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ESCUELA NACIONAL DE
CIENCIAS BIOLÓGICAS
Microbiología general
TINCIONES SELECTIVAS
6VF01
Profesores:
Sánchez Sánchez Antonio
Ortiz García Cesar Ismael
OBJETIVO
• Realizar varias técnicas de coloración selectiva que
permitirán observar algunas estructuras bacterianas.
1. Observación de la
capsula
1a. Método de la tinta china Metodología
Observar con
objetivo seco
Colocar fuerte y con el
cubreobjetos de inmersión
Hacer
suspensión en
Tomar la gota de agua
crecimiento de y mezclar con la
Gota de agua Klebsiella tinta china
del mismo pneumoniae
Con el asa tamaño a un
poner una gota lado
pequeña de
tinta china
Figura 1. Método de la
tinta china
Método de la tinta
China.
• Tinciones negativas (Tinta china).
• No son una verdadera tinción.
• El colorante contiene partículas finas de
carbono suspendidas en agua formado
un coloide.
• Permite visualizar las esporas como entes
refringentes sobre un campo de fondo
oscuro.
• Capsula: Compuesta en su mayor parte
de agua, y bajo porcentaje de
polisacáridos.
Klebsiella pneumoniae
Observar
con objetivo
Lavar y de
secar. inmersión.
Cubrir con
mordente de
Hacer frotis capsula (1
y secar al min.)
Suspenderlo aire
en la gota de
Cultivo de K. rojo Congo
pneumoniae
Gota
pequeña de
rojo Congo
Método del rojo • Es un colorante anicónico
Congo
• Mordente de cápsula
Solución de cloruro férrico 6%
Ácido acético glacial
Fenol 5%
Ficsina básica al 5% en agua
Figura 3: ejemplo de capsulas por
tinción rojo Congo.
-Zona clara, bacteria rojo, fondo azul
oscuro.-
Klebsiella pneumoniae
Observar al
microscopio
Poner con el objetivo
cubreobjetos de inmersión
Gota de
fucsina sobre
Lavar la preparación
Mordente de
Knaysi (10
Frotis de min.)
Bacillus
megaterium y
fijarlo al calor
Observar al
microscopio
Lavar con el objetivo
de inmersión
Cubrir con
safranina (1
Lavar min.)
Cubrir con
verde de
Frotis de malaquita y
Bacillus calentar
megaterium y suavemente
fijarlo al calor
Observar al
microscopio con
Lavar y secar el objetivo de
inmersión.
Cubrir con azul
de metileno
Frotis de Löeffer (1 min.)
Corynebacterium
y fijarlo al calor
Observación de gránulos
metacromáticos con la tinción
de Löeffler
• Es una coloración simple
• Muchos microorganismos pueden
acumular gránulos de volutina, que se
tiñen con colorantes básicos tales como
azul de metileno (granulos
metacromaticos).
• Los gránulos deben su comportamiento
metacromático a la presencia de grandes
cantidades de polifosfato inorgánico
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFÍA