CURSO DE TOXICOLOGIA

FUNDAMENTOS DE DE TOXICOLOGIA
CONCEIO A. TURINI
ESTEFNIA GASTALDELLO MOREIRA
cci@uel.br

FUNDAMENTOS DE TOXICOLOGIA
CONTEDO
REAS DA TOXICOLOGIA
CONCEITOS BSICOS
FASES DA INTOXICAO
- FASE I Exposio
- FASE II Toxicocintica
Absoro
Distribuio
Biotransformao
Excreo
- FASE III Toxicodinmica
- FASE IV - Clnica

FUNDAMENTOS DE TOXICOLOGIA
OBJETIVOS
Caracterizar as condies de exposio ao
agente txico
Identificar os
processos
envolvidos
na
absoro, distribuio, biotransformao e
exceo dos agentes txico
Reconhecer os principais mecanismos de
interao dos toxicantes com o sistema
biolgico
Reconhecer
o
espectro
de
efeitos
apresentados pelo organismo exposto

CONCEITO DE TOXICOLOGIA
o estudo da interao entre agentes
qumicos e sistemas biolgicos com o
objetivo de determinar, quantitativamente,
o potencial dos agentes qumicos em
produzir danos que resultam em efeitos
adversos em organismos vivos
(BALLANTYNE, 1999)

reas de Atuao

Toxicologia
de alimentos

Toxicologia
ambiental

Toxicologia de
medicamentos

Toxicologia
ocupacional

Toxicologia
social

ASPECTOS

Clnico

Analtico

Legislao

Investigao

reas de Atuao

Toxicologia Ambiental
Estuda os efeitos nocivos
causados pela interao entre os
agentes qumicos contaminantes
do ambiente gua, solo, ar com o organismo

reas de Atuao
Toxicologia Ocupacional
Estuda os efeitos nocivos
produzidos pela interao
entre os agentes qumicos e
os contaminantes do
ambiente de trabalho
com o indivduo exposto

reas de Atuao

Toxicologia de Alimentos
Estuda as condies em que
os alimentos podem ser
ingeridos, sem causar danos
ao organismo

reas de Atuao

Toxicologia de Medicamentos
e Cosmticos
Estuda os efeitos nocivos
produzidos pela interao de
medicamentos ou cosmticos
com o organismo, decorrentes de
uso inadequado ou da
suscetibilidade individual

reas de Atuao

Toxicologia Social
Estuda os efeitos nocivos
decorrentes do uso no mdico
de drogas ou frmacos,
causando prejuzo ao prprio
indivduo e sociedade

Farmacologia
Patologia
Medicina

Qumica
Biologia
Fisiologia

Cincias
Bsicas

TOXICOLOGIA
Analtica
reas
fundamentais

Geral

Experimental
Clnica
Ambiental

reas
aplicadas

ENSINO

Social
Alimentos
Medicamentos

ECOTOXICOLOGIA

Ocupacional

TOXICOLOGIA REGULATRIA
Fonte: Repetto, 1997

CONCEITOS BSICOS EM TOXICOLOGIA

Agente txico ou toxicante
Substncia qumica capaz de causar dano a um sistema
biolgico, alterando uma funo ou levando-o morte,
sob certas condies de exposio.

Xenobitico
Termo usado para designar substncias qumicas
estranhas ao organismo. No possuem papel fisiolgico
conhecido.

Toxina
Refere-se substncia txica produzida por um sistema
biolgico (plantas, animais, fungos e bactrias).

CONCEITOS BSICOS EM TOXICOLOGIA

Veneno
Termo de uso popular utilizado para designar a
substncia qumica, ou mistura de substncias
qumicas, que provoca a intoxicao ou a morte com
baixas doses.
Segundo alguns autores, um termo utilizado
especificamente
para
designar
substncias
provenientes de animais e plantas, nos quais teriam
importantes funes de autodefesa ou de predao.
Ex. animais: veneno de cobra, de abelha
plantas: comigo-ningum-pode, saia branca

CONCEITOS BSICOS EM TOXICOLOGIA

Frmaco
Toda substncia de estrutura qumica definida capaz
de
modificar ou explorar o sistema fisiolgico ou
estado
patolgico, em benefcio do organismo
receptor

Droga
Toda substncia capaz de modificar ou explorar o
sistema fisiolgico ou estado patolgico, utilizada
com ou sem inteno de benefcio do organismo
receptor. A palavra droga tem aceitao popular para
designar frmacos, medicamentos, matria-prima de
medicamentos, alucingenos e agentes txicos

CONCEITOS BSICOS EM TOXICOLOGIA

Toxicidade

Capacidade inerente a um agente txico

de

produzir

um

efeito

deletrio

no

organismo. Ou seja, a medida relativa

do potencial txico da substncia.

CONCEITOS BSICOS EM TOXICOLOGIA

Dose Letal 50 (DL50)
Dose, obtida estatisticamente, em mg/kg, de uma
determinada substncia, necessria para matar
50% de uma populao de animais
AGENTE
Etanol
Cloreto de sdio
Sulfato ferroso
Morfina
Estricnina
Nicotina
Dioxina (TCDD)
Toxina botulnica

DL50 (mg/kg)
10.0002
4.000
1.500
900
2
1
0,001
0,00001

CONCEITOS BSICOS EM TOXICOLOGIA

TOXICIDADE AGUDA
CLASSIFICAO
Extremamente txica: DL50 < ou = 1 mg/kg
Altamente txica: DL50 > 1 a 50 mg/kg
Moderadamente txica: DL50 > 50 a 500 mg/kg
Levemente txica: DL50 > 0,5 a 5 g/kg
Relativamente no txica: DL50 acima de 5 g/kg

CONCEITOS BSICOS EM TOXICOLOGIA

Risco = Toxicidade X Exposio
Termo
que
traduz
a
probabilidade
estatstica de uma substncia qumica
provocar efeitos nocivos em condies
definidas de exposio

Substncia com alta toxicidade mas baixa exposio

baixa probabilidade de causar intoxicaes

CONCEITOS BSICOS EM TOXICOLOGIA

Ao txica
Maneira pela qual um agente txico exerce sua
atividade sobre as estruturas teciduais

Efeito txico
Alterao anormal, indesejvel ou nociva, decorrente da
exposio a substncias potencialmente txicas

CONCEITOS BSICOS EM TOXICOLOGIA

Antdoto e Antagonista
Agente capaz de neutralizar ou reduzir os
efeitos de uma substncia potencialmente
txica
Antdoto a sustncia que se ope ao
efeito txico, atuando sobre o prprio
toxicante

PORTANTO
Antagonista a substncia que exerce
uma ao oposta do agente txico
(agonista)

CONCEITOS BSICOS EM TOXICOLOGIA

Antdoto: mecanismos de ao
neutralizao
- antgeno-anticorpo

impedir absoro
- adsoro (carvo ativado, Terra de Fller)
- ligao com protena (albumina, clara de ovo)

quelao
- metais (Pb-EDTA)

CLASSIFICAO DOS AGENTES TXICOS

Caractersticas qumicas:
aminas aromticas, hidrocarbonetos halogenados,
lcoois
Caractersticas fsicas:
slidos, lquidos, gases, vapores, partculas
Estabilidade ou reatividade qumica:
explosivo, inflamvel, oxidante, radioativo

CLASSIFICAO DOS AGENTES TXICOS

Ao txica:
local - irritantes
sistmica - asfixiantes, depressores,
hepatotxicos, carcinognicos
Potencial de toxicidade:
extremamente txicos, moderadamente txicos
Usos:
praguicidas, solventes, aditivos alimentares

CLASSIFICAO DOS AGENTES TXICOS

Efeitos txicos:
carcinognicos, mutagnicos, teratognicos
hepatotxicos, nefrotxicos, neurotxicos
Mecanismo de ao:
anticolinestersicos, metemoglobinizantes

COMPORTAMENTO CINTICO DO AGENTE TXICO

NO ORGANISMO
TOXICANTE

CINTICA

DINMICA
Vias de introduo
Absoro

DISTRIBUIO (SANGUE)
ACUMULAO
Combinado

Txico livre
Txico combinado
Livre
Produto de biotransformao

STIO DE AO

(receptores)
Interao

Eliminao
Fonte: Azevedo; Lima, 2003

Biotransformao

Efeitos

FASES DA INTOXICAO

. absoro
. distribuio
. eliminao
. biotransformao

Fonte: Moraes et al., 1991

FASE I EXPOSIO
Fase de contato das superfcies externas ou internas do
organismo que entram em contato com o toxicante

Depende:
Dose ou concentrao
Vias de introduo
Durao e freqncia da exposio
Propriedades fsico-qumicas das substncias
Fatores relacionados suscetibilidade individual

FASE I EXPOSIO
Dose: a quantidade de um agente
administrado para um indivduo e expressa em
unidades de massa por massa (mg de
toxicante/Kg de peso corpreo)

Dose efetiva 50 (DE50)

Dose letal mdia (DL50)

FASE I EXPOSIO
Concentrao: aplica-se exposio do
indivduo a uma determinada concentrao de
um agente presente em um compartimento
(ex. solo, gua e ar). expressa em unidades
de massa por volume do meio (ex. mg de
toxicante/m3 de ar; mg de toxicante/L de
gua; mg de toxicante/m3 de solo ou em ppm e
ppb)
Concentrao efetiva 50 (CE50)
Concentrao letal mdia (CL50)

FASE I EXPOSIO
Intravenosa

Via de introduo
... Via Respiratria
... Via Oral
... Via Drmica

Respiratria
Intraperitonial

Intensidade do
Efeito Txico
X
Rapidez de Resposta

Sub-cutnea
Intramuscular
Intradrmica
Oral

= superior a

Drmica

DURAO E FREQNCIA DA
EXPOSIO
Aguda
Sobreaguda
Subcrnica
Crnica

Administrao
nica
(repetida < 24 h)

Exposio repetida
< 1 ms

Exposio repetida
> 1 ms e < 3 meses

Exposio repetida
> 3 meses

FASE I EXPOSIO
Propriedades fsico-qumicas das substncias
Solubilidade
Presso de vapor
Constante de ionizao
Tamanho da partcula
Reatividade qumica
Estabilidade
Coeficiente de partio

FASE I EXPOSIO
Fatores relacionados ao organismo
Absoro
Distribuio
Biotransformao
Espcie

Peso
Diferenas genticas
Estado de sade

Idade

Estado nutricional

Sexo

Condies metablicas

FASE II TOXICOCINTICA
Inclui todos os processos envolvidos na
relao entre a disponibilidade qumica e a
concentrao do toxicante nos diferentes
tecidos do organismo
Intervm nesta fase:
Absoro
Distribuio
Biotransformao
Excreo

PASSOS DA ABSORO
EXTERIOR
Membrana

pele

respiratria

mucosa

digestiva

FLUIDO INTERSTICIAL

ocular
Membrana capilar

PLASMA
Membrana capilar
FLUIDO INTERSTICIAL
Membrana capilar
FLUIDO INTRACELULAR

FATORES QUE INFLUENCIAM

Caracterstica da membrana

Vias de introduo

Fatores relacionados ao
organismo

Fatores relacionados
substncia qumica

CARACTERSTICA DA MEMBRANA

Fonte: Repetto, 1997

TRANSPORTE ATRAVS DA MEMBRANA

1.Transporte passivo
Difuso simples
Filtrao

2. Transportes especializados
Transporte ativo
Difuso facilitada
Endocitose

MECANISMOS DE TRANSPORTE
Transporte Passivo

Difuso simples
extracelular

Membrana
lipdica

intracelular

Toxicante
Toxicante

- contnuo movimento de molculas e ons em lquidos ou gases

- depende da lipossolubilidade, gradiente de concentrao,
coeficiente de partio leo-gua e grau de ionizao

Ex: lcoois, medicamentos

MECANISMOS DE TRANSPORTE
Transporte Passivo

Filtrao
extracelular

Toxicante

membrana

intracelular

Toxicante
celular

depende do tamanho, carga e forma das partculas

MECANISMOS DE TRANSPORTE
Transporte Especializado

Transporte Ativo
Requer um transportador
Realiza-se contra gradiente de concentrao
Implica gasto de energia (ATP)
Utilizado apenas por substncias de peso
molecular elevado, hidrossolveis ou
ionizadas
Mecanismo utilizado por cidos e bases fortes

TRANSPORTE ATIVO
Lquido extra-celular

Stios de
fixao
de K+

Bomba K+/ Na+

Stios de
fixao
de Na+

Citoplasma

Fonte: http://sis.nlm.nih.gov/enviro/toxtutor/Tox2/index.html

MECANISMOS DE TRANSPORTE
Transporte Especializado

Difuso facilitada
a favor de um gradiente de concentrao,
depende de transportador que torna a substncia
a ser transposta solvel em lipdios.

DIFUSO FACILITADA
Lquido extra-celular

Partcula insolvel em
lipdios

Protena transportadora

Citoplasma
Fonte: http://sis.nlm.nih.gov/enviro/toxtutor/Tox2/index.html

MECANISMOS DE TRANSPORTE
Transportes Especializados

Endocitose

ocorre por quebra da tenso superficial de

vacolos e formao de vesculas fagocticas
ou pinocticas
Ex: protenas de alto peso molecular

ENDOCITOSE

Lquido extra-celular

Membrana

Citoplasma

Fonte: http://sis.nlm.nih.gov/enviro/toxtutor/Tox2/index.html

FATORES RELACIONADOS
SUBSTNCIA QUMICA
Solubilidade
Hidrossolubilidade: OH, COOH, NH2 , SH, C=O
Lipossolubilidade : alqulicos, fenlicos,
naftlicos, halognios,
acetila (CH3COO-)

FATORES RELACIONADOS
SUBSTNCIA QUMICA
Grau de ionizao do toxicante
valores de pKa (logaritmo negativo da constante
de dissociao) do toxicante
pH do meio (plasma, estmago, intestino, urina
etc.)

determinaro a proporo entre formas Ionizadas (I)

e No Ionizadas (NI) nos compartimentos

GRAU DE IONIZAO DO TOXICANTE

pH do meio

pKa do toxicante

EQUAO DE HANDERSON-HASSELBACH
para cidos fracos:

para bases fracas:

R COOH RCOO- H+
log NI
pKa - pH =
R NH3+ RNH2 [I]
H+
pKa - pH =

log I

NI

Onde:
I = forma
ionizada
NI = forma
no ionizada

Composto cido: AAS (pKa = 3,4)

Plasma

Suco gstrico

(pH = 7,4)

(pH = 1,4)
M

R-COOH

R-COOH

M
B

R-COO + H

R
A

10-4

NI
I

R-COO- + H+
NI

A
I

102

PASSAGEM DE UM COMPARTIMENTO A
OUTRO SEGUNDO O pH
pH alto

BASES

Fonte: Repetto, 1997

pH baixo
M
E
M
B
R
A
N
A

CIDOS

VALORES APROXIMADOS DE pKa DE ALGUNS CIDOS E BASES

Fortes

CIDOS

pKa
0
1
2

Penicilinas
cido saliclico
cido acetilsaliclico
Warfarina
Tolbutamida
Sulfadimetoxina
Fenobarbital
Tiopental
Fenitona
Teofilina
Glutetimida
*Nitrazepan
*Oxazepan

3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13

Fracos

Cafena

14

BASES
Cafena*
Dapsona
Oxazepan*
Nitrazepan*
Diazepan
Quinina
Quinidina
Clordiazepxido
Profoxifeno
Reserpina
Kanamicina
Lidocana
Quinina
Quinidina
Meperidina
Procainamida
Efedrina
Anfetamina
Tolazolina
Mecamilamina
Guanetidina

Fracos

Fortes

FASE II TOXICOCINTICA

ABSORO
Conceito: o processo de transferncia do
agente qumico do local de administrao
para a circulao geral. Esse processo se
d atravs das membranas biolgicas

VIAS DE INTRODUO
Barreira Biolgica
Cutnea
Agente
txico

Gastrintestinal
Alveolar
Vascular
Hemato-enceflica
Placentria

Sistema
biolgico

ABSORO GASTRINTESTINAL
Fatores que influenciam
Relacionados ao toxicante
- lipossolubilidade
- dissociao
- propriedades irritativas
e emticas
- resistncia ao pH estomacal,
enzimas digestivas e enzimas
da microflora intestinal
Estado de plenitude ou vacuidade GI
Interao fsico-qumica entre compostos no contedo intestinal

EFEITO DA PRIMEIRA PASSAGEM

OU ELIMINAO PR-SISTMICA

100% via oral

50% via retal
0% via
sublingual

ABSORO PULMONAR
Extensa rea de absoro
rea alveolar ~90 m2
Rpida intoxicao
pulmo corao
Absoro
Gases
Vapores
Partculas
lquidas

slidas

ABSORO PULMONAR

P ar alveolar > P sangue: absoro

P ar alveolar < P sangue: eliminao

ABSORO PULMONAR DE GASES E

VAPORES
Solubilidade no sangue
propriedades fsicoqumicas do soluto
Equilbrio sangue-alvolo
rpido para substncias
pouco solveis no sangue
lento para substncias
muito solveis no sangue
Fatores limitantes da absoro
circulao: equilbrio rpido
respirao: equilbrio lento

ABSORO PULMONAR MATERIAL

PARTICULADO

Partculas > 5 m remoo mecnica

Partculas 1-5 m remoo mucociliar

Alvolo
s

Partculas < 1 m absoro

ABSORO CUTNEA
Dificultada pelo extrato crneo

ABSORO CUTNEA
Fatores que influenciam
Ligados ao agente
lipossolubilidade, grau de dissociao, peso
molecular, volatilidade, viscosidade
Ligados ao indivduo
regio da pele, integridade da pele,
pilosidades locais, vascularizao
Ligados s condies de contato ou da exposio
durao e tipo do contato, temperatura local
da pele e do ambiente

FASE II TOXICOCINTICA
DISTRIBUIO
FATORES LIGADOS AO AGENTE TXICO

lipossolubilidade - quanto maior a lipossolubilidade mais

rpida a chegada aos rgos-alvo

grau de ionizao quanto menor a ionizao maior a

absoro
afinidade com molculas orgnicas quanto maior a afinidade
mais lenta a distribuio aos rgos-alvo
Ex: CO e Hb, chumbo e ossos, clorados e tecido adiposo,
metais e grupos SH
grau de oxidao do toxicante
Ex: As3+ (cumulativo) e As5+ (eliminado)

FASE II TOXICOCINTICA
DISTRIBUIO

FATORES LIGADOS AO ORGANISMO

Fluxo sangneo (fgado, bao, rins, pulmes)

Contedo hdrico (rins) ou lipdico (SNC) do rgo

Capacidade de biotransformao

integridade do rgo

FASE II TOXICOCINTICA
STIOS DE ARMAZENAMENTO
1 - AFINIDADE POR DIFERENTES TECIDOS
Ligao s protenas plasmticas
competio entre toxicantes
condies patolgicas
concentrao do agente
concentrao protica
pH
idade

FASE II TOXICOCINTICA
STIOS DE ARMAZENAMENTO
1 - AFINIDADE POR DIFERENTES TECIDOS
Ligaes celulares
tecido adiposo
tecido sseo
leite materno

COMPLEXAO DE AGENTES TXICOS COM

PROTENAS

Fonte: Repetto, 1997

FASE II TOXICOCINTICA
STIOS DE ARMAZENAMENTO
2- PRESENA DE MEMBRANAS OU BARREIRAS
DE EXCLUSO
Barreira hematoenceflica
Barreira placentria

FASE II TOXICOCINTICA
PRINCIPAIS STIOS DE ARMAZENAMENTO
fgado
rins
SNC
ossos
cabelos
leite materno, etc.

FASE
FaseIIIITOXICOCINTICA
Toxicocintica

BIOTRANSFORMAO

Conceito:
Conjunto
de
alteraes
qumicas
(ou
estruturais) que as substncias sofrem no
organismo,
geralmente
por
processos
enzimticos, para
formar derivados mais
polares e mais hidrossolveis, e facilitando a
excreo renal.

BIOTRANSFORMAO

X EN O B I T ICO
M ETAB LITO S
IN A T IV O S
( d e s to x ific a o )

A T IV O S
( b io a t iv a o )

METABLITOS TXICOS
Natureza qumica
eletroflicos
nucleoflicos
radicais livres
Molculas celulares alvos
DNA
protenas
lipdios

METABLITOS TXICOS

BIOATIVAO E DESTOXIFICAO DO
PARACETAMOL
Glicunonidao

Paracetamol

Sulfatao

Citocromo P450

Metablito eletroflico
reativo

Glutationa

Destoxificao

Protenas hepticas

Morte celular

REAES DE BIOTRANSFORMAO
Etapas sucessivas
Diferentes enzimas
estrutura qumica do substrato
Classificao das reaes
Reaes de fase I (no sintticas)
Reaes de fase II (sintticas)

FASES DA BIOTRANSFORMAO
FASE I

FASE II

-OH

BENZENO

FENOL

-OSO3H

FENIL SULFATO

FASES DA BIOTRANSFORMAO

FASES DA BIOTRANSFORMAO
Fase I
grupo funcional inserido ou exposto
(-OH, -NH2, -SH, -COOH)
pequeno aumento da hidrofilicidade
metablito quimicamente mais reativo
substrato para a fase II
Fase II
combinao com um doador endgeno
grande aumento da hidrofilicidade

REAES DE FASE I
Oxidao (perda de e-)
Adio de oxignio

Reduo
Azo-reduo

hidroxilao

Nitro-reduo

epoxidao

Desalogenao

sulfoxidao
Desidrogenao
Desaminao
Dessulfurao
Desalquilao

redutora
Reduo de
carbonila
Hidrlise

ENZIMAS OXIDATIVAS

Citocromo P-450
lcool desidrogenase
Aldedo desidrogenase
Xantina oxidase
Monoamina oxidase
Diamina oxidase
Flavina monooxigenases

CITOCROMO P-450
Conjunto

de
cerca
de
50
enzimas
(hemeprotenas) no homem localizadas nos
microssomos

CYP 2D6 (famlia, subfamlia, gene)

Metabolizam

maioria

dos

xenobiticos

lipossolveis
Vrias reaes enzimticas distintas
epoxidao,

oxidao,

hidroxilao,
dessulfurao,

desaminao

desalquilao,
desalogenao,

CICLO OXIDATIVO DO CITOCROMO P-450

1. Cit P450 oxidado + xenobitico
2. Doao de um e- pelo NADPH para
a
flavoprotena,
que
reduz
o
complexo cit P-450 + xenobitico
3. Complexo citP-450 + xenobitico
liga-se ao O2 e capta mais um e-.
Ambos os e- so transferidos ao O2
desmembrando-o
4. Um O liga-se ao substrato e o
outro entra na produo de uma H2O.
Enzima se oxida novamente

REAES DE OXIDAO: ADIO DE O2

hidroxilao

sulfoxidao

OXIDAO POR ADIO DE O2

a
d
i
x
o
ep

REAES DE OXIDAO

na
e
og
r
id
s
de

desaminao

REAES DE OXIDAO

dessulfurao

desalquilao

REAES DE REDUO
Substrato ganha eltrons
Enzimas do citocromo P-450 so mais
importantes, mas tambm existem enzimas
citoslicas e da microflora intestinal
Citocromo P-450 transfere e- direto ao
substrato ao invs de ativar o O2
Geralmente so reaes de bioativao

REAES DE REDUO

REAES DE HIDRLISE
Adio de uma molcula de gua
Grupo -OH inserido em um metablito e -H
em outro
Xenobiticos que apresentem ligao ster
ou amida
Biotransformao de molculas grandes
(steres, amidas, hidrazinas, carbamatos)
Enzimas no microssomais

REAES DE HIDRLISE

REAES DE FASE II
Enzimas citoslicas (principalmente)
sintetases
transferases
Doadores
c. glicurnico (glicuronidao)
sulfato (sulfatao)
acetil-CoA (acetilao)
S-adenosilmetionina (metilao)
glicina (conjugao com glicina)
glutationa (conjugao com glutationa)

FASE II: glicuronidao

Ocorre no RE
Reao mais importante
em mamferos
Substratos contendo
-OH, -SH, -NH2, -COOH,
-CH
Excreo biliar
-glicuronidase
(microflora)
reabsoro

FASE II: sulfatao

Ocorre no citosol
Importante em
mamferos
Substratos
contendo
-OH aromtico,
-NH2 aromtico,
lcoois
Excreo renal

FASE II: conjugao peptdica

Reao entre um
aminocido
endgeno
(glicina) e um
cido carboxlico
aromtico

FASE II: conjugao com glutationa

Citoplasma e RE
Importante para metablitos eletroflicos
(epxidos, oxiarenos, hidroxilaminas)
Glutationa S-transferase

Glutmico, cistena, glicina

CONSEQNCIAS DA BIOTRANSFORMAO

Favorecer a excreo por formao de

compostos mais polares
Reduzir a toxicidade do agente txico (caso
mais freqente)
Transformar o produto original em compostos
mais ativos

FATORES QUE MODIFICAM A

BIOTRANSFORMAO

constitucionais: espcie, gnero,

variabilidade gentica, idade
FATORES
INTERNOS

condicionais: dieta e estado

nutricional, estado patolgico

FATORES QUE MODIFICAM A

BIOTRANSFORMAO

FATORES EXTERNOS

induo enzimtica
inibio enzimtica

FASE II TOXICOCINTICA
EXCREO / ELIMINAO

Conceito:
Excreo - processo pelo qual uma substncia
expulsa do organismo

Eliminao por biotransformao - processo

pelo qual as substncias mudam de estrutura,
mas continuam no organismo sob a forma de
metablitos

FASE II TOXICOCINTICA
EXCREO / ELIMINAO
VIAS:

Renal (atravs da urina)

Pulmonar (atravs do ar expirado)
Biliar (atravs da bile)
Suor
Saliva
Leite
Gastrintestinal (pelas fezes)

EFEITO DO pH URINRIO SOBRE A REABSORO

E EXCREO DE UMA SUBSTNCIA IONIZADA

Plasma

Parede
tubular

Urina pH
cido
HX

Urina pH
bsico

Parede
tubular

H+ + X -

Plasma

X- + H+ HX

Fonte: Repetto, 1997

Ativao
metablica

Forma de
transporte

Degradao
metablica

Forma
ativa

IC O
T
I
Fluido extracelular
B
O
N
XE
Ligado a protenas
Absoro

Drogas em forma
ativa
Drogas em forma de
transporte
Produtos inativos

Fonte: Repetto, 1997

Forma
ativa

PRODUTOS
NOCIVOS

Efeito
teraputico
ou txico

Relao
Local de ao Estmulo
estmulo
principal
efeito
Local de ao
secundrio

Estmulo

Relao
estmulo
efeito
Efeitos
colaterais

FASE III TOXICODINMICA

Compreende
os
mecanismos
de
interao entre as molculas do
toxicante e os stios de ao,
especficos ou no, dos rgos e,
conseqentemente, o aparecimento
de desequilbrio homeosttico

Efeito txico

Dose administrada
do toxicante

Organismo

Alteraes bioqumicas
e fisiolgicas

Concentrao
adequada

Bioativao

Organismo
Stio de Ao

DESENCADEADORES DO EFEITO TXICO

Xenobitico original
chumbo, tetrodotoxina, cianeto
Metablito do xenobitico
fluoroacitrato (fluoracetato), cido oxlico
(etilenoglicol)
Espcies reativas de oxignio ou de nitrognio
OH (diquate, doxorubicina)
Compostos endgenos
bilirrubina deslocada da albumina pela
sulfonamida

CLASSIFICAO DOS TXICOS QUANTO

AOS SEUS MODOS DE AO
Inespecficos
efeito depende de suas propriedades
fsico-qumicas
cidos ou bases que so irritantes e
corrosivos nos tecidos de contato

Especficos
efeito mais seletivo pois atuam em uma
estrutura-alvo
(enzimas, molculas
transportadoras, canais inicos, cidos
nucleicos, etc)

FATORES QUE DETERMINAM A

SELETIVIDADE DE AO DE UM TXICO
Ligao seletiva do txico a um
determinado componente celular ou
bioqumico
bloqueador
de
canais
de
influenciar clulas excitveis

Na+

FATORES QUE DETERMINAM A

SELETIVIDADE DE AO DE UM TXICO
Distribuio seletiva
Porosidade do endotlio capilar
favorece acmulo e ao de xenobiticos nos
rins e fgado

Transporte de membrana especializado

paraquate entra no pneumcito atravs de uma
protena carreadora

Ligao a compostos intracelulares

ligao do MPTP
substncia negra

melanina

presente

na

"SOMENTE A DOSE
CORRETA DIFERENCIA
O VENENO DO
REMDIO.
Paracelsus (1493-1541)

RELAO DOSE-RESPOSTA OU
CONCENTRAO-RESPOSTA
Quanto maior a dose, maiores so os efeitos
Existem nveis de exposio seguros para a
sade humana (exceo para substncias
mutagnicas)
Morte

Resposta

100

Efeito grave

80
60

Efeito moderado

40
20
0

Sem efeito

Efeito pequeno

Dose

RELAES DOSE-RESPOSTA
Quantitativa
Maior a dose, mais intenso o efeito
Ex: hipertrofia heptica, freqncia
cardaca
Quantal
Maior a dose, maior o nmero de
indivduos que respondem
Ex: morte, convulso

CURVAS DOSE-RESPOSTA
Para efeitos que
apresentam limiar
de segurana
(threshold)

Para efeitos que

no apresentam
limiar de
segurana
100
90
80

% resposta

% resposta

100
80
60
40

Threshold

70
60
50
40
30

20

20

10

log dose

log dose

MECANISMOS DE TOXICIDADE
Alterao da expresso gnica
Alterao qumica de protenas
especficas
Alterao do funcionamento de
clulas excitveis
Prejuzo da sntese de ATP
Aumento de Ca2+ intracelular
Estresse oxidativo

EXPRESSO GNICA

EXPRESSO GNICA
Genes

Cromossomo

Regio
estrutural

Regio
reguladora

Codifica
aa

Modula
expresso

Alterao

Alterao

Alterao
estrutura
protica

Nveis
inadequados
protenas

EXPRESSO GNICA
Sinal externo (ligantes)

Extracelular

(fatores de crescimento, citocinas, hormnios)

Receptores de membrana
Ativao de protenaquinases
Citoplasma

Ncleo

Ativao da cascata
de fosforilao proteica
Ativao de fator
de transcrio
Ligao regio
reguladora do gene
Transcrio gnica

Citoplasma

Sntese proteica

Ligante

(hormnios)

ALTERAO DA EXPRESSO GNICA

Sinal externo
Receptores de membrana

Influncia na produo de sinais externos

herbicida amitrole TSH tumores tireoidenanos

Influncia na transduo de sinais

Ativao de protenaquinase

estmulo de PK efeito proliferativo

forbolester mimetiza diacilglicerol

Ativao da cascata
de fosforilao proteica

inibio de fosfatase efeito proliferativo

arsenito

inibio de PK efeito anti-proliferativo

estaurosporina induz apoptose

Ativao de fator
de transcrio
Ligante
Ligao regio
reguladora do gene
Transcrio gnica
Sntese proteica

Alterao da transcrio
interao com fatores de transcrio

Cd substitui Zn no fator MTF1

dietilestibestrol substitui estrgeno na ligao
ao receptor de estrgeno

interao com a regio reguladora

compostos genotxicos que se ligam regio

alterando transcrio

ALTERAO QUMICA DE
PROTENAS ESPECFICAS
Metais complexam-se com -SH inibio
Hg + protenas do citoesqueleto prejuzo
da migrao neuronal durante o
desenvolvimento desalinhamento de
neurnios corticais
Pb + protenas envolvidas na sntese do
heme anemia

Organofosforados fosforilam
enzima acetilcolinesterase

CLULAS EXCITVEIS E CONTROLE

M. liso e
cardaco

Juno
neuro-efetora

M. esqueltico

Juno
neuromuscular

Neurnio

Sinapse

NEUROTRANSMISSO
Liberao do
neurotransmissor (NT)

Trmino da ao do NT

1) Recaptura
2) Metabolizao
3) Difuso sangnea

3
2

Fonte: Silverthorn D. U. Fisiologia Humana uma abordagem integrada. SP:

Manole, 2003

ALTERAO DO FUNCIONAMENTO DE
CLULAS EXCITVEIS
Alterao da disponibilidade do NT
alterao da liberao
toxina botulnica Ach
anfetamina DA, 5-HT, NA
alterao da metabolizao
organofosforados inibem AChE
alterao da recaptura
cocana inibe recaptura de DA, 5-HT, NA

ALTERAO DO FUNCIONAMENTO DE
CLULAS EXCITVEIS
Interao com o receptor
Agonista
LSD em receptores 5HT2A
THC em receptores canabinides
Antagonista
curare em receptores nicotnicos
estricnina em receptores glicinrgicos
aldrin em receptores GABA-A

ALTERAO DO FUNCIONAMENTO DE
CLULAS EXCITVEIS
Ao em canais inicos
bloqueio
tetrodotoxina em canais de Na+ no msculo
esqueltico
antidepressivos tricclicos em canais de Na+
cardaco
abertura
batracotoxina e organoclorados em canais de
Na+
Alterao da fluidez da membrana
solventes

SNTESE DE ATP
Citoplasma

Matriz mitocondrial

Fonte: Lehninger A.L. et al.

Princpios de Bioqumica. SP:
Sarvier, 1996.

Cristas mitocondriais

Esta figura ilustra a fora prton-motora. Note que, medida que e vo passando pelas protenas da cadeia respiratria, H + vo sendo
colocados para fora. Como a membrana mitocondrial interna
impermevel aos ons H+, cria-se um gradiente eletroqumico no espao
intramembrana. A protena ATP-sintase permite a passagem desses
ons H+ e, quando os mesmos atravessam por ela, a energia
eletroqumica impulsiona esta protena a catalisar a incorporao de
um fosfato ao ADP, formando o ATP.

Fonte: Silverthorn D. U. Fisiologia Humana uma abordagem integrada. SP: Manole,

2003

ALTERAO DA SNTESE DE ATP

Inibio da formao de acetil-CoA
depletores da Co-A
etanol

inibidores da gliclise
iodoacetato

inibidores da oxidao de
cidos graxos
cido 4-pentenico

inibidores da piruvato desidrogenase

arsenito

ALTERAO DA SNTESE DE ATP

Inibio do ciclo do cido ctrico
inibidores da aconitase
fluoroaceato
inibidores da isocitrato
desidrogenase
diclorovinilcistena
inibidores da -cetoglutarato
desidrogenase
etanol
inibidores da succinato
desidrogenase
diclorovinilcistena,
fungicidas

Acetil-CoA
Oxaloacetato
Malato
desidrogenase
Malato
Fumarase
Fumarato

Citrato sintase
Citrato
Aconitase

Isocitrato
Isocitrato
desidrogenase
-cetoglutarato

Succinato
-cetoglutarato
desidrogenase
desidrogenase
Succinato
Succinil-CoA
Succinil-CoA
sintetase

ALTERAO DA SNTESE DE ATP

Inibio do transporte de eaceptores de e CCl4, doxorrubicina

inibidores dos complexos

transportadores
I: rotenona, paraquate
III: antimicina-A
IV: cianeto, CO
inibidores de mltiplos
locais: MPP+, dinitroanilina
Fonte: Lehninger A.L. et al. Princpios de Bioqumica. SP: Sarvier, 1996.

ALTERAO DA SNTESE DE ATP

Inibio da chegada de oxignio cadeia
transportadora
agentes que causam paralisia respiratria
depressores SNC, convulsivantes
agentes que causam isquemia
alcalides do ergot, cocana
agentes que inibem o transporte de oxignio
pela hemoglobina
CO, agentes metemoglobinizantes (nitrito)

ALTERAO DA SNTESE DE ATP

Inibidores da fosforilao do ADP
Inibidores da ATP sintase
oligomicina, DDT, clordecona
Inibidores do transportador de fosfato
p-benzoquinona
Desacopladores (prejudicam potencial de
membrana mitocondrial)
ionforos: pentaclorofenol, herbicidas,
amiodarona

CLCIO INTRACELULAR
Importante para vrias funes celulares
Excesso citotoxicidade
Mecanismos de controle dos nveis
intracelulares de Ca2+
Bomba de Ca2+ e Ca2+/Na+
Seqestro pelo retculo endoplasmtico e
pelas mitocndrias

AUMENTO DO CA2+ INTRACELULAR

Aumento do influxo
Abertura de canais inicos
glutamato
Dano membrana plasmtica
ionforos: clordecona, metilmercrio
enzimas hidrolticas: fosfolipases ofdicas
peroxidao lipdica: CCl4
Diminuio do efluxo
Inibio dos transportadores de Ca2+ na membrana
celular, retculo ou mitocndria
ligantes covalentes: paracetamol, clorofrmio, CCl 4
diminuio da sntese de ATP: cianeto

AUMENTO DO CA2+ INTRACELULAR

Mobilizao de reservatrios
intracelulares
Dano membrana mitocondrial
hidroperxidos, MPP+, ROS
Ao no retculo endoplasmtico
lindano (agonista de receptor IP3)

ESTRESSE OXIDATIVO

RL, ROS
ou RNS

Sistema
antioxidante

Injria celular
RL: radicais livres; ROS: espcie reativa de oxignio; RNS: espcie reativa de nitrognio

INDUO DE ESTRESSE OXIDATIVO POR

AGENTES TXICOS
Gerao de radicais livres
paracetamol, paraquate, doxorrubicina,
Cr, Pb

Reduo da atividade do sistema de

defesa antioxidante
inibio da atividade dos componentes
Pb, Hg

depleo dos componentes por excesso

de produo de RL

ALVOS DOS RADICAIS LIVRES

R a d ic a is liv r e s
L ip d e o s
in s a tu r a d o s

c id o s
n u c le ic o s

P r o te n a s

P o lis s a c a r d e o s

P e r o x id a o
lip d ic a

M o d if ic a o
de bases

In a tiv a o

D e s p o lim e r iz a o

A lte r a e s d a s
m e m b ra n a s

M u ta e s

A lte r a e s e s tr u tu r a is
e m e ta b lic a s

MECANISMOS DE TOXICIDADE
CONSIDERAES FINAIS
Muitos so os mecanismos de toxicidade e
eles podem ocorrer
Concomitantemente
Pb altera quimicamente protenas
especficas, mobiliza Ca2+ intracelular,
leva a estresse oxidativo
Seqencialmente
gerao de RL pelo paraquate lesar
membrana e ento haver de Ca2+
intracelular

MECANISMOS DE TOXICIDADE
CONSIDERAES FINAIS
Existem agentes com mecanismos mais seletivos e,
portanto, efeito mais localizado
curare
Outros tm mltiplos mecanismos e induzem
mltiplos efeitos
Pb
efeitos hematolgicos por inibir enzimas com
grupamento -SH
efeitos centrais por alterar neurotransmisso
hipertenso por estresse oxidativo e alterao
de Ca2+

MECANISMOS DE TOXICIDADE
CONSIDERAES FINAIS
Alguns efeitos resultam de mltiplos
mecanismos
hipertenso induzida pelo Pb
ROS so vasoconstritores
Inibio da NO sintase NO, que
vasodilatador
Ca2+ na musculatura lisa tnus vascular
Ca2+ nas clulas justaglomerulares libera
renina

INTERAES

MECANISMOS DE INTERAES
Toxicocintico
fenilbutazona e varfarina
bicarbonato e barbituratos
Toxicodinmico
lcool e benzodiazepnicos
opiides e naloxona
Qumico
metais e quelantes

Resultado da interao

Diminuio do efeito

Aumento do efeito

Sinergismo

Adio

Potenciao

Farmacolgico

Competitivo

Antagonismo

Funcional
Fisiolgico

No Competitivo

Qumico

ILUSTRAO DOS DIFERENTES TIPOS DE

INTERAES
Efeito do
agente A

Efeito do
agente B

Efeito de
A+B

Adio

20%

30%

50%

Sinergismo

20%

30%

100%

Potenciao

0%

30%

50%

20%

30%

5%

Interao

Antagonismo

Fonte: modificado de
http://www.sis.nlm.nih.gov/enviro/toxtutor/Tox1/a42.htm

ANTAGONISMO FARMACOLGICO
COMPETITIVO
Agonista

Antagonista competitivo

O antagonista compete com o agonista pelo

receptor
O antagonismo pode ser revertido
aumentando-se a concentrao do agonista

ANTAGONISMO FARMACOLGICO
NO COMPETITIVO
Agonista

Antagonista no
competitivo

A ligao do antagonista altera o stio de

ligao do agonista, impedindo-o de se ligar
O antagonismo no pode ser revertido
aumentando-se a concentrao do agonista

ANTAGONISMO FISIOLGICO
FUNCIONAL
Agentes atuam em diferentes receptores
produzindo efeitos opostos que se
contrabalanam
DDT e benzodiazepnicos
DDT fechamento canais Na+
hiperexcitabilidade neuronal
Benzodiazepnicos ao do GABA
depresso neuronal

ANTAGONISMO QUMICO
Interao qumica direta entre dois
agentes
metais e quelantes

FASE IV CLNICA
a fase em que h evidncias de sinais e
sintomas, ou ainda alteraes patolgicas
detectveis mediante provas diagnsticas,
caracterizando

os

efeitos

nocivos

provocados pela interao do toxicante

com o organismo

INTOXICAO

Processo patolgico causado por substncias

qumicas e caracterizado por desequilbrio
fisiolgico
secundrios
a
modificaes
bioqumicas no organismo.

Processo evidenciado por sinais e sintomas

ou mediante exames laboratoriais

PROCESSO DE ALCANCE DO STIO

DE AO PELO TOXICANTE
Local de exposio: pele, trato GI, trato respiratrio, placenta

Toxicante
Absoro
Distribuio para o alvo
Reabsoro
Ativao

X
X
X
X

Eliminao pr-sistmica
Distribuio longe do alvo
Excreo
Destoxificao

Toxicante final
Molcula-alvo (protena, lipdio, cido nuclico e
macromolcula) ou stio-alvo de ao
Fonte: Gregus; Klaassen (2001)

ESPECTRO DOS EFEITOS TXICOS

Efeito local
Efeito sistmico
efeito reversvel
efeito irreversvel

Efeito imediato
Efeito tardio
alteraes genticas
mutagnicos
carcinognicos
teratognicos

FIGURA-BASE PARA A CLASSIFICAO GERAL

DOS EFEITOS TXICOS

VIA DE EXPOSIO

SUBSTNCIA
TXICA

ABSORO

PELE OU MUCOSA

TOXICIDADE LOCAL

TECIDO CELULAR
RGO

TOXICIDADE SISTMICA

Fonte: Ballantyne et al., 1999 apud Paoliello, 2003

CLASSIFICAO E EVOLUO DA INTOXICAO

EM FUNO DO TEMPO

Fonte: Repetto, 1997

INTOXICAO A LONGO PRAZO:

ACUMULAO DO TOXICANTE NO ORGANISMO

Fonte: Lauwerys & Lauenne apud Chasin; Azevedo, 2003

INTOXICAO A LONGO PRAZO:

SOMA DOS EFEITOS DO TOXICANTE

Fonte: Lauwerys & Lauenne apud Chasin; Azevedo, 2003