Este documento describe varias técnicas de tinción para el examen microscópico de orina, incluyendo tinción de Sternheimer-Maibin, tinción de peroxidasa de Kaye modificada, tinción de Sudan III, tinción con Lugol y doble tinción con eosina y azul de metileno. También describe los procedimientos para la recogida de muestras, examen microscópico y cultivo de orina para el diagnóstico de infecciones del tracto urinario.
Este documento describe varias técnicas de tinción para el examen microscópico de orina, incluyendo tinción de Sternheimer-Maibin, tinción de peroxidasa de Kaye modificada, tinción de Sudan III, tinción con Lugol y doble tinción con eosina y azul de metileno. También describe los procedimientos para la recogida de muestras, examen microscópico y cultivo de orina para el diagnóstico de infecciones del tracto urinario.
Este documento describe varias técnicas de tinción para el examen microscópico de orina, incluyendo tinción de Sternheimer-Maibin, tinción de peroxidasa de Kaye modificada, tinción de Sudan III, tinción con Lugol y doble tinción con eosina y azul de metileno. También describe los procedimientos para la recogida de muestras, examen microscópico y cultivo de orina para el diagnóstico de infecciones del tracto urinario.
• La tinción facilita el reconocimiento de los elementos de la orina,estos
sirven como unas hermosas imágenes microscópicas y fotográficas,
no son tan utilizadas en la práctica cotidiana.3 • Son necesarios para la identificación de eosinófilos linfocitos y monocitos y para la detección de células tumorales en la orina: Tinción de Sternhelmer-Maibin
• Permite visualizar los leucocitos urinarios con un patrón de tintorial
diferente: • Leucocitos vitales con un ligero engrosamiento globuloso de color azul pálido y movimientos vibrátiles de las granulaciones del citoplasma celular. • Leucocitos desvitalizados. Pequeños con un núcleo claro de color púrpura. Soluciones que intervienen: • Violeta de genciana • Etanol (95%) • Oxalato amónico • Agua destilada • Safranina Tinción de peroxidasa de Kaye. (modificada por lamps) • Permite reconocer mejor los cilindros leucocitarios. • Reactivos necesarios • • Solución A: • Acetato de cobre • Ácido nítrico • Glucosa • • Solución B: • Clorhidrato de beucedina • Solución C: • Superóxido de hidrógeno • Urea • 8 hidroxiquinolina • Los leucocitos adoptan un color azul oscuro -negro si la tinción es adecuada • Los cilindros leucocitarios de un color muy intenso .se ven con gran facilidad. Tinción de la grasa con solución Sudan 111 • Después de centrifugar la orina y descontar el sobrenadante se añaden 1 a 2 gotas de solución saturada de Sudán 111 en etanol al 70% en el sedimento se agita bien y se examina al microscopio unos 15 minutos la grasa contenida en las células o cilindros granulosos se tiñe de color rojo anaranjado y se reconoce con gran facilidad3 Tinción con la solución de Lugol
• El sedimento preparado de la forma habitual se
mezcla con una gota de solución de lugol y se agita bien y luego se examinan microscopio3, los leucocitos aparecen de color parto el epitelio de color pardo claro y los cilindros céreos y estructura cilindroides de color amarillo claro Tinción de eosina • Se añade una gota de solución de eosina 0.5% en agua destilada al sedimento se examina se examina inmediatamente al microscopio los eritrocitos se tiñen de color rosa A diferencia de los hongos gotas de sangre o incluso Burbujas de aire que a veces se confunden con los hematíes la eosina tiñe también a casi todos los demás elementos de sedimento de un color rojizo epitelio leucocitos y todos los cilindros, los cilindros céreos adquieren un color específicamente llamativo3 Doble tinción con eosina y azul de metileno • La mezcla del sedimento y del colorante debe quirir macroscópicamente un color azul verde los hematíes, cilindros, eritrocitarios y epitelio plano se tiñen de color rojizo con la eosina pero todos los demás elementos se adquieren un color azulado, los cilindros céreos Se caracterizan por un color azul oscuro y los hilianos por un color azul claro3 Tinción con rojo-neutro y violeta de metilo de Schugut
• Sólo se obtiene una coloración adecuada con orinas
ácidas o neutras, aquí se conviene acidificar las Orinas alcalinas con ácido acético diluido, 3 la sustancia fundamental de los cilindros se tenía de color rojizo y las precipitados aparecen de color rojo azulado Doble tinción simultánea de Kensel • Solución saturada de sudan 111 • Solución saturada de azul de metileno • Solución de CdCl • Los lípidos aparecen de color rojo anaranjado en microscopio y los elementos celulares de color azul Tinción con azul de metileno de Loffler • Se añaden 2 gotas de las siguientes soluciones al sedimento • solución etanolica de azul de metileno e hidróxido de potasio al 0.01℅ • Después de unos 15 minutos los leucocitos y el epitelio adquieren un color azulado sobresaliendo las estructuras nucleares esta tinción permite diferenciar mejor entre las células tubulares que a menudo tienen tamaño poco mayor y los leucocitos3 Tinción eosinofílica de Hansel • Esta tinción se ha utilizado para la detección de eosinófilos en las secreciones nasales, bronquiales y oculares • Los eosinofilos adquieren una tensión rojo rosada de los gránulos y su núcleo segmentado aparece de color azul oscuro se distingue entre un recuento reducido o elevado de eosinofilos, la eosinofiluria es un hallazgo característico de la nefritis intersticial aguda inducida por medicamentos3 • El urocultivo es el cultivo de orina para diagnosticar infección sintomática del tracto urinario o infección asintomática (bacteriuria asintomática) en pacientes con riesgo de infección. Está basada en la presencia de un número significativo de bacterias (generalmente >100.000 bacterias/ml.)4 • La piuria, junto con la bacteriuria, es un dato muy importante para el diagnóstico de infección del tracto urinario, ya que prácticamente está presente en todas las infecciones urinarias. 4Una excepción es la bacteriuria asintomática en la que la piuria puede estar ausente. RECOGIDA DE MUESTRAS
• Para la recogida, transporte y manipulación de muestras podrán
tenerse en cuenta • La correcta recogida y conservación de la orina para urocultivos es fundamental para que puedan obtenerse resultados fiables. Los puntos clave son: • • Mujeres: Obtención de la orina después de separar los labios vaginales de manera que el chorro de orina no toque genitales externos. • • Hombres: Retracción del prepucio de manera que el chorro de orina salga directamente. EXAMEN MICROSCÓPICO (recomendado)
• El procedimiento elegido debe permitir:
• Recuento de leucocitos al menos semicuantitativo • Detección de células epiteliales (CE): su presencia indica muy probablemente contaminación de la muestra por contacto con genitales externos. • Ante un resultado (urocultivo) positivo si se observa presencia de células epiteliales debe pedirse nueva muestra para confirmar4. CULTIVO
• Debe permitir el aislamiento y el recuento cuantitativo desde 1.000 ó
10.000 Unidades Formadoras de Colonias (UFC)/ml. de los uropatógenos más comunes: • Se sembrará cuantitativamente, generalmente con asa calibrada de 1 ó 10 ml. en uno de los siguientes medios en placa: • • Cled • • Agar cromogénico de orina • • Agar sangre + agar MacConkey (Levine) • • Incubar a 35-37° C en aerobiosis durante 24-48 horas. El resultado del examen de urocultivo puede ser:
• • Negativo o normal cuando no se observa crecimiento de colonias
bacterianas en la orina en valores preocupantes;4 • • Positivo cuando es posible identificar más de 100.000 colonias de bacterias. En este caso, el resultado aún puede presentar el nombre de la bacteria y los antibióticos eficaces o no en el tratamiento; • • Falso positivo en situaciones en las que hay contaminación de la orina por otros microorganismos, sangre o medicamentos; • • Falso negativo si el individuo tiene un pH de la orina muy ácido, por debajo de 6, o está tomando algún antibiótico o diurético.4