LA GALERIE API 20E (travail de R.

FERRY CANNES)

1- Présentation de la galerie

Galerie de 20 microtubes prêts à l’emploi permettant de réaliser 23 tests biochimiques afin

d’identifier des bacilles Gram – appartenant à la famille des ENTEROBACTERIACEAE.
cupule

microtube contenant le milieu déshydraté

La suspension bactérienne introduite dans le tube dissout les substrats déshydratés.

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2- Préparation de l’inoculum

1 seule colonie
sur GO

isolement Prélèvement
d’une souche pure
sur GNI 5 mL d’eau distillée stérile

Souche pure sur GNI

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3- Ensemencement de la galerie API 20 E

Introduire la suspension bactérienne dans chaque tube à l’aide d’une pipette Pasteur stérile ouverte,
pointe appuyée à l’intérieur et sur le côté pour éviter la formation de bulles

Pour certains caractères:

Remplir le tube de suspension puis recouvrir

Remplir de suspension le tube et la cupule d’huile de paraffine
Pour les tests : CIT VP GEL Pour les tests : ADH, LDC, ODC, H2S, URE
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4- Lecture de la galerie API 20 E

Après 24h d’incubation à 37°C, dans quelles cupules doit-on rajouter des réactifs ?

Chlorure
de fer III
Napht-1-ol Naphtyl-1-
amine
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4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 premiers tests

Tests négatifs

+ Réactif + Réactif + Réactifs

TDA Kovacs VP 1 et 2
Tests positifs

+ Réactif + Réactif + Réactifs

TDA Kovacs VP 1 et 2
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4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 derniers tests

Tests négatifs

Tests positifs

Après ajout des réactifs Nit 1 et Nit 2 : lecture de la NR (ici NR +)

TABLEAU DE LECTURE DE LA GALERIE MINIATURISÉE API 20E
Lecture directe ou indirecte Résultat
Microtube Substrat : Caractère recherché : Révélateur Résultat +
Test (si nécessaire) -
ONPG = Ortho-
ONPG Nitro-Phényl- Beta Lecture directe
Galactoside galactosidase
ADH Arginine Arginine Dihydrolase Rouge
LDC Lysine Lysine Décarboxylase de Lecture directe
ODC Ornithine Ornithine Décarboxylase Phénol

CIT Citrate Utilisation du citrate BBT Lecture directe

Thiosulfate de
H2S
sodium
Production d’H2S Lecture directe

Uréase Rouge de Lecture directe

URÉ Urée
Phénol
Lecture indirecte
Tryptophane
TDA Tryptophane Ajouter une goutte de réactif
désaminase
chlorure de fer III
Lecture indirecte
Tryptophanase ou
IND Tryptophane Ajouter une goutte de réactif
production d’indole
Kovacs
production d’acétoïne Lecture indirecte
Pyruvate de
VP (hydroxy-3-butanone Ajouter 1 goutte de VP1 et
sodium
VP2 Attendre 10 minutes

GEL Gélatine gélatinase Lecture directe

GLU à Substrat
ARA Utilisation de substrats
carboné BBT Lecture directe
= carbonés (glucides)
zymogramme
(glucide)
Lecture indirecte
NO2- / N2 Nitrates (NO3) Nitrate réductase Ajouter 1 goutte de NIT1 et
NIT2 et zinc éventuellement
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5- Identification de la souche
Résultats de la galerie :

- + + + +

5 2 1 5 7 7 3 5 5
Résultats reportés sur la fiche d’identification

Code n°: 5 215 773 (55)

Se référer au catalogue pour identifier la souche à l’aide du code