Tema 2: Tratamiento de muestras y

técnicas de separación de analitos.

ecosistema
muestra
(¿contaminado?) toma y
preparación

sólido, líquido o gas

técnica
analítica
 Tratamiento de muestras (algunas directrices)

1) Toma de una muestra representativa: réplica en

miniatura del sistema real

2) Transformación en la forma química y física (sólido,

líquido, gas) y la concentración adecuadas al
método analítico que se va a emplear
3) Si es posible, extracción del analito de interés o de
especies interferentes en las medidas analíticas
4) Homogeneizado de la muestra para el análisis:
pulverizado de sólidos, homogeneizado de mezclas y
disoluciones
5) Métodos “de campo”: medidas in-situ, teledetección.
 Ejemplo de un análisis químico:
Cuantificación de cafeína y teobromina en chocolate

Paso 1: extracción de la materia grasa

Paso 2: extracción de los analitos
Paso 3: separación de los analitos
Detección por absorción
Ultravioleta a 254 nm Paso 4: Calibrado del método
y análisis de datos

Recta de calibrado para cada analito

Muestreo: algunas consideraciones
 ¿Qué cantidad de muestra es necesaria?

mezcla de dos especies A y B con

fracciones molares p y q, respectivamente

Si se cogen N partículas de la muestra como

analito para realizar una medida se tiene:
Partículas A: NA= N p
Partículas B: NB= N q
desviación estándar en NA y NB: s = Npq

desviación relativa (%) RA= s/NA x 100

RB= s/NB x 100
(porcentaje mayor para las componentes minoritarias)

Constante de muestreo Z : masa de analito tal que R= 1%

 ¿Qué cantidad de muestra es necesaria?
Medidas de 24Na en el hígado

x
valor
medio
s (desviación estándar)
R = s/x % K
desviación relativa

Masa de muestra

Masa necesaria si se
requiere un valor de R: M = Z/R2
Métodos de transformación y extracción de gases

- disolución
- condensación
- atrapamiento
químico líquido o
disolución

gas

- congelación sólido
- adsorción sobre
superficies
Métodos de transformación y extracción de líquidos

- evaporación
- ebullición
- volatilización de llama gas
o electroquímica
líquido o
disolución
- precipitación
- congelación sólido
- adsorción en
poros y superficies

extracción líquido-líquido
Métodos de transformación y extracción de sólidos

- fusión
- disolución líquido o
- digestión disolución
- extracción por
sólido recirculación y
supercrítica

- evaporación/desorción
- combustión gas
- ablación (láser, eléctrica)
- bombardeo (iones)
Digestión de sólidos:
disolución con ácidos, bases, agentes oxidantes
(HCl, HNO3, H2SO4, H3PO4, HF, NaOH, ...)

disolución ácida de metales: M + nH+  Mn+ + (n/2)H2

problema: se forman muchas sustancias volátiles.

Se deben usar reactores cerrados y paredes gruesas
protonación de aniones de la muestra: H2CO3 ( CO2),
H2S, PH3, H3BO3 , ...
formación de haluros metálicos volátiles: HgCl2, SnCl4,
 Extracción de analitos con disolventes

Familias de analitos y su polaridad

(tabla 24.2 libro de Harris)

No Polares Polaridad Intermedia fuerte

Hidrocarburos saturados Alcoholes
y aromáticos Ácidos carboxílicos
Mercaptanos y sulfuros Fenoles
Aminas primarias y secundarias
Nitrilos

Polaridad Intermedia débil Polaridad Fuerte

Éteres Polihidroxialcoholes
Cetonas Aminoalcoholes
Ésteres Hidroxácidos
Aminas terciarias Ácidos polipróticos
Nitritos Polifenoles
 Algunos disolventes típicos en Análisis Químico

Isooctano (99ºC) Disolvente (pto. Ebullición normal)

Hexano (69ºC)

Tolueno (101ºC)

Benceno (80ºC)
Polaridad decreciente

Diclorometano (39ºC)

Acetato de Etilo (77ºC)

Cloroformo (61ºC)

Etanol (78ºC)

Acetona (56ºC)

Dimetilsulfóxido (189ºC)

Metanol (64ºC)

Agua (100ºC)

inmiscibles miscibles
 Extracción en fase sólida

Disolución de
la muestra disolvente 2 disolvente 3

Muestra:
disolvente 1
con analitos

matriz
sólida

disolvente 1 disolvente 2 disolvente 3

 Métodos de separación y extracción de analitos

Extracción: Pasar un soluto de una matriz a otra

Extracción Líquido-líquido
V V V

Fase 1 Fase 1 Fase 2

(VA = VB)
Coeficiente de reparto K=0.5
[C]2
de un analito entre dos K = [C]
matrices (o fases)
1 K=5
 Extracción líquido-líquido
Disolventes inmiscibles
Coeficiente de reparto y
Eficiencia de extracción
Fase orgánica
[C]1 = q n /V1

[C]2 = (1-q) n /V2

Fase acuosa

Disolventes orgánicos
CCl4, CHCl3
tolueno, hexano,
benceno
 Extracción
líquido-líquido
condensador
(refrigerado) en modo continuo
muestra (analito no volátil)

muestra
disolvente
disolvente
extractor
extractor
menos denso
más denso
calor
 Separación cromatográfica clásica en columna
Los analitos A y B fluyen con velocidades distintas
a través del material de la columna (fase estacionaria)
Por su distinta interacción con el mismo

Disolvente con
Solutos A y B
(fase móvil)
A
Relleno de la columna
(fase estacionaria)
B

B A
emerge emerge
Emerge sólo disolvente
 Cromatografía de gases
Muestra con
analitos
A, B, C ,D detector

horno D
B
A C

señal
Horno con columna
de separación
tiempo
cromatográfica

Los analitos A, B, C, D, etc fluyen con velocidades distintas

a través de la columna por su distinta interacción con la misma
Mayor interacción = mayor tiempo de retención
Columnas cromatográficas modernas

Columna abierta Columna empaquetada

(cromatografía de gases) (cromatografía de líquidos)

Fase estacionaria Fase estacionaria

(sólida o líquida) (sólido poroso)
grosor 0.1 - 5 mm diámetro interno
diámetro interno columna 1 - 5 mm
columna 0.1 - 0.5 mm
 Un ejemplo:
Separación de hidrocarburos saturados (alcanos) lineales por
Cromatografía de gases con Temperatura programada

Temperatura
Programada
50º-250º en 8 min.
 Composición del “Chapapote” del Prestige

Fuel pesado (residuo de la destilación del petróleo crudo)

Utilización
- combustión industrial (centrales térmicas, hornos, cementeras) y
- combustible de barcos con motores diesel lentos, de gran potencia

Composición
(fuente: Laboratorio Le-Cedre (Francia) http://www.le-cedre.fr/fr/prestige)
Técnica Utilizada: Cromatografía de gases con
detección por Espectrometría de masas
Resultados
Hidrocarburos saturados 25 %
Hidrocarburos aromaticos 50 %
Resinas 10 % Asfaltenos 25 %
 Vertido del
Prestige

Hidrocarburos
Saturados

Hidrocarburos
Aromáticos