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Estructura bacteriana
Peptidoglicán
Proteína A
Cápsula difusa
Staphylococcus aureus. FACTORES DE VIRULENCIA
ENZIMAS TOXINAS
Catalasa alfa,beta,gama
toxinas
Coagulasa Leucocidina
Hialuronidasa Exfoliatina A y B
Nucleasa SSTT-1
B-lactamasa
Staphylococcus aureus. SUPERANTIGENOS
EFECTOS SISTEMICOS
LESIONES CUTANEAS
FIEBRE
HIPOTENSION
SHOCK
FALLA MULTIORGANICA
MUERTE
S.aureus. PORTACION
AUMENTO DE PORTACION EN
DIV, HIV, TRANSTORNOS DERMATOLOGICOS
DIABETICOS QUE RECIBEN INSULINA
HEMODIALIZADOS CRONICOS, CAPD
PERSONAL DE LA SALUD
FACTORES PREDISPONENTES
DIABETES MELLITUS
NEUTROPENIA
FIBROSIS QUISTICA
ADHERENCIA DE SCN
PS/A (polisacárido capsular)
PIA (adhesinas intercelulares polisacáridas)
Esquema de la formación de biofilms por S.epidermidis.
Modificado de Dune. Clin Microbiol Rev, abril, 2002
S. aureus. INFECCIONES
RELACIONADAS
ENFERMEDADES ASOCIADAS A
TOXINAS
SINDROME DE PIEL ESCALDADA
SINDROME DE SHOCK TOXICO
DIARREAS (ENTEROTOXINAS)
ENFERMEDADES ASOCIADAS A
CAPACIDAD INVASIVA
ALFA, BETA Y GAMA HEMOLISINAS
LEUCOCIDINAS
HIALURONIDASA
CATALASA
S. aureus. INFECCIONES
RELACIONADAS
INFECCIONES DE PIEL Y PARTES BLANDAS
FOLICULITIS
FORUNCULOS
IMPETIGO
CELULITIS
MASTITIS
HIDROADENITIS
INFECCIONES NECROTIZANTES DE PIEL Y
PARTES BLANDAS
INFECCION DE
HERIDAS,QUIRURGICAS,TRAUMATICAS,
QUEMADURAS Y MORDEDURAS
MIOSITIS
Inf de piel y partes blandas.
Fernadez-Caniggia y Col.
Curso a distancia De AAM
ENDOCARDITIS Y PERICARDITIS
S. aureus. INFECCIONES
RELACIONADAS
OTITIS MEDIA
SINUSITIS
NEUMONIA
PACIENTES EN ARM
FIBROQUISTICOS
POST-INFLUENZA
SECUNDARIA A ENDOCARDITIS DERECHA (DIV)
HIV
SECUNARIA A INFECCIONES POR P.JIROVECII
EMPIEMA PLEURAL
SECUNDARIO A NEUMONIA
POST-CIRUGIA TORACICA
S. aureus. INFECCIONES
RELACIONADAS
INFECCIONES OCULARES
CONJUNTIVITIS
BLEFARITIS
DACRIOCISTITIS
QUERATITIS
ENDOFTALMITIS
S. aureus Y SCN. INFECCIONES
RELACIONADAS
INFECCIONES ASOCIADAS A CUERPOS
EXTRAÑOS
CATETERES
VALVULA CARDIACA PROTESICA
PARCHES VASCULARES
MARCAPASOS
SHUNTS
SISTEMAS DE HEMODIALISIS Y DIALISIS
PERITONEAL
PROTESIS OSTEOARTICULARES
IMPLANTES MAMARIOS Y PENEANOS
LENTES INTRAOCULARES
S. aureus . INFECCIONES
RELACIONADAS
INFECCION % POR S.aureus
Bacteriemia 15
Endocarditis 30
Herida Quirurgica 20
Osteomielitis 50
-NICHOS ESPECIFICOS:
S.capitis: cabeza
S.auricularis: conducto auditivo externo
- S.saprophyticus: genitourinario
INFECCIONES POR ESTAFILOCOCOS
COAGULASA NEGATIVA
Transplantes
INFECCIONES POR ESTAFILOCOCOS
COAGULASA NEGATIVA
DE CURSO INDOLENTE
FRECUENTEMENTE INVOLUCRAN:
CUERPOS EXTRAÑOS
NEONATOS PREMATUROS
NEUTROPENICOS
CIRUGIA PREVIA
OSTEOMIELITIS EN
SECUNDARIA A INFECCION DE PROTESIS ARTICULAR
ESTERNAL SECUNDARIA A CIRUGIA TORACICA
RELACIONADA A INFECCION DE SISTEMAS DE
HEMODIALISIS
SCN. INFECCIONES ASOCIADAS
A CUERPOS EXTRAÑOS
13
10
46 38 SCN
S.aureus
28 S.viridans
Otros
42 18
Gram +
Gram -
Polimic
HEMOCULTIVOS. IMPORTANCIA
RELATIVA DE CONTAMINANTES
S. aureus 66 55
P. aeruginosa 12 10
E. faecalis 8 7
E. coli 7 6
K. pneumoniae 4 3
E. cloacae 3 3
S . epidermidis 3 3
A. baumannii 2 2
P. vulgaris 2 2
S. marcescens 2 2
H. influenzae no b 1 1
S. agalactiae 1 1
Estreptococo b hemolitico C 1 1
P. mirabilis 1 1
M. morganii 1 1
E. faecium 1 1
P. stutzeri 1 1
S. viridans 1 1
Escherichia spp 1 1
ARTRITIS BACTERIANA. ETIOLOGIA.
GOLDENBERG, D. LANCET; 351. 1998
Todos los 28 10 21
estreptococos
S.pneumoniae 10 0 1
S.pyogenes 8 9 16
Bacilos gram - 19 16 4
H.influenzae 7 0 1
E.coli 6 9 1
Pseudomonas 2 4 1
Otros 4 3 1
N.gonorrhoeae 0,6 3 12
Anaerobios 1,4 2 3
AGENTES ETIOLOGICOS DE ARTRITIS.
HOSPITAL DE NIÑOS RICARDO GUTIERREZ. 1996-2000
Microorganismo N %
S. aureus 46 60
E. cloacae 3 4
E. faecalis 3 4
H. Influenzae b 3 4
Salmonella Enteritidis 3 4
N. menigitidis 3 4
Haemophilus influenzae no b 2 3
K. pneumoniae 2 3
S. pyogenes 2 3
S. pneumoniae 2 3
E. agglomerans 1 1
A. baumannii 1 1
S. agalactiae 1 1
Salmonella Infantis 1 1
Salmonella spp 1 1
S. marcescens 1 1
S. agalactiae 1 1
INFECCIONES URINARIAS POR S.saprophyticus
Visualiz en Gram X X X X
Crecim. en medio X X X X
sólido
Crecim. en multiples
X
muestras
Efluente turbio X
Rpta inflamatoria X X
SCN. CRITERIOS DE JERARQUIZACION EN
HEMOCULTIVOS
CLINICA COMPATIBLE
AISLAMIENTO PRECOZ
1/2 o 1/3 puede ser bacteriemia en cerca del 30% de los casos
G ERM EN Nº %
P . a e r u g in o sa 60 2 7 ,1
K . p n e u m o n ia e 28 1 2 ,6
S .a u re u s 22 9 ,9
S . p n e u m o n ia e 15 6 ,7
H . in flu e n z a e 15 6 ,7
E n te r o b a c te r sp p 13 5 ,8
S .m a rc e sc e n s 11 4 ,9
P . m ir a b ilis 7 3 ,1
M . c a ta r r h a lis 6 2 ,7
E . c o li 6 2 ,7
S . e p id e r m id is 5 2 ,2
P r o v id e n c ia sp p 2 0 ,9
S . m a lto p h ilia 2 0 ,9
S . s a n g u is 2 0 ,9
C . fr e u n d ii 1 0 ,4
ETIOLOGIA
Incidencia documentada por técnicas broncoscópicas. Análisis de 24
estudios y 1.689 episodios. Chastre-Fagon.
Am J Respir Crit Care Med, 165. 2002.
Microorganismo Frecuencia (%)
•P. aeruginosa 24,4
Acinetobacter spp 7,9
S.maltophilia 1,7
Enterobacterias* 14,1
Haemophilus spp 9,8
S.aureus 20,4
S.pneumoniae 4,1
Streptococcus spp 8
SCN 1,4
Neisseria spp 2,6
Anaerobios 0,9
Hongos 0,9
Otros (<1% c/u) 3,8
*E.coli 24%; Proteus spp 22%; Klebsiella spp 15,6%; Enterobacter spp 19%;
Citrobacter spp 5%; Serratia spp 12%; H.alvei 2,1%
ETIOLOGIA
S
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1
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,R
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2GrupoSI
R
L
o c a lidad ,Ce n t ro s P a r ticip a n te s ( T it u la re s )
P
c ia .B ue n o
s A ir e s ,B a hí a B la n c a,H o s p .P r iv a d o d e lS u r( P aris de B a e za,A na M.
)
P
c ia .B ue n o
s A ir e s ,B h aí a B la n c a,IA C A L a b o ra to rio s (P e r
e z,S us a na )
P
c ia -B uen os A ir es ,A v ella n e d a ,S a n a to rio S to iz ( R o d rig o ,M o n ic a )
P
c ia .B ue n o
s A ir e s ,J unín ,H .I n te rz .A g ud os -" D r .A .P iñ e yro "( Ru s t
ic i,Stella)
P
c ia .B ue n o
s A ir e s ,L a P lata ,H o s p .N iñ os S o rM a .L u d o v ic
a (A lts
c h ule r,M a r
ta)
P
c ia .B ue n o
s A ir e s ,L a P lata ,H o s p .I t a lian o ( P a n t o z zi,F la v
ia )
P
c ia .B ue n o
s A ir e s ,M oró n,C lín ica M o d elo ( B a rd i,L etic ia )
P
c ia .B ue n o
s A ir e s ,P e r
g a m in o ,L a b.D r .F u e n te s (S c h u s t erM a rc
e lo)
P
c ia .B ue n o
s A ir e s ,S a n F er n a n d o ,S a n ato r io S a n L uc a s (Ca s e llas,J o seM .)
P
c ia .B ue n o
s A ir e s ,S a n M a r tín ,H o s p .E v a P e ró n (A lm u z a ra,M arisa )
C
a pita lFe deral,H os p .d e C lín ic a s J.d e S a n M a rt ín (F a m iglietti,A nge la )
C
a pita lFe deral,L a b .D o m eq y L afa g e ( F e rn a n d e z C a n ig ia ,L .)
C
a pita lFe deral,F u n d a ció n F a v a lo ro ( F e rn a n d e z ,A n a lia )
C
a pita lFe deral,S an a tor io G re y to n (L a to rra g a ,C la u d ia )
C
a pita lFe deral,H os p .M u ñiz ( Q u in te r o s,M /C ou t
o ,E )
C
a pita lFe deral,C en tr o d e e s t u d io s in fe cto ló g ic o s (S cilin g o,V iv ian a )
C
a pita lFe deral,C em ic S .A .( S m a y ev s k y ,J o r g e lin a )
C
ó rdo b a,H osp .N iño s de Có rd o b a (C a r va ja l,L y d ia )
C
ó rdo b a,H osp .d e C línic as (M o n te ris i,A id a )
E
n tre R í
o s,Pa r a n á ,H os p .M a te rn o I n f a ntilS a n R o q u e ( F e rna n d ez,H e ctor)
E
n tre R í
o s,Sa n a to rio Ad v en tis ta d e lP la ta (P o s s e ,G r a c ie la)
E
n tre R í
o s,G ua le g u a y ch ú,H o s p .C e n t en a rio (
T a n a ro ,J o se )
L
a P a m pa ,Sa n ta R o s a ,H os p .G d o r.C e n te n o ( M o re n o ,N oem i)
Me n do za,S an R a fa e l,H o sp .d e lS u rM en d o c in o ,( S u o n iS chic h i,N )
Misio n es,P os ad a s ,S a na torio N os ig lia (V e rg a ra ,M a rta )
N
e uq u én,H os p .H elle r( P ian c io la ,L u is )
N
e uq u én,P oliclí n ico N eu qu é n ( S o ria n o ,S ilv ia V .)
R
í o N e gro ,Gr a lR o c a ,H o s p .F r a n c is c o L o p e z L im a (D u r a ny ,D a niela)
R
í o N e gro ,Ba rilo c he ,H o sp.R a m ó n C a rrillo ( R u b in s t
e in ,G a b rie la)
S
a lta ,H os p.S a n B e r n ard o ( A r ia s ,C e c ilia )
S
a n Ju an ,H osp .M a r c ialQ u iro g a (C a s tro H u g o )
S
a n Ju an ,H osp .G u ille rm o R a w s o n (N a va r
r o ,R o b e rto )
S
a n ta Fe,H os p .I tu r ra sp e (D e fe n d i,M a rta )
S
a n ta Fe,V en a d o T u e r
to ,H o s p .S a m c o "D r.A .G u tie rre z "( P iñ e ir
o de G a
rcia)
S
a n ta Fe,R os a r io ,C e ntr o M é d ic o y P A M (( S u tic h ,E m a )
S
a n ta Fe,R os a r io ,H o sp .E s c.E va P e ro n (C a s ta g n av iz ,N )
ETIOLOGIA
Incidencia documentada por técnicas broncoscópicas.
Análisis de 31 centreos.
SIR 1996- 2001.
Congreso de SADET 2002.
P. aeruginosa K. pneumoniae
Otras Enterobacterias
(19.3%) (8.5%)
(10.5%)
S. pneumoniae
Acinetobacter spp (4%)
(23.9%)
Haemophilus spp
(3.3%)
S. aureus
(26.4%)
Otros
(4.1%)
60
50
50
40 PreATB
30
28 Penicilina
30 Blasa
20 Mrsa
10
0
1937 1944 1954 1962
ESTAFILOCOCOS.
COMPORTAMIENTO FRENTE A LOS
BETA LACTAMICOS
MECANISMOS
TOLERANCIA
ESTAFILOCOCOS. COMPORTAMIENTO
FRENTE A LOS BETA LACTAMICOS
HOMOGENEA
Resistente
OXA
Verdadera
(mec A +) HETEROGENEA
Hiperproducción de
Resistente ß-lasa (AORSA)
PBPs modificadas
Falsa (MODSA)
IMPACTO CLINICO DE LA
RESISTENCIA A METICILINA
METICILINO R
INTERNACION PROLONGADA
INTERNACION EN UCI O QUEMADOS
FACTORES TERAPIA ATB PREVIA
ASOCIADOS PROXIMIDAD A PCTE INFECTADO O
COLONIZADO
PRESENCIA DE HERIDA QUIRURGICA
DIABETICOS INSULINO DEPENDIENTES
DIV
HEMODIALIZADOS
genmec
gen mecAA
PBP
PBP 2a
2a
Resistencia
Resistencia aa TODOS
TODOS los
los
BETA-LACTAMICOS
BETA-LACTAMICOS
PBPs de Staphylococcus spp.
S a OXA R a OXA
1 1
2 2
2a o 2’
3 3
3’ 3’
4 4
HOMOGENEA HETEROGENEA
S.aureus y S.epidermidis
24 hs de
Pátina o micro-
incubación
Colonias dentro
Del halo = R
METICILINO RESISTENCIA. ANTIBIOGRAMA POR
DIFUSION. CEFOXITINA 30 ug
S.aureus y SCN
25 mm
22 mm
CLSI, 2010.
Screening Oxa 6µg/ml
Sau ATCC 43300
Cepa
Control (+)
clínica (+)
Cepa
Sau ATCC 29213 clínica (-)
Control (-)
S. aureus
CATETERES DE LARGA
PERMANENCIA
TRATAMIENTO ANTIBIOTICO
PREVIO
PEDIATRICOS, DEPORTES DE
CONACTO, CARCELES
Detección de Meticilino-Resistencia
en Staphylococcus spp.
S. aureus y
S.lugdu- < 21 > 22
-- ? ?
nensis
Species Number
S epidermidis 49
S. saprophyticus 14
S. hominis 13
S. haemolyticus 7
S. simulans 6
S. auricularis 4
S. capitis 3
S. cohnii 2
S. warneri 2
TOTAL 100
Vitek GPS-105 card y Test de Difusión vs.
gen mecA para S. Coag. Negativa
Nº OF ISOLATES
Vitek GPS 105 card Disk diffusion
PCR mecA Nº of
(ug/ml) (mm)
detection isolates
0.25 0.5 > 18 17
POSITIVE 54 0 54 1* 53
NEGATIVE 46 30 16* 31 15*
NEGATIVE
without
S. saprophyticus and 30 29 1* 30 0
S. cohnii
S. saprophyticus 13 Negative R* R*
S. cohnii 2 Negative R* R*
S. simulans 1 Negative R* S
S. hominis 1 Positive R S*
Vitek
GPS 105 card Disk diffusion
Specificity without
S. saprophyticus and S. 29/30 (96.7%) 30/30 (100%)
cohnii
PBP2
PBP1 PBP3
Muerte de
PBP2 PBP4
ßlactami MSSA
co
inner contents
released
Staphylococcus aureus
Diagrama 2: S. aureus mecA positivo
PBP2a
PBP3
PBP4
PBP2a
PBP1 PBP3
ßlactamico
PBP2 PBP4
Slidex MRSA Detection kit
Slidex MRSA Detection
Emulsionar
Cultivo puro
5-7 colonias
Paso 1 S. aureus
R3 paso 2
R4
Paso 3 Poner el tubo Paso 4
en heating
block
Enfriar
1 gota R4 Mezclar bien
3 min a>95°C
Slidex MRSA Método
Paso 5
Centrifugar 1500g/5min Paso 6 Sacar
2 x 50 µl del
sobrenadante
Step 7 Aglutinación :
círculo 1 : 50 µl sobrenadante + 1 gota Reactivo 1
círculo 2 : 50 µl sobrenadante + 1 gota reactivo 2
50 µl
50 µl
Girar 3 min
Resultado :
Aglutinación positiva = positiva para PBP2a
= meticilino reistencia
Aglutinación
DETECCION DE METICILINO RESISTENCIA EN S.aureus
TECNICAS DE AGLUTINACION
METODO AUTOR PUBLIC N S E COMENT.
MRSA-SCREEN Louie,L JCM 397 98,5 100 164MSSA,
Junio (100) 197 MRSA y
37 BORSA
MRSA-SCREEN Sakoula,G JCM 310 100 99,1 107 MSSA y
Nov 203 MRSA
2001
MRSA-SCREEN Swenson,J JCM 55 90 100 36 MSSA y
Oct 19 MRSA
(heterog 1 y 2
100% S a 15’
SLIDEX MRSA DETECTION
EVALUATION OF MRSA-SCREEN LATEX FOR
DETECTION OF METHICILLIN-RESISTANT Staphylococcus
aureus. ARGENTINEAN EXPERIENCE #
R. Soloaga, A. Corso, P. Gagetti, D. Faccone, M. Galas
and “MRSA Argentinean Collaborative Group”.
# Abstract en “IX Jornadas Argentinas de Microbiología”. 2002
79 mecA positivo
21 mecA negativo
SLIDEX MRSA DETECTION
# S. aureus, n:100
# EXCELENTE
ESPECIFICIDAD
# BAJA SENSIBILIDAD
Adaptación de “SLIDEX” para
S. Coag. Negativa
1) TPO. DE LECTURA:
3 min. vs 6 min. o 15 min.
Sensibilidad:
c/lectura a los 15 min. 45/54 (83%)
c/ 6 ansas (1µl) 54/54 (100%)
c/ inducc. OXA 54/54 (100%)
Especificidad:
en todos los casos 46/46 (100%)
Perfomance de MRSA ID
N: 998 cepas
Sensibilidad de 96,4% y especificidad de
98,2% a las 24 hs.
Sensibilidad de 98,8% y especificidad de
89,7% a las 48 hs.
RESISTENCIA CROMOSOMICA
ALTERACION EN EL SITIO BLANCO
(SUBFRACCION BETA DE RNA
POLIMERASA DNA DEPENDIENTE)
MECANISMO DE RESISTENCIA
PROTECCION EFLUJO
RIBOSOMAL
TETRACICLINA
TETRACICLINA (R) Y
(R) Y MINOCICLINA (R)
MINOCICLINA (R) TETRACICLINA
(R) Y
MINOCICLINA (S)
RESISTENCIA A QUINOLONAS
FLUORADAS
EFLUJO
NorA
RESISTENCIA A QUINOLONAS
FLUORADAS
GENOTIPOS DE RESISTENCIA EN 90 AISLAMIENTOS CLINICOS DE
S.aureus
GENOTIPO grlA gyrA gyrB norA N(%)
1 No No No No 30 (33,3)
2 Ser80 aPhe No No No 6 (6,7)
3 Ser80 a Phe Ser84 aLeu No No 48 (53,3)
4 Ser80 a Tyr Ser84 a Leu No No 3 (3,3)
5 Glu84 a Lys Ser84 a Leu No No 3 (3,3)
MECANISMO DE RESISTENCIA:
ALTERACION EN SISTEMAS
TRANSPORTADORES DE LA GLUCOSA
6FOSFATO O DEL GLICEROL FOSFATO
INACTIVACION ENZIMATICA POR
CONJUGACION CON GLUTATION
S.saprophytiucs: RESISTENCIA NATURAL
ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA
A MACROLIDOS
INDUCIBLE:
MACROLIDOS DE 14 Y 15 ATOMOS DE C, NO A
LOS DE 16 NI A CLINDAMICINA (SE ACHATA
EL HALO)
EL TRATAMIENTO DE ESTAS CEPAS CON
CLINDA SELECCIONA CONSTITUTIVAS.
CONSTITUTIVA:
MACROLIDOS DE 14,15,16,
ESTREPTOGRAMINAS B Y CLINDAMICINA
OXA
MLS+
GEN
Eri y Cli: R
ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA
A MACROLIDOS POR EFLUJO
SA: ESTREPTOGRAMINA A
vgaA Y vgaB
ESTAFILOCOCOS. RESISTENCIA A
MACROLIDOS POR INACTIVACION
ENZIMATICA
HIDROLASAS CODIFICADAS EN vgbA Y vgbB
(ESTREPTOGRAMINAS B):
ESTREPTOGRAMINAS B
(QUINUPRISTINA)
K. Hiramatsu. Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus: a new model of antibiotics resistance. Lancet Infect Diseases 2001. 1147-155
Síntesis de la pared celular
Antimicrob.Malbran
bacteriana
K. Hiramatsu. Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus: a new model of antibiotics resistance. Lancet Infect Diseases 2001. 1147-155
Síntesis de la pared celular
Antimicrob.Malbran bacteriana
Acción de Vancomicina sobre Staphylococcus spp
K. Hiramatsu. Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus: a new model of antibiotics resistance. Lancet Infect Diseases 2001. 1147-155
CLSI 2010
STAPHILOCOCCUS AUREUS.
SENSIBILIDAD DISMINUIDA A
GLICOPEPTIDOS
RECOMENDACIONES DEL CDC PARA
CONSIDERAR A UNA CEPA COMO GISA O VISA
Geisel R & cols. Eur. J. Microbiol Infect Dis (2000) 20: 685-697
GISA. SENSIBILIDAD ATB
DPC
Hemodializados
HETEROGENICIDAD EN LA
RESISTENCIA a GLICOPEPTIDOS
Se considera hetero-GISA a una cepa que posee
una subpoblación GISA (CIM 8-16 ug/ml) con una
frecuencia de 10-6 o más.
Hiramatsu sostiene que la hetero-GISA es un
precursor de la GISA, en la selección
intratratamiento.
La hetero-GISA puede causar por si misma falla
terapéutica con vancomicina????
OPCIONES TERAPEUTICAS EN LAS
INFECCIONES CAUSADAS POR VISA
Vancomicina+cefpirome
Arbekacina+Ampicilina/sulbactam
Vancomicina+rifampicina
Vancomicina+TMS
RESISTENCIA A VANCOMICINA
VISA I 4-8
VRSA R ≥ 16
*Incluye subpoblaciones de 1/1.000.000 que pueden crecer con >2 ug/ml vanco
Vancomicina: necesidad de revaluar
puntos de corte?
% de éxito terapéutico
% de éxito terapéutico
60 60
56
52
50 50
40 40
30 30 29
20 20
10 10 10 8
0 0
0,5 1a2 0,5 1 2
Sakoulas,G. J Clin Microbiol. 42. 2004 Moise-Broder, P. Clin Infect Dis. 38. 2004
Relación entre CIM a vancomicina y riesgo
de muerte
CIM (ug/ml) Riesgo de mortalidad (OR (95%CI) p
1 1
2 3.63 <0.001
0,5 1 2 5 10
N: 372
CAT AEROBICO OXID MOV ClNA BACI
OBLIGADO
Staphylocccus + -*** -* - + R
Stomatocccus -,+, - + - - S
debil
Micrococcus + + - -** +** S
Planococcus + + ND + + ND
Macrococcus +/- + R
+ - -
* Hay excepciones
^*M.agilis puede ser movil y no desarrollar en ClNa
OXIDACION DE
GLUCOSA FRUCTOSA
Micrococcus - -
Kocuria + +
Pruebas clásicas para diferenciar
estafilococos de micrococos
Producción de ácido a partir de glucosa, en
anerobiosis
Sensibilidad a 200 ug/ml de lisostafina o a 100 ug de
furazolidona
Producción de ácido del glicerol en presencia de 0,4
ug/ml de eritromicina
Todas positivas para estafilococos
MICROCOCOS Y GENEROS
RELACIONADOS
K.rosea +
Microco - - - - - - +
ccus
K.krist- + + + +
inae
D.nishin +
omiyaen
sis
N.halo- +
bia
Micrococcus S S -
K.sedentarius R R +
ARGININA
POSITIVA NEGATIVA(Todos S a meticil y peni)
Kytococcus sedentarius Micrococcus luteus
(R a peni y meticilina) Micrococcus lylae Dermacoccus nishinomiyaensis
Kocuria varians
Kocuria kristinae
Kocuria rosea
ESCULINA
POSITIVA NEGATIVA
Kocuria kristinae M.luteus y M.lylae
K.varians y K.rosea
D.nishinomiyaensis
OXIDACION DE FRUCTOSA
POSITIVA NEGATIVA
K.varians D.nishinomiyaensis (pigm naranja)
GELATINA
POSITIVA NEGATIVA
K.varians K.rosea
ESTAFILOCOCOS COAGULASA POSITIVA
•Staphylococcus aureus (Manitol + en anaerobiosis, diferencia del resto)
-COAGULASA EN PORTAOBJETO
-TEST COMERCIALES:
1ºGENERACION: ERITROCITOS SENSIBILIZADOS CON
FIBRINOGENO PARA DETECTAR FACTOR DE CLUMPING.
2º GENERACION: PARTICULAS DE LATEX Y/O
ERITROCITOS DE CARNERO PARA DETECTAR PROTEINA A Y
FACTOR DE CLUMPING
PROBLEMAS: ALGUNAS CEPAS NO EXPONEN ESTOS AG
DEBIDO A GRAN CANTIDAD DE AG CAPSULAR (SEROTIPO
5 EN MRSA)
3ºGENERACION: INCORPORAN AC CONTRA POLISACARIDO
CAPSULAR O CONTRA AG ESPECIFICO DE GRUPO DE
SUPERFICIE EXTERNA
Prueba de coagulasa
EQUIPO PROTEINA A F.CLUMPING POLISAC.CAPS. AG.SUPERF
SlidexStaphPlus x x x
(Biomeriuex)
StaphaureusPlus x x
(MurexDiagnostic)
PastorexStaphPlu x x x
(Sanofi Diagnostic Pasteur)
COMPARACION DE METODOS DE TERECERA GENERACION
Arjanne, Van Griethuysen y col. J Clin Microbiol, Enero 2001
N=892; 278 MRSA; 171 MSSA Y 443 SCN
GOLD ESTÁNDAR: ACU PROBE
Sensibilidad Especificidad
MS MR MS MR
SlidexStapPlus 98,9 97,1 98,9 98,4
StaphaurexPlus 98,2 98,2 96,2 96,2
PastorexStaphPlus 98,6 98,8 95,7 95,7
TEST COMERCIALES DE AGLUTINACION
PRUEBAS MANUALES
SISTEMAS COMERCIALES
API
VITEK
VERIFICAR AISLAMIENTO
MICROSCAN
PURO A LAS 48-72 HS
PHOENIX
STAPH-ZYM
PRUEBAS GENERALES DE
IDENTIFICACION BIOQUIMICA de SCN
Actividad de:
Fosfatasa alcalina (FAL)
Pirrolidonil aril-amidasa (PYR)
Ornitina decarboxilasa
Arginina dehidrolasa
UREASA
ß-galactosidasa, ß-glucosidasa y ß-glucuronidasa
Producción de acetil metil carbinol (VP)
Reducción de nitratos
Hidrólisis de esculina
Resistencia a: novobiocina ( 5 ug/disco),
polimixina B (300 U/disco) y bacitracina (0,04 U/disco)
Acidez anaeróbica de D-glucosa y D-manitol
PRUEBAS GENERALES DE
IDENTIFICACION BIOQUIMICA de SCN
.D-trehalosa .Maltosa
.D-manitol .Sacarosa
.D-manosa .Rafinosa
.D-turanosa .L-arabinosa
.D-xilosa .Lactosa
.D-celobiosa .N-acetil-glucosamina
ESQUEMAS GENERALES DE
IDENTIFICACION BIOQUIMICA de SCN
NOVO S
UREA + MANOSA + UREA + MANOSA- UREA - MANOSA+ UREA - MANOSA-
Grupo S.saprophyticus + -
Grupo S.cohnii + +
S.cohnii ss cohnii - d
Trehalosa
Grupo S.saprophyticus
S.saprophyticus -
S.hominis ss novobiosepticus +
Xylosa
Grupo S.cohnii
S.xylosus +
S.cohnii ss urealyticum -
Grupo: Novobiocina (S) y Urea (+),
todos rafinosa, arabinosa y xilosa (-)
Germen Man Manosa Treh Aerob Arg Orn ONPG PYR Coag VP Sac
S.hominis sub - - V + V - - - +
hominis
S.warneri v - + - V - - - +
S.pasteuri d - + - - - - - +
S.piscifermentans d - + - - - d nd d
S.epidermidis - + - - V -/+ - - +
S.lugdunensis - + + - - + - + +
S.capitis sub + + - - - -- - d +
urealyticus
S.felis + + + - nd nd + nd - d
S.chromogenes d + + - + - - d - +
S.hycus - + + - + - - - d +
S.caprae d + + - - - - d -
S.simulans + v v - + - + + d +
Grupo: Novobiocina (S) y
Urea (-)
Germen Manos Treh Arg Sac DNas Colonia FAL PYR Man V Xy Orn
a P
S.auricularis - + V V - Pequeña - d - - - -
(lenta
)
S.muscae - + - + - + nd - - + -
S.haemolyticus - + + + - Grande - + d + - -
S.carnosus + d - - - grande + + + + - -
S.lugdunensis + + - + - Grande - + - + - +
Grupo: Novobiocina (R), oxidasa -
Germen Urea Saca Treh Xylosa Manosa
rosa
S. saprophyticus + + + - -
S. hominis sub + + - - -
novobiosepticus
S.xylosus + + - + +
S.cohnii sub + - + - +
urealyticum
S.cohnii sub - - + - d
cohnii
S.klooosii v v + d -
S.arlettae - + + + +
S.gallinarum + + + + +
S.equorum + + + + +
Grupo: Novobiocina (R) y oxidasa
(+)
S. sciuri - - + + v + d
S.caseolyti- - nd d - - - -
cus
S.vitulus - - d + d d -
5)OXIDASA POSITIVA (Todos son arginina -; PYR -; Ureasa -;
Bglucosidasa -;
B glucoronidasa -; galactosidasa-)
S.sciuri subesp sciuri
S.sciuri subesp carnaticus
S.sciuri subesp rodentium
S.lentus
S.vitulus
RAFINOSA
POSITIVA NEGATIVA
S.lentus S.sciuri
S.vitulus
Esc Clumping Hemólisis FAL Man Ara Malt Lac Sac
S.sciuri + +/v +/- v +/d d d d +
S.vitulus d - - - - - - - +
TIPIFICACION DE
ESTAFILOCOCOS
DNAsa POSITIVA
S.aureus (coagulasa +,VP+)
S.schleiferi sub schleiferi (coagulasa -)
S.intermedius (coagulasa +, VP-, PYR y
ONPG +)
S.hyicus (coagulasa +, VP-, PYR y
ONPG -)
ORNITINA DECARBOXILASA
POSITIVA
S.lugdunensis (en 1-8 hs; PYR+)
S.epidermidis (>8 hs; PYR-)
RESISTENCIA A NOVOBIOCINA (<16 mm)
S.saprophyticus
S.hominis subesp novobiosepticus
S.xylosus
S.cohnii
S.kloosii
S.equorum
S.arlettae
S.gallinarum
RESISTENCIA A POLIMIXINA B (300 u): <10mm
S.aureus
S.epidermidis
S.hycus
S.chromogenes
Algunas cepas de
S.lugdunensis
S.haemolyticus (urea -)
S.lugdunensis (ornitina +)
S.schleiferi (DNAsa +)
S.intermedius (coagulasa +)
S.simulans (urea +, ONPG+)
S.caseolyticus (urea-)