Universidad Nacional Mayor de San Marcos

Universidad del Per, DECANA DE AMRICA

Facultad de Farmacia y Bioqumica

Departamento Acadmico de Microbiologa y
Parasitologa Bsica y Aplicada

Produccin de cido Ctrico

EL CIDO CTRICO
Breve resea
El cido ctrico ha sido reconocido como una sustancia
natural que se encuentra en los frutos ctricos como la
naranja, limn, mandarina, etc.
En 1923, saban que el cido ctrico era producido por
hongos filamentosos.
En 1923 se inici la primera fermentacin para
producir
este
cido
orgnico
utilizando
microorganismos que crecan sobre superficies de los
cultivos y posteriormente se utilizan los fermentadores o
bioreactores.
En 1929 sealado como un ao histrico se produce
5,000 toneladas del cido por fermentacin.

Comercialmente se usa el cido ctrico en la

alimentacin y bebidas en un 60%, el 10% en la
industria farmacutica y el 30% en la industria
qumica.
Su empleo es en los jugos de frutas, caramelos, helados,
mermeladas, bebidas gaseosas para resaltar su sabor.
Otros usos: como en detergentes, espumantes,
preservantes de la sangre almacenada, pomadas,
preparaciones
cosmticas,
jarabes,
como
reblandecedor de cueros su uso es muy variable.
El cido ctrico ha desplazado a los polifosfatos que se
empleaban como detergentes y eran txicos.

Para su produccin se busca una buena cepa

que debe reunir las siguientes condiciones:
a. Un rendimiento alto.
b. Facilidad del manejo de la cepa.
c. Econmicamente conveniente.

Para la produccin y crecimiento del hongo se

requiere cationes divalentes como el Fe2,
Mg+, Zn+, Mn2+, Cu+ como factores
importantes

El papel del hierro, durante su crecimiento

requiere una cantidad de 0.0005 05 ppm
cuando se trata de sustrato como la melaza,
cuando es la sacarosa el hierro necesita de
2.00 ppm, adems el hierro en un factor
importante en la enzima aconitasa, su pH
debe estar entre 2 3.
Desde hace 80 aos se sigue usando la cepa
de Aspergillus niger, hasta ahora no se
encuentra un reemplazo, el mundo sigue
buscando nuevas bacterias, hongos y otros.

Trofofase e Idiofase.
En el metabolismo secundario, las dos fases
distintas del metabolismo se denominan trofofase e
idiofase.
La trofofase. Es la fase de crecimiento (el prefijo
trofos, significa "crecimiento" )
Idiofase. Es la fase de produccin de metabolitos
.

BIOSNTESIS DEL CIDO CTRICO

GLUCOSA: Principal fuente de carbono.
Aspergillus niger, la glucosa es utilizada en un 78% por la ruta glucoltica o de
Embden-Meyerhof-Parnas (EMP) y un 22% por la ruta de la Hexosa Mono
Fosfato (HMP).
TROFOFASE: Existe gran actividad de la Va EMP y durante la IDIOFASE
hay gran actividad de la HMP.
En la IDIOFASE la actividad de la Citrato Sintasa se incrementa en 10 vexces,
no se expresan las enzimas alfa-cetoglutarato deshidrogenasa, disminuye la
actividad de las enzimas Aconidasa e Isocitrato deshidrogenasa.
Durante la esporulacin se produce glicerol, que inhibe la accin de isoenzimas
de Isocitrato deshidrogenasa.
Para mantener el Ciclo de Krebs activo, hay rutas Anaplerticas.
En A. niger se encontr la ruta de la Piruvato Carboxilasa.
En ausencia de glucosa opera el Ciclo del Glioxilato (Isocitrato liasa, malato
sintasa).
El rendimiento terico es de: 123 g de c. Ctrico 1-hidratado o 112 g de c.
Ctrico anhidro por 100 g de glucosa consumida.

Medios de cultivo
Fuentes de carbono:

Tratamiento de materia prima para la

produccin de cido ctrico

Melaza de caa de
azcar

Materia prima
Sucrosa pura

Intercambio catinico

Almidn de papa

Almidn puro

Intercambio catinico

Melaza de remolacha

Glucosa pura

Intercambio catinico

Azcar de caa

Clarificacin por ferrocianuro

Melazas

Clarificacin por ferrocianuro

Maz molido

Almidn crudo

Tratamiento qumico

Sucrosa pura

Maz molido

Tratamiento qumico

Hidrolizado de almidn

Proceso de purificacin

Glucosa pura
Todas las fuentes de carbohidratos requieren de procesos
previos de purificacin, fundamentalmente para eliminar
elementos traza que afectan la produccin de cido ctrico

Medio para produccin de cido ctrico

por Candida lipolytica

COMPONENTE
Acetato de sodio
40.0
Glucosa
20.0
Sulfato de Magnesio 7H2O
Cloruro de amonio
Fosfato de K
2.0
Extracto de levadura
0.5

CANTIDAD gl
1.0
6.0

Medios de cultivo
Para produccin de cido ctrico por Aspergillus niger
COMPONENTE
CANTIDAD
fermentacin
Sucrosa
Bacto agar
Nitrato de amonio
Fosfato de potasio dihidrgeno
2.5
Sulfato de magnesio 7H2O
Cobre
0.00006
Zinc
0.00025
Fierro (2)
0.0013
Manganeso

Para esporulacin
140.0
20.0
2.5

Para
140.0
0.0
2.5

1.0
0.25
0.00048

0.25

0.0038
0.0022
0.001

0.001

Para produccin de cido ctrico por

Aspergillus wentii

Sucrosa
150.0 Sulfato de manganeso 4 H2O
0.02
rea
1.0 Sulfato de zinc 7 H2O
0.01
Sulfato de magnesio0.5 Fosfato de potasio dihidrgeno
0.08
Cloruro de potasio 0.15

ELEMENTOS TRAZA
El exceso puede tener efectos adversos (Cu, Mg, Fe, Zn, Mo)
El fierro es cofactor de la acotinasa, durante el crecimiento se requieren
altas concentraciones, pero durante la produccin slo se requiere entre
0.005 a 0.5 ppm
EFECTO
DEL
Fe
SOBRE
LA
PRODUCCIN DE CIDO CTRICO
USANDO SUCROSA CATIONIZADA CON
Aspergillus
niger,
EN
CULTIVO
SUMERGIDO:
Fe (ppm)

% Yield

0.0

67.0

0.05

71.0

0.5

88.0

0.75

79.0

1.0

76.0

2.0

71.0

5.0

57.0

10.0

39.0

ELEMENTOS TRAZA
EFECTO DEL Cu Y DEL Fe SOBRE LA PRODUCCIN
DE CIDO CTRICO A PRTIR DE GLUCOSA
USANDO A. niger
Fe (ppm)
10
50
100
150
10
50
100
150
10
50
100
150

Cu (ppm) Y (%)
50
50
50
50
100
100
100
100
300
500
500
500

77.8
69.1
50.7
14.2
77.2
65.4
53.9
29.8
74.0
65.4
60.6
27.6

 Aspergillus clavatus

Mucor piriformis

Aspergillus niger

Paecilomices divaricatum

Aspergillus fumigatus

Trichoderma viride

Aspergillus japonicum

Citromyces pfefferianus

Aspergillus wentii

Candida guillermondi

Peniciliun citricum

Candida lipotica

Peniciliun luteum

Arthrobacter paraffineus

Ustulina vulgaris

Corynebacterium sp.

RECOLECTOR

6.0 ml H2O c/u, en esterilidad

CEPA: Aspergillus niger: Medio de esporulacin,

pH=6; 32C, x 7 das

150 ml
medio

150 ml
medio

150 ml
medio

En matraz de 100 ml,

recolectar 15 a 30 ml
de suspencin de
esporas en agitacin

150 ml
medio

150 ml
medio

En placa ROUX medio slido de

esporulacin, pH 6 a 32C x 7 das.
Lavar 10:10 10ml x placa H2O d/e,
verter en frascos de 500ml hasta
completar 200 ml

150 ml
medio

Cultivar: 30C x 22 hrs, en agitacin en bao mara - biomasa micolar

7L medio
germinado

7L medio
germinado

7L medio
germinado

7L medio
germinado

7L medio
germinado

7L medio
germinado

Inculo
industrial
Al 1 reactor

Cultivar: Medio lquido a 30C x 22 hrs en agitacin en bao mara en pH 6.0: Verter los 150 ml a c/fco.

Procesos de produccin
Procesos
industriales

Superficie

Medio
slido

Medio
lquido

Sumergido

Reactor
agitado

Reactor
aireado

Clulas
inmovilizadas

En arginato de
calcio

ctrico
Aire

Medio con
nutrientes
azucarados

Recipientes de
acero inoxidable

Licor

28 a 30C
Aire estril

Purificacin
cido Ctrico

Inculo

Agitador
Ventana
pequea

Ventana de
inspeccin
Abertura
de carga

Entrada
de vapor

Respiradero

Salida
de agua

Entrada
de agua
4 placas
dispersadoras
equidistantes

Espacio de doble
pared para agua

Entrada
de aire

Salida de
sustancias
condensadas

Orificio de
drenaje

Diagrama simplificado del proceso de produccin de cido

ctrico por cultivo sumergido a partir de melazas
Nutrientes
Tanque
de
melazas

Vapor

Dilucin
de
melazas

Preparacin
del medio
Filtro

Agua
Esterilizacin
del medio

Fermentador
para inculo
Fermentador
principal

Compresor
de aire

Almacenamiento del
caldo

Micelio de
desecho

Ca (OH)2

Filtro
de aire

H2SO4

Tratamiento
de efluentes

CaSO4

CRISTALIZACIN

Produccin de cido ctrico

Medio con
nutrientes que
contienen glucosa

Cultivo continuo de etapas mltiples

para produccin de cido ctrico
Etapa de
crecimiento

Aire

CaCO2

Etapa de
Produccin

Aire
estril
Licor
Purificacin

Acido ctrico

Aire
Medio con
nutrientes
azucarados

pH
NaOH

Cultivo sumergido
de A. niger para
produccin de
cido ctrico

Micelio

Aire
estril

Filtracin
Licor

Purificacin

IMPORTACIONES DE CIDO CTRICO

2000000

Kg x 1000

1500000
1000000
500000
0

Kg x 1000
Fuente: Anuario Estadstico

1992,

1993,

1994,

1995,

487908

995986

1248532

1883242

Usos del cido ctrico

INDUSTRIA

REA

Debidas

General
Vino
Bebidas
Carbonatadas

Alimentaria

Farmacutica
Cosmtica
Otros

Industrializacin
Congelados
Productos
Lcteos
Antibiticos
Antimicticos
Bases
Antioxidantes

USOS
Saborizantes
Conservadores
Eliminador de turbidez
Contra el deterioro
Inhibidor de oxidacin
Sabor fresco
Ayuda a la carbonatacin
Antioxidante
Mejoramiento de color
Regulador de pH
Inactivadores de sales traza
Emulsificantes
Disolvente y saborizante
Efervecente con H2CO3
Antioxidante sinergstico de metales en
tratamiento de aguas
Detergentes
Curtidos
Textiles

Gracias por su gentil atencin