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UNIVERSIDAD DE CARABOBO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


ESCUELA DE BIOANALISIS
PARASITOLOGIA

Realizado por:
Alviarez, Astrid
Barrios, Roxani
Bello, Daniela
Godoy, Brendys

o Protozoo
o Parasito intracelular obligado
o Distribucin universal y, probablemente, el agente ms
frecuente de infeccin protozoaria en el hombre.

Por un lado,Toxoplasmagondiies difcil de cultivar e incluso


en casos activos su aislamiento es frecuentemente negativo.
Por lo tanto un resultado negativo no descarta la enfermedad
aguda.

La identificacin de los quistes en cortes histolgicos y su


aislamiento en animales o en cultivos de tejidos, puede no
corresponder con el agente causal de la Sintomatologa, puesto
que muchos individuos han estado expuestos aT. gondiiy
tienen el parsito en sus tejidos sin presentar sntomas. Sin
embargo la presencia de trofozoitos o antgenos indica una
actual infeccin aguda.

Estos poliorganismos adquieren una coloracin


diferencial y se ven dentro del citoplasma de la
clula husped.
La tcnica de Giemsa est formada por varios
colorantes: los tintes neutros utilizados combinan el
azul de metileno como tinte bsico y la eosina como
tinte cido, lo que da una amplia gama de colores. El
azul de metileno es un colorante metacromtico, de
ah que el nucleo de esta celula se tia de prpura y
no de azul. Se visualiza con objetivo inmersin.

La coloracin de Giemsa se emplea para teir


frotis de sangre en el examen para protozoos,
observndose en su forma evolutiva trofozoitica,
descrito clsicamente con aspecto de semiluna con
extremidad redondeada y la otra ms acusada.
En esa forma es como penetra en las clulas de
rganos y tejidos extraintestinales y ocurre un
brotamiento interno denominado endodiogenia.

Tcnica que se basa en una reaccin antgeno anticuerpo


complemento la cual consiste en detectar anticuerpos IgG antiT. gondii presentes en el suero del paciente los cuales
reaccionan con antgenos (toxoplamas vivos) en unin al
complemento (Factor Accesorio) impidiendo la normal
coloracin del parasito con el azul de metileno.
Si el 50% o mas parsitos se encuentran sin teir la reaccin se
considera positiva y se expresa en ttulos, este ser la ltima
dilucin del suero la cual se encuentre positiva

Toxoplasma gondii presenta un ciclo de reproduccin


tanto sexual como asexual extraintestinal. Inicindose
con la ingestin del quiste los cuales se destruyen por
accin del jugo gstrico liberando a los bradizotos que
invaden las clulas epiteliales del intestino y
posteriormente por reproduccin asexual extraintestinal
se diferencian en taquizotos, los cuales se diseminan en
el organismo por va sangunea y linftica por lo cual
mediante esta tcnica se permite su demostracin con la
dbil tincin que estos parsitos presentan.

Tcnica que detecta la presencia de anticuerpos IgG IgM IgA anti T. gondii
empleando eritrocitos de carneros estabilizados y sensibilizados con
antgenos T. gondii mediante una reaccin antgeno anticuerpo. Si el suero
contiene los anticuerpos contra el parasito sern capaces de aglutinar los
glbulos rojos, dando lugar a una sedimentacin caracterstica en el fondo
del pocillo de la placa de microtitulacin con la formacin de una pelcula o
manto que cubre ms del 50% del pocillo.
Hay que tener en cuenta que los individuos con el antgeno de Forssman
negativo (presente en individuos con grupo sanguneo A, AB, B) desarrollan
anticuerpos contra del antgeno denominados anticuerpos heterofilos los
cuales producen reaccin cruzada, por este motivo se debe hacer un control
de heterofilia con glbulos rojos no sensibilizados (antgeno de Forssman).
Si el control de heterofilia da positivo se debe absorber el suero de
paciente, es decir eliminar los anticuerpos heterofilos que reaccionan con el
antgeno de Forssman si as evitar la reaccin cruzada

Toxoplasma gondii presenta un ciclo de reproduccin tanto


sexual como asexual. Inicindose con la ingestin de los
quistes los cuales se destruyen por accin del jugo gstrico
liberando a los bradizotos que
invaden las clulas
epiteliales del intestino y posteriormente por reproduccin
asexual se diferencian en taquizotos, los cuales se
diseminan en el organismo por va sangunea y linftica por
lo que mediante esta tcnica se permite la demostracin
indirecta de T. gondii mediante la bsqueda de anticuerpos
en suero principalmente IgM e IgG.

Tcnica que nos permite detectar anticuerpos especficos


(Igm e IgG) contra Toxoplasma gondii, mediante el uso de
trofozoitos muertos por formol o liofilizados. El suero del
paciente, de quien se sospecha presenta los anticuerpos
especificos se agregara en un portaobjetos que presentado fijados
los antigenos que constituyen el substrato conocido especifico; si
la reaccin es positiva, los IgG del paciente se adhieren a la pared
del parasito; dandose la formacin de complejo antgenoanticuerpo no visible. Posteriormente se agrega una antiinmunoglobulina humana marcada o conjugada con fluoresceina, que
reaccionara con el complejo formado, dando una coloracin verde
manzana a los parsitos; la cual podr ser visualizada por un
microscopio de luz de fluorescencia.

Toxoplasma gondii presenta un ciclo de reproduccin tanto sexual


como asexual. Inicindose con la ingestin de los quistes los cuales
se destruyen por accin del jugo gstrico
liberando a los
bradizotos que invaden las clulas epiteliales del intestino y
posteriormente por reproduccin asexual se diferencian en
taquizotos, los cuales se diseminan en el organismo por va
sangunea y linftica por lo que mediante esta tcnica se permite la
demostracin indirecta de T. gondii mediante la bsqueda de
anticuerpos en suero principalmente IgM e IgG.

Se basa la deteccin directa del ADN del parsito. En sta, un


fragmento especfico del genoma es amplificado a niveles que
puedan ser detectables para que sea visualizado en un gel de
electroforesis, en un secuenciador automtico o en un software
de PCR en tiempo real.
Por este mtodo se amplifica la secuencia B1 que se repite 35
veces o la secuencia REP 529, que se repite de 200 a 300 veces
en el genoma del T. gondii, la PCR convencional que utiliza la
secuencia B1 amplificandola mediante secuencias sintticas
especficas. la qPCR o PCR en tiempo real que utiliza la secuencia
REP329 y utiliza marcadores fluorescentes unidos a las
secuencias sintticas para realizar la medicio es necesaria la
presencia de un equipo (termociclador) que permita medir la
intensidad de fluorescencia.
la PCR convencional tiene un lmite de 1000 parsitos, La tcnica
ms eficiente fue la qPCR que logr detectar un solo parsito.

Toxoplasma gondii tiene un ciclo de reproduccin y transmisin que


comprende una fase sexual en el epitelio entrico del husped principal (los
felinos) y una fase de reproduccin asexual extraintestinal en los huspedes
intermediarios, la infeccin se adquiere por ingestin de agua o alimentos
contaminados con ooquistes liberados en las heces del hospedador definitivo
(felino) o por la ingesta de quistes presentes en los hospedadores
intermediaros al comer carne de cerdo o vaca, Despus de la ingestin, los
quistes u ooquistes liberan los parsitos por accin del jugo gstrico y
comienzan a multiplicarse en las clulas epiteliales del intestino.
Los taquizotos se diseminan en el organismo por va sangunea y linftica, y
pueden multiplicarse en todos los tipos celulares (salvo los eritrocitos), lo
que produce la infeccin aguda estos se van a encontrar en sangre, lquido
cefalorraqudeo, orina, lavado broncoalveolar o en muestras de diferentes
tejidos. La toxoplasmosis congnita tiene lugar en el caso de Mujeres que
contraen la infeccin durante el embarazo.Los taquizotos, que se multiplican
durante los primeros das de la infeccin, pueden atravesar la placenta en
forma extracelular o intracelular, e infectar al feto, y se van a encontrar en
el lquido amnitico.

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