Agar T.C.B.S.

Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa

Uso

Medio selectivo y diferencial para el

aislamiento y cultivo de:

Vibrio cholerae

Vibrio parahemolyticus

Vibrio vulnificus

Otras especies de Vibrio

A partir de heces, aguas y alimentos.

Tambin es conocido con el nombre

Agar
Tiosulfato
Citrato
Bilis
Sacarosa, o como Agar Selectivo
para Vibrios.

Vibrio

Los vibrios son bacterias generalmente

halotolerantes y mviles por flagelo polar que
son habitantes naturales del agua salobre y
salada en todo el mundo.

La enfermedad intestinal humana se ha asociado

con el consumo de agua y mariscos
contaminados. Vibrio cholerae es el agente
etiolgico de una diarrea secretora (clera),
propagada mediante la ingestin de agua y
alimentos contaminados y por la va fecal-oral.
Otras varias especies de Vibrio , por ejemplo, V. parahaemolyticus y V.
fluvialis, son la causa de la gastroenteritis aguda.
Adems, varias especies de Vibrio , por ejemplo, V. alginolyticus, V. vulnificus
y V. damsela se asocian con las infecciones extra intestinales, tales como
infecciones de heridas, septicemia, meningitis y otras.
Se ha demostrado que las infecciones de lesiones con Vibrio ocurren en especial
si los pacientes tuvieron contacto con agua salada y salobre

Fundamento

El extracto de levadura, la peptona de carne y la triptena aportan los nutrientes

para el desarrollo microbiano.

La bilis de buey, el citrato de sodio y el pH alcalino inhiben el desarrollo de flora

acompaante, favoreciendo el crecimiento de Vibrio spp.

El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico y debido a su alta concentracin

tambin contribuye a la selectividad del medio.

La sacarosa es el hidrato de carbono fermentable y el azul de bromotimol y azul de

timol son los indicadores de pH que en un ambiente alcalino le otorgan al medio de
cultivo el color verdeazulado y viran al color amarillo en medio cido (por
utilizacin de la sacarosa).

El tiosulfato de sodio es la fuente de azufre y junto con el citrato ferrico permiten

la deteccin de la produccin de cido sulfhdrico por formacin de un compuesto
color negro. El agar es el agente solidificante.

Caractersticas del medio

Color: Verde azulado

pH: 8,6 +- 0,2

Almacenamiento: 2-8C

Incubacin: Aerobia a 35-37C durante 18-24 horas.

Siembra: Estra, agotando el inoculo

Transporte

Este medio se utiliza para el aislamiento de las especies Vibrio a partir de

muestras fecales (en especial si los pacientes han consumido mariscos) o de
muestras clnicas extraintestinales si se sospecha la presencia de alguna
especie Vibrio.

Tambin se pueden utilizar muestras tales como torundas rectales, vmito y

muestras de alimentos, en especial mariscos.

Las torundas deben transportarse en medio de transporte Cary y Blair porque

las especies de Vibrio son particularmente sensibles a la deshidratacin. Todas
las muestras intestinales y muestras de alimentos pueden colocarse en tubos
con agua de peptona alcalina para evitar la deshidratacin de los materiales y
deben transportarse al laboratorio sin demora.

Los tiempos de transporte de ms de 8 horas reducen la viabilidad.

No se debe congelar las muestras.

Caractersticas de las colonias

Vibrio cholerae: Crecen colonias amarillas de 2-3 mm de dimetro, de borde

traslcido.

Vibrio alginolyticus: Crecen como colonias amarillas mucoides.

Vibrio parahaemolyticus: Crecen colonias con centro verde, borde traslcido

Vibrio hollisae: Vibrio que no crecen en agar T.C.B.S.

Pseudomona aeruginosa: Inhibido, si crece son colonias color verde azulado.

Aeromonas hydrophila: Inhibido

Enterococcus faecalis: Inhibido, si crece son colonias pequeas amarillas

Escherichia coli: Inhibido, si crece son colonias pequeas amarillas

Proteus mirabilis: Crecimiento inhibido, si no es inhibido crecen colonias de

centro verde y bordes traslucidos

Vibrio cholerae

Microorganismos fermentadores de sacarosa: colonias amarillas.

Vibrio parahaemolyticus

Microorganismos no fermentadores de sacarosa: colonias del color del

medio, con centro verde.

Comparacin de colonias

Limitaciones del medio

Realizar identificacin bioqumica a las colonias presuntivas de Vibrio spp.

Se recomienda no realizar la prueba de la oxidasa a las colonias de T.C.B.S.

Medio porque pueden obtenerse resultados falsos negativos.

Es conveniente sembrar la muestra en paralelo con un medio de cultivo

nutritivo no selectivo ya que algunas cepas de Vibrio pueden no desarrollar
satisfactoriamente en T.C.B.S. Medio.

Algunas cepas de Vibrio cholerae pueden fermentar lentamente la sacarosa y

observarse de color verdoso a las 24 horas de incubacin.

Algunas cepas de Proteus y Enterococos pueden crecer y observarse como

colonias pequeas.

El cultivo en este medio no es optimo para pruebas de aglutinacin con

antisuero

Noticias sobre el genero Vibrio

Catalogado por la prensa como la bacteria come carne Vibrio vulnificus esta
causando temor en las costa de EEUU, la bacteria que vive en agua clidas
puede penetrar al cuerpo por heridas abiertas.

Mas informacin:

http://
cl.tuhistory.com/noticias/la-terrorifica-bacteria-carnivora-que-ya-devoro-sucuarta-victima-en-eeuu

http://
www.telemundo47.com/noticias/Temor-en-las-playas-por-bacteria-come-carnevibrio-vulnificus-307876201.html

Bibliografa
Britanialab.com
BD.com