Montserrat Padilla Villavicencio

Miguel Ángel Villalobos Córdova

Proceso Usos potenciales
positivos y negativos,
biotecnológico sociales, políticos,
complicado económicos, legales,
éticos y religiosos

¿Quién la necesita?
¿Quién puede
pagarla?
¿En que casos puede
ser necesaria?
 Clonación: proviene del griego klon y
significa: brote, vástago o retoño.

 Biológicamente hablando se define

como: «Conjunto de células o población
de individuos originados de una sola
célula o individuo al que son
genéticamente idénticos»
 *Organismos unicelulares
(reproducción asexual) por
bipartición como las bacterias
y levaduras.
Clonación Natural *Organismos vegetales: pasto,
reproducción vegetativa
*Animales, patogénesis

Inicio con Hans Spemman

(1938), quien trabajando
con salamandras
Clonación Artificial desarrollo una técnica
llamada Transferencia
Nuclear
Consiste:
• Uso de una aguja hueca de 1
diezmilésima de pulgada con la
que se retira el núcleo haploide
de un ovulo.
• Se selecciona una célula
somática diferenciada.
• Se toma un núcleo diploide se
inserta en ele ovulo enucleado.
• Activar el embrión clonado con
un tratamiento químico
(ionomicina) y una corriente
eléctrica de algunos milivolts.
• Finalmente el “embrión” se
implanta en el útero
hormonalmente sincronizado de
una hembra de la especie a
clonar para su gestación y
parto.
 Existen tres tipos distintos de
clonación:
Por trasplante nuclear: en
Molecular: consiste en la ella se extrae el núcleo de
copia y la amplificación de una célula haploide –un
fragmentos de adn para óvulo—y se sustituye por el
formar una célula huésped. núcleo de una célula
Celular: se caracteriza por
Por medio de ésta, es diploide. El óvulo, ya con la
realizarse a partir de células
posible hacer experimentos otra mitad de la información
haploides, que son células
para obtener medicamentos necesaria para la vida forma
infértiles cultivadas en
tales como la insulina –para un embrión y, más tarde, un
laboratorio.
el tratamiento de diabetes— nuevo ser. Este tipo de
o la eritropoyetina –para clonación es la más usada y
anemias asociadas a el resultado con mayor
enfermedades del riñón. difusión es, sin duda, la
oveja Dolly.
 Oscar Hertwig (1848- Jaques Loeb (1859-
Gregory Goodwin (1903-
1922). Partogenesis; 1927)
1967)
aplico estricina o 1900. Desarrollo huevos
cloroformo a huevos de Consiguió óvulos de
de rana no fecundados
herizo de mar (huevos conejo mediante «shock»
inchandolos con una
sin espermatozoides) térmico
aguja.
 1976. Rudolf Jaenish
1972. Pau Berg inyecto DNA humano 1983. Kary Mullins
1978. Nacio Lousie
en ovulos de raton descubrio metodo
fue el primero en recien fecundados
Joy Brown, el
PCR para copiar
clonar genes con quienes transmitieron primer «bebe
trozos de DNA y
éxito. el material a sus probeta»
RNA.
descendientes.
 1998.
1984. Steen 1995. Wilmut y
Hawaii se crea
Willadsen clono un Campbell colocan
ratones
cordero vivo a celulas embrionarias 1996. Nace genéticamente
de oveja en una fase
partir de celulas Dolly idénticos
de reposo antes de
embrionarias de transferir sus nucleos En Universidad Kinki
oveja inmaduras a celulas de ovejas japonesa se clonan 8
terneros de una vaca.
 1999. 2003. Se
2001. Steve
Corea del 1999. En engendra
Texas se Stice triplico el en Italia
Sur extrajo
clono el indice de Prometea
celulas de
ternero clonación de el primer
una mujer Second bovinos caballo
esteril y se Chance a Haflinger
(células de
clonaron partir del clonado a
una vaca
en un toro brahman partir de
sacrificada 48
embrión (4 de 21 años celulas
hr) epiteliales.
celulas)
 Dolly
Las células las
Extrajeron células del útero de la
cultivaron en
oveja adulta Tracy
solución celular

Tracy ya estaba Ovulo y el núcleo se

muerta cuando sus estimularon en un
Dolly nace 5 julio
núcleos celulares se medio de cultivo
1996
inyectaron en otra (inicia desarrollo
raza de oveja embrionario)
Lo que se espera en un futuro:
Agricultura y Producción de Drogas: No solamente se pueden perpetuar
los mejores rasgos sino que también se podrían usar los animales de granja
como “máquinas” para la producción a gran escala de proteínas de
importancia médica. Polly, un cordero transgénico clonado, es un ejemplo de
ello. Es capaz de producir leche que contiene el factor IX, la proteína que es
deficiente en los hemofílicos.

Mantenimiento de la Biodiversidad: La clonación puede ser una

herramienta importante para la preservación de especies en peligro si los
métodos que se usan hoy en día fallan.

Investigación Biomédica: La clonación puede producir animales de laboratorio

genéticamente idénticos los cuales pueden ser usados como modelos para
enfermedades humanas. El ratón, el animal de laboratorio mas comúnmente utilizado,
se reproduce rápidamente y su genética ha sido bien estudiada. Los ratones han sido
clonados exitosamente y probablemente facilitarán el descubrimiento de nuevos
tratamientos para enfermedades; producir conejos transgénicos clonados para
estudiar la enfermedad cardiovascular con la esperanza de encontrar nuevos
tratamientos.
Iniciativas Comerciales: Al notar que hasta la fecha no se ha
reportado ningún clon vivo de perro, la compañía Per PETuate,
Inc. (de Connecticut) está congelando tejido de mascotas de
familias para el futuro. Los investigadores han tenido poco éxito
con los pasos que se requieren para hacer un clon de perro, tales
como el desarrollo después de la transferencia nuclear, y la
implantación del embrión en el útero.

Tratamientos para Enfermedades Humanas: Se podrían extraer

células de embriones en sus etapas iniciales, para suministrar
reemplazos de células y tejidos sin el peligro de rechazo que
existe con el trasplante. El gobierno del Reino Unido ha aceptado
recientemente las recomendaciones de su autoridad médica en el
sentido de permitir investigaciones que utilicen embriones, sujetas
a controles que incluyen un límite de 14 días.
 FIABILIDAD DE LA CLONACION POR BROTES AXILARES
COMO METODO EFICAZ PARA MEJORAR LOS
PROCESOS DE SELECCION DE VARIEDADES DE
TOMATE RESISTENTES A FUSARIUM OXYSPORUM F. SP.
LYCOPERSICI
El proceso de clonación comenzó con la germinación aséptica de las semillas de
tomate y tras 4-5 días de incubación las plántulas resultantes se situaron a la luz en
una cámara de cultivo a 26° C

7días después, las plántulas fueron cortadas 1 cm por debajo de los cotiledones y se
pasaron individualmente a un medio MS para su crecimiento y multiplicación.

Los brotes obtenidos fueron incubados durante 15-20 días y, tras alcanzar un tamaño
adecuado y ser troceados en secciones nodales con una yema axilar, fueron repicados
a medio fresco MS.

Esta rutina de subcultivo se mantuvo durante 3-4 subcultivos (aproximadamente 2-3

meses), hasta obtener el número de copias clonales deseadas.

Los nuevos brotes producen raíces adventicias profusamente en el mismo medio MS

de multiplicación, convirtiéndose en plántulas que fueron trasplantadas a turba, y
aclimatadas en invernadero en condiciones de alta humedad (HR 80 p. 100), con un
elevado porcentaje de supervivencia

El método de clonación por brotes axilares
es, por tanto, una herramienta muy eficaz
aplicable al proceso de introducción de
resistencia a patógenos en programas de
mejora genética clásica de tomate,
empleándose sin problemas en la obtención
de nuevas variedades con buenas
características agronómicas y con resistencia
a nematodos del género Meloidogyne,
Ventajas que presenta el método hay que
señalar que permite la evaluación, de forma
simultánea e independiente, del material
vegetal frente a varios agentes de selección.
Así, y sin que se produzcan interferencias
indeseadas, se puede evaluar el
comportamiento agronómico del material
vegetal en condiciones de campo y su
resistencia a varios patógenos, acortándose
de forma sustancial el tiempo necesario para
la conclusión de un programa de mejora.
 Ventajas
• La producción de plantas más
resistentes a las enfermedades.
• La reproducción de las plantas
superiores que tienen superioridad
nutricional.
• Crecimiento previsible que salvar
millones perdidos en malas
cosechas
• La capacidad para hacer frente al
hambre mundial a través de la
ciencia, no depende de los
agricultores.
• Aplicable a la nutrición no sólo,
pero para los propósitos
medicinales así.
• Las plantas que son resistentes a
los pesticidas pueden ser más
fáciles de reproducir.
Desventajas
• Ingeniería genética de una planta
completamente clon podría
resultar en una disminución en la
diversidad del ADN.
• La necesidad de la variación
genética en el futuro es
impredecible y no se puede
subestimar.
• El costo y el tiempo para el
procesamiento de plantas
clonadas
• Resistencia de los consumidores
para cambiar
• Plantas clonadas pueden no ser
capaces de reproducirse
naturalmente, por lo que si
dejamos de plantas que crecen de
forma natural y una especie
muere, no tenemos manera de
recuperarlo.
 Son las metodologías para transferir
genes de un organismo para
expresarlos en otro.

DONADOR RECEPTOR
 1. Identificar la característica deseable
 2. Verificar que existe el gen de la
característica
 3. Clonarlo e insertarlo en plásmidos-
vectores
 4. Caracterizar el gen
 5. Modificar el gen
 6. Transformación del organismo
(Plantas o animales)
 7. Caracterización del OGM: El OGM se
analiza molecular y biológicamente
Métodos

Agrobacterium
tumefaciens

Mecanismos
físicos
 Transferencia de material genético
proveniente de otro organismo

Cultivos in vitro

Regeneran plantas con el gen

Herencia
  Vector para transferirlo al tejido de la
planta (plásmido)

 Sistema para identificar las células o

tejidos transformados

Ventaja sobre células

Gen de selección
que no lo tienen
Se trabaja con el plásmido Ti, reemplazando la
secuencia de ADN-T (genes de formación de
tumores y síntesis de opinas) por una nueva.

El plásmido se transfiere a las células de At

La bacteria se usa para transformar células

vegetales
Dentro del plásmido Ti existe una zona donde
se encuentran los genes vir, responsables del
procesamiento, corte y transferencia de ADN-T
 El ADN-T se transporta y se integra a su
material genético

 Las células se multiplican y generan una

planta completa.
VECTOR

0.4 – 2 µm
De diámetro
  Impulsadas por
explosión de
pólvora seca,
liberación de gas
comprimido o
descarga eléctrica
de una gota de
agua.

 Si las partículas llegan al núcleo, el ADN se

integra de forma estable por recombinación.
 Aun se presentan problemas en
animales transgenicos:

 Lugar de integración indeterminado

 Falta o expresión variable (anatómicas,
fisiológicas y comportamiento)
 Elevada mortalidad en el desarrollo
embrional
 Microinyección Electroporación

Encapsulación
Vectores
de ADN

 El ADN introducido se integra

en el genoma del hospedador.
 Son los encargados de asegurar la
estabilidad del material genético hasta
llegar al núcleo.

Es el método más Se inyecta el Involucran

Físicos
Virales

No virales
eficaz, los virus fragmento de ADN principalmente
deben modificarse con el gen inyectores sin
para reemplazar directamente a las aguja y
el material células. Son electroporación.
genético (virus menos eficaces La electroporación
atenuados . para transformar se base en
células. Pueden impulsos
partir de eléctricos que
estructuras abren “agujeros”
sintéticas o en las membranas
bacterias. celulares.
 Puede hacerse exvivo o invivo (directamente a las células)

• Se extraen las células del individuo

para transformarlas
• Transferencia mas eficiente

Exvivo • Permite la propagación de células

(se incrementan)
• Es solo utilizable para esa especie
• Costoso

• Se administra el vector con el gen

al individuo
• Puede usarse en muchos

Invivo individuos
• Menor costo e infraestructura
• Complicado de controlar
• Menor eficiencia
 Microinyección de zigotos
 Manipulación de células embrionarias
 Uso de transposones
 • Se aíslan óvulos • Implica introducción • Los transposones
fertilizados de las de ADN a células son secuencias de
hembras totipotentes (ET) o material genómico
Microinyección de zigotos

Manipulación de células embrionarias

Uso de Transposones
• Se manipulan y se madres (EM) con la capacidad de
introduce una • Estas células se entrar y salir del
solución con el ADN toman de la blástula genoma
• Los óvulos en desarrollo y se • Pueden entrar en
modificados se transfieren a un plásmidos y ser
reimplantan en medio donde se propagados , por
hembras (nodrizas) mantiene su estado esto se les da la
• Los recién nacidos embrionario capacidad de ser
se chequean para • Se introduce el ADN transferidos
presenciar la extraño en las exitosamente en
evidencia del células ET y se células y genomas
transgen reintroducen en la extraños
blástula. • Se pueden manipular
para llevar a cabo
transferencia
horizontal. Que es la
transferencia de
material genético
entre células y
genomas de
especies diferentes.
https://www.youtube.com/watch?v=sO6R4
F6YnUo
Bibliografía
 http://www.actionbioscience.org/esp/biotec
nologia/pecorino.html
 http://www.revista.unam.mx/vol.5/num2/art
7/ene_art7.pdf
 http://www.inia.es/IASPV/1998/vol13/06-
M.C.RODRIGUEZ.pdf
 http://www.uned.es/experto-biotecnologia-
alimentos/TrabajosSelecc/PatriciaNarbon.p
df
 http://revistareduca.es/index.php/biologia/a
rticle/viewFile/978/984