Control de los microorganismos

Control de los microorganismos

Reducir la carga microbiana o el número de microorganismos viables

presentes en un material, alimento o en una solución.

El control del crecimiento microbiano puede hacerse por:

Inhibición, impidiendo el crecimiento de los microorganismos.
Esterilización, matando, destruyendo o eliminando todos los
microorganismos viables de un medio.

Los agentes que destruyen o matan las bacterias son bactericidas. Los
que impiden el crecimiento se llaman bacteriostáticos.

Las medidas de control de los microorganismos son la

descontaminación, la desinfección y la esterilización.
Acción de los agentes físicos
sobre los microorganismos
 Agentes físicos

 Efecto de la temperatura
 Efecto del calor.
 Efecto de bajas temperaturas.
 Liofilización
 Desecación
 Radiaciones
 Filtración
 Efecto del pH
Inactivación total y parcial

 Inactivación total= esterilización

 Inactivación parcial = desinfección
Se deben a:
 Desnaturalización de proteínas
 Fusión de lípidos de membrana
La inactivación puede ser por:
 Calor húmedo (más rápida por coagulación)
 Calor seco (mayor tiempo mata por oxidación)
 Algunos parámetros

 Punto térmico mortal: temperatura mínima que

mata a todas las bacterias en 10 minutos
 Tiempo térmico mortal: tiempo para que mueran
todas las bacterias a una determinada
temperatura
 Tiempo de reducción decimal (valor D10):
tiempo para reducir al 10% la densidad de una
suspensión a una determinada temperatura
Efecto de la T° en la viabilidad de una bacteria mesófila
Tiempo de reducción decimal (D) obtenido a tres T° diferentes
A 70ºC D = 3 min
A 60ºC D = 12 min
A 50ºC D = 42 min.
 Calor húmedo

 Pasteurización
 clásica: 63ºC x 30´ (BK, Coxiella)
 instantánea: 72ºC x 15”
 Uperización o ultrapasteurización (150°C x 5-8”)
 Mata más rápidamente
 Altera menos el sabor

 Actúa en flujos continuos

 Ebullición: 100ºC x 10´

 Vapor fluente: 110°C x 10´
 Calor húmedo
 Vapor a presión:
 Autoclave, 121°C x 20’; equivale a 15 lbs de P atmosférica.
Aplicaciones:
 Esterilización medios y soluciones en lab.
 Esterilización material quirúrgico

 En Ind. de alimentos: conservas, bebidas

 Tindalización
 Fases a): calentar material 100ºC x 15 min.
 Fases b): incubar material a 30-37ºC x 24h
 Fase c): calentar material 100ºC x 15 min.
 Calor seco

 Necesita mayores tiempos y temperaturas que el

calor húmedo (180°C x 90’). Aplicaciones:
 Flameado a la llama del asa de siembra
 Aire caliente (horno Pasteur): para esterilizar material
inerte en el laboratorio: vidrio, metales, etc.
 Incineración de materiales de desecho
 Horno bacteriológico

Flameado

Incineración
 Bajas temperaturas

 Refrigeración: NO efecto esterilizante, sino

microbiostático
 Congelación: -1 y -10ºC el citoplasma queda en
sobrefusión, pero hay pérdida de agua y
formación de microcristales de hielo  [sales y
electrolitos]
 desnaturalización de proteínas
  daño a membrana
 Bajas temperaturas

 En congelador (<-20ºC), poniendo en el medio ciertas

sustancias que promueven solidificación amorfa y vítrea
 En nieve carbónica (-78ºC)
 En nitrógeno líquido (-180ºC)
Filtración
 Liofilización

 Es la desecación al vacío de una muestra previamente

congelada (sublimación)
 Mantiene la viabilidad de los cultivos durante años (en
ampollas de vidrio herméticamente cerradas y mantenidas
a T° ambiente)
 Desecación

 Mata a las células vegetativas, pero no a

las endosporas
 Causas de muerte:
 Aumento de sales intracelulares
 Daños por oxidación
 Diversa sensibilidad, según especies:
 Bacilo tuberculoso: muy resistente (meses)
 Vibrión colérico: muy sensible (dos horas)
Efectos de las radiaciones ionizantes

 Radiaciones ionizantes:
 Rayos gamma
 Rayos catódicos
 Las bacterias son más resistentes que organismos
superiores (valores D10):
 Endosporas: 2000-3000 Gray (Gy)
 Deionococcus radiodurans: 2200 Gy
 Bacterias “normales”: 200-600 Gy
 Homo sapiens: su dosis letal es solo 10 Gy
Efectos de las radiaciones ionizantes

 Efecto letal directo (a altas dosis):

 Roturas y entrecruzamientos en el cromosoma que no se
pueden reparar
 Efecto mutagénico:
 Daños menores que se reparan por mecanismos
propensos a error
 Efecto letal indirecto: por radiolisis del agua, que
genera radicales OH· letales
 Si además, hay oxígeno  formación de peróxidos y
epóxidos que son letales
 Rayos gamma

 Las radiaciones gamma tienen mucha energía y son

emitidas por ciertos isótopos radiactivos como es el
Co60.
 Son difíciles de controlar porque este isótopo emite
constantemente los rayos en todas direcciones.
 Estos rayos pueden penetrar materiales, por lo que
un producto se puede empaquetar primero y después
esterilizar.
 Rayos catódicos

 Radiación con haz de electrones

 Se usan para esterilizar material quirúrgico,
medicamentos y otros materiales.
 Ventaja: el material se puede esterilizar después de
empacado (ya que éstas radiaciones penetran las
envolturas) y a la temperatura ambiente.
 Luz ultravioleta

 Radiaciones con longitudes de onda alrededor de

265 nm son las que tienen mayor eficacia como
bactericidas (200 - 295 nm).
 La luz UV tiene poca capacidad para penetrar la
materia por lo que sólo los microorganismos que
se encuentran en la superficie de los objetos que
se exponen directamente a la acción de la luz UV
son susceptibles de ser destruidos.
 Luz ultravioleta

Se usan para reducir la población microbiana en:

 Quirófanos
 Cuartos de llenado asépticos en la industria
farmacéutica
 Superficies contaminadas en la industria de
alimentos y leche.
 Bodegas de carne refrigeradas
Acción de los agentes químicos
sobre los microorganismos
 Desinfectantes,
 antisépticos,
 quimioterápicos y
 antibióticos
Conceptos generales

 Agentes químicos para el control de los

microorganismos según sus efectos:
 Microbicidas
 Microbiostáticos
 Tipos generales de agentes químicos
 Esterilizantes
 Desinfectantes (germicidas)
 Antisépticos
 Quimioterápicos
 Factores que afectan la potencia de un
agente químico

 Concentración del agente y tiempo de actuación

 pH
 Temperatura
 Naturaleza y población de microorganismos
 Presencia de materiales extraños
 Agentes que dañan la membrana:
Fenoles: Desnaturalizan las PE
Alcoholes: deshidratan, coagulan y
desnaturalizan las PE
Detergentes: alteran la tensión superficial
de la MC
 Agentes que modifican grupos funcionales
Metales pesados y sus compuestos. Ag,
Cu, Mg, Cr. Forman mercaptanos
Agentes alquilantes: formaldehído
 Halógenos, son oxidantes muy potentes y
muy usados:
 Yodo: el mejor desinfectante para la piel
 Cloro
 Cloro gaseoso (Cl2) a 1-3 ppm: cloración
de aguas potables y piscinas
Soluciones de hipocloritos: a 200 ppm
como líquidos (lejías) o en polvo:
desinfección de maquinaria, superficies
 Principales compuestos antimicrobianos

GRUPO MODO DE ACCIÓN APLICACIÓN

Fenoles Fenol, cresol Desnaturalizan proteínas Desinfección en hospitales y laboratorios

Dañan la membrana (instrumentos y superficies)
Hexaclorofeno Antiséptico en jabones y lociones

Alcoholes Etanol Desnaturalizan proteínas Etanol es el más usado. Antipeptico de la piel.

Isopropanol Disuelven lípidos Desinfectante de termómetros y superficies en
clínica
Halógenos Yodo Oxidante, yoda proteínas Antiséptico de la piel en forma de tintura o
yodóforos
Cloro Oxidante Desinfectante. Sistemas de distribución de agua
potable, piscinas. Industria lechera
Peróxido de H2O2 Oxidante Antiséptico en pequeñas heridas
hidrógeno

Metales Hg, Ag Inactivan proteínas Desinfectantes en el laboratorio. Antisépticos en

pesados la piel y ojos

Detergentes Cloruro de Alteran membranas Desinfectantes de utensilios y pequeños

catiónicos benzalconio Desnaturalizan proteínas instrumentos
Antisépticos cutáneos
Aldehídos Formaldehído Agentes alquilantes Desinfección de material de laboratorio y
Glutaraldehído quirúrgico. Son esporicidas y se pueden usar
como esterilizantes
Gaseosos Oxido de etileno Agente alquilante Esterilización de material sensible al calor como
placas Petri, jeringas de plástico, catéteres
Quimioterápicos y Antibióticos
 Retrato robot de un antibiótico ideal
(cualidades deseables)

 Toxicidad selectiva (“bala mágica”)

 Microbicida (pero existen microbiostáticos)
 Que los microorganismos no desarrollen
resistencias
 De amplio espectro
 No alergénico ni con efectos secundarios
 Que permanezca activo en plasma y tejidos
durante el tiempo necesario. Soluble en
agua
 Inhibidores de la síntesis de pared celular

Organismo
Fármaco Mecanismo de acción Espectro de acción
productor

Penicilina Inhiben la formación de Reducido (G+) Penicillium

Ampicilina puentes peptídicos Amplio (G+ y algunas G-) Penicillium
Cefalosporina Amplio (G+ y algunas G-) Cefalosporium
Vancomicina Reducido (G+) Streptomyces

Bacitracina Inhibe el transporte de Reducido (G+) Bacillus

precursores a la pared
 Inhibidores de la síntesis de proteínas

Organismo
Fármaco Mecanismo de acción Espectro de acción
productor
Estreptomicina Se unen a la subunidad 30S Amplio (G+, -, Streptomyces
micobacterias)
Gentamicina Reducido (G-) Micromonospora

Tetraciclinas Amplio (G+, G-, Streptomyces

rikettsias y clamidias)
Cloranfenicol Se unen a la subunidad 50S Amplio (G+, G-, Streptomyces
rikettsias y clamidias)
Reducido (G+ y
Eritromicina micoplasmas) Streptomyces

Puromicina Inhibe la unión del aminoacil- Investigación

ARNt al sitio A y libera la cadena
peptídica en formación
 Inhibidores de la síntesis de ácidos nucléicos

Organismo
Fármaco Mecanismo de acción Espectro de acción
productor
Quinolonas Inhiben la ADN girasa Amplio (G+ y G-) Sintéticos
Rifampicina Inhibe la ARN polimerasa Amplio (G+, -, micobacterias) Streptomyces
Actinomicina Inhibe la elongación del ARN Investigación

Alteración de la membrana celular

Organismo
Fármaco Mecanismo de acción Espectro de acción
productor
Polimixina Altera la estructura y Reducido (G-) Bacillus
permeabilidad de la membrana

Análogos de factores de crecimiento

Organismo
Fármaco Mecanismo de acción Espectro de acción
productor

Sulfanilamida Inhibe la síntesis del ácido fólico Amplio (G+ y G-) Sintéticos