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Coloraciones Tisulares

Coloracin de Hematoxilina Eosina

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Se denomina as a la coloracin

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

tisular mas utilizada en Histopatologa. El mtodo consta de una Tincin


Nuclear (con el colorante Hematoxilina) que brinda una tonalidad prpura, y
una Tincin Citoplasmtica (con el colorante Eosina) que brinda una tonalidad
rosada.

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Al trmino se obtiene como resultado:
Ncleo: Ntido, con buena definicin del detalle, pudiendo evidenciarse el
patrn de cromatina.
Citoplasma: De aspecto transparente, que permite apreciar las
caractersticas citoplasmticas.

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Estufa a 60C x 60

CITOPLASMA
Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

NUCLEO

Parafina

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Luego de la Seccin con el Micrtomo, todo el tejido se encuentra infiltrado de


Parafina la cual debe ser reemplazada por molculas que permitan el ingreso y
desplazamiento de los colorantes, para ello se eleva la temperatura a 60C que
es el punto de licuefaccin de la Parafina, eliminndose fsicamente la mayor
cantidad de este compuesto.
Parafina
Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 1.- Xilol x 5

CITOPLASMA
Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

NUCLEO

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un primer bao de Xilol al ser miscible con la Parafina y encontrarse en mayor


cantidad, busca su reemplazo de los espacios intra y extracelulares, ya que los
posteriores proceso de coloracin emplean sustancias que nos son miscibles en
Parafina.
Parafina
Xilol
Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

Parafina

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 2.- Xilol x 5

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un segundo bao de Xilol asegura el reemplazo de la Parafina de los espacios


intra y extracelulares

Xilol

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 3.- Alcohol Absoluto x 5

CITOPLASMA
OH
OH

OH
OH

NUCLEO

OH

OH
OH

OH
OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un primer bao de Alcohol al ser miscible con el Xilol y encontrarse en mayor


cantidad, busca su reemplazo de los espacios intra y extracelulares, ya que los
posteriores proceso de coloracin emplean sustancias que nos son miscibles en
Xilol.
Alcohol
Xilol
Absoluto
OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

OH

OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 4.- Alcohol Absoluto x 5

CITOPLASMA
OH
OH

OH
OH

NUCLEO

OH

OH
OH

OH
OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un segundo bao de Alcohol asegura el reemplazo del Xilol de los espacios intra
y extracelulares

Alcohol Absoluto
OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

OH

OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 5.- Alcohol 96% x 5

CITOPLASMA

OH
OH

OH
OH

NUCLEO

OH

OH
OH

OH
OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un primer bao de Alcohol de 96% presenta 4% de H2O que al ser miscible con
el Alcohol y encontrarse en mayor cantidad, busca su reemplazo en ese
porcentaje de los espacios celulares, de manera gradual para no afectar su
morfologa, ya que los posteriores proceso de coloracin emplean como solvente
el H2O
Alcohol
Alcohol
Absoluto
96%

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

OH

OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 6.- Alcohol 90% x 5

CITOPLASMA
OH

OH

OH

OH
OH

NUCLEO

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un segundo bao de Alcohol de 90% presenta 10% de H2O que al ser miscible
con el Alcohol y encontrarse en mayor cantidad, busca su reemplazo en ese
porcentaje de los espacios celulares, de manera gradual para no afectar su
morfologa, ya que los posteriores proceso de coloracin emplean como solvente
el H2O
Alcohol 90%
96%

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
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5
5
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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 7.- Alcohol 80% x 5

CITOPLASMA
OH

OH

NUCLEO

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un tercer bao de Alcohol de 80% presenta 20% de H2O que al ser miscible con
el Alcohol y encontrarse en mayor cantidad, busca su reemplazo en ese
porcentaje de los espacios celulares, de manera gradual para no afectar su
morfologa, ya que los posteriores proceso de coloracin emplean como solvente
el H2O
Alcohol 80%
90%

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
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5
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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 8.- Alcohol 70% x 5

CITOPLASMA

OH

NUCLEO

OH
OH
OH
OH
OH
OH

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un cuarto bao de Alcohol de 70% presenta 30% de H2O que al ser miscible con
el Alcohol y encontrarse en mayor cantidad, busca su reemplazo en ese
porcentaje de los espacios celulares, de manera gradual para no afectar su
morfologa, ya que los posteriores proceso de coloracin emplean como solvente
el H2O
Alcohol 70%
80%

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 9.- Agua Destilada x 5

CITOPLASMA

NUCLEO

OH

OH

OH

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un ltimo bao en Agua Destilada que presenta el 100% de H2O que al ser
miscible con el Alcohol y encontrarse en mayor cantidad, busca su reemplazo
absoluto de los espacios celulares, y al haberse realizado de manera gradual, no
afecta la morfologa celular, quedando todo dispuesto para los posteriores
procesos de coloracin que emplean como solvente el H2O
Agua
Alcohol
Destilada
70%

OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 10.- Hematoxilina de Harris x 10

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Las molculas colorantes de Hematoxilina de Harris penetrarn en la clula y


se dirigirn al ncleo de la misma por un proceso Fsico Qumico del Tipo
Atraccin Electrosttica.
Esta unin se debe gracias a los grupos Fosforitos cidos (-) del ncleo que le
dan carga global Negativa a la estructura celular tindolo de un color violeta.
Hematoxilina de Harris

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 11.- Agua Destilada x 30

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

El Agua Destilada eliminara por arrastre fsico el exceso de colorante intra y


extracelular que no este ligado al ncleo. Finalmente solo permanecern unidos
al ncleo las molculas colorantes unidas por diferencia de cargas elctricas
con este.
Hematoxilina
Agua Destilada
de Harris

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 12.- Agua Acida 1% x 2

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

El Agua Acida es una dilucin del cido Clorhdrico al 1%, por lo que presenta
una carga fuertemente cida (-). Las Cargas Negativas ingresarn a la clula y
se unirn por diferencia de carga con las Cargas Positivas, en este caso, con los
Grupos Auxocromos (+) de las molculas de Hematoxilina.
Agua
AguaCorriente
Acida

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 12.- Agua Acida 1% x 2

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Esta unin le darn carga global negativa a algunas molculas de Hematoxilina


separndolas del ncleo, logrando la decoloracin parcial, evitando la
sobresaturacin de colorante en el ncleo que podran impedir la observacin
de finos detalles nucleares.
Agua Acida

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 13.- Agua Destilada x 30

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

El enjuague con Agua Destilada eliminar el exceso de Agua cida (-) logrando
que las molculas de Hematoxilina intracelulares separadas sean eliminadas
por arrastre fsico del interior de la clula. Finalmente solo permanecern al
interior de la clula las molculas de Hematoxilina que se encuentren unidas
electrostticamente al ncleo celular.
Agua
Agua
Corriente
Acida

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 14.- Agua Amoniacal x 10

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

El Agua Amoniacal es una solucin alcalina (pH: 8) y los Grupos Auxocromos


de las molculas de Hematoxilina son Indicadores de pH que adoptan una
tonalidad rojiza con pH<3 y una tonalidad azulada con pH >3, al encontrarse en
un pH de 8 el ncleo adopta un color fuertemente azulado, por este motivo a
este paso se le conoce tambin como Azulamiento.
Agua
Agua Amoniacal
Corriente

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 15.- Agua Destilada x 30

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

El Agua Destilada eliminar el exceso de Agua Amoniacal evitando que las


molculas de Hematoxilina unidas al ncleo sigan virando su color. Finalmente
la tincin nuclear de la clula habr terminado con molculas de Hematoxilina
unidas fuertemente al ncleo y citoplasma con abundantes molculas de agua.
Agua
Agua Amoniacal
Corriente

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 16.- Eosina Yellow x 2

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

La Eosina Yellow penetrar en la clula y se unirn a los componentes


citoplasmticos de carga bsica (+) como con los grupos amino ionizados (NH4+)
de la mayor parte del citoplasma no especializado, filamentos y fibras, por un
proceso Fsico Qumico del Tipo Atraccin Electrosttica, presentando auto
fluorescencia espontnea y brindando tonalidades entre el rojo y el rosa.
Eosina Yellow

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 17.- Alcohol 70% x 5

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un primer bao de alcohol busca eliminar por arrastre fsico todas las
molculas de Eosina Yellow (solubles en alcohol) que no se encuentren ligadas a
algn componente proteico citoplasmtico de la clula. Asimismo busca
eliminar gradualmente el agua intracelular ya que los posteriores procesos de
Aclaramiento y Montaje emplean insumos que nos son miscibles en Agua.
Alcohol
Eosina Yellow
70%
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 18.- Alcohol 80% x 5

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un segundo bao de Alcohol de 80% presenta 80% de OH que al ser miscible


con el Agua y encontrarse en mayor cantidad, busca su reemplazo en ese
porcentaje de los espacios celulares, de manera gradual para no afectar su
morfologa, ya que los posteriores procesos de Aclaramiento y Montaje emplean
insumos que nos son miscibles en Agua.
Alcohol 80%
70%
OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 19.- Alcohol 90% x 5

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un tercer bao de Alcohol de 90% presenta 90% de OH que al ser miscible con
el Agua y encontrarse en mayor cantidad, busca su reemplazo en ese porcentaje
de los espacios celulares, de manera gradual para no afectar su morfologa, ya
que los posteriores procesos de Aclaramiento y Montaje emplean insumos que
nos son miscibles en Agua.
Alcohol 90%
80%
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 20.- Alcohol 96% x 5

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un cuarto bao de Alcohol de 96% presenta 96% de OH que al ser miscible con
el Agua y encontrarse en mayor cantidad, busca su reemplazo en ese porcentaje
de los espacios celulares, de manera gradual para no afectar su morfologa, ya
que los posteriores procesos de Aclaramiento y Montaje emplean insumos que
nos son miscibles en Agua.
Alcohol 96%
90%
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 21.- Alcohol Absoluto x 5

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un primer bao de Alcohol Absoluto asegura la eliminacin completa de


molculas de H2O

Alcohol
Alcohol
Absoluto
96%
OH
OH

OH
OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH
OH

OH

OH

OH

OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 22.- Alcohol Absoluto x 5

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un segundo bao de Alcohol Absoluto presenta 100% de OH que al ser miscible


con el Agua y encontrarse en mayor cantidad, busca su reemplazo total de los
espacios celulares, de manera gradual para no afectar su morfologa, ya que los
posteriores procesos de Aclaramiento y Montaje emplean insumos que nos son
miscibles en Agua.
Alcohol Absoluto
OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH

OH

OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 23.- Xilol x 5

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un primer bao de Xilol al ser miscible con el alcohol, busca su eliminacin de


los espacios intra y extracelulares, ya que el posterior proceso de Montaje
emplean sustancias que nos son miscibles en Alcohol. Adicionalmente el Xilol
cambia el ndice de Refraccin de la Clula transparentndola y permitiendo
una mejor observacin de detalles celulares.
AlcoholXilol
Absoluto

OH

OH

OH

OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH
OH

OH

OH

OH

OH

OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- 24.- Xilol x 5

NUCLEO

CITOPLASMA

Membrana Celular Membrana Celular Membrana Celular

Un segundo bao de Xilol asegura la completa eliminacin del alcohol y


culmina con el proceso de transparentar las estructuras celulares.

Xilol

MONTAJE
Es el procedimiento que impedir la resequedad y desintegracin de las
clulas, preservando la lamina citolgica para su archivamiento
posterior a la lectura microscpica.
Consiste en la unin de la lamina portaobjeto con la laminilla
cubreobjeto mediante una resina lo mas transparente posible y cuyo
ndice de Refraccin sea semejante a la del vidrio.

COLORACIONES TISULARES
Coloracin de Hematoxilina Eosina.- Comprende 24 pasos agrupados en
6 etapas (desparafinizacin, hidratacin, tincin nuclear, tincin
citoplasmtica, deshidratacin, aclaramiento) con el uso de 2 colorantes
(Hematoxilina de Harris y Eosina Yellow).
1.-Xilol
2.-Xilol
3.-Alcohol Absoluto
4.-Alcohol Absoluto
5.-Alcohol 96
6.-Alcohol 90
7.-Alcohol 80
8.-Alcohol 70
9.-Agua Destilada
10.-Hematoxilina de Harris
11.-Agua Destilada
12.-Agua cida
13.-Agua Destilada
14.-Agua Amoniacal
15.-Agua Destilada
16.-Eosina Yellow
17.-Alcohol 70
18.-Alcohol 80
19.-Alcohol 90
20.-Alcohol 96
21.-Alcohol Absoluto
22.-Alcohol Absoluto
23.-Xilol
24.-Xilol

5
5
5
5
5
5
5
5
5
10
30
2
30
10
30
2
5
5
5
5
5
5
5
5

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Desparafinizacin
Desparafinizacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Hidratacin
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Nuclear
Tincin Citoplasmtica
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Deshidratacin
Aclaramiento
Aclaramiento

=> Colorante

=> Colorante

angello2001@ hotmail.com
991083044

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