CENTRO FEDERAL DE EDUCAO TECNOLGICA DE RIO VERDE CURSO SUPERIOR BACHARELADO EM ENGENHARIA DE ALIMENTOS QUMICA ANALTICA E QUMICA ORGNICA

ANLISE CROMATOGRFICA DE COMPOSTOS ORGNICOS EM PESCADOS

Acadmicos: Bruno de Sousa Carvalho Jssica Leal Freitas e Souza

Orientador: Aristeu Gomes Tininis

RIO VERDE-GOIS Novembro/2007

Tpicos

Composio da matria-prima Pescados em mbito nacional: produo e consumo Aspectos econmicos Conceitos qumicos na indstria de pescados Aspectos sociais e ambientais Determinao de um novo futuro para o setor

Introduo
Composio dos pescados

Ricos em minerais, lipdios de excelente qualidade e baixo teor de colesterol

Boa fonte de vitaminas, alto teor protico

leos ricos em cido docosahexaenico (DHA) e cido eicosapentanico (EPA) Grande importncia farmacolgica

Pescados
Umidade (%) Energia (kcal) (Kj) Protena(g) Lipdeos(g) Colesterol(mg) Carboidrato(g) Fibra Al

Atum, fresco, cru Bacalhau, salgado, cru Corimba, cru Corvina de gua doce, crua Corvina do mar, crua Merluza, fil, crua Pescada, branca, crua

73 48 76 79 79 82 80

118 492 136 569 128 536 101 423 94 392 89 373 111 464

26 29 17 19 19 17 16

1 1 6 2 2 2 5

48 139 40 73 67 57 51

0 0 0 0 0 0 0

1,3 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0

Pescada, fil, crua

Pintado, cru Porquinho, cru Sardinha, inteira, crua

80
80 79 77

107 449
91 381 93 389 114 477

17
19 20 21

4
1 1 3

65
50 49 61

0
0 0 0

0,0
0,0 0,0 0,0

Demanda X Oferta

Aumento da demanda por alimentos Conscientizao com uma alimentao saudvel Brasil: potencial para produo e processamento de pescados Produo de 820 mil toneladas de peixes/ano, 25 no ranking mundial Gois 10 toneladas

Consumo mdio de 7 kg de pescado/ habitante/ ano Desconhecimento do produto e oferta pouco diversificada

Desafio

Garantir a qualidade dos pescados Implementar novas tecnologias Aumentar o valor agregado do produto Viabilizar alternativas promissoras

CLAE / HPLC

CG / GC

CG-EM

Otimizao de determinao de colesterol por HPLC, lipdeos totais e cidos graxos do camaro-rosa
Colesterol

CLAE, com coluna C18 e detector por conjunto de diodos

Cromatgrafo lquido com sistema ternrio de solventes (VARIAN, 9010); vlvula "Rheodyne" com ala de 10 l; coluna, Spherisorb ODS-2, 150 x 4,6 mm, 5 m; coluna de guarda, Spherisorb ODS-2, 10 x 4,6 mm, 5 m

FM: acetonitrila/isopropanol (70+30); vazo, 1,0 ml/min (presso de 45 atm.); e integrador processador (VARIAN, 4400) Tempo de corrida:15 min.

cidos graxos

CG
FE: slica fundida com DB-WAX FM: H numa vazo de 1,26 ml/min com velocidade linear de 39,4 cm/s

Coluna capilar 30 m de comprimento x 0,30 mm de dimetro interno e contendo 0,25 m de polietileno glicol (DB-WAX da J & W Scientific, Califrnia, USA)
Cromatgrafo VARIAN, modelo 3300, equipado com: injetor split, razo de 100:1; detector por ionizao em chama; integrador processador INTRALAB 4290

T da coluna, 150C por 11 min, programada a 210C numa razo de 3C/min

T do injetor; 250C; e T do detector, 280C.

Lipdeos

CG de alta eficincia

Composio qumica, teor de colesterol e caracterizao dos lipdeos totais de tilpia (oreochromis niloticus) e pargo (lutjanus purpureus)

Extrao: mtodo de BLIGH & DYER e posteriormente fracionados em lipdios neutros e fosfolipdios por cromatografia em coluna aberta, conforme JOHNSTON & GHANBARI

CLAE desenvolvido e otimizado por BRAGAGNOLO

Cromatgrafo lquido Varian modelo 9010, com sistema ternrio de solventes, injetor manual "Rheodyne" com ala de amostragem de 10L. Coluna C (Varian-Bondesil) de 15cm x 4,6mm, 5m.

FM: acetonitrila/isopropanol (70:30) com vazo de 1,0mL/min em eluio isocrtica

Detector de arranjo de diodo (DAD) (Varian mod. 9065) operando a 210nm e integrador/processador (Varian - mod. 4400) com corrida cromatogrfica de 12 minutos.

Fatty acid composition of commercially important fish from Brazil

Analysis of methyl esters CG-17 Gas Chromatograph (CG Instruments, Sao Paulo, Brazil), equipped with a flame ionization detector

A stainless steel column, 2m x 5mm, with diethylene glycol succinate (DEGS

Column T=195C; sample vaporizer T=225C; detector T=245C. MP: N, at a flow rate of 40 of mL/min Injected sample sizes were in the range 2.0 - 3.0 l.

Factors influencing the formation of cholesterol oxides in seafood rich in polyunsaturated fatty acids

The moisture and total lipid content were determined and the fatty acids from the lipid extract methylated and analyzed by GC Direct saponification at 20C for 22 h in the dark (4 ml aqueous 50% KOH and 6 ml ethanol) and 4 extractions of the non-saponifyable matter with hexane HPLC equipped with UV-visible and refractive index (RI) detectors connected in series, a Nova Pak CN HP column (300 x 3.9 mm x 4 mm)

MP: n- hexane:isopropanol (97:03) with a flow rate of 1 ml/min Analysis time: 30 minutes

Efeito da suplementao de -caroteno no processo oxidativo do fil da tilpia durante 7 dias de refrigerao

Os lipdios foram dissolvidos em hexano e analisados utilizando CG-EM, com injetor split/splites (razo 28) e coluna capilar DB-5 (25mXo,25um d.i.X0,25um filme). O forno foi inicialmente aquecido a 60C por 1 minuto, posteriormente aquecido de 60C a 310C a uma taxa de 6C/min onde se manteve esta temperatura por mais 10 minutos (tempo total de 52,42 minutos) FM: He a um fluxo constante (6 mL/min), com compensao a vcuo.

Figura 10 Cromatograma altura versus tempo de reteno (minutos) dos cidos graxos encontrados nas amostras dos fils

Putrecina

Triptamina

Histamina

Tiramina

Espermina

Feniletilamina

Aminas biognicas, aminas volteis, triptofano livre e uria como ndices qumicos de qualidade e frescor de pescado

Separao de derivados dansilados de agmatina (AGM), putrescina (PUT), triptamina (TRY), cadaverina (CAD), histamina (HIS), espermidina (SPD), espermina (SPM), tiramina (TYR) e feniletilamina (PHE) por solventes clorofrmio ter dietlico: trietilamina (6:4:1 - v/v) seguido de clorofrmio: trietilamina (6:1 v/v).

A melhor condio para derivatizao das aminas biognicas com cloreto de dansila foi 1h a 40 C. AGM permaneceu no local de aplicao (RF=0,0)
Ametodologia deve ser utilizada com cautela para a determinao desta amina.

Determinao de benzo(a)pireno em pescados

(HPAs) so contaminantes advindos principalmente dos 5 milhes de petrleo derramado no mar por ano

CLAE

Cromatgrafo Waters com por bomba quaternria modelo 600, injetor automtico modelo 717 e detector de fluorescncia modelo 474

A separao isocrtica foi feita em coluna cromatogrfica VYDAC C18 (5 m, Vydac 201 TP) de 25 cm x 4,6 mm d.i., acoplada a uma coluna de guarda tambm de 5 m (0,46 mm x 1,0 cm), T= 33C

FM: acetonitrila-gua (85:15, v/v), em vazo constante de 0,5 mL/min.

Concluso

Tcnicas cromatogrficas usadas na determinao de constituintes de alimentos e no controle da qualidade

Inovaes tecnolgicas ampliam as ofertas nos mercados

Incentivos governamentais: investimento no cultivo e industrializao dos pescados

Produo com desenvolvimento sustentvel

Estudo veemente traa um novo futuro para a indstria de pescados: valor agregado ao produto concomitantemente preservao ambiental e desenvolvimento social

Bibliografia

MOURA, A. F. P.; TORRES, R. P.; MANCINI FILHO, J.; TENUTA FILHO, A. Archivos Latinoamericanos de Nutricin. Caracterizao da frao lipdica de amostras comerciais de camaro-rosa. V.52 n2 supl.2 Caracas jun. 2002. AZEREDO, A.; TOLEDO, M. C. F.; CAMARGO; M. C. R. Cincia e Tecnologia de Alimentos. Determinao de benzo(a)pireno em pescados. V.26 n1. Campinas jan/mar.2006. BRAGAGNOLO, N.; RODRIGUEZ, A. D. Cinc. Tecnol. Aliment. Otimizao de determinao de colesterol por HPLC e nveis de colesterol, lipdeos totais e cidos graxos do camaro-rosa (Penaeus brasilienses). Vol.17 n3 Campinas Set./Dez. 1997. CANDIDA, M. V.; MAIA, V. N.; GODOY, H. T.; ALDIGRE, M. L. Cinc. Tecnol. Aliment. Composio qumica, teor de colesterol e caracterizao dos lipdios totais de tilpia (Oreochromis niloticus) e pargo (Lutjanus purpureus). Vol.23 n3. Campinas July/Sept. 2005.

GUTIERREZ, L.E.; SILVA, R.C.M. da. Scientia Agricola. (Piracicaba, Braz.). Fatty acid composition of commercially important fish from Brazil. Piracicaba, v. 50, n7. Oct/Dec. 1993. LAPA, G.; SILVA, J. Produo Cientfica da FEA-UNICAMP. Aminas biognicas, aminas volteis, triptofano livre e uria como ndices qumicos de qualidade e frescor de pescado. Campinas-SP, v. 25, n. 2, p. 189-199, 1995.

LOUREIRO, G. C. Cincia e Tecnologia de Alimentos. Efeito da suplementao de -caroteno no processo oxidativo do fil da tilpia tailandesa durante 7 dias de refrigerao. 2005.
MOURA, A. F. P.; TORRES, R. P.; MANCINI FILHO, J.; TENUTA FILHO, A. Archivos Latinoamericanos de Nutricin. Caracterizao da frao lipdica de amostras comerciais de camaro-rosa. V.52 n2 supl.2 Caracas jun. 2002. SALDANHA, T.; BRAGAGNOLO, N. Produo cientfica da FEA, UNICAMP. Factors influencing the formation of cholesterol oxides in seafoods rich in polyunsaturated fatty acids. Campinas-SP, v. 32, n.5, 2000.

Contatos

Bruno de Sousa Carvalho Email: bruno_bulaxa1234@hotmail.com

Jssica Leal Freitas e Souza Email: jessy_lfsouza@hotmail.com