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METODOLOGA EXPERIMENTAL
La metodologa experimental de este estudio se divide en tres
etapas:
1. Calibracin, validacin e implementacin de las tcnicas
analticas que permitan identificar cianobacterias y cuantificar
sus metabolitos en agua natural y potable; as como los mtodos
para determinar las principales caractersticas fisicoqumicas y
microbiolgicas (indicadores de la presencia de cianobacterias).
2. Realizacin de un programa de muestreo y caracterizacin
fisicoqumica y microbiolgica del agua cruda y tratada.
3. Anlisis estadstico de resultados.
Parmetros fisicoqumicos
Los parmetros fisicoqumicos determinados fueron: pH, temperatura, contenido de oxgeno disuelto, color,
turbiedad, fosfatos, nitritos, nitratos y slidos suspendidos totales.
Determinacin de clorofila-a: Las muestras se recolectaron en frascos mbar de un litro, se llevaron en hieleras
y se conservaron a una temperatura de 4C, para evitar su descomposicin gradual.
Muestreo de organismos: Cada muestra se recolect por duplicado en frascos mbar de un litro. En la botella
se agrego formol al 36% (fijador de clulas). Estas muestras fueron llevadas en hieleras al laboratorio
Determinacin de 2-metilisoborneol (2-MIB) y geosmina (GEO): Se recolectaron muestras de 60 mL, en frascos
de vidrio de 100 mL que contenan 15 g de cloruro de sodio (NaCl) y un agitador magntico; los frascos se
sellaron con una septa y fueron llevados en hieleras al laboratorio del Instituto de Ingeniera de la UNAM, para
su anlisis al da siguiente.
Determinacin de anatoxina-a, cilindrospermopsina y microcistina: Se recolectaron muestras de 500 mL en
frascos mbar, que fueron llevadas en hieleras al laboratorio del Instituto de Ingeniera de la UNAM y
conservadas en un cuarto fro a 4C, para realizar al da siguiente su extraccin en fase slida.
Parmetros microbiolgicos
Determinacin de clorofila-a:
Esta tcnica est constituida por dos etapas: a) extraccin y b)
cuantificacin por mtodo espectrofotomtrico. A continuacin se describe
cada etapa.
a) Extraccin de Clorofila-a:
Los pigmentos se extraen del concentrado planctnico con acetona acuosa
y la absorbancia del extracto se determina con un espectrofotmetro Este
procedimiento, que se describe a continuacin, se realiza con poca luz o
sin luz, para evitar procesos de degradacin de la clorofila-a y se utilizan
tubos opacos o protegidos de la luz con papel aluminio.
b) Cuantificacin de la clorofila - a
60 mL de agua
Calentamiento
60 C
15 g de NaCl
Desorcin
CG-EM
Adsorcin
30 min
60 C
Determinacin de cianotoxinas
Adsorcin
Acondicionamiento
500 mL de agua
5 mL cloruro de metileno/acetato de
etilo
5 mL de MeOH
5 mL de H 2O
HPLC
Concentracin
Desorcin
Rotavapor
5 mL de MeOH/H 2O al 30%
5 mL de MeOH/H 2O al 70%