PARED CELULAR:

Debajo de las sustancias extracelulares, como son las cpsulas y cubiertas mucilaginosas, y en la periferia de una delicada membrana que est en inmediato contacto con el citoplasma, se encuentra la Pared Celular, que esta formada a base de aminocidos, azucares y grasas y ellas estn entrelazadas formando un polmero complejo. La pared celular brinda una estructura rgida que da forma a la clula y estas pueden destruirse o romperse en condiciones especiales. Entre los

constituyentes de la pared Celular de las bacterias Gram (+) y Gram negativas Existen diferencias. importantes

BACTERIA GRAM POSITIVA

Tiene una capa gruesa de Peptidoglicano (mureina) y dos clases de cidos teicoicos: cido Lipoteicoico que est en la superficie, empotrado en la capa de peptidoglicano y unido a la membrana citoplsmica. Y cido teicoico de la Pared que est en la superficie y se une slo a la capa de peptidoglicano.

El cido Teicoico es el responsable del determinante antignico del organismo.

BACTERIA GRAM NEGATIVA

Tiene una capa delgada de Peptidoglicano (mureina) unida a una membrana exterior por lipoprotenas. La membrana exterior est hecha de protena, fosfolpido y lipopolisacrido. En el lipopolisacrido, la porcin de lpido est embebida en el fosfolpido y el antgeno O polisacrido est en la superficie. El lpido se llama Lpido A y es txico, pero el lipopolisacrido entero se llama Endotoxina. La pared de la clula tiene poros llamado Porines para el transporte de substancias de peso molecular bajo. Entre la membrana

citoplsmica y la pared celular hay un espacio periplsmico con enzimas hidrolticas, inactivadoras antibiticos y de transporte. enzimas de protenas

MEMBRANA CITOPLSMICA (CITOPLASMTICA O PROTOPLASMTICA)

Inmediatamente debajo de la Pared Celular, existe una membrana fina, O envoltura, que Membrana Formada fosfolpido por una se denomina est de bicapa citoplsmica y

integral y protenas

perifricas empotradas.

Se trata de una membrana semipermeable, selectiva, que controla el paso de Los elementos nutritivos dentro de la clula y la salida de los productos de desecho. Tiene enzimas respiratorias y durante la divisin celular el cromosoma Se une a la membrana de la clula en el sitio llamado Mesosoma.

CITOPLASMA
El material celular contenido dentro de Ia membrana citoplsmica puede dividirse en Tres Partes, Regin Citoplsmica, de apariencia granular, la cual es rica en RNA, Regin Nuclear o Cromatnica, que es rica en DNA, y la parte lquida que mantiene disueltos los elementos nutritivos. El RNA, o unos 200A que forman combinado con corpsculos de de dimetro, una masa Estas

protenas, forma partculas macromoleculares,

densa y compacta en todo el citoplasma. Partculas de RNA-protena se denominan Ribosomas.

CLASIFICACIN BACTERIANA

Dentro de las Eubacterias existen tres grupos de bacterias que pueden ser diferenciados en relacin a la Estructura de la Pared Celular. La forma ms sencilla de iniciar una identificacin del microorganismo que se desea estudiar es realizar una coloracin o Tincin de Gram. La tincin de Gram es una Tincin Diferencial porque no todas las clulas se tien de la misma manera y permite discriminar entre dos grandes grupos de Eubacterias, las Eubacterias Gram Positivas y Gram Negativas.

Staphylococcus aureus

Escherichia coli

CLASIFICACIN SEGN TINCIN DE LA PARED CELULAR

Tincin de Gram Cristal violeta. Tincin Gram positivos. Lugol. Alcohol-acetona.( Decoloracin) Tincin Gram negativos.

Safranina. Resultado:

Bacterias Gram positivas Bacterias Gram negativas.

CLASIFICACIN SEGN AGRUPACIN Agrupacin en cadena: Ej Streptocococcus Agrupacin en racimos: Ej Staphylococcus Agrupacin en empalizada: Ej Difteroides

CLASIFICACIN SEGN FORMA Y TINCIN

I.- COCOS GRAM POSITIVOS Gnero: Staphylococcus Staphylococcus aureus. Staphylococcus coagulasa negativa. Gnero: Streptococcus Streptococcus grupo A, B, C, G, D, Enterococcus Streptococcus pneumoniae II.-COCOS GRAM NEGATIVOS Gnero: Neisserias Neisseria meningitidis Neisseria gonorrhoeae Gnero: Moraxella

III.-BACILOS GRAM POSITIVOS

Gnero: Listeria (L. monocytogenes) Gnero: Corynebacterium (C. diphteriae) Gnero : Bacillus (B. anthrasis)
IV.-BACILOS GRAM NEGATIVOS (BGN) Enterobacterias Gnero: Escherichia, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Yersinia Proteus Gnero: Vibrio, Aeromonas y Plesiomonas. Bacilos no fermentadores Gneros: Pseudomonas, Acinetobacter, etc. BGN nutricionalmente exigentes:
Gnero Haemophilus (H. influenzae) Gnero Bordetella (B. pertussis) Gnero Brucella ( B. melitensis) Gnero Legionella (L. neumophila) Gnero Bartonella (B. henselae)

V.-BACTERIAS FUNCIONALMENTE DEFICITARIAS Gnero Chlamydea C. trachomatis C .psittaci C. pneumoniae Gnero Mycoplasma M. pneumoniae M. urogenitales M. hominis. Ureaplasma urealitycum. Gnero Rickettsia (R.ricketsii) VII.-ACTINOMICETALES VI.-ESPIROQUETAS Gnero Treponema
T. pallidum

Gnero Borrelia
B. bugdogferi

Gnero Leptospira
L. interrogans

-Bacterias forman ramificaciones. -Mayora son Gram positivas. -Algunas son cido-alcohol resistentes. Gnero Mycobacterium Gnero Actinomyces Gnero Nocardia

VIII.-BACTERIAS ANAEROBIAS -Crecen en ausencia de oxgeno. No esporulados Gram positivos Cocaceas : Peptostreptococcus Bacilos: Propinobacterium- Actinomyces- Bifidobacterium Eubacterium- Mobiluncus Gram negativos Cocaceas: Veillonella Bacilos : Bacteroides: grupo fragilis B. Fragilis grupo pigmentado Porfiromonas Prevotella Fusobacterium : F. Necrophorum F. Mortipherum F. nucleatum Esporulados: Clostridium: perfringens tetani- botulinum - difficile

Los microorganismos Gram positivos, como el Staphylococcus aureus, adquieren un color violeta despus de la coloracin de Gram debido a que contienen una pared celular estructuralmente muy diferente a la de los microorganismos Gram negativos, como la Escherichia coli, que adquieren un color rosado. El tercer grupo de Eubacterias es el de los Bacilos Acido-Alcohol Resistentes (BAAR) que pueden ser diferenciados utilizando la coloracin de Ziehl-Neelsen. La diferencia en la coloracin no se debe a reacciones qumicas con ciertos componentes de la pared sino a la estructura fsica de la misma.

Las Eubacterias Gram positivas son clulas que contienen una membrana citoplasmtica con fosfolpidos y protenas. Por fuera de la membrana citoplasmtica se encuentra la Pared Celular que est compuesta por una ancha capa de Peptidoglicano. Este Peptidoglicano es una macromolcula gigante formada por cadenas de un dmero compuesto por: N-acetilglucosamina y N-acetilmurmico. A su vez, estas cadenas se encuentran unidas entre s mediante Pptidos. Estos puentes peptdicos son caractersticos de las distintas bacterias y presentan mayor rigidez cuanto ms completo sea el entrecruzamiento. El Peptidoglicano es una Malla Porosa que otorga forma y rigidez a la clula, y evita que la clula estalle en medios hipotnicos. Al ser porosa permite el paso de nutrientes desde el exterior y el movimiento de enzimas catalticas y productos de secrecin hacia el exterior de la clula.

La pared celular Gram positiva tambin contienen cidos Teicoicos y cidos Lipoteicoicos. Los cidos teicoicos son cadenas de ribitol o glicerol unidas por fosfodisteres, y estn unidos covalentemente al peptidoglicano por medio de grupos fosfodister en el oxihidrilo del C6 del N-acetilmurmico. Los cidos lipoteicoicos son polmeros de glicerofosfato se encuentran anclados en la membrana citoplasmtica y no estn unidos al peptidoglicano. La funcin de estos compuestos sera estructural, pero existen evidencias que indican que tambin participaran en la regulacin de las enzimas hidrolticas que renuevan la pared celular (autolisisnas).

Esquema de las Envolturas de una Eubacteria Gram Positiva

Bacterias Gram (+)

PEPTIDOGLICANO

Esquema de la estructura del peptidoglicano del Staphylococcus aureus

Sntesis del Peptidoglicano de una Eubacteria

Tincin GRAM: Bacterias Gram-Positivas

Las Eubacterias Gram negativas son clulas rodeadas por una membrana citoplasmtica formada por una bicapa fosfolipdica y protenas. Por encima de esta membrana se encuentra una fina capa de peptidoglicano que se halla unida covalentemente a unas Lipoprotenas de Anclaje que fijan la Membrana Externa por medio de porciones lipoflicas. Entre la membrana citoplasmtica y la membrana externa queda delimitado el Espacio Periplsmico. Este espacio es ocupado por el Periplasma que es una matriz isotnica respecto al citoplasma, isotonicidad que es mantenida mediante los oligosacridos derivados de membrana (MDO), y en la que se hallan componentes catalticos de suma importancia para la viabilidad celular.

La membrana externa tiene una estructura de bicapa asimtrica en donde la cara externa esta compuesta por el Lipopolisacarido (LPS) y la cara interna por fosfolpidos.

Adems, esta membrana es rica en protenas, algunas de las cuales se denominan Porinas. La membrana externa funciona como una barrera de permeabilidad para ciertas sustancias como antimicrobianos y enlentece el pasaje de otros que son inactivados en el periplasma. El LPS est formado por tres regiones: el polisacrido O (Antgeno O), el polisacrido del centro (KDO) y el lpido A (Endotoxina). La presencia del LPS en la membrana externa le confiere a la clula una efectiva proteccin contra enzimas digestivas y detergentes como las sales biliares, y dota a la superficie bacteriana con una fuerte hidrofilicidad que le permite a la clula evadir la fagocitosis, tener cierta resistencia al complemento, evitar la respuesta inmune especfica por alteracin de la superficie antignica y adherirse a ciertas clulas del hospedador. Las porinas son poros o canales proteicos no especficos que pueden ser atravesados por pequeas molculas hidroflicas. En la membrana externa se encuentran otras protenas que funcionan como canales de difusin especficos y facilitan el paso de di, tri y oligosacridos.

Esquema de las Envolturas de una Eubacteria Gram Negativa

Bacterias Gram (-)

PEPTIDOGLICANO

Esquema de la estructura del peptidoglicano de la Escherichia coli

TINCIN GRAM: BACTERIAS GRAM-NEGATIVAS

Cocos Gram - Negativos Cocobacilos

Cocobacilos: forma usual de Acinetobacter sp, que puede ser Gram (+) o Gram (-), y, a menudo, Gram variable

TINCIN DE ESPORAS

TINCIN DIFERENCIA: Tincin de Ziehl-Neelsen (cido-alcohol resistencia)

Es un tipo especial de tincin que permite la identificacin de microorganismos de los grupos Mycobacterium y Nocardia de gran relevancia clnica

TINCIN DE CPSULAS Se trata de una tincin negativa usando tinta china que permite determinar la presencia de cpsulas polisacardicas

TINCIN DE FLAGELOS
Permite teir flagelos usando un mordiente para incrementar su grosor y hacerlos visibles al microscopio ptico.