UPS - Microbiología (Medios de Cultivo)

UNIVERSIDAD POLITÉCNICA SALESIANA
MICROBIOLOGÍA
CURSO: Grupo 2 – B71
 Galo David Flores Moreta

NOMBRE DE LOS  Cristian Geovanny Males Albuja
INTEGRANTES:  Martín Enrique Rojas Bravo
 Daysi Sabrina Valle Reyes
CARRERA: Biotecnología (Tercer Nivel)
DOCENTE: Gabriela Inés Méndez Silva
Quito – Ecuador
2018
Medios de Cultivo
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos.
Pseudomonas aeruginosa
Cultivo en placa de Agar Cetrimida
• Selectivo
Tipo (El agar es el agente solidificante)
Funcional
• El cloruro de magnesio y el sulfato de potasio promueven

la formación de pigmentos (piocianina, pioverdina,
piomelanina) y fluoresceína de P. aeruginosa.
Mecanismo
de Acción
• La cetrimida es un detergente catiónico que actúa como
agente inhibidor, libera el nitrógeno y el fósforo de las
células de casi toda la flora acompañante.
Composición
Coloración del Medio
 Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre

deslizamiento.
 Medio de cultivo preparado: color ámbar claro
Fuente de Energía
 En Agar Cetrimida, la peptona sirve como fuente de nitrógeno, y el glicerol se
utiliza como fuente de carbono y energía.
Aspecto de la Bacteria
 Pseudomonas aeruginosa es capaz de producir diferentes
pigmentos de los cuales el más característico es la piocianina.
Las colonias son grandes, redondas, lisas, con las mucosas y los
bordes dentados, porque es una bacteria móvil.
Cultivo en placa de Agar Mac Conkey
• Selectivo y Diferencial
Funcional
• La lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la

mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes
selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la
flora Gram positiva.
Mecanismo
de Acción
• Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH
alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color
del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las
colonias, y la precipitación de las sales biliares.
Composición
 Medio de cultivo deshidratado: color beige rosado, homogéneo, libre

deslizamiento.
 Medio de cultivo preparado: color rojizo púrpura.
Fuente de Energía
 En Agar Mac Conkey, las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable.
Pseudomonas aeruginosa son microorganismos no fermentadores de
lactosa los cuales producen colonias irregulares e incoloras.
Indicador de pH
 Cristal violeta y rojo neutro.
Cultivo en placa de Agar Sangre (Base Tripteína Soya Agar)
• Enriquecido y Diferencial
Tipo
Funcional
(El agar es el agente solidificante)
• El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. El

medio puede ser utilizado como base a la cual se
suplementa con nutrientes o con antimicrobianos,
lográndose un medio enriquecido o selectivo de acuerdo al
aditivo.
Mecanismo
de Acción
• El agregado de 5-10 % sangre ovina desfibrinada
estéril (REF Britasheep) promueve el desarrollo de
bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales y la
adecuada observación de las reacciones de hemólisis.
Composición

 Medio de cultivo color ámbar claro.
 En caso de ser suplementado con sangre ovina: color rojo cereza.
Fuente de Energía
 En Agar Sangre (TSA), los digeridos enzimáticos de caseína y harina de soja
proporcionan aminoácidos y otras sustancias nitrogenadas complejas. La
glucosa (dextrosa) es una fuente de energía.
 Pseudomonas aeruginosa es capaz de realizar Hemólisis alfa: lisis
parcial de los glóbulos rojos. Se observa un halo de color
verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido a la
oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto de
color verdoso) por el peróxido de hidrógeno generado por
los microorganismos
Vibrio cholerae
Vibrio cholerae
Cultivo en placa de Agar TCBS (agar tiosulfato citrato bilis sacarosa)
• Selectivo
Funcional
• El citrato sódico, el tiosulfato sódico, la bilis de buey y el

colato son agentes selectivos que proporcionan un pH
alcalino para inhibir los organismos gram positivos y
suprimir los organismos coliformes.
Mecanismo
de Acción
• El tiosulfato sódico es una fuente de azufre y actúa con el
citrato férrico como indicador para detectar la producción
de ácido sulfhídrico
Vibrio cholerae
Composición
Vibrio cholerae
 Apariencia del Deshidratado: Polvo homogéneo, suelto y de color

beige claro a beige-verde.
 Apariencia del Preparado: El medio preparado es color verde o verde
bosque y ligeramente opaco.
Fuente de Energía
 En Agar TCBS, el extracto de levadura y la peptona proporcionan el
nitrógeno y las vitaminas. La sacarosa es un carbohidrato fermentable
Vibrio cholerae
Vibrio cholerae se muestran lisos, opacos, con colonias amarillas
De bordes delgados en el Agar TCBS
Indicador de pH
 Azul de Bromotimol y azul de timol.
Vibrio cholerae
Cultivo en placa de Agar Hierro Lisina (LIA)
• Diferencial
Funcional
• El citrato de amonio férrico y el tiosulfato de sodio actúan

como marcadores de la producción de H2S, en este caso se
observa el desarrollo de sulfuro de hierro negro en el
tubo.
Mecanismo
de Acción
• También puede observarse producción de gas por efecto

de fermentación de la glucosa.
Vibrio cholerae
Composición
Vibrio cholerae
 Apariencia del Deshidratado: Polvo homogéneo, suelto y de color

violeta.
 Apariencia del Preparado: El medio preparado es color violeta
Fuente de Energía
 En Agar LIA, Las peptonas y el extracto de levadura aportan
aminoácidos y nutrientes esenciales, la dextrosa constituye una fuente
de energía.
Vibrio cholerae
 Vibrio cholerae se muestran cepas de color amarillento, por ser
microorganismos que no producen lisina descarboxilasa, se da
una reacción acida, debido a la presencia de H2S.
Indicador de pH
 Purpura de Bromocresol.
Fuentes Bibliográficas/Webgráficas
 Costanzo, L. (2014). Fisiología – Quinta Edición. Barcelona, España.:
Editorial Elsevier España Recuperado de: http://booksmedicos.org/fisiologia-
linda-s-costanzo-5a-edicion/
 Farmer III, J.J. 2003. Enterobacteriaceae: introduction and identification..
Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
 Prescott, Lansing M. Harley, John P. Klein, Donald A. . 2013. Microbiology.
Nutrientes de cultivos. de Mc Graw Hill Interamericana. Madrid. España.
 Poole K. Multidrug efflux systems in Pseudomonas aeruginosa: resistance,
regulation and activity. Abstract S29. In: Abstract book of the symposium
Pseudomonas ´99: Biotechnology and Pathogenesis, Maui, Hawaii. ASM
Press, Washington, D. C.
 Ryan & Ray. (2010). Sherris Microbiología Médica – Quinta Edición. Ciudad
de México, México.: Editorial McGraw-Hill. Recuperado de:
http://booksmedicos.org/sherris-microbiologia-medica-5a-edicion/
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• El cloruro de magnesio y el sulfato de potasio promueven

Coloración del Medio

 Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre

• La lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la

Coloración del Medio

 Medio de cultivo deshidratado: color beige rosado, homogéneo, libre

• El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. El

Coloración del Medio

• El citrato sódico, el tiosulfato sódico, la bilis de buey y el

Coloración del Medio

 Apariencia del Deshidratado: Polvo homogéneo, suelto y de color

• El citrato de amonio férrico y el tiosulfato de sodio actúan

• También puede observarse producción de gas por efecto

Coloración del Medio

 Apariencia del Deshidratado: Polvo homogéneo, suelto y de color

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