- FISIOLOGIA Y CRECIMIENTO BACTERIANO - MEDIOS DE CULTIVO - ESTERILIZACION Y DESINFECCION

FISIOLOGIA BACTERIANA
La funcin principal de cualquier clula microbiana es el crecimiento y este es el aumento ordenado en el N o masa de todos sus componentes y la multiplicacin celular es una consecuencia del crecimiento.

METABOLISMO
Es el conj. De reacciones qumicas mediante el cual las bacterias se nutren y aseguran su supervivencia, mediante la sntesis de los principales constituyentes de la clula ejm: sint. Proteica, enz., Mb celular, pared celular, cromosomas, flagelos etc.

Para esta sntesis se dan dos procesos antagnicos:

- Catabolismo (energtico) - Anabolismo (sinttico)

CATABOLISMO
es el conjunto de reacciones qumicas que transforman la materia viva en compuestos simples.

ANABOLISMO
Conjunto de fases del metabolismo para dar por resultado la sntesis de materiales constitutivos del protoplasma bacteriano y otros que pueden eliminarse al exterior

NUTRICION BACTERANA
La nutricin es el proceso por el que los seres vivos toman del medio donde habitan las sustancias qumicas que necesitan para crecer. Dichas sustancias se denominan nutrientes.

Estos de acuerdo a su papel en el metabolismo se clasifican en: MACRONUTRIENTES: requeridos en forma significativa -Fuentes de carbono -Fuentes de hidrogeno -Fuentes de oxigeno -Fuentes de nitrgeno

-Minerales Mg, Fe, K, Ca, P

MICRONUTRIENTES: o elementos traza (Co, Cu, Zn, Mo...) -Las bacterias lo obtienen del medio que las rodea o de la clula a la que esta infectando.

En el laboratorio se puede recrear este medio que lo rodea y producir el crecimiento bacteriano en forma artificial para as determinar de que germen se trata.

Requerimientos nutricionales: Qumicos

Carbono Nitrgeno Azufre Fosforo Iones inorgnicos Factores de crecimiento

Requerimientos nutricionales: Qumicos

Carbono: Sntesis de compuestos orgnicos necesarios para formar las estructuras y funcin de la clula, tales como Aminocidos, lpidos, azucares, cidos nucleicos. Segn el tipo de utilizacin las bacterias se clasifican en: Autotroficas: realizan fotosntesis o quimiosntesis, siendo la fuente de energa la luz o algn compuesto qumico. Como fuente de carbono usan CO2, para la sntesis de sus compuestos carbonados. Son bacterias de vida libre. Heterotrficas: usan compuestos orgnicos como fuente de carbono y energa. Aqu estn bacterias de vida libre y bacterias relacionadas con el hombre

Requerimientos nutricionales: Qumicos

Nitrgeno: necesario para la sntesis de aminocidos, bases nitrogenadas purinas y pirimidinas. Lo pueden obtener de:
Sales de amonio Fijacin del nitrgeno atmosfrico Degradacin de aminocidos

Requerimientos nutricionales: Qumicos

Azufre: necesario para la sntesis de aminocidos azufrados como cistena o metionina que participan en la estabilizacin de estructura de las protenas y sitio cataltico de enzimas

Requerimientos nutricionales: Qumicos

Fsforo: Es utilizado para la sntesis de ATP, cidos nucleicos y fosfolpidos. Iones inorgnicos: participan como coenzimas y dan estabilidad a componentes celulares como ribosomas y membranas. Ej: K+, Mg 2+, Ca 2+,Na+, PO43,Fe2+, etc Factores de crecimiento: nutrientes complejos que la bacteria no es capaz de sintetizar y que por lo tanto se deben encontrar en el medio. Ej: vitaminas, bases nitrogenadas, aminocidos, etc

Requerimientos nutricionales: Factores fsicos

Temperatura pH Tensin de oxigeno

Requerimientos nutricionales: Factores fsicos

Temperatura: Importante en actividad y desarrollo bacteriano. Segn la temperatura ptima decrecimiento se clasifican en: Termfilas: T ptima de crecimiento por sobre los 50C. Mesfilas: T ptima entre 25 y 40 C. Aqu estn la mayora de las bacterias que se relacionan con el hombre. Psicrfilas: T ptima entre10 y 20 C. Se encuentran principalmente en el ambiente

Requerimientos nutricionales: Factores fsicos pH: la mayora de las bacterias son neutrfilas, pero existen las que se desarrollan en medios cidos y en medios bsicos. Segn el pH ptimo de crecimiento: - Neutrfilas: pH 6.5-7.5 - Acidfilas: pH 2- 4 - Basfilas o alcalfilos: pH 8-9

Requerimientos nutricionales: Factores fsicos Tensin de oxgeno: Segn el requerimiento de oxgeno se clasifican en: Bacterias aerbicas: requieren de oxgeno Facultativas: pueden multiplicarse con o sin oxgeno. Anaerbicas: se multiplican en ausencia de oxgeno. Para los anaerobios estrictos el oxgeno es incluso txico para ellos

Requerimientos o factores fsicos(Tensin de oxgeno) Dentro de las bacterias aerobias hay 2 grupos especiales: Microaeroflicas: requieren baja tensin de oxgeno, menor que la del aire (<21%) y presencia de CO2 para su multiplicacin Ej: Campylobacter spp Capnoflicas: para crecer en forma ptima requieren de elevadas concentraciones de CO2 Ej: Neisserias pp

Factores que afectan el crecimiento bacteriano -Falta de nutrientes: Macronutrientes(fuentes C. H. O. N, Minerales) y Micronutrientes (Co, Cu, Zn, Mo)

-pH : 6-8 neutrofilo (<3 acidofilo, >10 alcalofilo)

-Temperatura: 30-37C mesofilas (15-25C psicofilas, 50-60C termofilas) -Aereacin:

MEDIOS DE CULTIVO
Son preparaciones liquidas, slidas o semislidas que se utilizan para el crecimiento bacteriano, estas poseen todos los constituyentes necesarios para el crecimiento y multiplicacin.

Medios de cultivo
En los medios slidos se pueden obtener colonias. stas son distintas y caractersticas para cada tipo bacteriano. Colonias: son agrupaciones macroscpicas, son visibles a simple vista y corresponden al crecimiento en un punto de una nica lnea bacteriana (todas las clulas que componen la colonia provienen de una misma nica clula)

Bacterias
Caractersticas macroscpicas: - Aspecto colonia - Pigmento - Hemlisis - Olor - Tamao

-Clasificacin: -A) De acuerdo a su composicin - Sintticos - No sintticos

B) De acuerdo a su finalidad: -Medios universales: Agar nutritivo, A. sangre, A.chocolate, etc. -Medios selectivos: Agar SS, Agar XLD, Agar campylobacter, etc. -Medios diferenciales: Agar Mckonkey, Agar CLED, etc. -Medios de enriquecimiento: Caldo selenito, caldo peptonado, etc. -Medios electivos: Agar chapman.

Mtodos de siembra
Aguja, Asa de platino, hisopo, pipeta

Medios de cultivo
Medios universales: Contienen sustancias nutricionalmente muy ricas(sangre, suero, etc). Permite desarrollo de bacterias poco exigentes y exigentes. Ejemplo: agar sangre, agar chocolate

Medios de cultivo
Medios selectivos: Tienen sustancias que inhiben el crecimiento de algunas bacterias y favorecen el de otras Medios diferenciales: permiten detectar alguna caracterstica propia de algunas bacterias, para diferenciar las distintas colonias que se obtienen en un medio de cultivo. Contienen un sustrato sobre el que acta la bacteria y una sustancia que detecta cambio de pH o productos metablicos por el uso del sustrato

Medios de cultivo
Medios de cultivo diferenciales
Nos sirven para distinguir o diferenciar el crecimiento de una bacteria determinada, contiene un producto fermentador (lactosa) y tiene un indicador de pH Ejm: Agar Mac conkey (rosado) , Agar CLED (amarillo)

Morfologa colonias bacterianas

Morfologa colonias bacterianas

Colonias Bacterianas

Crecimiento bacteriano
El crecimiento bacteriano es el producto de la divisin celular (biparticin) y el numero de clulas aumentan con el tiempo forma geomtrica.

Curva de crecimiento

C
B A D

A) Fase de latencia: las bacterias se adaptan al nuevo medio B) Fase exponencial: Rpida multiplicacin

C) Fase estacionaria: se agotan los nutrientes

D) Fase de declinacin: nacen pocas y mueren muchas por agotamiento de nutrientes. Importancia de la curva de crecimiento: de utilidad en la Biotecnologa para la fabricacin de ciertas enzimas, hormonas, etc. tiles para el ser humano.

AGENTES ANTIMICROBIANOS
BACTERIOSTATICO: Agente que inhibe el crecimiento de las bacterias. BACTERICIDA: Agente que mata las bacterias ESTERIL: Todo producto o superficie excepto de vida. DESINFECTANTE: Sustancia qumica usada para matar MO en superficies SEPTICO: Presencia de MO perjudiciales en el tejido vivo. ASEPTICO: Es la ausencia de MO perjudiciales ANTISEPTICO: que tiene la propiedad de matar MO perjudiciales en el tej. DESINFECTANTE: Tiene la prop. de matar organismos infecciosos en superficies inanimadas ESTERILIZACION: Proceso que se encarga de la completa destruccin MO

Procedimientos de esterilizacin

1) mtodos fsicos:
2) mtodos qumicos

Procedimientos de esterilizacin
1. mtodos fsicos:
A) calor seco: - llama directa (flameado) - Incineracin (quema) - Aire caliente (hornos) 180C x 30-170x60`-120x2hrs

Procedimientos de esterilizacin
B) Calor hmedo: -Vapor fluente (bao Maria) 100C x 60 - Vapor a presin (autoclave) 121C x 20 -tindalizacin 56 99C x 30 en tres das sucesivos.

Procedimientos de esterilizacin
C) Filtracin: para lquidos (filtros de millipore 0.02 um)

Procedimientos de esterilizacin
D) Radiacin: UV

Procedimientos de esterilizacin
2) Mtodos qumicos

- Oxido de etileno al 5%:equipos de venoclisis, agujas,etc.

Procedimientos de esterilizacin
Mtodos Qumicos
Formol como gas: ambientes

Procedimientos de esterilizacin
Mtodos qumicos
Glutaraldehido 2%:equipos con fibra ptica

Iones metlicos: sales de mercurio o plata

Desinfectantes y antispticos
A) Compuestos inorgnicos - Nitrato de plata: sulfaplata (quemados) - Derivados mercuriales: mercuriocromo - Agua oxigenada: peroxido de hidrogeno - Permanganato de potasio

Desinfectantes y antispticos
B) Compuestos orgnicos - Alcoholes 70% - Fenoles 1 o 2 % - Clohexidina

Bibliografia
http://microbiologiabasica.files.wordpress. com/2008/03/fisiologia_microbiana.pdf http://www.monografias.com/trabajos15/es terilizacion-desinfeccion/esterilizaciondesinfeccion.shtml http://www.higiene.edu.uy/cefa/Libro2002/ Cap%2027.pdf