UROCULTIVO

GABRIELA GUALPA
MICROBIOLOGIA CLINICA I
 INTRODUCCION
La infeccin urinaria es una de las infecciones
bacterianas ms frecuentes tanto a nivel
comunitario como hospitalario, siendo en el hospital
la segunda causa de infeccin nosocomial

El diagnstico microbiolgico de la infeccin del

tracto urinario se basa en el aislamiento del
microorganismo en orina pero, en ocasiones,
realizar un diagnstico correcto no es fcil.

El diagnstico microbiolgico se realiza de forma

cuantitativa y se informa como nmero de unidades
formadoras de colonias por mililitro de orina
(UFC/ml).
Mantecn M, et al., VARIACIONES EN LA INTERPRETACIN DEL
UROCULTIVO TRAS UNA REFRIGERACIN DE LAS
MUESTRAS DE ORINA SUPERIOR A 24 HORAS. Rev Electron Biomed / Electron J Biomed 2008;2:19-26
Infeccin del tracto urinario
Una ITU se define como la presencia y multiplicacin
de bacterias en el tracto urinario con invasin de
tejidos y suele manifestarse por la presencia de un
gran nmero de bacterias en la orina.

La presencia de bacterias en la orina se denomina

bacteriuria, sta es significativa cuando el
crecimiento es superior a 105 unidades formadoras
de colonias (ufc) de un microorganismo por mililitro
de orina (nmero de Kass).

El trmino bacteriuria asintomtica se refiere a la

presencia de una bacteriuria significativa sin
sntomas.
 Los microorganismos llegan al aparato
urinario mediante:

Va hematgena.- la ITU por va

hematgena representa una pequea
proporcin de causas de pielonefritis en el
ser humano.

Va ascendente, es decir, por el paso de

bacterias desde el extremo distal de la
uretra hasta la vejiga, donde comienzan a
multiplicarse. La migracin de bacterias
hasta la vejiga se favorece por factores
mecnicos, sobre todo por el masaje uretral
que se produce durante le relacin sexual.
 En este tipo de infeccin las bacterias, en su gran mayora
proceden del tracto intestinal, fundamentalmente
Escherichia coli; las bacterias colonizan la vagina, el
introito uretral y luego pasan a la vejiga donde se
adhieren al epitelio vesical penetran con frecuencia tras
pequeos traumatismos qumicos, mecnicos o
instrumentaciones vesicales.

Los factores que predisponen a la ITU:

cateterismo uretrales, ciruga urolgica y actividad sexual,

disminucin de la ingesta de lquidos y de flujo urinario,
prolongacin en el tiempo entre las distintas micciones,
obstruccin, estenosis uretral, valvas uretrales, adenomas
protticos, vejiga neurgena, divertculos vesicales y
reflujo ureteral.
 FACTORES DE RIESGO PARA
BACTERIURIA
Edad
Fenotipo de grupo sanguneo P2
Embarazo
Grupo sanguneo B y AB
Elevada densidad de receptores de pilis (fimbrae)
Configuracin anatmica urogenital femenina
Miccin anormal
Coito
pH vaginal alto
 FACTORES DE RIESGO PARA
BACTERIURIA
Obstruccin del tracto urinario
Litiasis renal
Vejiga neurgena
Sonda vesical permanente
Reflujo vesico-ureteral
Diabetes mellitus
Hipertensin arterial
Enfermedad renal de otra etiologa
Inmunodepresin
Transplante renal
 Una vez que la bacteria ha llegado a
vas urinarias la evolucin de una
infeccin depende de la magnitud de
la carga bacteriana introducida, as
como de factores de virulencia, la
resistencia a los antimicrobianos, de
los mecanismos de defensa del
Husped.
 FACTORES DE VIRULENCIA
BACTERIANA EN ITU
Antgeno K
Antgeno O
Aerobactina15
Exotoxina A
Factor necrotizante citotxico
Cpsula de polisacrido
Formacin de ureasa
Capacidad de adherencia a travs de los pili o fimbria a las
clulas vaginales y uroepiteliales (adhesinas)
Capacidad de sintetizar guanina, arginina, glutamina
Resistencia a los antimicrobianos a travs de plsmidos y
transposones
Resistencia a las secreciones vaginales de pH bajo
Resistencia a la actividad bactericida del suero
 Toma de muestra
An cuando se utilicen las ms especficas y
sofisticadas tcnicas de laboratorio, stas no
tienen valor si no se realiza una recogida
adecuada de orina y se remite de inmediato al
laboratorio.

Si la muestra de orina no puede ser procesada y

cultivada en la media hora siguiente a su
obtencin debe ser refrigerada para evitar la
multiplicacin de los microorganismos
contaminantes. La orina, al igual que la mayora
de muestras destinadas al estudio
bacteriolgico, debe recogerse antes de la
instauracin del tratamiento antibitico.
Es preferible obtener la muestra de la
primeramiccin de la maana, en este
momento los recuentos bacterianos sern
ms elevados debido a la posibilidad que
tienen las bacterias de multiplicarse durante
la incubacin nocturna (cada 20 minutos).

En caso contrario se esperarn 4 horas

despus de la ltima miccin antes de
recoger la muestra. No se debe forzar la
miccin con lquidos y si esto sucede debe
constar en la hoja del pedido.
 MATERIAL DE
RECOLECCIN:
Los recipientes deben estar estriles y deben
cumplir con las siguientes condiciones:
Ser de plstico translcido y no volverse a utilizar.
La tapa debe cerrar hermticamente de tal
manera que el contenido no se derrame,
independientemente de la posicin del recipiente.
El diseo del recipiente debe permitir que una
etiqueta no se destruya en condiciones de
refrigeracin o de congelacin.
Es importante pegar la etiqueta en el recipiente
no en la tapa.
 MICCIN ESPONTANEA
Este mtodo de recoleccin de orina es posible en adultos y en
los nios que ya pueden controlar esfnteres. En el caso de las
mujeres adultas el mtodo idneo de recogida es el siguiente:

1.Lavado de las manos

2.Lavado de los genitales externos suavemente empleando

compresas o gasas humedecidas con agua y jabn; no utilizar
antispticos pues pueden mezclarse con la orina y dar
resultados falsos negativos o alterados.
El lavado debe hacerse manteniendo las piernas separadas y
abriendo a la vez los labios mayores con una mano mientras
que con la otra se lava suavemente desde adelante hacia atrs
la zona utilizando una compresa, gasa o toalla por vez.
Despus del lavado hay que aclarar con agua y secar con una
toalla efectuando los mismos movimientos.
3. Con los labios an separados se iniciar la miccin
desechando el primer chorro de orina, que por
arrastre mecnico limpia el canal uretral. Se
recoger la segunda parte de la miccin (chorro
medio) en un recipiente estril de boca ancha, que
inmediatamente se cerrar y se entregar al
laboratorio para su procesamiento.

En el varn la recogida de la orina es ms sencilla.

Hay que dar instrucciones a los varones no
circuncidados para que retraigan la piel del prepucio.
Una vez que se ha realizado la limpieza del glande y
posteriormente a su secado con la gasa o compresa,
se recoger igualmente la orina a mitad de la
miccin descartando la primera parte de la misma.
 BOLSA ADHESIVA ESTRIL:
Previo lavado genital prolijo, mantenerla pegada a la zona
perineal 20 minutos mximo. Recomendada en lactantes.

CATETERIZACION
La cateterizacin uretral no se recomienda como mtodo
de rutina puesto que existe el riesgo de introducir
bacterias al insertar el catter y provocar de este modo
una bacteriuria en un paciente que careca de ella.3
Se realiza este mtodo en casos como: incapacidad o
dificultad para orinar, obesidad marcada o labios muy
voluminosos en la mujer y casos de enfermedad o
debilidad tan pronunciada que el paciente no puede
excretar una muestra til, y eventualmente en la infancia.
 PACIENTES CON SONDA
VESICAL
En pacientes con sonda permanente la orina se
tomar con aguja y jeringa estril.

La sonda debe pinzarse durante 10 a 15 minutos

desinfectando posteriormente la sonda con alcohol
o povidona yodada en su parte ms blanda. En esa
zona se pincha con aguja y jeringa y se extraen
unos mililitros de orina. La orina debe tomarse
mediante aspiracin con una aguja a travs de un
punto desinfectado de la pared del catter y no de
la bolsa de recoleccin o desconectando el catter
del tubo de recogida.
 PUNCIN SUPRAPBICA
La puncin suprapbica es el mtodo de eleccin para la recogida de muestra
en nios pequeos (recin nacidos y lactantes.)

COMPLICACIONES Y CONTRAINDICACIONES DE LA PUNCIN SUPRAPBICA

Complicaciones:
1.- Hematuria macroscpica (0.6%)
2.- Perforacin intestinal
3.- Hematomas de pared
4.- Bacteriemia anaerbica
5.- Peritonitis (excepcional)
6.- Ruptura de aguja en zona de insercin (excepcional)

Contraindicaciones:
1.- Miccin reciente (<1 hora)
2.- Nio con cuadro de deshidratacin
3.- Distensin abdominal
4.- Alteraciones en la coagulacin
5.- Anomalas anatmicas mal definidas del tracto urinario.
 Transporte de la muestra
Una vez recogida la muestra de orina sta
debe procesarse inmediatamente y si no es
posible se conservar en la refrigeradora a 4C
para evitar la multiplicacin bacteriana en
mximo 24 horas. Existen en el comercio
envases para la recoleccin que llevan
conservantes incorporado en forma de pastilla.
Si no se dispone de este mtodo
comercializado se puede preservar la muestra
en cido brico.
 Procesamiento de la
muestra
Antes de realizar un cultivo de orina, es muy til realizar
una tincin de Gram de gota fresca. Este examen
microscpico de orina, previo a la siembra es muy
sensible y proporciona informacin de gran inters

GRAM DE GOTA FRESCA DE ORINA DE ACUERDO A

WASHINGTON
1) Coloque unas gotas de orina sobre un portaobjetos y
djela secar al aire
2) Coloree con tincin de Gram
3) Examine la placa con objetivo de 1000X
4) La presencia de al menos un organismo por campo de
inmersin observado (examine 20 campos) se
correlaciona con una bacteriuria significativa
(>105ufc/cc)
 La muestra de orina puede ser sembrada en una sola
caja Petri con agar CLED o Brolacin, o en dos cajas de
agar como agar sangre y McConkey o en agar EMB y
agar tripticasa soja.

En caso de procesar grandes volmenes de

urocultivos se pueden utilizar mtodos automatizados
o semiautomatizados que pudieran resultar costo
efectivos.

Automatizados:
Sistema MS-2 (Laboratorios Abbot) utiliza una cubeta
y nefelometra
Sistema AutoMicrobic (bioMrieux Vitek) utiliza un
lector de turbidez y un computador interno es el
lector del nmero de colonias
 Sistemas rpidos manuales:
Bac-T-Screen Bacteriuria (bioMrieux Vitek).
Indica en 1 minuto si hay ITU, no identifica
el patgeno
Filtra-Check-UTI (Meridian Diagnostics).
Indica en 1 minuto si hay ITU, no identifica
el patgeno
URISCREEN (bioMrieux Vitek). Detecta la
enzima catalasa. No identifica
Streptococcus
Qualture. Identifica el posible patgeno y el
recuento en 4 horas.
 Interpretacin de
urocultivos
Cuando no exista crecimiento a las 24 horas de
incubacin reincube hasta 48 horas.

Cuando existan <104 ufc/ml de dos o ms tipos

de patgenos haga un informe cuantitativo y la
identificacin mnima de los grmenes. No realice
antibiograma. Sin embargo es conveniente
guardar la caja o llamar al clnicopara averiguar si
ameritar identificacin completa y antibiograma,
pues podra tratarse de una infeccin crnica o
recurrente o de un proceso obstructivo.
 Cuando exista un recuento >104 ufc/ml de un solo tipo
de colonia haga una identificacin completa y
antibiograma.

Un cultivo puro de Staphylococcus aureus se debe

informar con antibiograma independientemente del
nmero de colonias.

La presencia de levaduras siempre debe ser informada.

El crecimiento <10.000 ufc/cc de orina de un nico

patgeno puede ser indicativo de infeccin. Merece
consideracin especial si se trata de varones y mujeres
sintomticas con piuria.
 Cuando la orina ha sido tomada con mtodos
invasivos: cateterizacin, puncin suprapbica,
cistoscopa o ciruga, siempre se debe realizar
recuento, identificacin total y antibiograma.

Algunos autores recomiendan sembrar este tipo de

muestra en agar chocolate, sangre, cled, agar
sangre para anaerobios y en caldo tioglicolato. En el
caso de ciruga siempre (muestra tomada deriones
o urter) deben colocarse unas pocas gotas de orina
en caldo tioglicolato para lograr la identificacin de
un nmero pequeo de microorganismos que en
estos sitios anatmicos puedan encontrarse, luego
de una incubacin de 24 horas haga pases de este
caldo a agar sangre, chocolate y McConkey.
 CAUSAS DE UROCULTIVO
FALSAMENTE NEGATIVOS
Orina sobre-diluida (<1.005 de densidad)
Permanencia de la orina en la vejiga por poco
tiempo
pH urinario inferior a 5 y superior a 8
Toma de antimicrobianos previa al cultivo
Contaminacin de la orina con el antisptico de
limpieza genital
Obstruccin uretral completa distal a la infeccin
Infeccin causada por bacterias que requieren
medios especiales
Infecciones crnicas asociadas a recuentos bajos.
 UROCULTIVOS
Tcnicas de cultivo y recuento:

Tcnica de cultivo y recuento por el

mtodo de dispersin con varilla de
vidrio
La muestra tomada con el asa calibrada se deposita
en el centro de la superficie del medio de cultivo,
luego con una varilla de vidrio en forma de "L" se
dispersa la muestra sobre toda la superficie del agar
rotando la caja de Petri por lo menos dos veces para
asegurar una distribucin uniforme (Figura 1).
 Despus del perodo de incubacin se
cuentan una a una las colonias aisladas
sobre el medio y el nmero total se
multiplica por 103 para calcular el nmero
de UFC/ml.
 Tcnica de cultivo y recuento
por el mtodo de Kass.
Se inocula el medio depositando la
cantidad de muestra tomada con el asa
calibrada en el centro del agar y a partir
de ah se traza una lnea recta de extremo
a extremo de la caja.
Con la misma asa, y sin tomar ms
muestra ni esterilizarla, se realiza una
estriacin en zig-zag de manera que
interceptara la lnea central de lado a lado
(Figura 2).

Figura2.MtododeKass
 Los parmetros utilizados para obtener el
recuento de UFC despus del perodo son los
siguientes:

Crecimiento en todas las lneas de siembra, se

considera un recuento >100,000 UFC/ml.

Crecimiento en la lnea central y hasta la mitad

de las lneas que interceptan a sta, el recuento
es de 75,000 UFC/ml.

Crecimiento slo en la lnea central es compatible

con un recuento de 50,000 UFC/ml.
 Crecimiento de slo la mitad de la lnea
central de siembra, se considera que
corresponde a un recuento de 25,000
UFC/ml.

Cuando no se presenta crecimiento

completo en una lnea, se hace una
aproximacin al parmetro que el lector
consideraba ms apropiado.
 Tcnica de cultivo y recuento por
el mtodo tradicional de "cuatro
estras".
Se inocula la superficie del medio
realizando cuatro estras separadas que
van de extremo a extremo de la caja.

Se realiza con el asa calibrada, sin tomar

ms muestra cada vez y sin esterilizarla
entre una y otra lnea (Figura 3).

Figura3.Mtodotradicionalde"cuatroestras"
 Elcrecimiento completo de colonias
en cada lnea representaba 25,000
UFC/ml. De igual manera cuando no
se presentaba crecimiento completo
en una lnea, se haca una
aproximacin al parmetro que el
lector consideraba ms apropiado