Mémoire de fin d’étude

Efficacité de deux procédures de

vaccination contre la peste
porcine classique chez les
porcelets
Directeurs de l’étude:
M. TRAN THANH PHONG
Mme. NGUYEN THI THU HONG

Etudiante:
NGUYEN THANH THAO

HO CHI MINH VILLE, le 10 juillet 2006

   
 Durée et lieux des expériences

• Durée: de 1/2006 à 6/2006.

• Deux fermes porcines A et B de la province de Dong Nai

• Laboratoire virologique du centre de recherche

vétérinaire de la Compagnie Nationale Vétérinaire

(NAVETCO) à HoChiMinh ville.

   
PARTIE I: INTRODUCTION

PARTIE II: MATERIELS ET METHODES

PARTIE III: RESULTATS ET DISCUSSIONS

PARTIE IV: CONCLUSIONS ET PROPOSITIONS

   
 PARTIE I: INTRODUCTION

LA PESTE PORCINE CLASIQUE (PPC)

décrite la 1ère fois au début du 19ème

@
siècle à Ohio (Etats-Unis)
@ maladie virale infectieuse spécifique des
suidés (porc domestique et sanglier)
@ maladie de la liste A (A130) de l’OIE -- >
maladie à déclaration obligatoire
responsable de 50-60% des dégâts dûs à
@
toutes les maladies du porc

   
 rein piqueté hémorragique
Rate infarctus en périphérie (cortex et médullaire)

Ganglions mésentériques
Intestin pétéchie et valvule iléo-caecale
    hypertrophiés et hémorragiques
hémorragique et ulcèrée
Au vietnam

• PPC connue depuis 1923-1924 par Houdemer

• circuler sous des formes frustes, sporadiques,

des symptômes et des lésions atypiques

• Proportion de vaccination obtient 81,4% mais
la maladie ayant lieu consécutivement
Diverses recommandations à l’égard de l’âge de
la 1ère vaccination pour les porcelets:
• 45 jours (Pham Van Chuc, 1985)
• 21-30 jours (Bui Quang Anh, 2001)
•  35-50 jours (Nguyen Tien  Dung, 2003)…
Existence de 2 protocoles vaccinals principals en réalité:

1. chez les porcelets à l’âge de 21 jours appliqué largement

dans les fermes industrielles et dans les petites fermes

2. chez les nouveaux-nés avant la prise de colostrum mis

également en pratique sur quelques petites fermes et sur
certaines fermes familiales

Face à la situation réelle -- > nous réalisons ce sujet.

   
 OBJECTIFS

- Déterminer les résultats de deux procédures de

vaccination
• Procédure 1: vacciner les nouveaux-nés avant la

prise de colostrum et faire le rappel à 30 jours d’âge.

• Procédure 2: vacciner les porcelets à 21 jours

d’âge et faire le rappel à 51 jours d’âge.

- Evaluer le pouvoir de protection du vaccin chez les

porcs vaccinés par expérimentation d’épreuve virulente.

   
PARTIE II: MATERIELS ET METHODES

2.1 Matériels (1)

• Vaccin à virus modifié lyophilisé de la souche C:
fabriqué par NAVETCO et un vaccin importé.
• Animaux :
• 10 nouveaux-nés Yorshire Landrace, normaux et sains
de la ferme A.
• 90 porcelets Yorkshire Landrace, normaux et sains à
21J d’âge de la ferme B.

• Virus PPC virulent : dose: 10 7LD50 /porc, S.C

   
2.1 Matériels (2)
4. Matériels pour le test de neutralisation (NPLA) sur
la cellule PK15 et la technique de la coloration
immunoperoxidase (IPX)
( fournis par l’AAHL -Australian Animal Health
Laboratory)

• Matériels pour le test d’ELISA (fournis par l’AAHL)

6. Autres matériels : étuve à 370C, étuve à 5% CO2,

réfrigérateur, congélateur à -20oC , Centrifugeuse,
Tubes stériles avec anticoagulant…

   
 2.2 Méthode d’étude
Dispositions expérimentales:
A. Expérimentation 1: le vaccin antiPPC de Navetco est
utilisé dans cette expérience

Tableau 3.1: Protocole expérimental de la 1ère procédure vaccinale

Nombre Av. 1ère Av. 2ème Après 2ème vaccination
Portée de Réalisation vaccination vaccination
porcelet (1 j d’âge) (30J d’âge)
1mois 2 mois 3 mois

Prélèvement
1 5
sanguin x x x x x

Prélèvement
2 5
sanguin x x x x x

   
Schéma 3.1: Etapes de réalisation d’expérimentation 1

Prélèvement sanguin de truies Examination de l’antigène P125

vaccinées Détection du titre d’Ac antiPPC

Les nouveaux-nés -Détection de l’Ac anti PPC

-1ère vaccination contre la PPC.
2h après
la mise bas
Prise du colostrum

Porcelets à 30 jours d’âge - Examination du titre d’ Ac antiPPC

- 2ème vaccination contre la PPC.

Porcelets à 60 jours d’âge Détection du titre d’ Ac actif

Porcs à l’âge de 90 jours Détection du titre d’ Ac actif

Porcs à l’âge de 120 jours Détection du titre d’ Ac actif

   
 B. Expérimentation 2:
Tableau 3.2: Protocole expérimental de la 2ème procédure de
vaccination

Nombre Avant 1ère Avant 2ème Après 2ème vaccination

Lot de Réalisation vaccination vaccination
porcs (21J d’âge) (51J d’âge)
1mois 2 mois

Vaccin de Prélèvement
40 x x x x
Navetco sanguin

Vaccin Prélèvement
40 x x x x
importé sanguin

   
chéma 3.2: Etapes de réalisation d’expérimentation 2

Prélèvement sanguin de Examination l’antigène P125

truies vaccinées Détection du titre d’Ac antiPPC

- Détection l’Ac maternel antiPPC

- 1ère vaccination contre la PPC:
Porcelets à 21 jours d’âge * Lot du vaccin de Navetco
* Lot du vaccin importé

- Examination le titre d’ Ac antiPPC

- 2ère vaccination contre la PPC:
Porcelets à 51 jours d’âge * Lot du vaccin de Navetco
* Lot du vaccin importé

Porcs à l’âge de 90 jours Détection le titre d’ Ac actif

Porcs à l’âge de 120 jours Détection le titre d’ Ac actif

   
 C.Expérimentation 3

recherche d’épreuve virulente pour

déterminer l’efficacité du vaccin

   
Tableau 3.3: Protocole de l’expérimentation d’épreuve virulente

Ap. 2ème vaccination

Nombre Av. 1ère Av. 2ème
Lot de Réalisation vaccination vaccination
porcs (21J d’âge) (51J d’âge) 2,5
1mois 2mois
mois

Prélèvement
Vaccin x x x x
sanguin
de 5
Navetco
Epreuve x

Prélèvement
x x x x
Vaccin sanguin
3
importé
Epreuve x

Prélèvement
Témoin x x x x
sanguin
(non 2
vacciné)
Epreuve x

   
2.3 Les tests de laboratoire utilisés

• Le test ELISA de dépistage d’antigène(Ag)

P125 du virus ppc

2. Test de neutralisation immunoperoxydase

(NPLA) pour titrer l’anticorps contre le virus
PPC.
*remarque: Un titre en Ac identifié à partir
de 3log2 signifie que l’Ac anti Virus PPC est
présent (sous la direction de AAHL).

3. Numération du nombre total des

  leucocytes  
 PARTIE III

RESULTATS ET DISCUSSIONS

   
3.1 Examen de l’antigène P125 chez les truies
100% des truies négatifs pour l’antigène P125
--> cela garantit donc qu’elles ne peuvent pas

transmettre le virus PPC à leurs porcelets.

3.2 Expérimentation 1:
10 nouveaux-nés administrés du vaccin antiPPC de Navetco
à 1 jour et à 30 jours d’âge

3.2.1 Réponse immunitaire après la 1ère vaccination

   
 Tableau 3.1: Evolution de titre d’Ac des porcelets après la 1ère
vaccination
Résultat NPLA (log2)
Numéro
Avant la vaccination Après la vaccination
Portée de
(jour d’âge) (jour d’âge)
porcelet
1 10 20 30
1 2 2 2 2

1 2 2 3 2 2
3 2 4 3 2
4 2 4 3 2
5 2 4 3 3
X1 ∑n=5 2.0 3.4 2.6 2.2
6 2 7 6 4

2 7 2 8 6 5

8 2 8 7 5

9 2 7 5 4
10 2 7 7 5
X2
 
∑n=5 2.0  
7.4 6.2 4.6
 Des autres recherches concernants

✔ Etude de Joris et col (2001) sur 10 nouveaux-

nés vaccinés avant l’ingestion du colostrum -- > et
puis soumis à l’épreuve virulente à 10sem d’âge
-- > 100% de porcelets survivants

✔ Autre étude réalisée à Navetco sur les

porcelets vaccinés avant la prise du colostrum
-- > soumis à l’épreuve virulente à 30 jours d’âge
-- > 100% de porcelets survivants
-- > Réaction immunitaire de mémoire après la 1ère
injection de vaccin

   
A quel moment faut-il faire la deuxième
vaccination ?

   
Graphique 3.1: Evolution de titre d’anticorps antiPPC des
porcelet pendant 30 premiers jours d’âge

Titre d'anticorps 
(log2) 8
7
6 Portée 1
5 Portée 2
4
3
2
1
0 Temps (en jours)
1 10 20 30

   
3.2.2 Durée d’immunité chez les porcs
vaccinés suivant l’expérimentation 1 

   
Tableau 3.2: Evolution de titre d’Ac chez les porcelets suivant
la vaccination suite à l’expérimentation 1
Résultat de NPLA (log2)
N0 de Avant la 2ème
Portée Après la 2ème vaccination
porc vaccination
(30 jours d’âge) 1 mois 2 mois 3 mois
1 2 5 6 6
2 2 7 6 5
1 3 2 6 6 5
4 2 4 5 5
5 3 5 5 4

X Σn=5 2.2 (+0,4) 5.4 (+1,1) 5.6 (+0,5) 5.0 (+0,7)

6 4 4 3 3
7 5 4 3 3
2
8 5 5 2 2
9 4 4 2 2
10 5 5 2 4
  X Σn=5 4.6 (+0,5)   4.4 (+0,5) 2.5 (+0,5) 2.8 (+0,8)
 3.3 Expérimentation 2

3.3.1Titre d’anticorps maternel chez les porcelets

avant la 1ère vaccination

   
Graphique 3.2: Histogramme de la répartition du titre d’Ac maternel
chez les porcelets à 21 jours d’âge
Fréquence (%)
40

30

20

10

0
Titre d'anticorps (log2) <2 2 3 4 5 6
Vaccin de Navetco 15,2 17,4 15,2 28,3 6,5 17,4
Vaccin importé 19,0 19,0 19,0 31,0 9,5 2,4

-Lot du vaccin de Navetco: 76,1% (<4log2)

-Lot du vaccin importé: 88,1% (<4log2)
   
Tableau 3.3: Réponse d’anticorps chez les porcelets suivant la
vaccination d’expérimentation 2
Résultat NPLA (log2)
N de
0
Nombre Av. 1ère Av. 2ème
Lot Ap. 2ème vaccination 2
truie porcelet vaccination vaccination
mois
(21 jours d’âge) (51 jours d’âge)
10449 10 5.7 3.4 3.1

Vaccin 7564 9 3.8 2.3 3.0

de 7702 10 3.6 2.7 4.3
Navetco 6572 8 3.6 2.8 5.4
10153 9 2.0 2.0 5.5
X Σn=46 3.7 (+1.5) 2.6 (+0.8) 4.3 (+1.6)
6003 10 4.5 3.0 2.6
6732 10 3.6 2.3 3.4
Vaccin 5615 8 2.7 2.8 5.0
importé
10176 7 2.6 2.0 4.8
6728 8 2.0 2.0 4.0

  X Σn=42 3.1 (+1.1)

  2.4 (+0.8) 4.0 (+1.6)
Graphique 3.3: Evolution du titre d’anticorps au cours du temps après
vaccination chez les porcelets vaccinés avec le vaccin antiPPC de
Navetco

6 5,7
5,4 5,5
Titre d'anticorps (log2)

5 4,3 Avant la 1ère

4 3,4
3,8
3,6 3,6 vaccination
3,1 3,0
2,7 2,8 Avant la 2ème
3 2,3 vaccination
1,92,0
2 Après 2ème
vaccination 2 mois
1
0
10449 7564 7702 6572 10153 Numéro de truie

   
Graphique 3.4: Evolution du titre d’anticorps au cours du temps après
vaccination chez les porcelets avec le vaccin antiPPC importé

6
5,0
5 4,5
4,8 Avant la 1ère
vaccination
Titre d'anticorps (log2)

4,0
4 3,6
3,4
3,0 Avant la 2ème
3 2,6 2,7 2,8 2,6 vaccination
2,3
2,0 1,9 1,9
2 Après 2ème
vaccination 2
1 mois

0
0
6003 6732 5615 10176 6728 N de truie

   
 3.4 Expérimentation 3 

   
Graphique 3.5: Courbes représentant l’évolution du taux d’anticorps
suivant la vaccination chez les porcelets de l’expérimentation 3

Titre d'anticorps
(log2)
6
5 Vaccin de
4 Navetco
Vaccin importé
3
2 Témoin
1 (non vacciné)
0
a 1ère v a2èv 1m p2è v 2m p2èv
Temps
   
Tableau 3.4: Evolution du titre d’Ac chez les porcelets suivant la
vaccination d’expérimentation 3 (21-51 jours d’âge)
Résultat NPLA (log2)
Avant la vaccination Après 2ème vaccination
Lot N0 de porc
1ère fois 2ème fois
1 mois 2 mois
(21 jours d’âge) (51 jours d’âge)
3217 2 3 5 4
1 3221 2 4 6 5
(vaccin de 3242 4 4 3 2
Navetco) 3244 4 3 5 5
3245 3 4 4 4
___

X Σn=5 3.0 (+1,0) 3.6 (+0,5) 4.6 (+1,1) 4.0 (+1,2)

1615 4 3 5 4
2
1634 3 4 5 5
(vaccin importé)
1635 3 3 5 3
___

X Σn=3 3.3 (+0,6) 3.3 (+0,6) 5.0 4.0 (+1,0)

Témoin 1616 3 2 2 2
(non vacciné) 1620 7 5 4 2
___

X Σn=2 5.0 (+2,8) 3.5 (+2,1) 3.0 (+1,4) 2.0

   
3.5 Détermination du pouvoir de protection
du vaccin antiPPC chez les porcs suivant
l’épreuve virulente

3.5.1 Manifestations de la PPC chez les porcs

éprouvés

   
Tableau 3.5: Signes cliniques et virologie des porcs lors de l’épreuve
Avant
Après épreuve virulente
l’épreuve
N0 de
Lot Jour débuté Virus
porc Résultat N0 de Symptô
de fièvre Lésion dans le
NPLA (log2) fièvre me
(>40.50C) sang
3217 4 - - - - -

3221 5 - - - - -
1
(vaccin de 3242 2 2 3 + - -
Navetco)
3244 5 - - - - -

3245 4 - - - - -

1615 4 - - - - -
2
(vaccin 1634 5 - - - - -
importé)
1635 3 - - - - -
Témoin 1616 2 3 4 +a - -
(non vacciné)
  1620 2 2  6* +b + +
Graphique 3.7: Evolution des températures chez les porcs éprouvés
à 4,5 mois d’âge

Température
corporelle(0C)
42
41,5
41
Lot 1
40,5
Lot 2
40
39,5 Témoin 1
(1616)
39
Témoin 2
38,5 (1620)

38
37,5
J ours
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20

   
 Tableau 3.6: Titre d’Ac des porcs de 3 lots suivant l’épreuve

Résultat NPLA (log2)

Numéro
Lot Après épreuve
de porc Avant l’épreuve
14 jours 21 jours
3217 4 >9 >9
3221 5 >9 >9
1
3242 2 >9 >9
(vaccin de Navetco)
3244 5 >9 >9
3245 4 >9 >9
1615 4 >9 >9
2
(vaccin importé) 1634 5 >9 >9
1635 3 >9 >9

Témoin 1616 2 2 5
(non vacciné) 1620 2 Non échantillon

   
3.5.2 Pouvoir de protection du vaccin
après la vaccination

   
 Tableau 3.7: Proportion protectrice

Titre d’Ac Proportion

Nombre Mortalité
Lot av. l’épreuve Mortalité protectrice
de porcs par la PPC
(log2) (%)

1
5 2-5 0 0 100
(vaccin de Navetco)

2
3 3-5 0 0 100
(vaccin importé)

Témoin
2 2 1 1 50
(non vacciné)

   
 PARTIE IV

CONCLUSIONS ET PROPOSITIONS

   
4.1 Conclusions

• Expérimentation 1 :
10 nouveaux-nés administrés du vaccin antiPPC de Navetco
à 1 jour et à 30 jours d’âge

✔ Après 2 vaccinations, chez la portée 1, une bonne

réponse immunitaire avec le titre moyen d’Ac est de
5+0,7log2 à 4 mois d’âge .

✔ Au contraire, chez la portée 2, une réponse moindre

avec le titre moyen d’Ac est de 2,8+0,8log2 à l’âge de
4 mois.

   
2. Expérimentation 2
80 porcelets vaccinés à 21 jours d’âge et à 51 jours d’âge

✔ Après 2 administrations du vaccin, une chute de titre

après la 1ère vaccination et une augmentation de titre
après la 2ère vaccination
✔ A l’âge de 4 mois,
• le titre moyen du lot du vaccin de Navetco est de
4,3+1,6log2
• celui du lot de vaccin importé est de 4+1,6log2
--> La différence entre 2 lots n’est pas significative
(P>0.05).
   
 3. Expérimentation 3

8 porcelets vaccinés à 21-51 jours d’âge et 2 porcelets non

vaccinés et puis, tous ces 10 porcs inoculés le virus PPC
virulent à l’âge de 4,5 mois
- Après 2 vaccinations, la différence non significative de
la réponse d’Ac entre lot 1 (lot du vaccin de Navetco) et
lot 2 (lot du vaccin importé) jusqu’à l’âge de 4 mois.

− Après l’épreuve virulente à 4,5 mois d’âge:

 la proportion protective du vaccin des lot 1 et lot 2
est de 100%
 celle du lot non vaccinés est seulement de 50% (1/2).

   
 4.2 Propositions 

 Etudier la réponse immunitaire chez les porcs selon

2 procédures de vaccination (1-30jours d’âge) et (21-
51jours d’âge) jusqu’au moment de l’abattage et en
grande nombre de porcs pour le 1ère procédure.

 Étudier à la fois la réponse d’immunité humorale et la

réponse d’immunité à médiation cellulaire chez les porcs
vaccinés.