CAUSALES DE ENDOCARDITIS BACTERIANA INTEGRANTES: FERNÁNDEZ ROBLES, HEBER ADRIAN GANOZA NUNJA, GREIGLIN JARA RUBIO, RONALD ANTHONY PAJARES HUAYHUA, MARÍA ADELA DOCENTE: POLO GAMBOA, JAIME ABELARDO AYALA RAVELO, MARÍA SOLEDAD EXPERIENCIA CURRICULAR: “FUNDAMENTOS DE AYUDA DIAGNÓSTICA I” CICLO: IV Streptoccocus Pyogenes • EL MIEMBRO DE MAYOR IMPORTANCIA CLÍNICA DE ESTE GRUPO DE COCOS GRAMPOSITIVOS. • ES UNO DE LOS PATÓGENOS BACTERIANOS QUE SE ENCUENTRA CON MAYOR FRECUENCIA EN LOS SERES HUMANOS DE TODO EL MUNDO. • COCOS GRAM POSITIVOS QUE SE AGRUPAN EN CADENAS, MI DEN DE 0.5 A 1.25 MICRAS. • SON ANAEROBIOS FACULTATIVOS. • FERMENTAN GLUCOSA, MALTOSA, LACTOSA, SACAROSA Y PRODUCEN ÁCIDO LÁCTICO. • LA CÁPSULA TIENE ÁCIDO HIALURÓNICO; LA PARED CELULAR PROTEÍNAS, Y LA MEMBRANA LÍPIDOS Y GLUCOSA. • SU CAPACIDAD ANTIGÉNICA ESTÁ CONSTITUIDA POR: CARBOHIDRATOS C, PROTEÍNA M, PRODUCEN ESTREPTOLISINA O, ESTREPTOLISINA S, HIALURONIDASA, AMILASA Y ESTEARASA. • COLONIAS EN FORMA DE DISCO DE 0.5 A 2.0 MM. Factores de Virulencia Métodos de Diagnóstico kits antigénicos rápidos de Detección de látex. antígenos Mediante el uso de pruebas inmunológicas que utilizan anticuerpos • Para la detección directa de que reaccionan con los carbohidratos estreptococos del grupo A en específicos de grupo. muestras extraídas de Esta prueba posee una sensibilidad pacientes se usan mucho unos moderada y especificidad alta, kits antigénicos rápidos de además de ser económicas. látex. Streptococcus pyogenes se identifican • Si las partículas de látex se de forma definitiva mediante la agrupan, la prueba es positiva; demostración del antígeno A. si se mantienen separadas y dan a la suspensión un aspecto lechoso, el resultado es negativo. Estreptococos viridans • TIENEN UNA FORMA REDONDA U OVOIDE • MIDEN MENOS DE 2 ΜM DE DIÁMETRO. • BACTERIAS ESFÉRICAS GRAM POSITIVAS(GRAM+) • CATALASA-NEGATIVOS; OTRA CARACTERÍSTICA QUE LOS DISTINGUEN DE STAPHYLOCOCCUS. • INMÓVILES Y NO FORMAN ESPORAS. • SON Α-HEMOLÍTICOS • S. VIRIDANS SE PUEDE DISTINGUIR DE STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE MEDIANTE LA PRUEBA DE LA OPTOQUINA, PUES S. VIRIDANS ES RESISTENTE A ESTA SUSTANCIA. • CRECIMIENTO Y REPRODUCCIÓN ENTRE 10 Y 45 GRADOS CENTÍGRADOS CON TEMPERATURA ÓPTIMA ALREDEDOR DE 37 GRADOS CENTÍGRADOS. Estreptococos viridans Estructura antigénica: • No posee ninguno de los antígenos de la pared celular de lancefield – este carbohidrato se encuentra en la pared celular y constituye la base de los grupos serológicos. La especificad serológica de los carbohidratos específicos del grupo se determina mediante un aminoazúcar. • Proteína M – Se localiza en la superficie de la bacteria y es el principal factor de virulencia del estreptococos. La proteína M esta formada por 4 unidades de repetición (A-D), donde la variación de la unidad A (localizada en la región aminoterminal) es la más importante debido a que en ella se encuentra la especificidad de serotipo. Estreptococos viridans Toxinas y Enzimas – Estreptocinasa , estreptodornasa , hialuronidasa, toxina eritrogena. Aislamiento Cultivo en agar sangre, agar chocolate, infusión cerebro y corazón En agar sangre colonias lisas o mucoides, hemolisis alfa Dentro de sus factores de virulencia se destacan: • La presencia de ácido lipoteicoico que favorece la adherencia del microorganismo (importante en la adherencia a las válvulas cardíacas cuando ocasiona endocarditis) • La producción de abundantes polisacáridos extracelulares (limo) que interviene en los mecanismos patogénicos de producción{ Pruebas bioquímicas Staphylococcus aureus El género Staphylococcus está formado por cocos Gram positivos, con un diámetro de 0.5 a 1.5 μm, agrupados como células únicas, en pares, tétradas, cadenas cortas o formando racimos de uvas. Son bacterias no móviles, no esporuladas, no poseen cápsula. La mayoría de los estafilococos producen catalasa. El género Staphylococcus contiene 32 especies, de las cuales 16 de ellas se localizan en los humano(piel y mucosas en humanos) y otras se encuentran sólo entre la flora de otros mamíferos y aves. Crecen después de incubarse durante 18-24 hora. Forman colonias de 0.5-1.5 mm de diámetro. Las colonias de S. aureus se observan lisas, elevadas, brillantes y de bordes enteros, presentan consistencia cremosa y pigmentación que va del amarillo a dorado debido a la producción de carotenoides. La mayoría de las cepas producen β- hemólisis o hemólisis total alrededor de las colonias cuando se cultivan en agar sangre. S. aureus crece bien en medios de cultivos no selectivos, como el agar sangre, agar chocolate, cerebro corazón infusión agar (BHI, por sus siglas en inglés) y medios líquidos para hemocultivo donde se recupera fácilmente. El medio recomendable y usado por la mayoría de los laboratorios es el agar sal manitol o medio de Chapman por su elevado contenido de sal que inhibe el crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram negativas. Este medio permite realizar la identificación presuntiva de S. aureus por la pigmentación amarilla característica de S. aureus. Debido a que esta bacteria fermenta el manitol se genera un cambio de color en el medio que vira de rojo pálido a amarillo. FACTORES DE VIRULENCIA DIAGNÓSTICO La identificación de S. aureus se realiza con el empleo de la tinción de Gram, pruebas bioquímicas como: prueba de la catalasa, fermentación de glucosa, que permite diferenciar al género Staphylococcus del género Micrococcus, que también se considera una catalasa positiva pero no fermenta la glucosa. CATALASA: Se coloca una gota de H2O2 al 3% sobre un portaobjetos y luego se transfiere una porción de colonia sobre el H2O2 realizándose una emulsión. En lo posible debe tomarse la colonia a partir de un medio sin sangre ya que los eritrocitos tienen actividad de catalasa y pueden falsear los resultados. Esta prueba también puede realizarse en un aislamiento en tubo, simplemente colocando unas gotas de H2O2 dentro del mismo. PRUEBA DE COAGULASA Permite separar S.aureus, que posee coagulasa, de las otras especies de estafilococos que genéricamente se denominan coagulasa negativo Procedimiento: Se emulsionan una o más colonias en una gota de suero fisiológico hasta formar una suspensión lechosa sobre un portaobjetos. Luego se agrega una gota de plasma citratado de conejo y se mezclan. Interpretación de resultados: Debe realizarse dentro de los primeros diez segundos. Un test positivo se evidencia por la formación de grumos. Los test negativos deben ser confirmados por test en tubo.