INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

METABOLISMO DE AMINOÁCIDOS

.
 INTRODUCCIÓN
Los mo´s, además de requerir una fuente de:
*Carbono
*Energía
Necesitan un fuente de N2, para poder construir su propio material celular

ORGÁNICO INORGÁNICO

Proteínas Nitrógeno molecular (N2)

Aminoácidos Amonio (NH4+)

Bases nitrogenadas Nitratos y nitritos (NO3- ,NO2−)

OBJETIVO
Realizar pruebas bioquímicas para poner de manifiesto las actividades que llevan a cabo
los mo´s sobre los aminoácidos.
Aminoácidos
• Son los monómeros de las proteínas
• Todos los aminoácidos contienen 2 grupos funcionales:
 Importancia grupos funcionales
• Estructura de las proteínas.
• Forman enlaces covalentes entre el grupo carboxílico de un aminoácido y el grupo
amino de un segundo aminoácido (con la eliminación de una molécula de agua)
formando un enlace peptídico.
Proteínas con grupo sulfhidrilo.

También hay proteínas con contenido de

otros compuestos azufrados ,como el ión
tiosulfato.
¿Cómo identificar el metabolismo de
aminoácidos en algunos MO´s?
ENZIMAS PRUEBAS BIOQUÍMICAS

Descarboxilasas LIA

Cisteinasa / tiosulfato SIM

reductasa
Ureasa / Citrulinación CALDO TRIPTONA
 Descarboxilación
Proceso por el cual las bacterias que poseen enzimas descarboxilasas especificas,
atacan a los aa, en su carboxilo terminal, para formar una amina o una diamina y
dióxido de carbono.
Se usa para evaluar el metabolismo de las bacterias en pruebas como SIM y LIA, usando
un indicador de pH, cuando se desamina o descarboxila, obteniendo el medio, pH
básico o ácido.

La descarboxilación es:
-Irreversible
-No oxidativa
-Coenzima en común, fosfato de piridoxal.

La degradación de los aa
-ocurre en anaerobios
Sistema arginina descarboxilasa.
Sistema arginina dihidrolasa
 Reacción para manifestar el H2S
Medio SIM (SULFURO-INDOL-MOTILIDAD)

A partir del tiosulfato, los mo pueden ganar ácido sulfhídrico, que reaccionan con el hierro presente
formándose un compuesto de color negro
 Producción de indol
El triptófano es un aa, constituyente de varias peptonas como la tripteina.
Las bacterias que producen la enzima triptofanasa son capaces de hidrolizar
y desaminar el triptófano con producción de indol, ac. Pirúvico y amoniaco.
Reacción indol con el reactivo de Kovac
La prueba del indol, está basada en la formación de un complejo rojo cuando
el indol reacciona con el grupo aldehído p-dimetelaminobenzaldehido. Este
es el principio activo del reactivo de Kovaks
 Composición
Peptona de carne
Medio SIM Medio semisólido Peptona de caseína
Sulfato ferrosos de amonio

Identificar bacilos entéricos; en base a la producción Tiosulfato de amonio

de H2S, triptofanasa (indol) y movilidad. Agar

Interpretación
H2S:
+ Coloración negra.
- Sin coloración. Tubo de la izquierda.
Indol: Salmonella typhi, con H2S +,
+Anillo rojo es capa alcohólica. movilidad +.
-Sin color en capa alcohólica. Tubo de la derecha.
Movilidad: Pseudomonas aeruginosa, con
+Producción de turbiedad en el H2S -, movilidad -.
medio.
- Sólo se observa la línea de la
picadura.
Resultados

De izquierda a derecha.
Tubo 1, Salmonella typhi.
Tubo 2, Shigella flexneri.
Tubo 3, Staphylococcus aureus.

Tubo 1, Salmonella typhi.

Tubo 2, Pseudomonas Proteus vulgaris
aeruginosa.
 Composición
Peptona de caseína
Caldo triptona Medio líquido
Cloruro de sódio
Agua
Realizar pruebas de amoniaco e indol. pH 7.3

Interpretación
NH3:
Se observa con
una tira de papel NH3 +
tornasol. Color Pseudomonas aeruginosa
violeta +.
Indol:
+ Halo rojo
- Halo amarillo Indol + Indol -

Indol -, Proteus vulgaris.

Indol +, Shigella flexneri.
Resultados
Para NH3 – Todas las
sepas dieron positivo. Staphylococcus
aureus

Escherichia coli.

De izquierda a derecha.
Tubo 1, Shigella flexneri.
Tubo 2, Basillus subtilis.
 Composición
Peptona de gelatina
Extracto de levadura
LIA Alcalinisa el p,de b Medio sólido en tubo D- Glucosa
L-Lisina
Identificar entero bacterias del género Salmonella, en base a su Citrato de amonio férrico
capacidad de descarboxilar y desaminar lisina; así como
producción de H2S Tiosulfato de sodio
Púrpura de bromocresol
Agar
Interpretación
Descarboxilación:
+Color púrpura del medio por la
cadaverina.
-Color amarillo, fermentación de
glucosa.
Desaminación:
Color rojo en la superficie.
H2S:
+Precipitado negro.
- No hay precipitado negro.
Control
 Resultados

Salmonella typhi. Pseudomonas aeruginosa Basillus subtilis Proteus vulgaris

H2S + Descarboxilación + Descarboxilación + Desaminación +
Descarboxilación +
 RESULTADOS EXPERIMENTALES.

Prueba Klebsiella Escherichia Bacillus Salmonella Shigella Staphylococcus Pseudomo Proteus

pneumoni coli subtillis typhi flexneri aureus nas vulgaris
ae aeruginosa

H2S - - - + - - - +
SIM
Indol - + - - + - - -

movilidad - + + + + - + +

Caldo amoniaco + + + + + + +
+
triptona
indol - + - - + + - -

Descarbo- + + + + + + + -
xilación
LIA Desamina - - - - - - - +
ción
H2S - - - + - - - -
 RESULTADOS TEORICOS

Prueba Klebsiella Escherichia Bacillus Salmonella Shigella Staphylococcus Pseudomo Proteus

pneumoni coli subtillis typhi flexneri aureus nas vulgaris
ae aeruginosa

H2S - - - + - - - +
SIM
Indol - + - - + - - +

movilidad - + + + - - + +

Caldo amoniaco - + - - + - +
-
triptona
indol - + - - + - - +

Descarbo- + + + + - + + -
xilación
LIA Desamina - - - - - - - +
ción
H2S - - - + - - - +
Bibliografía.
Mac Faddin, J. F. 2003. Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de importancia clínica. Editorial
Medica Panamericana S. A. México. Paginas 113-128, 192-206.