Professional Documents
Culture Documents
MICROBIOLOGA
9/29/16
PRCTICA N1
Bioseguridad en el laboratorio
microbiolgico. Materiales.
Objetivo
Ensear al alumno la importancia de la
higiene, limpieza y desinfeccin durante
la preparacin de productos alimenticios.
Mtodo: Preparacin de materiales de
laboratorio de uso en microbiologa
9/29/16
A. Materiales e indumentaria
proporcionada por los alumnos
Los alumnos ingresarn al laboratorio con
guardapolvo, cabello recogido en un moo
alto, con zapatos cerrados y sin objetos
colgantes como pulseras, aretes largos o
anillos.
Los ensayos se realizarn con mascarilla,
gorro cobertor, guantes descartables y
lentes de proteccin. (de uso personal).
9/29/16
Material
Gradillas para tubos 20 x 200
Mango de siembra (Asa de Kolle)
Matraz Erlenmeyer 250 ml
Mechero con alcohol
Pipeta graduada de 5 ml
Placa petri 15 x 100
Tubo de ensayo 16 x 150
Probetas 50 ml
Baguetas
Esptulas c/mango de madera
Beaker 250 ml
EQUIPOS INSTRUMENTOS
Incubadora
Reactivos: Denominacin
Piceta c/desinfectante
(*) El material y los medios se entregarn en forma proporcional a la cantidad de mesas de trabajo, calculados
tomando en cuenta a 5 alumnos por mesa de trabajo.(en caso de ser mas se aumenta las placas a razn de una placa
por alumno)
9/29/16
Cuestionario
Qu diferencia hay entre las siguientes tcnicas de
esterilizacin; pasteurizacin, tindalizacin y uperizacin?
Respuesta
ESTERILIZACION: se encarga de la distraccin de los
microorganismos que se hallan en un objeto, sustancia o lugar,
sometiendo a aquellos que se requiere esterilizar a altas
temperaturas que causan la muerte de los microorganismos.
PASTEURIZACION: es incrementar la temperatura de un
producto alimenticio en estado liquido a nivel que resulta
apenas inferior al necesario para su ebullicin durante un
periodo temporal recluido.
El producto es enfriado con rapidez, de este modo se logra los
microorganismos sin modificar las caractersticas del producto
en cuestin.
9/29/16
9/29/16
INTEGRANTES DE LA
PRACTICA N1
Ccente Mauricio, Maricruz
9/29/16
Referencia bibliogrfica
BROCKS, G, F.; BUTEL, J.S.; MORSE,
S.A. Microbiologa mdica de Jawetz,
Melnick y Adelberg. 18 ed. Mxico,
D.F.: El Manual Moderno, 2005.
9/29/16
PRCTICA N 2:
CONTROL DEL MEDIO AMBIENTE
Objetivo
Conocer la tcnica para observar la contaminacin del medio
ambiente y las distintas colonias de microorganismos que
crecen en los medios de cultivo
10
Material
Placas petri 15 x 100 2 x mesa Con
agar nutritivo
Mangos para asa de Kolle (Los
alumnos traern el asa de siembra)
Mecheros con alcohol
(*) El material y los medios se entregarn en forma
proporcional a la cantidad de mesas de trabajo,
calculados tomando en cuenta a 5 alumnos por
mesa de trabajo.(en caso de ser mas se aumenta las
placas a razn de una placa por alumno)
9/29/16
11
Observaciones y Resultados
Observar y discutir los resultados
despus del tiempo de incubacin.
Cuestionario
Mencione los tiempos de incubacin y
temperatura para bacterias, mohos y
hongos.
Mencione otras tcnicas usadas en el
control del medio ambiente.
9/29/16
13
Respuestas:
9/29/16
14
15
INTEGRANTES DE LA
PRACTICA N2
9/29/16
16
Referencia bibliogrfica
BROCKS, G, F.; BUTEL, J.S.; MORSE, S.A.
Microbiologa mdica de Jawetz, Melnick y
Adelberg. 18 ed. Mxico, D.F.: El Manual
Moderno, 2005.
AGURTO, S. T; GUERRA, S.C. A, Microbiologa
Bsica: coloraciones de bacterias y la bioqumica
en los medios de cultivo. 1a ed. Lima: Unin de
la Universidad Peruana Unin, 2004.
PRATS, GUILLERMO, Microbiologa Clnica, 1a ed.
Buenos Aires: Editorial Medica Panamericana,
Madrid Espaa. 2005.
9/29/16
17
PRCTICA N 3
TECNICAS DE SIEMBRA, AISLAMIENTO, ESTUDIO DE LAS
COLONIAS BACTERIANAS
Introduccin
La siembra de microorganismos es bsico en la identificacin
de las colonias y determinacin de los microorganismos en la
contaminacin, por eso se debe aprender a realizar dichas
tcnicas que nos permitan observar el crecimiento
microbiano.
Objetivo
Ensear al alumno las tcnicas de siembra de las especies
bacterianas de inters en salud y el control de calidad en el
laboratorio microbiolgico.
Mtodo
Siembra en agar nutritivo por la tcnica de extensin, adems
de la siembra con hisopo estril.
9/29/16
18
Materiales e indumentaria
proporcionada por los alumnos
Los alumnos ingresarn al laboratorio con
guardapolvo, cabello recogido en un moo
alto, con zapatos cerrados y sin objetos
colgantes como pulseras, aretes largos o
anillos.
Los ensayos se realizarn con mascarilla,
gorro cobertor, guantes descartables y
lentes de proteccin. (de uso personal).
9/29/16
19
Material
Placas Peri 3 x mesa Estriles
Tubos de ensayo 13 x 100 mm 2 x mesa.
Estriles (conteniendo el caldo nutritivo )
Hisopos largos. 1 x mesa Estriles
Pipetas graduadas de 10 ml 5 ml 1 x mesa
Estriles
Mechero con alcohol
Mango de siembra (Asa de kolle)
Gradillas p/tubos de 13 x 100 mm
Propipetas
EQUIPOS INSTRUMENTOS
Incubadora
9/29/16
20
Reactivo
Agar Nutritivo 20 ml x placa (3 placas x mesa)
Se entregar fundido x plaquear
Caldo nutritivo 3 ml por tubo 13x100 (2 tubos x
mesa)
Desinfectante
En Piceta
21
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Preparacin del rea de trabajo
Ensear al alumno los procedimientos
de trabajo y limpieza del rea de
microbiologa
Preparacin de los medios de cultivo
Placas petri 15 x 100mm
Verter 15-20 ml de Agar fundido a
aproximadamente 40C, sobre las
placas, cerca de un mechero.
9/29/16
22
Siembra
Siembra en estras o por
agotamiento en superficie
Efectuar en la superficie de Agar
nutritivo con la ayuda del asa de
siembra en forma de aro.
23
24
Incubacin
Colocar en incubadora a 37C por 24 hrs. a
48 hrs. la siembra por estras, hisopado y
opcionalmente la siembra por inoculacin.
Observaciones y Resultados
Anotar las caractersticas del crecimiento
bacteriano al cabo de 24 y 48 horas de
incubacin.
Cuestionario
Indique los usos de cada tcnica de
siembra.
9/29/16
25
Referencia bibliogrfica
BROCKS, G, F.; BUTEL, J.S.; MORSE, S.A.
Microbiologa mdica de Jawetz, Melnick y Adelberg.
18 ed. Mxico, D.F.: El Manual Moderno, 2005.
AGURTO, S. T; GUERRA, S.C. A, Microbiologa Bsica:
coloraciones de bacterias y la bioqumica en los
medios de cultivo. 1a ed. Lima: Unin de la
Universidad Peruana Unin, 2004.
ABARCA, KATIA; GARCA, PATRICIA; VIAL, PABLO.
Microbiologa Clnica, 2a ed. Santiago de Chile:
Ediciones Universidad Catlica de Chile, 2001.
9/29/16
26
PRCTICA N 4
ESTUDIO DE LAS ESPECIES BACTERIANAS
Y MEDIOS DE CULTIVOS
Introduccin
Los medios nutritivos permiten el crecimiento
de microorganismos, de acuerdo a los
nutrientes que poseen, y de acuerdo a las
especies microbianas que se pueden sembrar.
Objetivo
Sembrar y reconocer las especies bacterianas,
de acuerdo al tipo de agar de acuerdo a las
colonias que forman.
9/29/16
27
Mtodo
Mtodo de siembra por agotamiento en superficie de
medio slido
28
Material
Mangos de asa de siembra
Mecheros con alcohol
Tubo de ensayo 1 Con cepa bacteriana Gram
(+)
Tubo de ensayo 1 Con cepa bacteriana Gram
(-)
Placas Petri 2 x mesa Estriles .
EQUIPOS INSTRUMENTOS
Incubadora
(*) El material y los medios se entregarn en forma proporcional a la
cantidad de mesas de trabajo, calculados tomando en cuenta a 5 alumnos
por mesa de trabajo.(en caso de ser mas se aumenta las placas a razn de
una placa por alumno)
9/29/16
29
Procedimiento Experimental
A. Preparacin de la zona de trabajo
Desinfectar la zona de trabajo, previa limpieza de las superficies con solucin
jabonosa y esponja, emplear para la desinfeccin Amonio cuaternario
9/29/16
30
E. Incubacin
Se realiza en incubadora a 37C y por 24 hrs. o 48 hrs.
F. Lectura e interpretacin
Leer las placas e identificar las formas de las colonias
de las especies estudiadas.
9/29/16
31
Observaciones y Resultados
Anotar las caractersticas de las colonias en ambas placas y
establecer diferencias.
Respuesta
Observaciones:
AGAR MACCONKEY:
Es un medio selectivo diferencial utilizado para el aislamiento y
diferenciacin de bacilos gran negativo fermentadores y no
fermentadores de lactosa. Se utiliza con frecuencia para el
aislamiento de coniformes.
Resultados:
Colonias tpicas Las colonias de los
microorganismos fermentadores de lactosa
(coliformes) en agar MacConkey son de color rojo
ladrillo, eventualmente rodeadas de bilis
precipitada.
9/29/16
32
9/29/16
33
- Cuestionario
Qu otros medios de cultivo selectivos existen?
Respuesta
Medio corriente:
Caldo nutritivo
Agar nutritivo
Medios mejorados:
Agar sangre
Agar sabouraud
Medios selectivos:
Manitol sal agar
Baird Parker agar
9/29/16
34
35
INTEGRANTES DE LA
PRACTICA N4
Ccente Mauricio, Maricruz
Grijalba Rivas, Lizeth
Guerra Navarro, Sonia
Ramirez Condori, Cynthia
Carolina
9/29/16
36
Referencia bibliogrfica
AGURTO, S. T; GUERRA, S.C. A, Microbiologa Bsica:
coloraciones de bacterias y la bioqumica en los medios de
cultivo. 1a ed. Lima: Unin de la Universidad Peruana Unin,
2004.
PRATS, GUILLERMO, Microbiologa Clnica, 1a ed. Buenos
Aires: Editorial Medica Panamericana, Madrid Espaa. 2005.
GARCA-RODRIGUEZ, JOS A., PICAZ, JUAN J. Compendio de
Microbiologa Medica, 1a ed. Madrid: Editorial Harcourt, 1999.
MURRAY, PATRICK R; ROSENTHAL, KEN S.; PFALLER, MICHAEL
A. Microbiologa mdica. 5a ed. Madrid: Editorial Elsevier,
2006.
9/29/16
37
PRCTICA N 5
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DE
LOS HONGOS
Introduccin
Los hongos constituyen organismos vivos indicadores de
contaminacin y presencia de humedad, son muy frecuentes en
los alimentos, por lo que saber distinguirlos morfolgicamente es
importante para determinar la inocuidad de los alimentos.
Objetivo
Reconocer las caractersticas de las especies de hongos
Mtodo
Cultivo y observacin de hongos en alimentos.
9/29/16
38
Materiales e indumentaria
proporcionada por los alumnos
Los alumnos ingresarn al laboratorio con
guardapolvo, cabello recogido en un moo
alto, con zapatos cerrados y sin objetos
colgantes como pulseras, aretes largos o
anillos.
Los ensayos se realizarn con mascarilla,
gorro cobertor, guantes descartables y lentes
de proteccin. (de uso personal).
Los alumnos traern muestras de alimentos
con hongos mediante procedimiento indicado
por el docente (una semana de siembra)
9/29/16
39
Material
Laminas portaobjeto 30
Placa petri
Laminillas cubreobjetos
Goteros de plstico
Mecheros con alcohol
Pinzas quirrgicas de metal
Mangos de asa de siembra
Baja lenguas
Microscopios
EQUIPOS INSTRUMENTOS
1-2 x mesa
Muestras
Lminas fijadas
10 10 lminas de hongos
(*) El material y los medios se entregarn en forma proporcional a la cantidad de mesas de trabajo, calculados
tomando en cuenta a 5 alumnos por mesa de trabajo.(en caso de ser mas se aumenta las placas a razn de una
placa por alumno)
Los alumnos
con hongos
como
fruta, pan y arroz.
9/29/16 traern muestras de alimentosING.ELA
FALERO
SNCHEZ
40
Procedimiento Experimental
Estudio microscpico de hongos
a. Observacin de Hongos
Previa indicacin del docente se emplear los
siguientes reactivos para observacin de
hongos:
41
b. Observacin
Se realiza en el microscopio ptico. Ubicar
con el objetivo panormico y observar con
el objetivo 40x.
9/29/16
42
Observaciones y Resultados
Indique el aumento del microscopio
para cada observacin.
Esquematice sus observaciones.
Cuestionario
Mencione el ciclo vital de los hongos
ambientales
Mencione 10 clases de hongos
benficos para el hombre y el
proceso de elaboracin.
9/29/16
43
Referencia bibliogrfica
AGURTO, S. T; GUERRA, S.C. A, Microbiologa Bsica:
coloraciones de bacterias y la bioqumica en los medios de
cultivo. 1a ed. Lima: Unin de la Universidad Peruana Unin,
2004.
GARCA-RODRIGUEZ, JOS A., PICAZ, JUAN J. Compendio de
Microbiologa Medica, 1a ed. Madrid: Editorial Harcourt, 1999.
MURRAY, PATRICK R; ROSENTHAL, KEN S.; PFALLER, MICHAEL
A. Microbiologa mdica. 5a ed. Madrid: Editorial Elsevier,
2006.
BROCKS, G, F.; BUTEL, J.S.; MORSE, S.A. Microbiologa mdica
de Jawetz, Melnick y Adelberg. 18 ed. Mxico, D.F.: El Manual
Moderno, 2005.
9/29/16
44
PRCTICA N 6
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DE LOS
PARSITOS
Introduccin
Las parasitosis es una enfermedad comn que se
trasmite fcilmente por los alimentos por ello es
importante reconocerlos morfolgicamente y conocer las
medidas de higiene adecuados para evitar la
contaminacin.
Objetivo:
Reconocer las caractersticas de los parsitos ms
importantes que contaminan los alimentos.
Mtodo
Reconocimiento de parsitos en agua estancada, agua
de pozo o agua de maceteros, y observacin de parsitos
en laminas fijadas.
9/29/16
45
Materiales e indumentaria
proporcionada por los alumnos
Los alumnos ingresarn al laboratorio con
guardapolvo, cabello recogido en un
moo alto, con zapatos cerrados y sin
objetos colgantes como pulseras, aretes
largos o anillos.
Los ensayos se realizarn con mascarilla,
gorro cobertor, guantes descartables y
lentes de proteccin. (de uso personal).
9/29/16
46
Material
Laminas portaobjeto 30
Placa petri
Laminillas cubreobjetos
Goteros de plstico
Mecheros con alcohol
Equipos instrumentos
Microscopios 1-2 x mesa
Reactivos
Lugol .2 fco.
Cloruro de sodio 0.85 %
Desinfectante En Piceta
Aceite de inmersin 1 gotero
(*) El material y los medios se entregarn en forma proporcional a la cantidad de mesas de trabajo, calculados
tomando en cuenta a 5 alumnos por mesa de trabajo.(en caso de ser mas se aumenta las placas a razn de
una placa por alumno)
ING.ELA FALERO
47
Los9/29/16
alumnos traern muestras de agua estancada,
agua deSNCHEZ
pozo, agua de maceteros.
Procedimiento Experimental
Estudio morfolgico de los parsitos
a. Estudio morfolgico de parsitos
adultos.
Efectuar la observacin microscpica de los
parsitos con ayuda de una lupa.
b. Estudio morfolgico de parsitos
(OPCIONAL).
Se efecta con un frasco con huevos y
quistes de parsitos. Colocar una gota de
muestra en una lmina portaobjeto y aadir
una gota de lugol, se coloca una laminilla y se
observa al microscopio
9/29/16
48
Observaciones y Resultados
Indique el aumento del microscopio
para cada observacin.
Esquematice sus observaciones.
Cuestionario
Grafique el ciclo biolgico de Enterobius
vermicularis, scaris lumbricoides,
Uncinarias, Strongyloides stercolaris,
Taenia saginata
9/29/16
49
Respuesta
Observamos los distintos
parsitos :
Enterobius Vermiculares
(oxiuros ) en 40x.
9/29/16
50
Fasciola Hepatica
(huevo) en 10x.
Schistosoma Mansoni
en 4x.
Fasciola Hepatica
(parasito adulto) en 40x
9/29/16
51
9/29/16
52
9/29/16
53
INTEGRANTES DE LA PRACTICA N 6
9/29/16
54
Referencia bibliogrfica
AGURTO, S. T; GUERRA, S.C. A, Microbiologa Bsica:
coloraciones de bacterias y la bioqumica en los medios de
cultivo. 1a ed. Lima: Unin de la Universidad Peruana
Unin, 2004.
GARCA-RODRIGUEZ, JOS A., PICAZ, JUAN J. Compendio de
Microbiologa Medica, 1a ed. Madrid: Editorial Harcourt,
1999.
MURRAY, PATRICK R; ROSENTHAL, KEN S.; PFALLER,
MICHAEL A. Microbiologa mdica. 5a ed. Madrid: Editorial
Elsevier, 2006.
BROCKS, G, F.; BUTEL, J.S.; MORSE, S.A. Microbiologa
mdica de Jawetz, Melnick y Adelberg. 18 ed. Mxico, D.F.:
El Manual Moderno, 2005.
9/29/16
55