Estructura del ADN

y Replicacin

LA HEBRA DE ADN
Unin de
desoxirribonucletidos
Se unen por enlaces
fosfodiester
Se establece la unin
entre el grupo
fosfrico en C 5 de
una desoxirribosa y el
grupo hidroxilo en C 3
de la desoxirribosa del
nucletido siguiente
Se denominan estas
uniones extremo 5 y
extremo 3

LA HEBRA DE ADN
RECORDEMOS

LA HEBRA DE ADN
RECORDEMOS

La hebra de adn
Recordemos

El modelo de watson y crick

Consideraciones.
Experimentos previos

Griffith 1928:
transformacin bacteriana en S. pneumoniae
Rugosa

Muerte por neumona

Lisa

No muere

Muere

Cepa resistente

Cul es el Principio transformante?

Principio
Rugosa

Lisa

El elemento transformante es el adn (1944)

Colin MacLeod

Maclyn McCarty

Oswald
Avery

Slo DNA produce transformacin

REGLAS DE CHARGAFF

1. Proporcin de purinas = Proporcin de pirimidinas

A+G=C+T
2.

A=T

3.

G=C

1953. Ao culminante:

J. WATSON Y F. CRICK RESUELVEN LA

ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DEL DNA
(NATURE 171: 737-738)

Watson y yo hemos
encontrado el
secreto de la vida

1953. AO CULMINANTE:
Dos lneas de evidencia:
Reglas de Chargaf
Fotografas de difraccin de rayos X

SIGNIFICAFO DE LAS REGLAS DE

CHARGAFF

Complementariedad de las bases

DIFRACCIN DE RAYOS X

Hemoglobina
Linus Pauling

INTERPRETACIN DEL PATRN DE

DIFRACCIN DE RAYOS X DEL ADN

Rosalind E.
Franklin

Crick

J. Watson y F. Crick concluyeron:

La estructura del DNA es una doble hlice.
Formada por cadenas orientadas en direcciones
opuestas (antiparalelas).
La estructura se mantiene gracias a enlaces de
hidrgeno entre las bases nitrogenadas que se
encuentran orientadas hacia el interior de las
cadenas

Modelo en metal del ADN

Doble
hlice,
formada
por
cadenas orientadas
en
direcciones

La estructura se mantiene
gracias a enlaces de hidrgeno
entre las bases nitrogenadas
que se encuentran orientadas
hacia el interior de las cadenas

El modelo de watson y crick

Si el ADN era la molcula que transmita la
informacin gentica a las clulas hijas, esta
deba funcionar como un cdigo.
Mitad de los aos 1950: La secuencia de
nucletidos en el ADN daba origen a una
secuencia de polipptidos.
ADN

Protenas

Protenas se sintetizan fuera del ncleo.

ADN se traduce ARN y este a su vez dirige la

produccin de protenas.

ADN

ARN
Protenas

La informacin fluye del ADN al ARN por va

del proceso Transcripcin, y luego a la
protena por el proceso de traduccin.

Transcripcin: proceso de fabricacin ARN

usando ADN como molde
Traduccin: Construccin de una secuencia
de
aminocidos
(polipptido)
con
la
informacin proporcionada por la molcula de
ARN.

 El ARNm es el molde para la construccin de la

protena.
El ARNr se encuentra en el sitio donde se
construye la protena: el ribosoma.
El ARNt es el transportador que coloca el
aminocido apropiado en el sitio correspondiente.

Replicacin

POSIBLES MODELOS DE
REPLICACION

Replicacion del adn

Semiconservativa: una cadena sirve de molde para una nueva
cadena
El experimento de M. Meselson y F. Stahl (1958) demuestra que
la replicacin es semiconservativa

Mathew Meselson

Frank Stahl

Replicacion del adn

Enzimas que sintetizan (replican) el DNA
E. coli
DNA polimerasa I (rellena huecos y repara)
DNA polimerasa II y III (funcin principal en la sntesis)
Aade bases en ambas cadenas en la direccin 5 3
Requiere un 3 OH final
Eucariotas
5 polimerasas
y principal en replicacin
, y exonucleasas
Correccin de pruebas: actividad 3 5 exonucleotdica.
Sustituye bases mal emparejadas (10-5) por correctas (10-7);
mecanismos de reparacin adicionales la reducen hasta 10 -10

Pasos de la replicacion
Pasos

Enzimas

Topoisomerasa (impide el
Desenrollamiento
sobreenrollamiento)
Denaturacin
Helicasa (rompe los puentes
RNA partidor
de hidrgeno)
RNA primasa (sintetiza el
Elongacin
cebador para la hebra
Sustitucin partidores retrasada)
Ligamiento
DNA pol (III) (se encarga de
sintetizar las hebras
Reparacin

replicadas)
DNA pol (I) (saca los primers
de ARN cebador)
DNA ligasa (une los
fragmentos de Okasaki)

Topoisomerasa
Las topoisomerasas son enzimascapaces de actuar
sobre latopologadelADN, ya sea enredndolo para
permitir que se almacene de manera ms compacta o
desenredndolo para que controle la sntesis de
protenas y para facilitar la replicacin del mismo. Estas
enzimas son necesarias debido a los inherentes
problemas causados por la configuracin estructural del
ADN.

Helicasa
Es una enzima vital en losseres vivosya que participa
en los procesos de transcripcin,
recombinacin yreparacindelADN, y de biognesis
deribosomas. Su misin es romper lospuentes de
hidrgenoque unen lasbases nitrogenadas, haciendo
as posible que otras enzimas puedan copiar la
secuencia de la hebra molde.

Adn polimerasa
La ADN polimerasa agrega nucletidos en la direccin 5`- 3`, es
decir, une nucletidos al extremo 3 de la cadena en
crecimiento.
La ADN polimerasa copia la cadena molde con alta fidelidad.
Sin embargo, introduce en promedio un error cada
107nucletidos incorporados. Tiene, adems, la capacidad de
corregir sus propios errores, ya que puede degradar ADN que
acaba de sintetizar.

OH

PP
P

OH

OH

PP
P

+ H2O

OH

PP

OH

OH

Fragmentos de Okazaki
Durante
lareplicacin
de
ADN,
se
conocen
comofragmentos de Okazakia las cadenas cortas
deADNrecin sintetizadas en la hebra discontinua. stos
se
sintetizan
en
direccin
5
3
a
partir
decebadoresdeARNque despus son eliminados. Los
fragmentos de Okazaki se unen entre s mediante laADN
ligasacompletando la nueva cadena.

Entonces
Replicacin Continua (cadena adelantada, cebador slo
inicio)
Replicacin
cebadores):

Discontinua(cadena

retrasada,

varios

- Cebador (pequeo RNA 2-60 nucletidos aadido por enzima

primasa o RNA pol que provee extremo 3 OH.
- Fragmento de Okazaki sintetizado por DNA pol III
- DNA Pol I elimina cebador 3 -> 5 y llena los espacios (gap)
- DNA ligasa realiza la unin de los fragmentos mediante la
formacin de los enlaces fosfodister.

Por qu no
hay una
enzima que
polimerice en
la direccin 3> 5?
No funcionara la
correccin
de
errores por falta
de un trifosfato
que suministre la
energa de enlace
covalente azcarfosfato

PP

P
PP

OH

OH

+ H2O

PP

OH

OH

OH

Adicin
35
(hipottica)

Replicacin

Funcin reparadora de la ADN pol III