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INFORME DE

PRCTICA:
COPROCULTIVO
Curso: Microbiologa Especial
Kathya Mimbela Barrera
Marivel Paredes Or
AISLAMIENTO BACTERIANO
En las muestras de heces,
las bacterias entricas
patgenas se encuentran
siempre asociadas a una
gran variedad de bacterias
comensales, es por ello,
que para facilitar el
aislamiento y posterior
identificacin de estas
bacterias, se emplean
diferentes medios de
enriquecimiento, selectivos
y selectivos diferenciales.
CASO CLNICO
Se nos informa de un caso acerca de un nio de 9 aos de edad que
manifiesta cefalea, malestar, anorexia, fiebre y diarreas. Refiere tener 3 das
de diarrea moderada, pero a la fecha que son 10 das de diarrea indica como
un cuadro de disentera y la fiebre continua de forma remitente.

OBSERVACIONES: Se nos entrega una muestra de hisopado rectal la cual se sembr


en el Agar MacConkey, Agar SS, Agar XLD y Agar TCBS. Debido a que el paciente
presentaba de un cuadro de disentera se podra sospechar de una Shiguella spp. o de
E. coli (ECEI o ECEH). Asimismo la fiebre intermitente y disentera tambin nos
sealaba la posibilidad de Salmonella spp. ( sobretodo Salmonella Typhi).
MATERIALES Y MTODOS
Se nos entreg un hisopo contenido en un medio de
transporte Cary Blair con el caso correspondiente.
Se sembr la muestra obtenido por hisopado rectal en
cuatro medios de cultivo: TCBS, SS, XLD y MacConkey.
Asimismo se dej el hisopo en el caldo selenito (para
enriquecimiento de Salmonella) y en Agua Peptonada
Alcalina (para el enriquecimiento de Vibrio). Se llevaron
a incubacin a 37C por 24 horas.
Lectura de placas a las 24 horas
Agar MacConkey:
Observamos colonias lactosa
negativas. Las colonias son
grandes, de borde continuo,
brillantes, lisas, convexas.
Lectura de placas a las 24 horas
Agar SS
Observamos colonias lactosa
negativas con precipitado color
negro (presencia de SH2). Las
colonias son grandes,
continuas, brillantes, convexas.
Lectura de placas a las 24 horas
Agar XLD
Se observaron colonias xilosa
positivas, lisina descarboxilasa
positivas, lactosa negativas con
precipitado de SH2. Las colonias
eran grandes, continuas, brillantes,
incoloras, convexas y con
precipitado de color negro que
corresponde a la presencia de SH2.
Lectura de placas a las 24 horas
Agar TCBS
A las 24 horas no se observ crecimiento; sin embargo,
a las 48 horas se observaron pequeas colonias de
color verde que no son tpicas de Vibrio.
Identificacin bioqumica
Se repicaron 2 colonias del Agar SS cuyas caractersticas eran
iguales pero solamente se diferenciaban en tamao. Las bateras
bioqumicas se incubaron a 37C por 24 horas. Ambas bateras
bioqumicas resultaron iguales.

CIT TSI GAS SH2 LDC MOT IND REA RM VP

C1 + K/A + + + + - - + -

C2 + K/A + + + + - - + -
Ambas bateras bioqumicas correspondan a Salmonella spp. Posiblemente, se pueda
tratar de una Salmonella Typhi debido a la cantidad de hidrgeno sulfurado producido; sin
embargo, es necesario realizar pruebas serolgicas para confirmar.
CIT TSI GAS SH2 LDC MOT IND REA RM VP

C1 + K/A + + + + - - + -

C2 + K/A + + + + - - + -
Pruebas serolgicas
Se utiliz antisuero polivalente para Salmonella. Se corri en
simultneo un control para observar que no se produzcan falsos
positivos. En una lmina se coloc una gota de NaCl y se emulsion
la cepa bacteriana de la batera bioqumica, despus se agreg una
gota del antisuero para observar aglutinacin. Para el control, se
agreg una gota de NaCl y se agreg una gota del antisuero para
descartar falsos positivos.

RESULTADO
Antisuero polivalente para Salmonella: Positivo
Con ello se confirma que el germen aislado pertenece al gnero
Salmonella; es necesario realizar otras pruebas serolgicas para la
determinacin de la especie.
Cuadro clnico de Salmonellosis
Enfermedad de transmisin alimentaria, con
prevalencia en nios
Aparicin brusca de fiebre, dolor abdominal
Diarrea, se manifiesta 6-72 horas y se
autolimita de 2-7 das.
Nuseas
Vmitos
Heces con sangre
Factores de Virulencia de Salmonella
Mecanismo de adherencia
Presencia de capsula y flagelos
Mecanismos de invasin, invade lugares que no son normalmente fagociticas
como la mucosa de clulas epiteliaes
Daa al hospedero
Resistencia a los mecanismo de defensa del sistema inmune
Causa reaccin inflamatoria en la mucosa intestinal.
Segn el esquema clsico de Kauffman-White basado en antgenos somticos,
flagelares y ocasionalmente capsular (Vi), las salmonelas se clasifican en ms
de 2,500 serotipos, que pueden ser mviles o inmviles.
Uno de los patgenos entricos ms frecuentes tanto en pases desarrollados
como subdesarrollados es Salmonella spp, la cual dependiendo de su especie,
tamao del inculo, factores de virulencia expresados por la cepa, hospedero
involucrado, estado inmunolgico del paciente e intervencin mdica puede
ocasionar desde una infeccin gastrointestinal media a severa hasta una
infeccin sistmica que compromete la vida del paciente.
OTRAS PRUEBAS CONFIRMATORIAS
Para el desarrollo de una enfermedad bacteriana es necesaria la
localizacin de la bacteria en un ambiente adecuado para su
establecimiento, replicacin y expresin de sus factores de
virulencia. Durante el proceso infeccioso se presenta una
interaccin entre hospedero-microorganismo, la cual cada da se
comprende mejor, debido a los avances en el estudio sobre
patognesis molecular, al desarrollar tcnicas como la PCR y la
secuenciacin del ADN entre muchas otras.
Biologa molecular
Ingeniera gentica