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PRUEBAS DE AGLUTINACIÓN EN LATEX:

PCR, ASO Y FACTOR REUMATOIDEO.


ASIGNATURA: INMUNOLOGÍA ESPECIAL
LIC. T.M. ORLANDO GERSON LLALLICO
MANZANEDO
INTEGRANTES:
• BALVIN AVILA, SHELEM
CANDY.
• GALLEGOS PALERMO,
CHRISTIAN.
AGLUTINACIÓN

Es la interacción entre un anticuerpo y una partícula


antigénica que se visualiza por la formación de agregados
o grumos macroscópicos.
En este proceso, el anticuerpo es conocido como
aglutinina y el antígeno como el aglutinógeno.
PRINCIPIO DE AGLUTINACIÓN
AGLUTINACIÓN EN LÁTEX
Es un método de laboratorio para examinar ciertos
anticuerpos o antígenos.

Los anticuerpos o antígenos conocidos son unidos a partículas de látex, con el objeto de
facilitar la visualización de la prueba.
Se pueden emplear otras partículas insolubles como el poliestireno o la bentonita.
TIPOS DE REACTIVOS EN LÁTEX
De fácil uso

Muy rápido Muy cómodo

Aglutinación
en látex
Sensible y Cualitativo y
específico semicuantitativo

Presuntivo
PROTEÌNA C REACTIVA
Hígado, cuando hay una infección o inflamación aguda en el cuerpo.
Importancia es que reacciona con el sistema del complemento que es un
sistema de defensa contra agresiones externas del cuerpo humano.

Para que se realiza

Enfermedades Enfermedades
infecciosas bacterianas. inflamatorias.

No se necesita estar en
ayunas.
Artritis reumatoidea

Infarto Pulmonar Fiebre reumática

Artritis aguda Cáncer

Infarto pulmonar Proteína C reactiva Traumatismos

Problemas de rechazo de
Pancreatitis trasplantes

Enfermedades autoinmunes
Estrés
(S. Reiter, E. Cronh , LED)

Infecciones bacterianas
(TBC, urinarias, etc.)
PRUEBA EN PORTA
La determinación se efectúa ensayando una suspensión de látex recubierto
con anticuerpos anti-PCR, frente a los sueros problema. La presencia de
aglutinación es indicativa de un aumento del nivel de PCR por encima del
límite superior del intervalo de referencia de las muestras ensayadas.

Composición de los reactivos


R CONTROL + CONTROL -
Reactivo PCR-Látex. Suero humano con una Suero animal, con una
Suspensión estabilizada y concentración de PCR > 15 mg/L. concentración máxima de 1 mg/L
tamponada de partículas de látex Contiene 0,95 g/L de azida sódica de PCR humana.
recubiertas con anticuerpos Contiene 0,95 g/L de azida sódica
específicos anti-PCR humana.
Contiene 0,95g/L de azida sódica
PROCEDIMIENTO CUALITATIVA
50 μl Suero
50 μl Reactivo

Se mezcla con
un palillo las
Colocamos la tarjeta en un dos gotas
agitador rotatorio a 80 - 100 rpm
durante 2 minutos.

Positivo Negativo
LECTURA

Positivo Negativo
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
• Negativo: suspensión homogénea.
• Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2
minutos. Se califica de 1 a 4 +.

VALORES DE REFERENCIA: Hasta 6 mg/l.


PROCEDIMIENTO SEMI CUANTITATIVO

SUERO
FISIOLOG.

1:2 1:4 1:8 1:16 1:32

50 μl
50 μl
1 2 3 5
4
100 μl

Suero fisiolog.50 μl 50 μl
Suero humano 50 μl.

Suero 50 μl 25 μl 12.5 μl 6.25 μl 3.12 μl


LECTURA Dilución:
DILUCIONES DEL SUERO 1. 100 μl suero en 3900 μl en solución salina (1/4)
TITULO SENSIBILIDAD RESULTADO 2. 50 μl suero en 950 μl en solución salina (1/2)
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 3. 500 μl suero en 500 μl en solución salina (1/2)

P N N N N 2 6 12 mg/l
P P N N N 4 6 24 mg/l
P P P N N 8 6 48 mg/l
P P P P N 16 6 72 mg/l
P P P P P 32 6 192 mg/l
Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce
aglutinación visible macroscópicamente.
La concentración aproximada de PCR en la muestra puede
ser calculada por la fórmula siguiente:
PCR (mg/l) = Título x Sensibilidad de la reacción (6 mg/l)
Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. Su
concentración de PCR es de 2 x 6 = 12 mg/l. VALORES DE REFERENCIA: Hasta 6 mg/l.
ANTIESTREPTOLISINA-O (AS0, ASLO)
Es la medición de anticuerpos anti-Estreptococo betahemolíticos del tipo
A. Esta bacteria produce una enzima llamada estreptolisina O, que puede
destruir los hematíes y el cuerpo reacciona contra ella produciendo
anticuerpos específicos antiestreptolisina O.

Para que se realiza

Glomerulonefritis. Endocarditis
bacteriana.

No se necesita estar en
ayunas.
Endocarditis infecciosa

Sepsis puerperal Glomerulonefritis

Erisipela. Fiebre reumática

Faringitis aguda ASO - ASLO Escarlatina

Piodermia Espondilitis

Amigdalitis estreptocócica
PRUEBA EN PORTA
La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de
látex recubiertos con estreptolisina frente a los sueros problema. La
presencia o ausencia de aglutinación visible es indicativa de la presencia o
ausencia de ASLO en las muestras ensayadas a niveles significativos

Composición de los reactivos


R CONTROL + CONTROL -
Antígeno ASLO-Látex. Suero humano con una actividad Suero animal con una actividad
Suspensión estabilizada y ASLO superior a 200 UI/mL. ASLO inferior a 100 UI/mL.
tamponada de partículas de látex Contiene 0,95 g/L de azida sódica Contiene 0,95 g/L de azida sódica.
recubiertas con estreptolisina O.
Contiene 0,95 g/L de azida sódica.
PROCEDIMIENTO CUALITATIVA
50 μl Suero
50 μl Reactivo

Se mezcla con
un palillo las
Colocamos la tarjeta en un dos gotas
agitador rotatorio a 80 - 100 rpm
durante 2 minutos.

Positivo Negativo
LECTURA

Positivo Negativo
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
• Negativo: suspensión homogénea.
• Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2
minutos. Se califica de 1 a 4 +.

VALORES DE REFERENCIA: Hasta 200 UI/ml.


PROCEDIMIENTO SEMI CUANTITATIVO

SUERO
FISIOLOG.

1:2 1:4 1:8 1:16 1:32

50 μl
50 μl
1 2 3 5
4
100 μl

Suero fisiolog.50 μl 50 μl
Suero humano 50 μl.

Suero 50 μl 25 μl 12.5 μl 6.25 μl 3.12 μl


LECTURA
DILUCIONES DEL SUERO
TITULO SENSIBILIDAD RESULTADO
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
P N N N N 2 200 400 UI/ml.
P P N N N 4 200 800 UI/ml.
P P P N N 8 200 1600 UI/ml.
P P P P N 16 200 3200 UI/ml.
P P P P P 32 200 6400 UI/ml.
Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce
aglutinación visible macroscópicamente.
El nivel aproximado de antiestreptolisina O en la muestra,
puede ser calculada por la fórmula siguiente:
ASO (UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (200 UI/ml)
Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. El nivel de ASO
es de 2 x 200 = 400 UI/ml VALORES DE REFERENCIA: Hasta200 UI/ml.
FACTOR REUMATOIDEO
El factor reumatoide (FR) es una prueba que mide la presencia y nivel de la
IgM específica contra las inmunoglobulinas IgG anormales, producidas por
los linfocitos de la membrana sinovial, de las articulaciones de personas
afectadas por la Artritis Reumatoide

Para que se realiza


La Artritis Reumatoide es una enfermedad crónica, que
produce la inflamación de las articulaciones
principalmente de manos y pies.

No se necesita estar en
ayunas.
Artritis Reumatoide

Leucemia Tuberculosis

Infección viral crónica Hepatitis crónica

Dermatomiositis Factor reumatoideo Mononucleosis infecciosa

Lupus Eritematoso
Síndrome Nefrótico Sistémico

Síndrome de Sjogren
PRUEBA EN PORTA
La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de
látex recubiertos con gamma globulina humana frente a los sueros
problema. La presencia o ausencia de aglutinación visible es indicativa de
la presencia o ausencia de FR en las muestras ensayadas

Composición de los reactivos


R CONTROL + CONTROL -
Reactivo FR-Látex. Suero humano con una actividad Suero animal con una actividad
Suspensión estabilizada y aproximada equivalente a 25 inferior a 5 UI/mL.
tamponada de partículas de látex UI/mL. Contiene 0,95 g/L de azida sódica
recubiertas con gamma globulina Contiene 0,95 g/L de azida sódica
humana.
Contiene 0,95 g/L de azida sódica
PROCEDIMIENTO CUALITATIVA
50 μl Suero
50 μl Reactivo

Se mezcla con
un palillo las
Colocamos la tarjeta en un dos gotas
agitador rotatorio a 80 - 100 rpm
durante 2 minutos.

Positivo Negativo
LECTURA

Positivo Negativo
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
• Negativo: suspensión homogénea.
• Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2
minutos. Se califica de 1 a 4 +.
VALORES DE REFERENCIA: No están
claramente establecidos. Se consideran
patológicos valores superiores a 20-30
UI/ml.
PROCEDIMIENTO SEMI CUANTITATIVO

SUERO
FISIOLOG.

1:20 1:40 1:80 1:160 1:320

50 μl
50 μl
1 2 3 5
4
100 μl

Suero fisiolog.50 μl 50 μl
Suero humano 50 μl.

Suero 50 μl 25 μl 12.5 μl 6.25 μl 3.12 μl


LECTURA
DILUCIONES DEL SUERO
TITULO SENSIBILIDAD RESULTADO
1:20 1:40 1:80 1:160 1:320
P N N N N 20 1 20 UI/ml.
P P N N N 40 1 40 UI/ml.
P P P N N 80 1 160 UI/ml.
P P P P N 16 0 1 160 UI/ml.
P P P P P 32 0 1 320 UI/ml.
Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce
aglutinación visible macroscópicamente.
La concentración aproximada de factor reumatoideo en la
muestra puede ser calculada por la fórmula siguiente: FR
(UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (1 UI/ml)
Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:40. Su
concentración en FR es de 40 x 1 = 40 UI/ml. VALORES DE REFERENCIA: Hasta200 UI/ml.
BIBLIOGRAFÍA.

• ADOLFO CAMPOS FERRER, CARLOS MUÑOZ RUIZ, GONZALO RUBIO PEDRAZA, MANUAL DE
PRÁCTICAS DE INMUNOLOGÍA, 1RA EDICION, ESPAÑA, MASSON, 2004.
• LEONARDO FAINBOIM, JORGE GEFFNER, INTRODUCCION A LA INMUNOLOGÍA, 6TA EDICION,
ESPAÑA, EDITORIAL MEDICA PANAMERICANA, 2012.
• LOPEZ DE LA MORA. DAVID ALEJANDRO, INMUNOLOGÍA. MANUAL DE PRÁCTICAS, 1RA EDICIÓN,
ESPAÑA, MCGRAW-HILL, 2015.
• MALE. DAVID, INMUNOLOGÍA, 8VA EDICIÓN, ESPAÑA, ELSEVIER, 2014.
• ADRIANA GARIBAY ESCOBAR, MANUAL DE PRÁCTICAS DE INMUNOLOGÍA, 1RA EDICIÓN, MEXICO,
UNISON, 2006.

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