You are on page 1of 23

AGLUTINACIJA

Institut za javno zdravlje Vojvodine


Prof.dr Ivana Hrnjaković
Cvjetković
Definicija aglutinacije
• Aglutinacija je serološka reakcija u kojoj je
antigen korpuskularan
• Aglutinat nastaje izukrštenim
povezivanjem antigena mostovima antitela
• Antigeni mogu biti prirodni antigeni ćelija ili
su naneti na inertne čestice
Vidljivost kompleksa ag - at
• KOLIČINSKI ODNOSI AG i AT
• U višku antigena kompleks NIJE VIDLJIV
• U višku antitela NIJE VIDLJIV
• U optimalnim proporcijama kompleks AG AT JE
VIDLJIV sve antigenske determinante i sva
aktivna mesta na antitelima su međusobno
povezani

• FENOMEN PROZONE
Vidljivost kompleksa ag - at
• Nespecifični faktori koji utiču na vidljivodt
kompleksa AG – AT
• Koncentracija elektrolita
• pH
• Temperatura
• Valentnost antitela
• Veličina čestice antigena i njegov
elektrostatski naboj
VRSTE AGLUTINACIJE
• 1.DIREKTNA
• BRZA AGLUTINACIJA (kvalitativna
metoda) na pločici
• SPORA (polukvantitativna metoda) u
epruvetama
• KVANTITATIVNA
• 2.INDIREKTNA ILI PASIVNA
Direktna aglutinacija
• Antigeni su prirodni površinski antigeni
ćelija
• Primeri direktne aglutinacije
tipizacija krvnih grupa
tipizacija histokompatibilnih antigena
leukocita
identifikacija bakterija
određivanje antibakterijskih antitela u
bakteriologiji
REAKCIJE AGLUTINACIJE

• BRZA AGLUTINACIJA na pločici za


serološku identifikaciju bakterija,tipizaciju
krvnih grupa, za tipizaciju
histokompatibilnih antigena leukocita
DIREKTNA AGLUTINACIJA

• Na ploćicu se nanosi
kap antigena
• I kap seruma
• PRISUSTVO
AGLUTINATA MOŽE
SE ODREDITI
GOLIM OKOM
Spora aglutinacija
• Izvodi se u seriji epruveta,kapilarima ili
udubljenjima na pločama za mikrotitraciju
• SERUM prave se dvostruka stepenasta
razređenja seruma
• Dodaje se standardna količina poznatog
antigena
• Inkubacija u termostatu na 37°C
• Očitavanje TITRA AGLUTINACIJE
Primeri aglutinacije u
epruvetama
• POLUKVANTITATIVNA AGLUTINACIJA u
epruveti
WIDALOVA reakcija za dijagnostiku tifusa i
paratifusa
PAUL BUNNELL reakcija za dokazivanje
infektivne mononukleoze
AGLUTINACIJA U EPRUVETAMA
• REZULTAT SE
IZRAŽAVA KAO
TITAR NAJVEĆE
RAZREĐENJE KOJE
DAJE POZITIVNU
SEROLOČKU
REAKCIJU
INDIREKTNA AGLUTINACIJA
• Inertne čestice (lateks,bentonit) ili eritrociti
su nosači solubilnih antigena
• Nosač može biti obložen antigenima
dijagnostika u parazitologiji
dokazivanje reumatoidnog faktora
testovi za trudnoću
• Nosač može biti obložen antigenima
(HBsAg)
OBLAGANJE ČESTICA
ANTIGENOM SE VRŠI
• PASIVNOM ADSORPCIJOM neki ag se
spontano vezuju za antigen
• Hemijskim vezivanjem (pomću taninske
kiseline ili glutar aldehida)
COOMBSOV TEST
• Antieritrocitna antitela klase IgG
NEKOMPLETNA (oblažu eritrocite ali ne
dovode do aglutinacije)
• ANTIGLOBULINSKI ANTISERUM
• AGLUTINACIJA
PRECIPITACIJA
• Definicija: serološka reakcija u kojoj je
antigen rastvorljiv solubilan
• FAKTORI OD KOJIH ZAVISI VIDLJIVOST
PRECIPITATA
• Količinski odnosi antigena i antitela
• Nespecifični faktori kao:koncentracija jona,
pH, temperatura
PRIMENA PRECIPITACIJE
• 1) ZA UTVRĐIVANJE ETIOLOŠKE
DIJAGNOZE BOLESTI

• 2) U KLINIČKOJ IMUNOLOGIJI ZA
ISPITIVANJE PROTEINA PLAZME I
TKIVNIH TEČNOSTI
PODELA PRECIPITACIJA

• 1.PRECIPITACIJA U TEČNOM
MEDIJUMU

• 2.PRECIPITACIJA U GELU (AGAR,


POLIAKRILAMID)
1.PRECIPITACIJA U TEČNOM
MEDIJUMU
• 1.1 KVALITATIVNA PRECIPITACIJA U
PRSTENU
• 1.2 KVANTITATIVNA PRECIPITACIJA
pri optimalnim koncentracijama Ag i At svo
At se nalazi u precipitatu. Precipitat se
izdvaja centrifugovanjem i količina antitela
se meri hemijskim ili spektrofotometrijskim
metodama
2.PRECIPITACIJA U GELU
• 2.1.Ag i At se dovode u vezu PROSTOM
DIFUZIJOM
• Dvostruka imunodifuzija u gelu

• Radijalna imunodifuzija
2.PRECIPITACIJA U GELU
• 2.2 Ag i At se dovode u vezu pod
dejstvom struje
• 2.2.1.OBIČNA IMUNOELEKTROFOREZA
Ag se elektroforezom izdvajaju iz
smeše u gelu se načini kanal
paralelan sa prethodnim dejstvom
struje u kanal se
stavljaju At
Precipitat se formira u vidu luka sa
konkavitetom prema mestu Ag
2.PRECIPITACIJA U GELU
• 2.2 Ag i At se dovode u vezu pod
dejstvom struje
• 2.2.2 UKRŠTENA
IMUNOELEKTROFOREZA
Ag i At se stavljaju u rupice kao u
dvostrukoj imunodifuziji i kreću se pod
dejstvom električne struje
2.PRECIPITACIJA U GELU
• 2.2 Ag i At se dovode u vezu pod
dejstvom struje
• 2.2.3 RAKETNA
IMUNOELEKTROFOREZA slična
radijalnoj imunodifuziji u
gel je inkorporisan monospecifični
serum
Ag se stavlja u rupice u gelu
precipitat je u obliku rakete
2.PRECIPITACIJA U GELU
• 2.2 Ag i At se dovode u vezu pod dejstvom
struje
• 2.2.4 VIŠEDIMENZIONALNA
IMUNOELEKTROFOREZA
varijanta raketne
prvo se vrši elektroforetsko razdvajanje ag iz
smeše, razdvojeni ag ubrzavaju se u svojoj
migraciji u gelu pod dejstvom električne
struje
gel sadrži inkorporisana at
Za svaki antigen formira se precipitat u vidu
rakete

You might also like