El Laboratorio en el Diagnostico de Enfermedades Infecciosas

El Laboratorio en el Diagnostico
Se requieren procedimientos para conocer el agente etiolgico involucrado en enfermedades. Se usa para dirigir o modificar el tratamiento en forma especifica. Se requiere que la muestra sea tomada correctamente, as como buen manejo de la misma.

El Laboratorio en el Diagnostico
Principalmente es usado en hongos y bacterias. Para parsitos y virus se usa la deteccin de anticuerpos o antgenos. En la actualidad se usan tcnicas mas avanzadas como la biologa molecular.

Pruebas de Diagnostico Tinciones

Es el primer paso para cualquier muestra. La mas usada es el mtodo de Gram que tie la pared celular y permite dividir en Grammpositivas y Grammnegativas Las muestras son observadas en un microscopio de luz con la morfologa de la bacteria, la tincin, la clnica y la epidemiologia, se facilita el diagnostico

Tinciones
Otra tincin menos usada es la de naranja de detritus No diferencia unas bacterias de otras pero si permite detectar un numero escaso de bacterias Se requiere un microscopio de luz ultravioleta para observar la fluorescena de las bacterias

Los pasos ha seguir para tincin GRAM

Fijamos la muestra mediante calor. Violeta cristal (Tie todas las bateras, gram + y -) Fijamos con Lugol Decoloremos con una mezcla alcohol-cetona (los gram - se decoloren). Safranina (colorante de contraste, tie a los gram ) Se deja Secar Se examina en Microscopio

Tinciones
Para Hongos se examina la muestra directa, Gram y una tcnica especial con tinta china que permite ver hongos filamentosos y levaduriformes Otra tcnica utilizada en hongos es la inmunofluoresceina

Pruebas Rpidas para la deteccin de Anticuerpos y Antgenos

Son pruebas que varan en especificidad y sensibilidad. Los mas usados son la contrainmunoelectroforesis, inmunofluorescencia directa o indirecta, aglutinacin con ltex, coaglutinacion y el ensayo inmunoenzimatico

Pruebas Rpidas para la deteccin de Anticuerpos y Antgenos

se utilizan para detectar antgenos o anticuerpos contra varios microorganismos. Como bacterias, y virus, as como tambin para parsitos y hongos.

Cultivos
Es el aislamiento de los microorganismos y para esto se utilizan medios de cultivo, pueden ser lquidos o slidos. Dependiendo del tipo de lesin y lugar anatmico ser el tipo de muestra a tomar.

Hemocultivo
Se usa para detectar bacteremias Se requieren varias tomas de muestra de sangre (2 a 3) antes del inicio de la teraputica con antibiticos. Se utilizan de 10 a 5 ml por cultivo El medio que se utiliza debe contener anticoagulante o el medio de Ruiz Castaeda

Mielocultivo
Se toma la muestra directamente de medula sea puncionando a nivel de espina iliaca posterior. Se inocula en frascos parecidos a los del hemocultivo En bacterias de crecimiento lento se incuba de 14 a 21 das, con siembras peridicas.

Cultivo de liquido Cefalorraquideo

Se realiza puncin en la regin lumbosacra con asepsia adecuada Se punciona a nivel de l4 y l5 obteniendo de 3 a 5 ml El lcr se enva a tubo estril y se inocula en medio enriquecido y a temperatura de 37 grados Se realiza tincin gram y ziehl-Neelsen En laboratorio se realizan pruebas de coaglutinacion y de aglutinacion con ltex

Urocultivo
1. 2. 3. 4. Existen 4 formas de toma de muestra: Chorro medio Sonda transuretral Puncin supra pbica Bolsa recolectora

Urocultivo
Se debe evitar cualquier tipo de contaminacin La muestra se debe examinar en los primeros 30 minutos o si no almacenarse a 4 grados C Las muestras con bolsa recolectora son menos confiables y requieren 3 muestras

Cultivo De Exudado Farngeo

Un procedimiento muy comn en medicina Las muestras no son estriles as que puede dar lugar a confusin, as que se debe tener muy en cuenta la flora normal de la transitoria. Los organismos que tienen importancia son: S. pyogenens, S. agalactae, S pneumoniae, H. influenzae, N. Gonorrhoeae y N. meningitidis

Cultivo De Exudado Farngeo

La muestra se toma con hisopo estril y se inocula en un semislido En algunos pacientes tambin se debe de requerir la muestra de nasofaringe con un hisopo con alginato de calcio

Cultivo De Exudado Bronquial

Puede ser usado en la neumona Se obtiene cuando un paciente esta intubado y se desea conocer el agente causal Se debe tomar la muestra en las primeras 6 horas a la intubacin

Coprocultivo
Muy usado en la practica medica Se solicita en casos de diarrea con sangre, en recin nacidos, en inmunocomprometidos, sndrome urmico hemoltico y como en estudios epidemiolgicos La muestra fecal no es estril pero las bacterias de importancia son: Shigella, Salmonela sp, Vibrio cholerea, E. coli. Y Campylobacter sp.

Coprocultivo
La muestra debe ser tomada directamente del recto y transportarse en medio Cary Blair Existen 3 tipos de medios de cultivo: 1. Selectivos 2. No selectivos 3. Diferenciales (agar sangre)

Biologa Molecular en el Diagnostico Microbiolgico

Se basa en el fenotipo de los microorganismos, morfologa y bioqumica Tiene la desventaja de ser costoso, requiere mas tiempo y de ser complicado, y solo se limita a microorganismos que se pueden cultivar in vitro Tienen la ventaja de ser muy especficos en el diagnostico

Otras
Hibridacin por Sonda: Reconoce secuencias especificas de ADN Y ARN Amplificacin por reaccin en cadena de polimerasas genotipificacion