II.

Crecimiento en el
laboratorio
Fisiologa bacteriana

Procesos de reproduccin de las

bacterias
Fisin binaria
En la mayora
de las clulas
procariotas,
el
crecimiento
de
una
clula
individual
es
hasta
que
se
divide en dos
clulas nuevas
(Expresa
el
hecho de que se

FISIN BINARIA:

Protenas

FtsZ:Protena del citoesqueleto de las bacterias que se ensambla en un

anillo para mediar durante la divisin bacteriana. Es el equivalente
procariotico a la tubulina en las clulas eucariotas. Codifcada por el gen
FtsZ.
MreB, ParM.

Sntesis
Peptidoglicano
FISIN BINARIA:

Streptomyces

Nocardia

Hyphomicrobium

Crecimiento
Un
aumento
en
la
cantidad
constituyentes y estructuras celulares.

Aumento en el tamao y peso de la clula

Aumento en el nmero de clulas

de

cimiento individual

cimiento de poblaciones

l aumento del nmero de clulas como consecuenci

recimiento individual y posterior divisin.
rre de una manera exponencial.
na consecuencia del hecho de que cada clula se di
do dos (2) clulas hijas, las cuales al dividirse darn
dos clulas hijas, as es que en cada perodo de div
poblacin se duplica.

Tiempo de generacin

empo de generacin (G).

tiempo que tarda una poblacin en duplicarse.

riable

CURVA DE CRECIMIENTO:

Crecimiento

Exponencial

El nmero de clulas se dobla cada cierto

Periodo de tiempo.
Tiempo de generacin:
Tiempo requerido para que una poblacin
microbiana determinada duplique su nmero
(E. coli = 20 minutos)

Bacteria

Medio

Escherichia coli
Bacillus megaterium
Streptococcus lactis
Staphylococcus aureus

Glucosa-sales
Sacarosa-sales
Leche
Medio de
infusin de
corazn
Medio con
lactosa
Leche

Streptococcus lactis
Lactobacillus
acidophilus
Rhizobium japonicum

Manitol-sales-

Tiempo
de
duplicaci
n en
min
17
25
26
27-30

48
66 - 87
344 - 461

Matemtica del crecimiento

exponencial
La relacin que existe entre el nmero de clulas y las
generaciones de un cultivo creciendo en forma exponencial,
puede deducirse matemticamente de la manera siguiente:

Se designa como:
x = N de bacterias al tiempo 0
y = N de bacterias al tiempo t
t = tiempo en crecimiento exponencial
Al tiempo 0 y = x
Despus de: 1 generacin y = x.2
2 generaciones y = (x.2) 2 =2 x
3 generaciones y = (22 x) 2= 23 x
n generaciones y = 2n x (1)

Para calcular n = (nmero de generaciones)

Resolviendo la ecuacin (1) para n se tiene:
log y = log x + n log 2
log y-log x
n= ---------------------------log 2
Si se sustituye en la ecuacin anterior log 2
por su valor 0.3010, se tiene que 1/0.3010 =
3.3
n = 3.3 log y/x

El tiempo de generacin G es igual a t (tiempo

transcurrido en fase exponencial para llegar de x a
y) dividido por el nmero de generaciones n, o sea:
G= t/n
Ejemplo
Se tienen 1050 bacterias en un medio de cultivo
ptimo y despus de 3 horas de incubacin,
creciendo exponencialmente, se obtienen 100.000
bacterias. Calcule el tiempo de generacin.
x = 1050
y = 100.000
T = 3 horas
G =?
n = 3.3 log y/x n = 3.3 log 100.000/1050 = 6.5
generaciones

Una bacteria tiene un tiempo de generacin de 90

minutos, al cabo de 72 hs se determin que en un
cultivo hay 2.8 x1013 UFC / ml.
Cuantas bacterias haba inicialmente en el cultivo si
el matraz contiene 100 ml?
Nf = No x 2n

n=t/G

Curva de crecimiento tpica:

Microorganismo viable = capaz de reproducirse

Fase de latencia
Representa un periodo de transicin para los
microorganismos cuando son transferidos a una
nueva condicin. En esta fase se producen las
enzimas necesarias para que ellos puedan crecer
en un nuevo medio ambiente.
Cultivo nuevo
Cultivo viejo
Clulas daadas
Rico a pobre

Fase exponencial o
logartmica
Es el perodo de la curva en el cual el
microorganismo crece exponencialmente, es
decir que cada vez que pasa un tiempo de
generacin la poblacin se duplica.
Bajo condiciones apropiadas la velocidad de
crecimiento es mxima. Las condiciones
ambientales (temperatura, composicin del
medio de cultivo, etc.) afectan a la velocidad
de crecimiento exponencial.

Fase estacionaria
En cultivos en recipientes cerrados una poblacin
no puede crecer indefinidamente en forma
exponencial.
Las limitaciones del crecimiento ocurren ya sea
por agotamiento de algn nutriente esencial, por
acumulacin de productos txicos, porque se
alcance un nmero de clulas
elevado para el espacio disponible o por una
combinacin de las causas anteriores.
Este periodo durante el cual cesa el crecimiento
se conoce como fase estacionaria.

Fase de muerte
Si la incubacin contina despus de que una
poblacin
microbiana
alcanza
la
fase
estacionaria, las clulas pueden seguir vivas y
continuar metabolizando, pero va a comenzar
una disminucin progresiva en el nmero de
clulas viables y cuando esto ocurre se dice
que la poblacin ha entrado en fase de muerte

Medicin del crecimiento

microbiano
El crecimiento microbiano se mide por cambios
sucesivos en el nmero de clulas o por el
aumento de peso de la masa de las clulas.
Hay varios mtodos para enumerar las clulas o
estimar la masa de stas.

Mtodos de medicin
Indirectos
Indirectos

Directos
Directos

Recuento
Directo
Recuento
Directo

Extensin en
placa en
Extensin
placa
Mtodo
vertido
en
Mtodo
placaen
vertido

Turbidimetr
a
Turbidimetr
a
Clulas
viables
Clulas
viables

placa

Filtracin
Filtracin

Determinacin del nmero de

clulas totales

ecuento directo mediante contadores electrnicos

as limitaciones de este mtodo son las siguientes:

e cuentan clulas vivas y muertas.

as suspensiones deben estar libres de partculas diferentes a

icroorganismos que estamos contando por que el aparato no
uede distinguir entre una u otra.

Determinacin del nmero de

clulas totales

ecuento directo al microscopio

as limitaciones de este mtodo son las siguientes:

No se pueden distinguir las clulas vivas de las clulas muer

Las clulas muy pequeas son difciles de contar.
La precisin es difcil de lograr
El mtodo no es adecuado para suspensiones celulares de ba
nsidad, es decir las soluciones deben contener aproximadam
07 clulas/mL o ms.

Determinacin de clulas
viables

Extensin

Vertido en Plac
Cada clulas viable puede dar lugar a una colonia

Diluciones

MTODOS DE MEDICIN:

Directos

Filtracin

Miles-Misra

Indirectos
masa microbiana

MTODOS DE MEDICIN:

Espectrofotmetro

Determinacin masa
microbiana

Reproduccin de los hongos

Los hongos pueden reproducirse por procesos asexuales
y procesos sexuales.
Reproduccin asexual
Los procesos asexuales implican divisin de los ncleos y
formacin de nuevos hongos sin participacin de
gametos y sin fusin nuclear.
Se conocen 3 mecanismos de reproduccin asexual:
1. Esporulacin seguida de germinacin de las esporas.
2. Gemacin.
3. Fragmentacin de hifas.

Esporas asexuales
No presentan latencia, es decir ellas pueden germinar
cuando dispongan de humedad an en ausencia de
nutrientes.
Existen varios tipos de esporas asexuales:
a. Clamidosporas: esporas esfricas u ovoides de pared
gruesa que se forman dentro de las hifas somticas.
Son ms resistentes al calor y a la desecacin que las
otras esporas asexuales.
b. Conidiosporas: Son esporas delgadas que se
encuentran
en
grupos
o
solas
sobre
hifas
especializadas llamadas conidiforos. Algunos autores
llaman conidiosporas a todas las esporas asexuales

 c. Esporangiosporas: Son esporas que se forman

dentro de una estructura en forma de saco
denominada esporangio. La hifa que porta el
esporangio se denomina esporangiforo.
d. Astrosporas: Son esporas de paredes delgadas
que se forman por fragmentacin de las hifas.
e. Blastosporas: Son esporas que se forman por
gemacin.

osporas

Conidiosporas

Esporangio

 Gemacin
Es el proceso de reproduccin asexual
que prevalece en las levaduras,
aunque algunas
especies se dividen por fisin.
Fragmentacin de hifas
Los fragmentos de hifas son capaces
tambin de dar nuevas colonias.

Esporas sexuales
a. Zygosporas: Son esporas grandes de pared gruesa que
resultan de la fusin de 2 gametos similares.
b. Ascosporas: Se producen en una estructura en forma de
saco, llamada asca, despus de la unin de 2 ncleos.
Generalmente hay 8 ascosporas dentro de cada asca.
c. Basidiosporas: Resultan de la unin de 2 ncleos sobre
una estructura especializada en forma de masa conocida
como basidio. Generalmente hay 4 por basidio.
d. Oosporas: Estas se forman dentro de una estructura
femenina denominada oogonio.

Cultivo diauxico
Este tipo de crecimiento tiene
lugar cuando una bacteria crece
en un medio con dos fuentes de
carbono, una de las cuales se usa
con preferencia sobre la otra. Es
consecuencia de la represin
catablica
(mecanismo
de
regulacin
de
la
expresin
gnica)
Da lugar a una curva de
crecimiento
con
dos
fases
exponenciales separadas por una
fase estacionaria corta.

Replicacin de los
Micoplasmas

Reproduccin de las
Clamidias