UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS

INSTITUTO DE CINCIAS EXATAS E TECNOLOGIA

CURSO FARMCIA

Disciplina: Imunologia
Clnica
AMOSTRAS UTILIZADAS EM
Prof Maxwel Abegg
IMUNOENSAIOS

Acadmico
s
Cludia
Santos
ITACOATIARA-AM
 Para que o laboratrio
possa obter um resultado
confivel, no basta que
execute as tcnicas de
forma correta; necessrio
que receba uma amostra
adequada, em quantidade
suficiente, em recipiente
apropriado, bem
identificada, conservada e

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transportada corretamente.
Essa uma etapa anterior etapa do ensaio clnico, chamada de
ETAPA PR-ANALTICA.
 VARIAES DOS
RESULTADOS DE
EXAMES
LABORATORIAIS:
IDADE

SEXO

ETNIA

GRAVIDEZ

PERODO DO CICLO

MENSTRUAL

USO DE MEDICAMENTOS

JEJUM
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 JEJUM
No tem importncia para imunoensaios.
No entanto, concentrao excessiva de lipdeos pode
interferir em teste de imunoprecipitao e aglutinao.
Evitar coletar amostras at 2h aps refeio (almoo e
janta) fase ps-prandial.
Recomendvel jejum padro de 8h, equivalente ao perodo
de sono noturno.
Jejum de 4h pesquisas de anticorpos e utilizao de
mtodos imunoenzimticos, imunofluorescncia ou

4 quimiluminescncia.
 FSICOS
Exerccios extenuantes com perda de gua pelo suor,
alteram a concentrao de parmetros bioqumicos e
hormnios:
da concentrao de albumina circulante, glucagon,
somatotropina, cortisol e ACTH (hormnio
adrenocorticotrfico);
insulina;

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 IDADE
Imunoglobulinas mostram variaes de

acordo com a idade (VR devem ser

estabelecidos para cada faixa etria).

Idosos observam-se maior frequncia de

gamopatias e ativao policlonal de linfcito

B, doenas auto-imunes: maiores falso-

positivos pesquisa de Ac.

Idosos deficincia na produo de Ac e

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 Coleta de Amostras
Plasma, soro, sangue total, urina, fezes e
liquor.

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 Sangue
Protocolos internacionais definem o tipo

de amostra para cada analito utilizado.

Sangue total com anticoagulante, soro

sanguneo e plasma mais usados em

imunoensaios.

Evitar hemlise: ruptura de hemcias.

Coleta em tubo seco ou gel, e

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9
 Sangue

Imagem 1: Soro Imagem 2: Plasma Imagem 3: Sangue Total

Para a coleta de sangue o paciente deve estar, preferencialmente, em jejum

10
 ou Plasma

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 Uso do Plasma
necessrio certo tempo para formao

do cogulo e retrao ideal;

No aconselhvel refrigerar a amostra;

Aps centrifugao, obtm-se o plasma;

O sangue contendo o plasma deve ser

contido em temperatura (T) ambiente;

T Altas, T baixas ou centrifugao

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 Soro sanguneo
Para obteno do soro sanguneo

necessrio aguardar completa

coagulao do sangue coletado;

Manuteno do tubo de 30 a 60 minutos

em T ambiente;

13 Para amostras em pacientes que esto

 Fezes
Instrues de Coleta
Fezes diarricas ou no, em recipientes de
boca larga, limpos e estreis;

Material e Conservao para Envio

O material colhido em frascos de boca larga
deve ser enviado ao Laboratrio o mais rpido
possvel (1 hora) ou conservado sob
refrigerao por at 24 horas.

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 Fezes
A pesquisa de alguns antgenos fecais podem ser realizados
atravs de imunoensaios;

Rotavrus

Entamoeba histolytica

Giardia lamblia

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 Fezes
Previamente ao ensaio, e preciso
preparar a suspenso de fezes e obter a
partir da obter uma soluo o mais
lmpida possvel;
centrifugao utilizada nesse processo;
Resduos slidos iro dificultar a
migrao do material fecal no testes
rpidos e interferir na aglutinao das
partculas.

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 Urina
Imunoensaios na urina determinaes hormonais
ou de drogas.
1 urina da manh pode ser ideal se for a mais
concentrada do dia.
Teste qualitativo amostra coletada ao acaso pode
ser usada.
Teste de quantificao urina de perodo de 24
horas.

Laboratrio deve fornecer os frascos adequados

descartveis, estreis, de material plstico que no
adsorva os analitos e protenas da urina.
Utilizar preservadores cido ascrbico.

17 Obs: Urina que apresenta turvao deve ser centrifugada antes do imunoensaio.
 Lquor
O aspecto normal do LCR lmpido e incolor - alterao na
cor ou turvao deve ser anotada.

Imunoensaios incluem: pesquisa de Ag bacterianos, virais e

parasitrios e pesquisa de Ac das diversas infeces que podem
afetam o SNC.

Na deteco de Ac investigar se foram produzidos no local

(intratecal) ou se resultam da passagem transmembranas e
provenientes do sangue circulante.
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 Lquor
RECOMENDAES GERAIS

A puno de lquor um procedimento de urgncia, invasivo e

que deve ser realizado no hospital por um profissional treinado.

A paramentao deve ser adequada e realizada sob

procedimentos de biossegurana.

A puno lombar deve ser realizada, preferencialmente, antes da

terapia antimicrobiana.

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 Lquor Coleta
Preparar todo o material necessrio, retirando o meio de cultura da
geladeira para adquirir a temperatura ambiente e fazendo identificao
dos frascos adequadamente;
Preparar o paciente;

Realizar a antissepsia adequada da pele do paciente, no local da puno com lcool 70%;

PVPI ou lcool iodado;

Puno lombar volume mnimo de 5 ml de lquor;

Gotejar imediatamente 5 a 10 gotas da amostra no tubo ou frasco contendo o gar chocolate, e

1 gota em cada lmina de vidro. Manter a cadeia assptica.

Dividir o restante da amostra coletada em 2 frascos esterilizados (teste do ltex e citoqumico).

Obs: Os frascos para teste do ltex e citoqumico devem ser mantidos a temperatura ambiente
20 por at 3 horas ou a 4 C quando o tempo exceder 3 horas.
 NEUROLGICAS SOROLOGIA
IgM ou IgG

Instrues de Coleta
Colher o sangue sem Instrues de
anticoagulante entre 6 e Coleta
60 dia aps o incio dos Coletar fezes na
sintomas. Separa no quantidade de 1/3
mnimo 1 ml do soro para do coletor.
sorologia.
Mtodo Mtodo
Imunoensaio Pesquisa de
enzimtico para Enterovrus
deteco de anticorpos (diagnstico
IgM ou IgG. diferencial).
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 DOENA DE CHAGAS AGUDA
SOROLOGIA
Instrues de Coleta
Venopuno em tubo seco e limpo
ou sistema a vcuo.
Material
2 ml de soro.
Mtodo
Imunofluorescncia Indireta IgM.
DOENA DE CHAGAS
SOROLOGIA
Mtodo
Enzimaimunoensaio IgG,
Imunofluorescncia Indireta IgG e
22 Hemaglutinao Indireta.
 HEPATITES VIRAIS
SOROLOGIA
Instrues de Coleta

Coletar o sangue sem anticoagulante a

partir do

incio dos sintomas ou a critrio mdico.

Separar no mnimo 2 ml do soro para

sorologia.

23 Mtodo
 Referncias Bibliogrficas
Manual de coleta, acondicionamento e transporte de

amostras para exames laboratoriais/(organizado por)

Elza Gadelha Lima. (et al.) 2. ed. Fortaleza: SESA,

2013.

VAZ, A.J.; TAKEI, K.; BUENO, E.C. Imunoensaios:

fundamentos e aplicaes. Rio de Janeiro: Guanabara

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