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HEMOCULTIVO Y
COPROCULTIVO
DOCENTE:
DRA. ANA ZEVALLOS GONZLES
INTEGRANTES:
HEMOCULTIVO
3.2 IMPACTO
MICROBIOLGICO:
Ha sido principalmente una disminucin de
la carga de trabajo con posibilidades de
procesar grandes volmenes de muestras
3.3 IMPACTO
EPIDEMIOLGICO
El soporte computacional que poseen
estos sistemas permiten obtener
listados de positividad por pacientes,
por muestra, por microorganismo,
conocer el rendimiento
(% de positividad) y la contaminacin
de los hemocultivos.
Estos datos se pueden evaluar por
servicio, por tipo de muestra, diario,
semanal, mensual y/o anual, lo que
constituyen gran aporte en el control
de las bacteriemias intrahospitalarias
4.1 MOMENTO DE LA
OBTENCIN DE LA
MUESTRA
Se ha documentado que el mejor
momento para obtener la muestra de
sangre es entre 2 horas a 30 minutos
antes del peak febril. Thomson y Evans
demostraron en 78 episodios de
bacteriemia que el porcentaje ms alto
de positividad
Sin embargo dado que este momento
no se puede predecir, se recomienda en
forma
arbitraria
obtener
dos
hemocultivos en 24 horas separados
por 30 a 90 minutos
O bien obtener los dos hemocultivos al
mismo tiempo, de diferentes sitios de
puncin
si se trata de un paciente que va a
requerir
inicio
inmediato
de
antimicrobianos.
4.2 MTODO DE
OBTENCIN DE LA
MUESTRA
4.3
PREPARACIN DE
LA PIEL
4.4 VOLUMEN DE
LA MUESTRA
Variables ms crticas en el
aumento de la positividad de los
hemocultivos. Dado que la
mayora de las bacteriemias son
de baja magnitud (< 1 a 10
ufc/ml) a mayor volumen de
muestra obtenido, mayor es la
sensibilidad del hemocultivo.
Despus de la palpacin de la
vena, la piel debe ser lavada con
povidona yodada, lavador
quirrgico, con gluconato de
clorhexidina al 2-4% o con agua y
jabn.
Siempre la puncin debe ser
efectuada con guantes, que
deben ser estriles cuando se
requiere nuevamente la
palpacin de la vena
la recuperacin de
microorganismos en el
hemocultivo obtenido a travs del
catter puede corresponder al
arrastre de las bacterias que estn
colonizando la superficie interna
ms que a la presencia de
bacterias en el torrente sanguneo,
con un aumento de los falsos
positivos de 1,7 a 3,8%.
4.5 INOCULACIN DE
LAS BOTELLAS
La recomendacin general es
obtener dos hemocultivos en un
perodo de 24 horas.
Para sistemas manuales, Weinstein
en 1983 encontr que en un
episodio bacterimico la positividad
de uno, dos y tres hemocultivos fue
de 91%, 98% y 99%
respectivamente
La obtencin de 2 hemocultivos en
24 horas, no slo aumenta la
probabilidad de recuperar las
bacterias a partir de la sangre sino
que tambin permite diferenciar
una bacteriemia verdadera de una
contaminacin.
Protocolo
Adultos y adolescentes:
- Endocarditis infecciosa
Dos cultivos en 24 hrs.
Comentarios
tratamiento.
Bacteriemia de origen desconocido Dos hemocultivos en 24 horas. Si Tomar
muestra
justo
antes
de
(paciente con tratamiento).
persisten negativos a las 24 horas, administrar una nueva dosis de
- Episodios febriles
No ms de tres cultivos
Puede haber bacteriemia 1 hora antes
de la fiebre.
Nios menores:
- neonatos a 1 ao
- 0,5 a 1,5 ml de una vez
Dos cultivos pueden ser suficiente para
6.0 PROCEDIMIENTO
6.1 PROCEDIMIENTOS GENERALES
a.- Los hemocultivos corrientes se incuban por 7 das a 35C en atmsfera
normal y en endocarditis bacteriana subaguda hasta 14 das.
b.- Observar diariamente el aspecto macroscpico en busca de signos que
indiquen desarrollo bacteriano: hemlisis, turbidez, presencia de gas, colonias,
etc.
c.- Realizar subcultivos ciegos aunque no se observen evidencias de desarrollo a
las 24 horas y al 7 da de incubacin, independientemente del aspecto
macroscpico que presente la botella.
d.- Observar caractersticas macroscpicas de las colonias y hacer tincin de
Gram directo.
e.- Efectuar las pruebas bioqumicas y estudio de susceptibilidad antimicrobiana
que corresponda al tipo de aislamiento.
6.2.
PROCEDIMIENTO
S ESPECFICOS
En sospecha de
Brucelosis incubar
hasta 30 das en
atmsfera con 5-10%
CO2.
Para hemocultivos
anaerbicos si se
utilizan medios
comerciales
especficos, incubar en
atmsfera normal por 7
das.
6.2.2 MICROORGANISMOS DE
PARED DEFICIENTE
Se sospecha frente a un paciente con
endocarditis
bacteriana
que
presenta
hemocultivos negativos. Para efectuar el
aislamiento se recomienda incorporar al medio
de cultivo sacarosa o manitol al 10%.
...
7.2.6 HACEK
Estas bacterias se
recuperan en
hemocultivos de
pacientes con
endocarditis infecciosa,
aunque pueden aislarse
a partir de otros focos
infecciosos.
7.2 1 Micobacterias
El mtodo de lisiscentrifugacin
microorganismos
intracelulares Permite la
liberacin de las
micobacterias lo que favorece
su desarrollo
7.2.4 Campylobacter
spp.
Sistemas automatizados
y por lisiscentrifugacin,
7.2.7 Bartonella
henselae
Lisis-centrifugacin con
cultivo del sedimento en
agar por un perodo de
incubacin de al menos
7 das
7.2.2 Hongos
Lisis-centrifugacin que
recupera levaduras y hongos
dimrficos. sistemas
automatizados de
hemocultivos
MIELOCULTIVO
Prueba diagnstica invasiva que consiste en la extraccin de una pequea
cantidad de medula sea (5cc), el cual es vaciado en un medio de
transporte (caldo) para su posterior siembra e identificacin de agentes
infecciosas mediante el uso de un punzn afilado que contiene una gua en
su interior.
La medula sea es un componente lquido del tejido seo que se encuentra
en los huesos esponjosos del cuerpo.
Los lugares de realizacin del aspirado pueden ser las espinas iliacas
posterosuperiores, espinas iliacas anterosuperiores, esternn (tanto en el
manubrio como a nivel de cuerpo esternal) o en la espina tibial (solo
aplicable en casos de nios menores de 5 aos).
INDICACIONES:
Fiebre de origen
desconocido.
Sospecha de micosis
sistmicas
CONTRAINDICACION
ES:
Paciente
anticoagulado
Paciente con
hemofilia u otras
coagulopatias
congnitas.
Quemaduras de II o III
grado en la regin
prxima al sitio de
DECRIPCION
DETALLADA DEL
PROCEDIMIENTO
La duracin del
procedimiento es
aproximadamente 25
minutos.
COMPLICACIONES:
Hematoma subcutneo en el sitio de la
puncin. (10% de lo casos). Usualmente es
autolimitado y no requiere de tratamiento. En
casos severos (hematoma de >20cc medido
por ecografa) se indicara transfusin de
plaquetas y/o plasma fresco segn sea el caso.
El pronostico es favorable.
Osteomielitis.
Complicacin
muy
infrecuente (< 1%) y de aparicin tarda
(despus de 1 mes del procedimiento).
Fcilmente identificable por la presencia de
fiebre y dolor persistente en la zona de
puncin. El tratamiento requiere de la
administracin
de
antibiticos
por
2
semanas. El pronstico es favorable.
Embolismo
graso.
Complicacin muy
infrecuente (<1%) y de aparicin inmediata
(dentro de las siguientes 6 horas despus del
procedimiento). Se caracteriza por una
COPROCULTIVO
Es un examen de laboratorio para encontrar organismos
ETAPA PREANALITICA
OBTENCION DE LA MUESTRA
No requiere dieta previa.
Muestra emitida espontneamente.
MACROSCPI
CA
ETAPA ANALITICA
Consistencia.
Aspecto.
Color.
Presencia de
sangre o
moco.
Elemento
anormales.
Diarrea
Bacteria
ECEH
Shigella
A. histotica
V. cholerae
S. tiphy
Autolimitada
S. paratiphy
Porcentaje de pacientes
leucocitosis fecal (1)
100
Shigelosis
100
E. coli(invasor)
100
100
Variable
Controles
sanos,
virsica, clera.
diarrea 0-10
(1) La leucocitosis fecal se puede apreciar, simplemente, por observacin entre porta y
cubre.
(2) El tipo de leucocitos se observa despus de una coloracin de Gram.
Protozoos
PATGENOS PRIMARIOS CLSICOS
Giardia lamblia
Entamoeba histolytica-dispar
Cryptosporidium parvum
OPORTUNISTAS EMERGENTES
Cryptosporidium parvum
Isospora belli
Cyclospora cayetanensis
Microsporidios
Para este propsito es til el alcohol polivinlico. Un estudio
parasitolgico incluye tres tipos de tcnicas:
a) Observacin en fresco con lugol para quistes, o con solucin salina
para trofozoitos.
b)Coloraciones (hematoxilina frrica, etctera).
Familia Enterobacteriaceae
Gnero Escherichia
Gnero Klebsiella
Gnero Salmonella
Gnero Shigella
Gnero Citrobacter
Gnero Enterobacter
Gnero Morganella
Gnero Proteus
Gnero Serratia
Gnero Yersinia
SALMONELLA:
Estos dos cuadros son la fiebre tifoidea:
producido porSalmonellaTyphi,
almonellaParatyphi A
ySalmonellaParatyphi B.
la salmonelosis gastrointestinal:
SalmonellaTyphimurium,SalmonellaEnteri
tidis, SalmonellaCholeraesuis
Para aislarSalmonella: sobre medios de
enriquecimiento selenito de Leifson, medios
selectivoscomo elHektoen resembrando a las
doce-diecisis horas de incubacin un asa de las
primeras en una placa de estos ltimos. Con las
colonias sospechosas se realizarn pruebas de
identificacin.
Caractersticas:
Shigella
Caractersticas:
Bacilos Gram negativos
no esporulados
anaerobio facultativos
fermentadores
mviles
agente etiolgico de
gastroenteritis (shigelosis) y
disentera (S. dysenteriae)
se asocia adems a colitis
hemorrgica (CH) y sndrome
hemoltico urmico (SHU)
invade y se replica
intracelularmente
Shiga toxina (tipo A-B5) (S.
dysenteriae)
Yersinia
Caractersticas:
Bacilos Gram negativos
no esporulados
anaerobio facultativos
fermentadores
inmviles
Y. pestis posee una cpsula proteica
agente etiolgico de peste
bubnica (Y. pestis), diarreas acuosas
agudas (otras especies)
Y. pestis
Y. enterocolitica
Y. pseudotuberculosis
Escherichia
Caractersticas:
Bacilos Gram negativos
no esporulados
anaerobio facultativos
fermentadores
mviles
agente etiolgico de
septicemia, infecciones del
tracto urinario, meningitis
neonatal y gastroenteritis las
infecciones son endgenas,
mientras que las gastroenteritis
son exgenas
Escherichia coli
Enteroinvasiva
Contagio por alimentos contaminados
La bacteria se adhiere, invade y destruye las
clulas epiteliales
Causa diarreas con sangre (disentera) y
acuosas
Enterotoxina codificada en un plasmidio...
Enterohemorrgica
Contagio por alimentos contaminados
Baja dosis infectiva (<100 bacterias)
Causa desde diarreas leves hasta coltis
hemorrgica
Toxinas VT1 y VT2 codificadas en dos
profagos. Parecidas a las txinas de Shigella
Puede producir SHU por dao renal posterior
a las coltis
Enterotoxignica
Contagio por alimentos o aguas contaminadas
Causa diarrea de viajero leves hasta coltis
hemorrgica
Fimbrias denominadas Factores de
colonizacin (CFA) codificadas en un
plasmidio. CFAI y CFAII, se adhieren
especficamente al epitelio del intestino
delgado
Toxinas STI y STII (termoestables;
codificada en un transposn) y LTI y LTII
(termolbiles)
STI. Estimula la salida de Cl- y/o inhibe
absorcin de NaCl. Diarrea acuosa.
STII. Se cree que estimulara la salida de
HCO3-. Diarrea acuosa.
LTI. Funcin homloga a la toxina del clera.
LTII. Rara en el humano.
Escherichia coli
Enteropatognica
Contagio por alimentos y aguas contaminadas
La bacteria se adhiere al epitelio del intestino
y destruye las microvellosidades
Los factores de virulencia estn codificados
en una isla de patogenicidad y plasmidio
La diarrea se produce generalmente en nios
pequeos, por la reduccin de la absorcin
Enteroagregativa
Formacin de una biopelcula sobre las
clulas epiteliales
Posee varias enterotoxinas y citotoxinas
La diarrea se produce generalmente en nios
y es persistente
Diagnstico
i) Se realiza por los signos y sntomas clnicos
ii) Aislamiento y crecimiento del microorganismo
a partir de las heces
Familia Vibrionaceae
Vibrio
Caractersticas:
Bacilos Gram negativos
curvos
no esporulados
anaerobio facultativos
fermentadores
mviles
agente etiolgico del clera
(V. cholerae) y diarreas acuosas
explosivas
V. cholerae
V. vulnificus
V. parahaemolyticus
Diagnstico
i) Se realiza por los signos y sntomas clnicos ( CONSUMO
DE MARISCOS)
ii) Cultivo se realiza en etapas tempranas de la enfermedad
iii) Aislamiento en medios diferenciales (TCBS)
iv) Pruebas bioqumicas para su diferenciacin
v) Estudios genticos
Familia Campylobacteriaceae
Campylobacter
C. jejuni
C. consisus
C. curvus
C. rectus
C. showae
Caractersticas:
Bacilos Gram negativos
pequeos y ondulados
no esporulados
microaeroflicos
fermentadores
mviles (flagelo polar)
agente etiolgico de
gastroenteritis, septicemias,
meningitis, aborto espontneo,
proctitis
GRACIAS