Asignatura: Anlisis Qumico

Grado: Bioqumica
Curso acadmico: 2011/12
N. Campillo Seva

 1. Generalidades:
Anlisis Cualitativo y Anlisis Cuantitativo

2. Conceptos bsicos en Anlisis Qumico

3. Clasificacin de los mtodos de Anlisis
4. El proceso analtico

2
N. Campillo Seva

1. GENERALIDADES

CIENCIA DE LA MEDICIN: separa, identifica

y cuantifica los componentes de una muestra de materia.
Para ello desarrolla y mejora mtodos
e instrumentos

QUMICA ANALTICA

ANLISIS QUMICO
Parte prctica de la Qumica Analtica que aplica
los mtodos de anlisis para resolver problemas

3
N. Campillo Seva

ANLISIS QUMICO

Anlisis Cualitativo

Anlisis Cuantitativo

Determinacin de la cantidad relativa

de los componentes de la muestra en
trminos numricos

Identificacin de las especies

que componen la muestra
Sangre
Glucosa, colesterol total,
triglicridos, hierro,
ferritina, albmina,
acido rico.

F1
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Glucosa 100 mg/dL

Colesterol total 200 mg/dL
Triglicridos 160 mg/dL
cido rico 5 mg/dL
Fe 150 g/dL
Ferritina 200 g/dL
Albmina 5 g/dL
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IMPORTANCIA DE LA QUMICA ANALTICA

Geologa

Biologa

Ciencias
Ambientales

Agricultura

Qumica

QUMICA
ANALTICA

Ciencias
Sociales

Ingeniera

Medicina
Ciencias de
los materiales

Fsica

2. CONCEPTOS BSICOS EN ANLISIS QUMICO

MUESTRA: Parte representativa de la materia objeto de anlisis.

ALCUOTA: Fraccin o porcin de muestra.
ANALITO: Especie qumica objeto del anlisis.
MATRIZ DE LA MUESTRA: Especies qumicas que acompaan al analito en
la muestra.
TCNICA ANALTICA: Medio empleado para obtener informacin sobre el
analito.
MTODO ANALTICO: Secuencia de operaciones y tcnicas aplicadas para
el anlisis de una muestra.

EJEMPLO: Anlisis de glucosa en sangre.

Muestra: Sangre
Analito: Glucosa
Matriz: Protenas, sales minerales, colesterol
Tcnica analtica: Espectrofotometra de absorcin molecular visible
Mtodo analtico: Implica desde la toma de muestra hasta la obtencin del resultado final.
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OTROS CONCEPTOS IMPORTANTES

INTERFERENTE: Especie qumica distinta del analito que aumenta o

disminuye la respuesta del analito bajo el mtodo aplicado. (Ej. Analito: Ca2+,
Al3+ es un interferente si la determinacin se lleva a cabo por valoracin con
EDTA. Interferencia positiva)

ENMASCARAMIENTO: Transformacin del interferente en otra especie

qumica que no es detectada con la tcnica analtica empleada.
(Ej. Al3+ + 3OH- Al(OH)3)

DISOLUCIN ESTNDAR: Disolucin conteniendo el analito en

concentracin perfectamente conocida. (Ej. Disolucin acuosa conteniendo
glucosa en una concentracin exacta de 75 mg/dL)

CURVA DE CALIBRADO: Grfica que representa la seal analtica

monitorizada frente a la concentracin del analito.

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Mediciones en
Anlisis Cuantitativo

- Peso o volumen de muestra

- Cantidad proporcional a la cantidad de analito
en la muestra

3. CLASIFICACIN DE LOS MTODOS DE ANLISIS

Mtodos clsicos: se basan en propiedades qumicas de los analitos.
Volumetras y gravimetras.

Mtodos instrumentales: se basan en propiedades qumico-fsicas de los analitos.

Se clasifican segn la propiedad que se mide (espectroscpicos,
electroqumicos, miscelneos)

Mtodos de separacin: la finalidad inicial de estos mtodos era separar

interferentes antes de proceder a aplicar la tcnica analtica
seleccionada. En la actualidad, existen mtodos de separacin
que son mtodos de anlisis en s mismos, como por ejemplo
la cromatografa.
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N. Campillo Seva

4. EL PROCESO ANALTICO
El Anlisis Qumico alcanza sus objetivos mediante el PROCESO ANALTICO,
que es la aplicacin del mtodo cientfico, implicando el proceso de la figura:
Problema
Eleccin del
mtodo analtico
Toma de
muestra

MTODO ANALTICO
Tratamiento
de la muestra

Proceso de
medida

Tratamiento de
los datos
Valoracin de
los resultados
Informe y
conclusiones
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N. Campillo Seva

ETAPAS DEL PROCESO ANALTICO

4.1. Definicin del problema:

En esta 1 etapa se plantea el tipo de

anlisis requerido y la escala de trabajo.

Ejemplo: Se pretende contrastar el contenido real de acido acetilsaliclico (AAS) en un

producto farmacutico con el valor suministrado por el fabricante

4.2. Seleccin del mtodo de anlisis:

Consideraciones importantes:

Etapa crucial para el xito

de los resultados finales

Exactitud requerida en los resultados

Disponibilidad de tiempo y de dinero
Nmero de muestras a analizar
Concentracin esperada del analito en la muestra

Volumetra
cido-base

NaOH
F1

Complejidad de la muestra bajo anlisis

Buscar en la bibliografa procedimientos apropiados o, si es necesario, poner
a punto nuevos procedimientos analticos para llevar a cabo el anlisis

AAS

F2

10
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4.3. Toma de muestra o muestreo

Plan de muestreo: estrategia a seguir para garantizar que los

resultados obtenidos reflejen la realidad del material analizado.

Caractersticas que ha de cumplir la muestra:

ser representativa del material a analizar

ser homognea, lo que significa que debe ser igual en todas

sus partes.

Se reduce el error en los resultados

F1

11
N. Campillo Seva

4.4. Tratamiento de la muestra

Son escasos los problemas que se resuelven sin necesidad de
tratamiento de la muestra
Lo habitual, es que la muestra necesite algn tipo de tratamiento, con
el fin de:
1. Preparar la forma y tamao de la muestra, as como la concentracin
del analito(s), ms adecuada para la tcnica analtica seleccionada
2. Eliminar interferencias matriciales

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N. Campillo Seva

Consideraciones importantes durante la etapa de

preparacin de muestra
1) La preparacin de la muestra no puede implicar prdidas de analito, ni
tampoco contaminaciones.
2) Se debe transformar el analito en la mejor forma qumica para el
mtodo analtico seleccionado.
3) Si es necesario, se eliminarn las interferencias de la matriz, mejorando as
la selectividad del mtodo.
4) No se deben introducir nuevas interferencias.
5) Debe considerarse la dilucin o preconcentracin del analito, de manera que
se halle en el intervalo de linealidad del mtodo seleccionado.

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N. Campillo Seva

La mayora de las tcnicas analticas: MUESTRA EN ESTADO LQUIDO

Si la muestra es slida
Molienda: Disminucin tamao
de partcula

Si el anlisis no
va a ser inmediato

Almacenamiento:
luz, T, tipo de recipientes

Maza

Mortero

F4

F1

F5

F2

Liofilizacin previa

F3

Si la muestra es lquida
Evaporacin del
disolvente

Si el analito es un gas disuelto en un lquido

Doble recipiente sellado
para su almacenamiento
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N. Campillo Seva

MUESTRA EN ESTADO LQUIDO

Eleccin del mtodo

Obtencin de la
muestra

Extraccin del analito

a una fase lquida

Preparacin de la
muestra

No

Se encuentra el analito
disuelto?
S
Es mensurable la
propiedad analtica?

Agitaci
n
Disolvent
e (H2O,
EtOH,
MeOH

Suspensi
n del
slido en
el
disolvent
e

Muestra
slida
F1
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Centrifuga
cin

Decantac
in

Lquido
sobrenadante

Residuo
slido

Recogemos el
lquido
el sobrenadante

Resid
uo
slido

15

Para la determinacin de AAS en producto farmacutico mediante

volumetra cido-base
Trituracin del
frmaco y disolucin
en etanol
F1

F2

F3

- En ocasiones, se requieren condiciones ms enrgicas para la

extraccin del analito a la fase lquida:
Disoluciones acuosas de:
- cidos fuertes
- bases fuertes
- agentes oxidantes
- agentes reductores
- combinaciones de reactivos

F4

Aplicacin de energa externa:

- microondas
- ultrasonidos

F5

16
N. Campillo Seva

Eleccin del mtodo

Obtencin de la
muestra

Extraccin del analito

a la fase lquida

Especie fluorescente

Cambio de la forma
qumica del analito

Preparacin de la
muestra

No

No

Se encuentra el analito
disuelto?
S
Es mensurable la
propiedad analtica?
S
Eliminar interferencias si
las hubiere

Ej. Sulfonamida

Adicionamos reactivos (para la determinacin

mediante fluorimetra)

MTODOS DE SEPARACIN
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N. Campillo Seva

DEFINICIN DE RPLICAS DE MUESTRAS

El proceso de medida debe llevarse a cabo en varias alcuotas idnticas de la
muestra

F2

1 mL

110 mg/dL
Finalidad

F1

1 mL

109,6 mg/dL

1 mL

187,5 mg/dL

1mL

110,3 mg/dL

X SD
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1.Establecer la
variabilidad del anlisis
2.Evitar un error grave
LA INCERTIDUMBRE
ES TAN IMPORTANTE
COMO LA MEDIDA
MISMA

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4.5. Proceso de medida

La mayora de los mtodos necesitan de disoluciones estndar o patrn
VOLUMETRAS:
VOLUMETRAS Se mide la cantidad de equivalentes qumicos de valorante
en el punto final de la valoracin
K= constante de proporcionalidad
CA= concentracin de analito

Seal analtica = K x CA
Disolucin patrn

Disolucin problema

CA = 80 mg/dL
S = 0,199

CA = ?
S = 0,261

F1

F2

0,199 = K 80
K = 0,0025 dL/mg

0,261 = 0,0025 CA
CA = 104,4 mg/dL
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4.6. Tratamiento de los datos a travs de ecuaciones de calibracin

Curva de calibracin con patrones externos
0.6

Concentracin,
mg/dl

Seal analtica

0,001

40

0,101

80

0,199

120

0,303

160

0,401

200

0,498

Seal analtica

0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0.0
0

50

100

150

200

250

Concentracin, ppm
mg/dl

Seal analtica = ordenada origen + K x CA

Seal analtica = 0,00129 + 0,0024 x C A

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N. Campillo Seva

CLCULO DE CA EN LA MUESTRA A TRAVS DE LA CURVA DE CALIBRADO

Seal analtica = 0,0013 + 0,0024 x CA

0.6

Seal analtica

0.5

0,261 = 0,0013 + 0,0024 x CA

0.4
0.3

CA = 108,2 mg/dL

0.2
0.1
0.0
0

50

100

150

200

250

Aplicacin de factores de
dilucin preconcentracin,
si procede

Concentracin, ppm
mg/dl

El mtodo de calibracin frente a patrones externos es vlido si una determinada

CA tanto en la muestra como en la disolucin estndar proporciona la misma
respuesta analtica.
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N. Campillo Seva

Si las respuestas analticas para un mismo valor de CA en la disolucin

estndar y en la muestra son diferentes:

Mtodo del estndar interno

El patrn interno es una especie de referencia (R),
con propiedades qumicas y fsicas parecidas
a las del analito (A)

SA/SR

Mtodo de adiciones estndar

Se agregan cantidades conocidas de analito
a la muestra

SA

CA aadida a la muestra

CA
Concentracin de analito en la muestra

22

4.7. Evaluacin de los resultados, informe y conclusiones

Los resultados han de ser evaluados por estimacin de su fiabilidad
El informe dirigido al solicitante del anlisis ha de:
1.Indicar claramente los resultados
2.Las condiciones experimentales empleadas
3.Limitaciones concretas de la tcnica analtica empleada

1. Concentracin de
glucosa obtenida:
x SD
1. Tcnica
espectrofotomtrica
2. Intervalo de linealidad,
LD, LQ

As en orina
1. ND (no detectado)
2. Espectrometra de absrcin atmica
con atomizacin electrotrmica (ETAAS)
3. LD (Lmite de deteccin): 50 ppt

23
N. Campillo Seva

Conclusiones
El analista puede o no implicarse en lo que se vaya a hacer con su informacin.
Como mnimo debera asegurarse que las conclusiones que se extraigan
de sus datos sean coherentes con los mismos.
1. Concentracin de glucosa:
520 1 mg/dL
1. Tcnica espectrofotomtrica
2. Intervalo de linealidad,
LD, LQ

1. Concentracin de As en orina:
403 2 ng/L
2. Tcnica HG-AAS
3. Intervalo de linealidad,
LD, LQ

Ingreso hospitalario del individuo

Envenenamiento crnico del individuo

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Eleccin del mtodo

Obtencin de la
muestra

Extraccin del analito

a la fase lquida

Cambio de la forma
qumica del analito

Preparacin de la
muestra

No

No

Se encuentra el analito
disuelto?
S
Es mensurable la
propiedad analtica?
S
Eliminar interferencias si
las hubiere

Estimar la fiabilidad
de los resultados
Informe

Calcular los resultados

Medir la propiedad
analtica

Conclusiones
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CRDITOS DE LAS ILUSTRACIONES PICTURES COPYRIGHTS

-Logo Portada OCW-UM. Autor: Universidad de Murcia. Direccin web: http://ocw.um.es.
-Pgina 5, F1. Direccin web: http://blogdelcancer.blogspot.com/
-Pgina 10, F1. Autor: Mysid (original by Quantockgoblin). Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:burette.svg
-Pgina 10, F2. Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Chemistry_flask_matthew_02.svg
-Pgina 11, F1. Direccin web: http://maikelnai.elcomercio.es/wp-content/uploads/2008/04/farmaco_radiacion.jpg
-Pgina 14, F1. Fuente: Quantitative Chemical Analysis, Seventh Edition, 2007 W.H. Freeman and Company.
-Pgina 14, F2. Direccin web:
http://profesores.elo.utfsm.cl/~agv/elo323/2s06/projects/GerardoAlvarez/proyecto_final_archivos/image009.gif
-Pgina 14, F3. Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Eppendorf_tubes.jpg
-Pgina 14, F4. Direccin web: http://www.sunbox.es/es/envases-industriales-3/botes-5/frascos-roscados-111.html
-Pgina 14, F5. Direccin web: http://www.adendorf.net/
-Pgina 15, F1. Fuente: Quantitative Chemical Analysis, Seventh Edition, 2007 W.H. Freeman and Company.
-Pgina 16, F1. Autor: Hannes Grobe. Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Mortar_achat_hg.jpg
-Pgina 16, F2. Autor. User:Ruhrfisch. Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Magnetic_Stirrer.JPG
-Pgina 16, F3. Autor: Hannes Grobe. Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Volumetric_flask_hg.jpg
-Pgina 16, F4. Direccin web:
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-Pgina 19, F1 y F2. Fuente: Quantitative Chemical Analysis, Seventh Edition, 2007 W.H. Freeman and Company.

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