Leccin 5.

Cultivo y crecimiento de microorganismos

1.- Los requerimientos nutricionales

2.- Medios de cultivo:composicin y preparacin
3.- Obtencin de cultivos puros
4.- Mantenimiento y conservacin de los microorganismos
5.- Cultivo y colecciones de cultivo
6.- Definicin de crecimiento
7.- Mtodos para medir el crecimiento microbiano
8.- Curva de crecimiento
9.- Factores fsico-qumicos que influyen en el crecimiento
 1.- Requerimientos nutricionales
Macronutrientes (g/L o mg/L)
1. Carbono: forma parte de aminocidos, hidratos de carbono y lpidos.
a) Utilizan compuestos orgnicos como fuente de carbono: hetertrofos
b) Utilizan CO2 como fuente de carbono: auttrofos

2. Nitrgeno: forma parte de aminocidos, bases pricas y pirimidnicas; algunos hidratos de

carbono y lpidos.
a) Compuestos orgnicos: aminocidos
b) Compuestos inorgnicos: NH4+ , NO3-
c) Fijacin de nitrgeno atmosfrico

3. Fsforo: forma parte de cidos nucleicos, fosfolpidos, cofactores, algunas protenas y LPS.
a) Compuestos inorgnicos: fosfatos

4. Azufre: forma parte de aminocidos (cis, met); coenzimas (biotina, CoA).

a) Compuestos orgnicos: aminocidos
b) Compuestos inorgnicos: Sulfatos (SO4 2-)

5. Otros macronutrientes:
K+: cofactor y activadores de enzimas
Ca2+: termorresistencia esporas, cofactor de enzimas
Mg2+: cofactor de enzimas, ribosomas
Na+: Estabilidad de halfilos
Fe2+ y Fe3+: citocromos, protenas, cofactores.
 Micronutrientes (g/L)

a) Cobalto: sntesis de la vitamina B12

b) Cinc: papel estructural en muchas enzimas (ADN y ARN polimerasas,
protenas de unin a ADN)
c) Molibdeno: necesario para la actividad de algunas enzimas (Flavoprotenas,
nitrogenasa, nitratorreductasa, sulfito oxidasa)
d) Manganeso: activador de muchas enzimas
e) Cobre: grupo prosttico de enzimas respiratorias

Factores de crecimiento

a) Aminocidos
b) Bases pricas y pirimidnicas
c) Vitaminas:
- p-aminobenzoico. cido flico. cidos nucleicos
- Biotina (B8): cidos grasos
- Niacina: NAD
- Riboflavina: FAD y FMN
- Piridoxina (B6): transformaciones de aa
- Tiamina (B1)
- Cobalamina (B12): Sntesis de desoxirribosa
Tipos nutricionales segn la fuente de carbono y energa
2.- Medios de cultivo: composicin y preparacin
Table 6.3
Clasificacin de los microorganismos de acuerdo a su tolerancia al O2

a) Aerobios estrictos
b) Anaerobios estrictos
c) Anaerobios facultativos
d) Microaerfilos
e) Anaeobios aerotolerantes
Cultivo de microorganismos anaerobios o
microaerfilos
Figure 6.5
 3.- Obtencin de cultivos puros

3.1. Siembra por agotamiento

3.2. Diluciones seriadas y siembra en placa

0.1 ml 0.1 ml
 Tcnica de siembra en superficie

1.: Colocar el inculo en la placa de Petri 4: Extender el inculo en la placa

2, 3: Esterilizar el asa de vidrio

Morfologa de las colonias