ESPERMATOGRAMA

INTRODUCCION

• Evalua el funcionamiento y la producción de

espermatozoides así como la función de las glàndulas
accesorias.
• Provee información esencial sobre el estado clínico del
individuo
• Mínimo 2 análisis (7 días a 3 meses).
• La recolección y el análisis debes ser realizados mediante
técnicas estandarizadas.
• Es un método utilizado para la regulación de la fertilidad
masculina.
 SEMEN

• Es un fluido biológico que se obtriene tras la estimulación

sexual y se denomina eyaculado.
• El eyaculado esta constituido por dos elementos
diferenciados uno sólido celular y otro líquido
• plasma seminal.
• El elemento celular esta representado por los
espermatozoides y es el reflejo funcional de los túbulos
seminíferos.
• El plasma seminal, producto de origen multiglandular:
Cooper, Litrre. Vesículas seminales. Participa en le
contenido del eyaculado en diferentes tiempos.
 ESPERMATOGRAMA

• PRE- ANALITICA:recolección de la muestra y datos de la

filiación.
• ANALITICA: Exa. Físico, Exa. Microscópico, Bioquímica
seminal, Capacidad fertilizante.
• POST-ANALITICA: Reporte de resultados.
 Recolección de la Muestra
• De acuerdo a la hoja de instrucciónes.
• Abstinencia sexual previa (mínimo 3 días, máx. 7 días,
preferentemente 5 días).
• Antes de obtener una muestra para el estudio es necesario tener
una eyaculación voluntaria,
• La muestra de semen siempre se obtendrá por masturbación.
• Se rechazan las muestras obtenidas por coitos interruptus, uso de
lubricantes y las muestras incompletas.
• Si la obtención de la muestra se realiza en domicilio debe ser
entregada antes de los 60 minutos ( temperatura entre 20 y 40
grados cent.)
• Medidas de seguridad para el manejo de
muestras:virus,HIV,HVB otros,
• Para el cultivo utilizar técnicas estériles.
 Exámen Macroscópico
• Aspecto: normalmente es gris opalescente, clara por menor
concentr. de spz, marrón por presencia de GR o amarilla ante
ictericia .
• Olor
• PH : VN 7.2 a 7.8 la alcalinidad indica indica prostaitis, la acidez
inflamación crónica y alteración en los conductos.
• Volumen: 1.5 a 5 ml., hipospermia e hiperespermia.
• Consistencia: viscocidad, permite libre caida de las gotas por medio
de una pipeta, long. del filamento mayor 2cm.esta aumentada
interfiriendo en la mótilidad, concentración y detección de Ac.
• Coagulación : después de la eyaculación dependiente de la vesícula
seminal ,estado de gel los EMZ estan en una fase de letargo.
• Licuefacción: antes de la hora, dependiente de la próstata y gl.de
Cowper y la temperatura (37 grados cent.) los spz pasan a un medio
líquido. Se evalúa como completa o incompleta.
 Exámen Microscópico

• Lámina de orientación
• Motilidad
• Vitalidad
• Recuento de spz
• Morfología celular
• Células germinales
 Lámina de Orientación

• Objetivo: presencia o no de spz, células redondas (hasta

5%).
• En cámara de Neubauer, observación al minuto y rápida.
• 10 a 20 ul en lámina, 40X
• Adecuar la dilución si muestra concentrada o centrifugar si
se observa menos de 1a2 spz por campo.
• Detectar mucocidad y observar aglutinaciónes.
 Motilidad.

• Grado III : muy móviles (atraviesan todo el campo)

• Grado II : móviles (movimiento dentro del campo en zig
zag)
• Grado I : poco móviles (movimiento en su sitio)
• Grado 0 : inmóviles
• Se observa directamente colocando 10ul de semen en
lámina.
• Se debe contar 200 spz , realizar 2 conteos y sacar un
promedio.
 Vitalidad

• Número de spz que estan vivos : no colorean

• se usa colorante vital, las menbranas citoplasmáticas
dañadas (spz muertos) permiten el ingreso del colorante:
colorean
• se cuentan 200 spz ,el resultado se expresa en %, normal
mayor al 60%
• sirve para verificar la exactitud de la evaluación de la
motilidad ya que el % de spz muertos no debe ser mayor
que el de spz inmóviles.
 Recuento de Espermatozoides

• Evaluación de la concentración
• Dilución 1:20 según técnica, se utiliza el método
hemocitométrico (cámara de Neubauer), se cuentan spz
con cabeza y cola.
• Dos conteos y verificar la diferencia con la curva, se
expresa el promedio.
• Cálculo: contar en retículo de GR, la cantidad obtenida se
multiplica x 10(al exp, 6) spz/ml y por el volm. de semen.
• VN : 20 a 250 millones de spz/ml
• Oligospermia menor a 20 millones spz/ml : leve, moderada
y severa
• Azoospermia: ausencia de spz.
 Morfología Celular
• Relacionada con la capacidad fertilizante
• expresa el % se spz normales
• Observación: realizar 2 extenciónes de la muestra de semen
en fresco, usar técnicas de tinción Wrigth,Giemsa,PAP
• observar morfología de cabeza, cuello y cola.
• Cabeza:
anucleada,macrocefálica,alargada,bicefálica,redonda,triang
ular, piriforme etc.
• Cuello: implantación axial anómala,encorvado,delgado
,engrosado, gotas citoplasmáticas (inmadurez)
• Cola: ausente,enrrollada,dobles,angulaciónes
• VN : spz normales mayor al 50%, inmaduros menor al 10%
 Células Germinales

• Espermátides, espermatocitos y espermatogonios

• Hasta el 10% de los spz en l eyaculación puedentener
anormalidades.
• dificil identificación por ser degeneraticas, usa tinción
Bryan Leishman
• El incremento sugiere función defctuosa de los túbulos
seminíferos, hipopespermatogénesis, varicocele, disfunción
de las células de Sertoli.
• VN de 0 a 3.7
 Recuento de Leucocitos
• Sirven para descartar infección y pobre calidad del semen,
dos técnicas:
• Peroxidasa intracelular : PMN con tinción ortotoloudina y
agua oxigenada,(recuentos menores por no detectar
linfocitos y pmn que desagregaron gránulos de peroxidasa)
VN menor a 1 por mil PMN/ml
• Antígenos específicos para leucocitos, más exacto
• Leucocitospermia sugiere exámen. microbiológico para
investigar infección de glánd. anexas.
 Capacidad Fertilizante

• Test Hipo-osmótico: evalúa integridad de la membrana al

someterla a una concentración hipoosmótica que produce
ingreso de agua e hinchamiento celular (cola).
• Según técnica con buffer hipoosmótico, se observa al
microscopio % de colas hinchadas
• VN mayor al 60%
• Test de sobrevida del spz:supervivencia del spz en función
del tiempo, los spz se separan del plasma seminal por
lavados, se evalúa la motilidad de 2 a 24hr.
• Resultado en % de motildad.
 Bioquímica

• Próstata : ácido cítrico, zinc,fosfatasa ácida, alfa glutamil

transferasa
• Vesícula seminal : fructosa, prostaglandinas,indica función
de las gland. sexuales accesorias y conductos de transporte
• VN fructosa: 1.2 a 4 mg/ml
• VN ácido cítrico : 1.5 a 15 mg/ml
 Alteración de la Glándulas Anexas

• Vesícula Seminal : PH disminuido, coagulación pobre o

ausente, espermaglutinación, leucocitospermia,
astenozoospermia, fructosa corregida dismnuida.
• Próstata : PH aumentado, licuefacción retartada,
consistencia aumentada, leucocitospermia,
astenozoospermia, marcadores bioquímicos, disminuidos.
 Valores de Referencia

• Volumen: 1 - 5 ml
• PH 7.2 - 8.0
• Color Gris blanquecino
• Licuefacción En menos de 30 min.
• Viabilidad mayor al 65%
• Movilidad Mayor del 60%
• Morfología Menos de 30% anormales
• Rcyo de spz Mayor de 20 millones /ml
• Acido cítrico 1.5 a 15 mg/ml
• Fructosa 1.2 a 5 mg/ml
 INTERPRETACION DEL
ESPERMATOGRAMA

• NORMOZOOSPERMIA:mayor a 20 millones de spz/ml

• OLIGOZOOSPERMIA: menor de 20 millones “
• Oligozoospermia leve: 15 a 20 millones “
• Oligozoospermia moderada: 5 a 14 millones “
• Oligozoospermia severa: menor de 5 millones “
• AZOOSPERMIA: ausencia de spz en l eyaculado
• POLIZOOSPERMIA: mayor a 250 millones de spz/ml
(volm de 2ml)
• ASTENOZOOSPERMIA: menor al 50% de spz en grado
III y II, menor del 25% de spz grado II
• astenozoospermia leve : 41 al 50% “
• astenozoospermia moderada: 11 a 40% “
• astenozoospermia severa:. menor del 10% “
• TERATOZOOSPERMIA0menor al 50% de spz normales
• ASPERMIA: ausencia de eyaculado externo
• HIPERESPERMIA: eyaculado mayor de 5ml
• lEUCOCITOSPERMIA: mayor de 1millon de
leucocitos/ml
• HEMOSPERMIA: presencia de hematíes en el eyaculado
• NECROZOOSPERMIA: vitalidad 0% (total de spz
muertos)
GRACIAS
 EMBRIOLOGIA

• 4º semana aparecen las células germinales primordiales.

• 5º semana las gónadas (mesonefros).
• Migración de cel. germinales para formar testículo quien en
el interior conten´rá los túbulos seminíferos rodeado de
mesenquima.
• Las paredes de Tub. seminíferos contienen 2 clases de
células: Cél. de Sertoli (sostén) y espermatogonios.
• Los Conductos separados por mesénquima que contiene a
las cél. intersticiales de Leyding.
 REGULACION HORMONAL

• Eje hipotálamo-hipofisiario
• Celulas de Leyding: intersticio, sintetizan el 95%
Testosterona
• LH y Prolactina : estimulan a cel. Leyding para producción
de testosterona.
• FSH y Testosterona : estimulan poducción de
espermatozoides en tub. seminíferos.
 ESPERMATOGENESIS

• Proceso por el cual los espermatogonios se dividen y se

diferencian a spz.
• Fase Espematogónica : las células precursoras (stem cell)
se dividen para formar una cel. precursora de reemplazo y
proporcionar una población de espermatogonios,,posee tres
tipos celulares: Ao,Ac,Ab.
• Fase de Espermatocitos: los espermatocitos primarios
sufren meiosis para reducir el número de cromosomas.
• Fase de Espermátides: o espermiogénesis las espermátides
se diferencian en espermatozoides (aploides) la condición
de diploide se restablece luego de la fecundación con el
óvulo,posee 4 fases:Fase de golgi,casquete,acrosoma y
maduración.
 ESPERMATOZOIDE

• Mide 60 um de largo,cabeza aplanada y cónica de 5um de

largo x 3um ancho x 1um espesor.
• Casquete acrosómico cubre los dos tercios ant. del nucleo
ctiene: hialuronidasa, neuraminidasa, fosfatasa ácida
acrosina, enzimas necesarias para penetrar la membrana del
óvulo
• Cola : se divide en cuello, pieza intermedia (7 um y
contiene mitocondrias), Pieza principal (40um) y pieza
terminal(5um).
• El cuello debe estar unido a la cabeza de forma axial y la
cola debe ser derecha, uniofrme y desenrrollada.
• Los spz viven varias sem. en los tub. seminíferos y solo 2 a
 FACTORES QUE AFECTAN LA
ESPERMATOGÉNESIS

• Deficiencias alimentarias
• Infecciónes locales o generalizadas
• Aumento de la temperatura testicular
• Hormonas esteroides y medicamentos relacionados
• Agentes tóxicos,mutágenos, farmacos, antimetabolitos y
pesticidas.
• Radiaciónes
 GENETICA

• El FDT (Factor Determinante Testicular) y el gen SRY

(región determinante del sexo) esta localizado cerca del
extremo del brazo Los requisitos para la producción de spz
incluyen una temperatura escrotal de 2ºc por debajo de la
corporal, una tensión tisular de oxígeno (mitad de la
arterial) y una concentración local de testosterona.
GRACIAS