GC / MS

Curso Bsico

Perkin Elmer
Instruments

Introduo
A GC / MS uma tcnica analtica instrumental que utiliza
um GC acoplado a um Detector de MS com objetivo de
identificar positivamente , definir a estrutura Qumica e ou
quantificar os componentes de uma amostra (mistura) .
A funo do GC a da introduo da amostra , sua
vaporizao e posterior separao dos componentes na
Coluna capilar .
Os componetes eluem da Coluna e so enviados ao MS
atravs de uma Linha de Transferncia .
O Detector de MS ioniza os componentes, oriundos do
GC, e ento obtem-se os seus espectros de massa .
Estes possibilitam a identificao positiva , baseado na
sua estrutura molecular, comparando com os dados das

Caractersticas do GC / MS

Universal e especfico

Alta sensibilidade

Identificaco positiva contra padres ou Bibliotecas de

Espectros

Quantificaco livre de interferncias

Utilizao de Padro interno com etiqueta isotpica

TurboMass Hardware 1 - 3

Capacidade da Tcnica do GC / MS

Combina tcnicas de separao / identificao

Proporciona informao tanto qualitativa como

quantitativa , sobre os componentes da amostra

Oferece a melhor soluo , para muitos problemas

analticos

Quantificao livre de interferncias

TurboMass Hardware 1 - 4

Neste curso abordaremos os seguintes tpicos :

- G C e suas caractersticas
- Linha de transferncia
- Detector MS e suas caractersticas

Componentes fsicos de um GC /
MS
Vacuum Manifold
Inlet
System
GC

Transfer
line

Ion
source

Mass
Analyzer

High Vacuum
Pump

Data System

TurboMass Hardware 1 - 6

Backing
Pump

Detector

Vacuum
Gauges

MS
Electronics

Configurao do CG
Vacuum Manifold

Inlet
System
GC

Transfer
line

Ion
source

Mass
Analyzer

High Vacuum
Pump

Backing
Pump

TurboMass Hardware 1 - 7

Detector

Vacuum
Gauges

MS
Electronics

GC
A GC uma tcnica analtica, bastante conhecida, que visa
separar os componentes de misturas volteis .
A amostra injetada no aparelho atravs de uma GS Valve
(gases) , Injetor capilar (lquidos volteis) ou acessrios
(AutoSampler, ATD , HeadSpace, Purge and Trap) para
amostras difceis (Ar atmosf., guas , pastosas, slidas, etc) .
A mistura injetada, vaporizada, transportada pelo Gs de
arraste Coluna capilar (low I.D.) onde os seus componentes
so separados (pelas propried. Fsico-Qum. do filme interno) .
Neste caso , aps a eluio da coluna, os componentes so
conduzidos ao MS atravs de uma Linha de Transferncia .
Os parmetros do GC (pneumtica (PPC), temperaturas,
sinal, etc) so controlados pelo Software Analtico do Sistema.

Manifold
(gs - arraste)

Transfer Line
(MS)

PPC

Amplific.
Forno
Coluna.

Injetor
p/ Gses

TurboMass Hardware 1 - 9

Injetor p/ Lquidos

Controle Pneumtico
Programvel - PPC
Funcionalidade
Programmable
Pneumatic
Control
(PPC)

Electronic
Pressure
Control
(EPC)

GSV
Carrier
Gas

TurboMass Hardware 1 - 10

PreVent
Mid-Point
Gas

Electronic
Flow
Control
(EFC)

Split/Splitless
& PSS
Carrier
Gases

Split/Splitless
& PSS
Split Flow

Packed Column
& POC
Carrier
Gases

Detector
Combustion
& Make-Up
Gases

PPC - Componentes
Restritor Programvel
Impedncia fixa - Frit

Transdutor de presso

Controle do Software

TurboMass Hardware 1 - 11

Controle do Carrier Gas Flow

TurboMass Hardware 1 - 12

PPC

- Split Pneumatics
Pressure
Control

Fixed
Pressure
Regulator

Fixed
Restrictor

PC

Charcoal
Trap

Flow Control

TurboMass Hardware 1 - 13

Solenoid
Valve

Injetor de Amostras Lquidas

As amostra lquidas so injetadas no GC , atravs de

um Septo , num Liner de quartzo (dentro de um bloco de
ao aquecido) , onde vaporizada instantaneamente e
carreada ao sistema pelo Gs de arraste .
A temperatura do bloco deve ser suficiente para
vaporizar totalmente (*) a amostra .
(*) - Como regra geral , utiliza-se 20 a 50 c acima do
Ponto Final de Ebulio da Amostra .
O bloco deve possuir volume interno mnimo e os
dispositivos que permitem a purga do septo , diviso
da Amostra (Spliter) , etc .
TurboMass Hardware 1 - 14

* Vide slides especficos

Devido ao alto grau de expanso dos lquidos

(~ 1 : 300) ao vaporizar, deve-se trabalhar com pequenos
volumes de amostra (microseringa de 1 a 10 uL) .
Existem diversos tipos de Injetores Lquidos :
- Empacotado (Packed) - para utilizao com
Colunas empacotadas ou Capil. Mega bore (c/ adaptador)
- Capilar (Split/Splitless) - para Col. Capilares (.10 a .53
mm ID) , que permitem a diviso (split) da amostra.
- PSS (*) - dem , com programao pneumtica e
da temperatura .
- On Column - para injeo direta , da amostra ,
na coluna capilar .
- POC (*) - dem , com programao pneumtica e
da temperatura
TurboMass Hardware 1 - 15

Injetor Packed Column

(Empacotado))

Carrier gas in

TurboMass Hardware 1 - 16

Injetor Split / Splitless

Capilar
Septum
Purge

Carrier gas in
Split Vent

Liner

Capillary Column

TurboMass Hardware 1 - 17

Split
Point

Injetor Programmable
Split/Splitless (PSS)

Septum
purge

Carrier gas in
Split vent
Cooling fins

Cooling fan
Split point

Capillary column

Liner
Heater block

Hot Injection

Condensation of highboiling components

FLASH
EVAPORATION
(EXPANSION)

Cold Injection

NO EVAPORATION

Programmed Evaporation
CONTROLLED
EVAPORATION

Injetor On-Column

Hourglass
adapter
Carrier gas in

Capillary column
or Pre-column
TurboMass Hardware 1 - 22

Forno
O Forno do GC destina-se ao acondicionamento e
aquecimento da(s) Coluna(s) Cromatogrficas .
Sua temperatura controlada pr termostato regulvel e
deve ser adequada para obter-se a separao ideal de
alguns ou de todos os componentes da amostra.
A temperatura do Forno , durante as anlises , pode
ser constante (Isotrmica) ou aumentar gradativamente
(conforme Programao) .
Os ajustes da temperatura dependem da Coluna e da
separao dos componentes desejados .
O tempo de reteno dos picos duplica a cada 30 c de
reduo da temperatura (Giddings) .
TurboMass Hardware 1 - 23

- Colunas Cromatogrficas
O objetivo primrio das Colunas a separao dos
componentes de uma mistura (amostra) .
A sua escolha correta o fator mais importante para o
bom desempenho de uma anlise .
Estudaremos os tipos bsicos de Colunas : Capilares e
Empacotad. e os itens que influem no seu desempenho.
- Empacotadas :
(no utilizadas em GC / MS)
so constituidas de tubos (Ao inox, Cu, Ni ou Vidro)
de 1/8 a 1/4 ID e comprimentos que variam de 1 a 5 mts .
As de Vidro so usadas para anlises de produtos
farmacut. ou biolg. e as de Ao inox para uso genrico .
TurboMass Hardware 1 - 24

Coluna Capilar
So constituidas de tubos de Slica fundida (10 a 100m)
revestidos internamente de uma camada rugosa (Celite) ,
impregnadas de uma fase lquida oleosa orgnica (filme) de
alto ponto de ebulio .Devido as suas caractersticas (I D ,
comprim. e expessura do filme) apresenta uma vazo bem
baixa (0.5 a 2 ml/min) . Isto proporciona maior tempo de
residncia e de contato amostra / fase .
Estes fatores facilitam a separao dos componentes
da amostra , proporcionam picos bem agudos , num
tempo bem mais rpido que o das colunas empacotadas .
As fases lquidas separam os componentes , por
dissoluo diferencial ou afinidade qumica .
Estas devem ser bastante termo-estvel, bom solvente
diferencial , no voltil , etc. .
TurboMass Hardware 1 - 25

A fase lquida deve ter algumas caractersticas fsicoqumicas similares a da amostra , com base na
polaridade destas . Assim , amostras polares devem ser
analisadas em fases lquidas polares e vice versa .
Vejamos a classificao de algumas substncias tpicas:
- Classe 1 (muito polar) : gua , Glicol ,Glicerol ,
Aminas , Alcoois , Polifenois .
- Classe 2 (polar) - Alcoois , Acidos Graxos , Fenois ,
Aminas Primarias e Secundarias .
- Classe 3 (intermed.) - Esteres , Cetonas e Aldeidos .
- Classe 4 (baixa polar.) - Hidrocarbon. Aromticos e Olefinas
- Classe 5 (apolar) - Hidrocarbon. Saturados e Mercaptans
TurboMass Hardware 1 - 26

ACESSRIOS
Temos o problema da manipulao de
Amostras difceis , do tipo aquosa (efluentes,
solues, etc) pastosa (pomadas, gel, lodo, etc)
slidas (terra, sabonetes, polmeros, etc) e
gasosas / vapores / odores / Ar Atmosfricas, que
normalmente , no podemos injetar diretamente
no Cromatgrafo .
Para a resoluo destes problemas podemos
utilizar os seguintes acessrios / equipamentos :

AutoSampler Movimentos
Sample B
Sample A

Inlet B

Inlet A

TurboMass Hardware 1 - 28

Tcnica PreVent
um avanado Sistema de Injeo Capilar , instalado
no AutoSystem XL GC , que utiliza tcnicas de
Pre-Column Venting para :

Tratamento de amostras problemticas

Proteger a Coluna e o Cromatgrafo
Proporcionar limites mais baixos de deteco
Aumentar o desempenho analtico

TurboMass Hardware 1 - 29

PreVent
Permite ...

proteger o sistema do GC , quando em repouso

otimizar os picos cromatogrficos
prevenir a Coluna e o Detector de solventes ou
compostos agressivos
injees de grandes volumes (LVI)
reduzir o tempo das anlises
eliminar a necessidade de programao de
temperatura do forno

TurboMass Hardware 1 - 30

Tcnica PreVent
Componentes :

Injetor PSS - Split/Splitless Programvel

Restritores e Equalizadores de fluxo

PPC - Controle Pneumtico Programvel

Instalado exclusivamente - GC AutoSystem XL

TurboMass Hardware 1 - 31

PreVent
Injetor - Restritor
PSS Injector

Restrictor

Detector
T-Piece

P
Capillary Column

TurboMass Hardware 1 - 32

PreVent
A Purga do Solvente previne a inundao de solvente

O Gs de Arraste leva a amostra lquida para a parede interna da coluna...

isto pode causar a distoro dos picos no cromatograma resultante ...

A Purga do Solvente reduz a quantidade solvente que entra na coluna ...

TurboMass Hardware 1 - 33

Tcnicas de
Amostragem
Amostras de Gases , Ar
Atmosfrico
e de Matrizes Aquosas ,
Pastosas e
Slidas

TurboMass Hardware 1 - 34

Head Space
e

Head Space
o equipamento apropriado p/ a extrao de
compostos volteis de amostras lquidas, pastosas ou
slidas . Baseado na propriedade fsica da Partio,
os componentes volteis da amostra migram , na fase
vapor , p/ a parte superior do frasco (HS) e ento so
injetados no GC , via linha de transferncia .
Utilizado principalmente nas anlises de :
- guas (Efluentes) : BTEX , Organoclorados , etc
- Alimentos e Cosmticos : flagrncias e aromas
- Polmeros (Acet. em garrafas PET) e Farmacuticos
- Solos (vazam. Gasolina , Organoclorados, etc)
TurboMass Hardware 1 - 35

Headspace - Gas Chromatography

Princpios

Partition

CS
K
CG
CS = concentr. do
analito na amostra
CG = concentr. do
analito na fase gs
TurboMass Hardware 1 - 36

O coeficiente de partio K ,
obtida - no equilbrio.

K influenciado por :
- Temperatura
- Concentrao do Sal , etc.

O equilbrio documentado por

anlises MHE durante o
desenvolvimento do mtodo .
(Check da adsoro residual ou
migrao incompleta do analito
na amostra) .

TurboMatrix HeadSpace
Principais Caractersticas
3 Tipos de Carrossel :
- 16 Amostras
- 40 Amostras
- 110 Amostras
Acessrios :
- Shaker
- Criogenia
-MHE
* Adaptvel a qualquer GC

TurboMass Hardware 1 - 37

Stand by
Injeo (Transf.)

TurboMass Hardware 1 - 38

Pressurizao

Headspace Sampling
Applications
Organic Volatile Impurities (OVIs) in
Pharmaceuticals

TurboMass Hardware 1 - 39

ATD - Dessoro Trmica Automtica

- As amostras (Ar atmosfrico ou similares) , neste
tipo de anlise , so coletadas em Tubos de Adsoro
(tubos de ao recheados com fase estacionria) .
O ATD o equipamento apropriado p/ extrair os
compostos dos tubos por Dessoro trmica com purga
do prprio gs de arraste , trapeamento da amostra e
posterior transferncia para o GC .
Estas operaes so todas programadas e
automatizadas (Auto Sampler) .
- So utilizados principalmente p/ anlises de
controle do Meio Ambiente. (determin. de Poluentes na
Atmosfera) , Sade ocupacional , Aromas , etc.
TurboMass Hardware 1 - 40

TurboMatrix Thermal Desorber

Principais Caractersticas
Tipos de Carrossel :
01 Tubo
50 Tubos
Acessrios :
Criogena
Amostrador On Line
* Adaptvel a qualquer GC
TurboMass Hardware 1 - 41

Concentrao dos Analitos :

- Um pequeno Trap de Adsorvente (20-100mg) ,
eletronicamente refrigerado
GC

xxxxxx
xxxxxx

Detector

Electrically cooled
-30 to +30 C

Vantagens :

Analytical column

No utiliza lquidos criognicos

Reteno quantitativa , mesmo de componentes muito
volteis , como os C2 Hidrocarbonetos

Dessoro rpida e quantitativa dos analitos (ampla faixa

de Pto. de ebulio) gerando picos capilares , sem
necessidade de concentrao adicional
Sem risco de bloqueio do fluxo , por formao de gelo
TurboMass Hardware 1 - 42

Tubos de ao inox ou vidro revestidos

internamente , identificados com ID
Number
Glass Tube
Perkin-Elmer

Sampling End
of Tube

X12345

Serial Number

Perkin-Elmer

A12345

Stainless Steel Tube

TurboMass Hardware 1 - 43

Pump End
of Tube

Compostos especficos US EPA

TO-14 Air Toxics
freon 12
methyl chloride
freon 114
tetrachloroethane
vinyl chloride
methyl bromide
ethyl chloride
benzene
freon 11
benzene
vinylidene chloride
dichloromethane
trichlorotrifluoroethane
1,1-dichloroethane
cis-1,2-dichloroethylene
trichlorobenzene
chloroform
1,2-dichloroethane
TurboMass Hardware 1 - 44

1,1,1-trichloroethane
benzene
carbon tetrachloride

p-xylene
styrene
1,1,2,2-

1,2-dichloropropane
trichloroethylene
cis-1,3-dichloropropene

o-xylene
4-ethyl toluene
1,3,5-trimethyl

trans-1,3-dichloropropene

1,2,4-trimethyl

1,1,2-trichloroethane
toluene
1,2-dibromoethane
tetrachloroethylene
chlorobenzene

m-dichlorobenzene
benzyl chloride
p-dichlorobenzene
o-dichlorobenzene
1,2,4-

ethyl benzene
m-xylene

hexachlorobutadiene

Interface - GC / MS
Vacuum Manifold

Inlet
System
GC

Transfer
line

Ion
source

Mass
Analyzer

High Vacuum
Pump

Data System

TurboMass Hardware 1 - 45

Backing
Pump

Detector

Vacuum
Gauges

MS
Electronics

Interface com introduo direta

do capilar

Vantagens
- Simples , baixo custo
- Um mnimo de
reatividade
de volume morto
seletividade

Desvantagens
- Range de fluxo , limitado
- Variedade de ID , limitado , para as colunas

TurboMass Hardware 1 - 46

Lnha de Transferncia do CG

Controle da temperatura
atravs do MS

Em condies de alarme do
CG , desliga
automaticamente o
aquecimento

Tubo interno isolado por

camisa a vcuo
Lmite mximo: 350C

TurboMass Hardware 1 - 47

Comparao - tipos de Interfaces

CG / MS

TurboMass Hardware 1 - 48

Interface
Type

Sample
Conductance
(%)

Enrichment

Direct

100

Splitter

5-90

Jet
Separator

60-90

100

Open/Split

5-95

Interface de fracionador de fluxo

aberto Open/Split
He in

He out

From
GC

To
MS

Liner

TurboMass Hardware 1 - 49

Flow restrictor

Fracionadores (Splitter)

From
GC

TurboMass Hardware 1 - 50

To
MS

Jet Separator

From
GC

TurboMass Hardware 1 - 51

Vacuum

To
MS

MS - Configurao
Vacuum Manifold

Inlet
System
AutoSystem

Transfer
line

Ion
source

Mass
Analyzer

High Vacuum
Pump

Data System

TurboMass Hardware 1 - 52

Backing
Pump

Detector

Vacuum
Gauges

MS
Electronics

Espectrometria de Massa (MS)

A MS uma poderosa tcnica analtica, tambm bastante
conhecida, que visa identificar positivamente e ou quantificar
os componentes conhecidos de uma mistura e elucidar a
estrutura e as propriedades Qumicas das molculas .
Os componentes da amostra, previamente separados no GC,
so transferidas p/ o MS, atravs da linha de transferncia.
No MS ocorre a fragmentao da molcula , a ionizao e a
deteco, possibilitando ao usurio o detalhamento da
estrutura e o peso molecular do composto.
Utilizando uma biblioteca especfica ou a NIST , Wiley,
Aquarius (M.A.) ou Plefger/Marer/Weber (Toxic.) podemos
identificar positivamente o composto, baseado na abundncia
dos seus fragmentos (ons) .
Ex. Vide o CCL4 (pm 152) .

MS
. A MS mede as massas de molculas (individuais)
que foram convertidas em ons (molculas carregadas
eletrnicamente) .
. As molculas so to pequenas (H=1,66x10-24g) que foi
necessrio criar uma nova unidade mais conveniente
para as massas moleculares : Dalton (Da) .
. Esta definida como : 1 Da = 1/12 da massa de
1 tomo do istopo do C-12 . No entanto, atualmente,
a MS no mede diretamente a massa e sim a relao
massa (m) / (z) carga dos ons .
A amostra na fase gasosa introduzida, no sistema a
vcuo, e ionizada na Fonte .

MS

continuao . . .

Os ons formados so conduzidos atravs do

Analisador de Massas, de acordo com o seu m/z , e
ento coletados pelo Detector . Neste os ons geram um
sinal eletrnico proporcional ao seu n # (fragmentos) .
O Sistema de tratam. de Dados registra estes sinais
eletrnicos e os converte em um Espectro de Massas .

Caractersticas de um Espectro de Massa

o grfico da abundncia de ons vs. m / z .
Os ons e sua abundncia servem para estabelecer o
P. M. e a estrutura dos compostos em anlise .

Mass Spectrum

....... continuao

Vejamos o Espectro de massa da molcula do CO2 .

Visto que o processo de ionizao, geralmente fragmenta
a molcula , os ons aparecem no Espectro com valores m/z
abaixo da massa molcular correspondente .

Mass Spectrum

continuao . . .

No espectro, visto anteriorm. , a molcula ionizada do

CO2 (ou on molecular) aparece com m/z 44 (12+2.16) .
A clivagem da ponte C - O no on molecular, para
produzir CO ionizado ou O atmico , resulta nos
fragmentos de m/z 28 e16 .
A perda de 2 O atmicos neutros resulta num
fragmento adicional de m/z 12 do C .
Neste exemplo, todos os ons so de carga positiva ;
o on molecular designado como M+ ou CO2+ e os
fragmentos so indicados como C+ , O+ e CO+ .
possvel , tambm, gerar e detectar ions negativos .

Caractersticas :
No GC, o Gs de arraste (He) flui da coluna capilar
(0,5/3,0 ml/min) p/ a fonte de ons do MS (~2x10-5 Torr EI / 3x10-4 Torr - CI) causando uma grande expanso,
equivalente a vrios L/min .
Consequentemente, necessrio uma Bomba de vcuo
de grande capacidade (Turbomolecular) p/ compensar .
. Na fonte Inica , os eluentes da coluna so
bombard. por um feixe de eletrons (EI) , fragmentam e
os ons resultantes so repelidos e direcionados , via
Quadrupolo para o Detector de PMT .
So escaneados repetidamente (num range de massa),
com grande velocid., permitindo uma deteco adequada
dos espectros das massas (dados armazen. em Arquivo).

Estes espectros so ento manipulados, pelo scan do

topo dos picos ou pelo total dos ons (TIC), mostrando
todos os componentes da mistura.
Deve-se subtrair o background e refinar os picos
(devido sangramento das colunas, etc) para evitar
distores nos resultados .
O prximo passo identificar componentes da
amostra ou detalhar as suas propriedades Fs/Qum ,
pesquisando nas Bibliotecas (NIST, etc) disponveis (60
a 200 K espectros).
Nestas obtemos uma lista dos compostos mais
provveis, suas frmulas, PM, etc , que nos possibilita
identificar positivamente (RT) o composto .

Podemos , tambm , trabalhar com ons especficos

(Select Ion Recording - SIR ou Monitorig - SIM) .
Estes ltimos procedimentos permitem anlises
precisas e de baixos teores (sub ppb , ppt) .
Como por exemplo :
. Drogas de abuso em fludos humanos .
. Benzo(a)Pireno, Dioxina e VOCS em solos e efluentes
. Aromas e flagrncias em leos , pastas , gel ,
etc. .
. Odores e poluentes do Ar atmosfrico .

Uma breve reviso das

unidades . . .
Name

Symbol

Scaling

gram

gm

milligram

mg

10-3

microgram

10-6

nanogram

ng

10-9

picogram

pg

10-12

femtogram

fg

10-15

attogram

ag

10-18

TurboMass Hardware 1 - 61

Sensibilidade e Especificidade

Varredura total
- Lmites de deteo de 1 a 10 picogramas
- Identificao de desconhecidos , por comparao com os espectros
em Bibliotecas de Referncia
- Confirmao por tempos de reteno , padres e similaridade entre
os espectros
Monitoramento de Ions Pre-Seleccionados (SIM)
- Lmites de deteco de 10 a 100 femtogramos
- Identificao por tempos de reteno
- Confirmao usando razes de abund. natural, de Ions
Seletividade
- Compostos (vs. Funcionalidade como o ECD ou NPD)

TurboMass Hardware 1 - 62

Caractersticas de um Espectro
de Massas

Grfico da intensidade dos Ions versus a razo m / z

Os fragmentos Inicos proporcionam detalhes sobre a

estrutura e o peso molecular do composto.

Exemplo :

Espectro de massas do Tetracloreto de Carbono

TurboMass Hardware 1 - 63

Tetracloreto de Carbono
CCl4 (MW 148)
CCl3

CCl
Cl

TurboMass Hardware 1 - 64

CCl2

Universal e especfico
Quantificao livre de Interferncias

Universal
TurboMass Hardware 1 - 65

Especifico

Universal e Especfico

TurboMass Hardware 1 - 66

Abundncia isotpica natural ,

do
Bromo
Br
Br
Br
2

m +2

+4

TurboMass Hardware 1 - 67

+4

Br5

Br4

+8

+4

+4

Br6

+8

+4 +8 +10

Abundncia isotpica natural do

Cloro
Cl
Cl
Cl
2

m +2

+4

TurboMass Hardware 1 - 68

+4

Cl5

Cl4

+8

+4

+4

Cl6

+8

+4

+8

Sistema de Vcuo
Vacuum Manifold

Inlet
System
AutoSystem

Transfer
line

Ion
source

Mass
Analyzer

High Vacuum
Pump

Data System

TurboMass Hardware 1 - 69

Backing
Pump

Detector

Vacuum
Gauges

MS
Electronics

Manifold de Vcuo

Lnha de Transferncia desde o CG

- Controle da temperatura desde o MS
- Isolamento trmico Dewar

A fonte de Ions e o Quadrupolo montados na face superior do

Manifold
- Pode ser retirado por cima , sem mover o CG

O Detector montado atrs do Manifold

A Bomba de alto vcuo e os indicadores , so montados abaixo

do Manifold

TurboMass Hardware 1 - 70

Bombas

Bombas de alto vcuo (10-4 to 10-12 Torr)

- Difuso de leo
No possui partes em movimento
No mais recomendvel
- Turbomolecular
Limpa - sem leo
atinge 10-6 Torr

Bomba mecanica auxiliar (atm. to 10 -4 Torr)

- Rotativa

TurboMass Hardware 1 - 71

Bombas de Vcuo

Opes para Bomba de Alto Vcuo :

- 80 L/sec esfriada a ar (somente para EI)
- 250 L/sec Turbomolecular

- * * As Bombas a leo no so mais recomendadas

devido a comprovada contaminao do MS .
Bomba de Arranque - Vane ou similar
- Bomba mecnica de 3.0 m3/hr
- Alto vcuo : 2 x 10 -3 mbar
- Dupla Voltagem
- Trabalha sincronizada
com a Bomba
TurboMolecular
TurboMass Hardware 1 - 72

250 L/sec - Bomba

Turbomolecular

Controle automtico, da Bomba,

no processo de vcuo inicial

Esfriamento por gua (opcional)

Controle automtico do Vent .

- Abre , quando a bomba
alcana 50% da velocidade
de trabalho

No necessita manuteno

TurboMass Hardware 1 - 73

Bomba Turbomolecular
Lminas Rotatrias
Lminas fixas

para
bomba
secundria

TurboMass Hardware 1 - 74

Motor

Indicadores de Vcuo (Gauges)

Vcuo inicial (desde presso atmosf. at 10-4 Torr)

- Pirani (standard com bomba de difuso)

Alto vcuo (10-3 a 10-8 Torr)

- Penning Ionization
- Necessrio para EI e IQ e nas aplicaes com fluxos muito altos ,
atravs da coluna .

TurboMass Hardware 1 - 75

ptica Inica
Vacuum Manifold

Inlet
System
AutoSystem

Transfer
line

Ion
source

Mass
Analyzer

High Vacuum
Pump

Data System

TurboMass Hardware 1 - 76

Backing
Pump

Detector

Vacuum
Gauges

MS
Electronics

Fonte do EI (Interna e Externa)

Magnet
Lens
2

Filament
Repeller

Analytical
Quadrupole

Collector
Magnet

TurboMass Hardware 1 - 77

Lens
1

Pre
Quads

Phosphor
Screen

Conversion
Dynode

Photomultiplier

ptica inica - Configurao

Reference & CI
Gas Inlets

Prefilter
GC
Column
TurboMass Hardware 1 - 78

Outer
Ion Source

RF Amplifier

Quadrupole
PMT
Conversion
Phosphor
Dynode

Fonte de ons
Vacuum Manifold

Inlet
System
AutoSystem

Transfer
line

Ion
source

Mass
Analyzer

High Vacuum
Pump

Data System

TurboMass Hardware 1 - 79

Backing
Pump

Detector

Vacuum
Gauges

MS
Electronics

Qual a necessidade da Fonte de

ons ?

As partculas carregadas (ons) podem ser facilmente

manipuladas usando ajustes de campos eltricos e
magnticos , tais como :
- enfoque
- desvio
filtros
deteco

As partculas neutras e as molculas so muito mais

difceis de manipular .

TurboMass Hardware 1 - 80

Fonte de ions

Intercambio rpido , da fonte de ions interna

- Volume inico , filamento
- Repeler e Trap de electrons (EI - somente)
- Introduz-se pela parte frontal do Instrumento
- Filamento nico , com fcil troca
Fonte externa
- Lentes , magnetos , aquecedores
- Conexes para os gases de calibrao e IQ
- Wiper contacts para a fonte interna
- O Manifold pode ser retirado inteiro , para
manutenes

TurboMass Hardware 1 - 81

Fonte de ions
A Fonte de ons (de IE) gera os ons por bombardeio
das molculas gasosas por um feixe de Eletrons .
Na tcnica IE , uma mistura de ons positivos e negativ. e
espcies neutras so geradas pelo bombardeio de 70 eV
sobre as molculas gasosas .
Os ons posit. so impelidos para dentro do Analisador ,
mantendo a Fonte a um potencial posit. em relao a este e
focados por voltagens aplicadas as lentes do sistema .
A funo do eletrodo Repeller regular a focagem dos
ons em direo ao Analisador. Os ons negat. e Eletrons
so atraidos por um trap de eletrons com carga posit. .
As molculas e os fragmentos neutros (no ionizados)
TurboMass Hardware 1 - 82
so
ventados pelo sistema de vcuo .

Fonte de ions
continuao . . .
No processo EI , a energia de bombard. dos eletrons
geralmente muito maior do que a de atrao que mantm
as moleculas juntas . Ento , quando os eletrons altamente
energiz. interagem com uma molcula, ocorre a ionizao e
as pontes so quebradas formando os fragmentos .
Esta a causa por que outros ons , alm dos ons da
molcula original , aparecem no Espectro .
Embora ons posit. e negat. sejam gerados na Fonte
ao mesmo tempo, uma polaridade selecionada , e o
Espectro registrado consiste de ons positivos .
As partculas neutras no so detectadas .
Os Espectros EI dos ons posit. so mais usualmente
registr. devido aos negat. serem bem menos abundantes .
TurboMass Hardware 1 - 83

Tipo de Ionizao da amostra CG/MS

Ionizao por Impacto de Eletrons (EI)

- Alta energa: 70 eV
- Ions positivos
- Fragmentao : Informao estrutural

Ionizao Qumica (CI)

- Baixa energa
- Ions positivos e negativos
- O Ion molecular reage com um Gas Reagente
- Usa-se tpicamente Metano, Isobutano e Amnia

TurboMass Hardware 1 - 84

Ionizao da Amostra

TurboMass Hardware 1 - 85

Fonte de ons - Tcnica

EI

TurboMass Hardware 1 - 86

Vantagens da Ionizao por EI

Construo simples
Ionizao de alta eficincia (10-5)
Padro de fragmentao , altamente caracterizado
Impresso digital
A existncia de biblioteca de espectros EI,
pesquisados por computadores
Limitada quantidade de reaes devidas a colizes
entre fragmentos

TurboMass Hardware 1 - 87

Desvantagens da Ionizao por

IE

A mostra deve estar em forma gasosa

Pode causar excessiva fragmentao

Alguns compostos podem NO gerar o Ion molecular

O espectro pode NO permitir distinguir entre os ismeros

Alguns espectros podem ser muito complicados de interpretar

TurboMass Hardware 1 - 88

Reaes da Ionizao por Impacto de

Eletrons
molecule + e-

molecule
+

+ 2e-

Fragmentao
molecule
+

mole
+

TurboMass Hardware 1 - 89

mo
+

radical

ion
mole
+

cule

le

neutral molecule

Reagrupamento

molecule
+

mole...e
+

radical
ion

TurboMass Hardware 1 - 90

cul
+
neutral
molecule

Ionizao Qumica
Em contraste com a EI, muitas aplicaes de CI produzem
ons pelo processo relativamente brando de transferncia
de protons .
A transfer. de um proton para uma molcula M, a partir
de um gs reagente como o Metano , na forma de CH5+ ,
forma um on positivo (M + H)+ .
A transfer. de um Proton de M para outros tipos de ons
reag. libera um on negativamente carregado M(H)- .
No caso dos ons positivos de CI resulta geralmente em
molculas com abundncia de protons .
Vide exemplos . . .
TurboMass Hardware 1 - 91

Vantagens da Ionizao Qumica

Fragmentao mnima
Informao sobre o peso molecular (PM) .
Os gases reativos podem ser seletivos com respeito a
certas caractersticas dos compostos
- Seletividade por afinidade a protons ou eletrons
- Possibilita a seletividade em relao aos ismeros
- Possibilita a localizao de duplas ligaes
- Possibilita a mesma seletividade do Detector ECD
Permite obter sensibilidades parecidas ao do Detector ECD

Menores espectros de background

TurboMass Hardware 1 - 92

IE

TurboMass Hardware 1 - 93

Reao - CI

TurboMass Hardware 1 - 94

Desvantagens da Ionizao
Qumica

Menor fragmentao que a EI

O espectro No muito informativo
Os resultados dependem de :
- o tipo do gas reativo e a presso do mesmo
- a temperatura e o tempo de reao
- do analito.
O espectro pode No ser suficientemente reprodutivo , para
permitir a busca nas Bibliotecas
No existe uma Biblioteca comercial, acessvel por
computador, no mercado
Requer manuteno mais frequente da fonte de Ions

TurboMass Hardware 1 - 95

Reaes da Ionizao Qumica Positiva

R + eR+ + RH
RH+ + M

R+ + 2eRH+ + R
MH+ + R

R = reagente
M = molcula da amostra
e- = eletron
= eletron radical
H = Hidrognio

TurboMass Hardware 1 - 96

Reaes da ionizao Quimica

Negativa
e- + MX

M+ + X- + e -

formao do par inico

e- + MX

MX-

Electron attachment

e- + MX

M + X-

Dissociative electron
attachment

M = Molcula da amostra
X = elemento com alta afinidade eletrnica
e- = thermal electron (~0.25 eV)
TurboMass Hardware 1 - 97

ons dos Gases Reagentes

Reagent Gas

Molecular Ion

Reagent Ion

CH4

CH4+.

CH5+

H2

H2+.

H3+

C4H10

C4H3+.

C4H11+

NH3

NH3+.

NH4+

CH3OH

CH3OH+.

CH3OH2+

NO

NO+.

NO+

TurboMass Hardware 1 - 98

Gases Reagentes , no modo CI

Metano
- Funciona bem, com a maioria dos compostos orgnicos
- Pode produzir ons complexos do tipo [M+H] + e [M+CH3]+
- Produz mais fragmentao que outros gases reativos

Isobutano
- Funciona com menor quantidade de compostos orgnicos,
que o Metano
- Produz menor fragmentao que o Metano
- Pode produzir complexos do tipo [M+H] +, [M+C4H9]+
- Produz mais complexos que o Metano

TurboMass Hardware 1 - 99

Gases reagentes no modo CI

Amnia
- Os compostos bsicos produzem complexos do
tipo [M+H]+
- Os compostos polares produzem complexos do
tipo [M+NH4]+
- Fragmentao pobre
- Os compostos no-polares e os no-basicos, no
so ionizveis
- Excelente para as Aminas

TurboMass Hardware 1 - 100

Metano como Gs reagente, no

modo CI+
CH4+ + CH4

CH5+ + CH3

CH3+ + CH4

C2H5+ + H2

formao do
dmero

MH + C2H5+

MH2+ + C2H4

transferencia
protnica

MH + C2H5+

M+ + C2H6

transferncia de
Hidretos

TurboMass Hardware 1 - 101

Analisador de Massa
Vacuum Manifold

Inlet
System
AutoSystem

Transfer
line

Ion
source

Mass
Analyzer

High Vacuum
Pump

Data System

TurboMass Hardware 1 - 102

Backing
Pump

Detector

Vacuum
Gauges

MS
Electronics

Analisador de Massa

Quadrupolo / Prefiltro - Trabalha somente com aplicao

de RF .
- Conectado atravs de condensadores
- Melhora a sensibilidade e a forma dos picos
- Minimiza a contaminao do Quadrupolo principal
- Barras do prefiltro : 16 mm x 12 mm
Quadrupolo analtico
- 2 a 1200 Da
- Barras circulares de 131 mm x 12 mm
- Liga de Ao inox - Molibdnio

TurboMass Hardware 1 - 103

Analisador de Massa
Decoupling Capacitor

Ceramic Mounts

Prefilter
Analytical Quadrupole

TurboMass Hardware 1 - 104

Ion
Source

Tipos de Analizadores de Massas

Setor magntico
- Alta resoluo
- Alta sensibilidade
- Alto custo
Time-of-Flight -TOF
- Alta velocidade
100 - 1000 espectros / segundo
- Alta sensibilidade
- Amplo range de massas
- Alto custo
- A tecnologia do futuro, para GC/MS

TurboMass Hardware 1 - 105

Tipos de analizadores
(continuao)

Ion Trap
- Uma matriz complexa
- CI autoinduzida
- Quantificao dependente da concentrao
- MS/MS
Quadrupolo
- Varredura rpida
- Fcil de conectar (interface)
- Mais utilizado nas Bibliotecas
- Alta sensibilidade

- O MELHOR DETECTOR PARA GC/MS , ROBUSTO E SENSVEL

TurboMass Hardware 1 - 106

Foco simples
Analisador de massas, de Setor
Magntico
Ion Source
Magnetic Field

Acceleration Region

M/Z too large

M/Z too small

Detector
TurboMass Hardware 1 - 107

Analisador de Massas
Time-of-Flight
Ion
Source

Ion extraction

Detector
TurboMass Hardware 1 - 108

Drift tube

Reflectron

Analisador - Ion Trap

Top End Cap

m1

Ring Electrode
m4
+
+
+

Bottom End Cap

TurboMass Hardware 1 - 109

Ion Trap
Top End Cap

y
r

Ring
Electrode
x

Bottom End Cap

TurboMass Hardware 1 - 110

Vantagens do Espectrmetro de
Massas, com filtro de Quadrupolo

Alta sensibilidade
Simplicidade na operao
Resoluo de picos coeluentes
Varreduras rpidas
Registro de um s ou de ons mltiplos
Disponibilidade de Bibliotecas
Facil para interfacear a diferentes tecnicas de
separao prvia , da amostra

TurboMass Hardware 1 - 111

O campo eltrico, em qualquer ponto

dentro da estrutura do Quadrupolo, ser
descrito pela equao :

(Vdc + Vrfcos T)(x2 - y2)

____________________
r2 o

Onde:
Vdc voltagem da DC aplicada
Vrf

voltagem da RF aplicada

T
ro

frequncia da RF aplicada
Tempo
Metade da distancia entre a superficie das barras

x&y

TurboMass Hardware 1 - 112

so as coordenadas de um on no campo

Quadrupolo
Electron
Multiplier

Electron Reflector

Filament
Quadrupole Mass Filter
Entrance Lens
Lens 2
Lens 1
Ionizer

TurboMass Hardware 1 - 113

GC Column

Filtro de Massas do Quadrupolo

Ions
2-dimensional

TurboMass Hardware 1 - 114

Voltagens aplicadas ao Filtro do

y Quadrupolo
V=Vrf + Vdc
z

Massas - Barras
12 mm diameter
131 mm length

V
TurboMass Hardware 1 - 115

Quadrupolo - Analisador de
Massas
+Vrf only
+ + +

m4

m2
m1

m3

( +Vdc + Vrf cos wt)

++ +

TurboMass Hardware 1 - 116

m1
m4

m2

m3

Detector
Vacuum Manifold

Inlet
System
AutoSystem

Transfer
line

Ion
source

Mass
Analyzer

High Vacuum
Pump

Data System

TurboMass Hardware 1 - 117

Backing
Pump

Detector

Vacuum
Gauges

MS
Electronics

Detector

Dinodo de converso de eixo defazado

- Converso de ons a eSensor de Fsforo
- Converso de e- a fotn
Fotomultiplicador
- Converso de fotn a e- Selado dentro de un recepiente de
vidro
- Elimina a contaminao
- 10 anos de vida til
Pode detectar um s on

TurboMass Hardware 1 - 118

Detectores

Multiplicador de Eletrons
- De Dynodo contnuo
- De Dynodo discreto
- Desvantagens do multiplicador de Eletrons
Vida til, limitada pela dosagem de ons
Contaminao
Descargas de HV
Fotomultiplicador
- Longa vida til (10 anos)
- Imune a contaminao

TurboMass Hardware 1 - 119

Multiplicador de Eletrons de Dinodo

Contnuo
ion

EM Gain with Time

0

107
Gain

EM voltage

106
105
104

-3000

103
2

10 14 18

Time (months)
TurboMass Hardware 1 - 120

Multiplicador de Eletrons de
Dinodo Discreto

TurboMass Hardware 1 - 121

Deteco por Fotomultiplicador,

com Sistema de Converso
ons
Dinodo de converso

Eletrons
Fsforo
Fotons
Fotomultiplicador
Corrente de Eletrons

TurboMass Hardware 1 - 122

Fotomultiplicador
Photocathode
Electron optics
Focusing Electrode

First dynode

Electron
multiplier
Anode
Mounting
Base
TurboMass Hardware 1 - 123

Fotomultiplicador
Photoelectron

Dynodes

Secondary
electrons

Radiation
h

Photoemissive
cathode

High voltage (-)

200 - 2000V
TurboMass Hardware 1 - 124

Anode

current-tovoltage
amplifier

Eletrnica do MS
Vacuum Manifold

Inlet
System
AutoSystem

Transfer
line

Ion
source

Mass
Analyzer

High Vacuum
Pump

Data System

TurboMass Hardware 1 - 125

Backing
Pump

Detector

Vacuum
Gauges

MS
Electronics

Eletrnica do MS

Placa de comunicao no PC (Tdat)

- Interrupts e DMA transfer
Duas placas principais , no MS
- Analoga - I/O
Controla todas as voltagens
- MPU (Multiple Processor Unit)
Aquisio dos dados
Processador digital de sinal de alta velocidade - Placas Adicionais :
Eletrmetro do PMT
Fonte de energia de HV
Dinodo de converso
Proporciona baixa voltagem

TurboMass Hardware 1 - 126

Tratamento de Dados

Software Analtico
GC / MS

TurboMass Hardware 1 - 127

O Software Analtico compreende diversos

tpicos :

Mtodos Operacionais
:

1 . Mtodo do GC - Parmetros :
- Inlet : temperatura, presso / fluxo,
spliter (fluxo / razo) e os dados da
Coluna (ID , comprimento , etc)
- Forno : temperatura, isotrmico ou com

TurboMass Hardware 1 - 128

Mtodos Operacionais

. . .

continuao

2 . Mtodo do MS - Parmetros : Full

Scan
- Transfer Line : temperatura
- Fonte : temperatura , corrente
- Massa : inicial e final (m/z)
- Delay : tempo (min.)
- Modo : Ionizao (EI ou CI) e dados

TurboMass Hardware 1 - 129

Tuning e Calibration
Nesta tela efetuado o Tuning e a
Calibrao dos parmetros do MS :
- ajuste dos Filtros
- ajuste do Repeller
- ajuste do PMT
- Correntes do Filamento e da Fonte
Estes ajustes so efetuados,
automaticamente, pelo MS utilizando o
Heptacosa como padro-referncia .

TurboMass Hardware 1 - 130

Tela Principal - Default

Nesta tela observamos os seguintes tens :
- cones representativos dos Mtodos e Funes.
- box dos Parmetros analticos
- barra superior com os Menus das aplicaes
- acompanhamento do cromatograma , real time,
das anlises .
- na tela do cromatograma obtemos o espectro do
componente selecionado , o qual pode ser refinado
(subtract) e ento pesquisado na Biblioteca .

TurboMass Hardware 1 - 131

Biblioteca de Espectros
Existem diversas Bibliotecas de consulta dos Espectros,
contendo informaes sobre a estrutura, peso molecul.,
propried. Fs-Qum. e outras . As mais utilizadas so :
- NIST : genrica, base no analisador Quadrupolo,
inclui Anlises Forenses; a mais utilizada
- Wiley: genrica, Quadrupolo , razoavelmente
utilizada .
- Aquarius : especfica para Meio Ambiente
- Plefger/Marer/Weber : especfica para Toxicologia

TurboMass Hardware 1 - 132

Biblioteca de Espectros

. . .

continuao
O usurio pode construir a sua Biblioteca especfica,
com os espectros dos componentes encontrados em
anlises habituais .
Antes de consultar a Biblioteca devemos tomar uma
srie de precaues (nos Mtodos GC e MS) para evitar
erros de interpretao dos componentes desejados :
GC - os maiores cuidados devem ser quanto a
otimizao da separao dos componentes desejados , ao
sangramento da Coluna(*) e vazamentos(*) .
MS - o Range de Massa (*) dos fragmentos (ons) dos
componentes , os dados do Scan , Treshold , Noise , etc.

TurboMass Hardware 1 - 133

Quantificao
Os sinais emitidos pelo Detector so enviados ao
sistema de tratamento de dados (Software) .
..A partir destes podemos processar os Clculos
para a determinao da concentrao de certos
componentes ou da composio total da amostra .
..Dependendo da anlise ou do interesse do
usurio , pode-se aplicar diferentes tipos de Clculos :
- Normalizao (rea ou corrigida)
- Padronizao Externa
- Padronizao Interna
- Adio

TurboMass Hardware 1 - 134

- Normalizao :
Neste tipo de clculo so determinadas as
percentagens de todos os componentes da amostra ,
fechando a somatria dos resultados em 100 % .
So determinadas a reas (simples ou corrigidas) dos
componentes (Ax) e a diviso destas pela rea total
(At) nos fornece a composio percentual .
% x = Ax . f . 100 / At

onde :

f = fator de correo (RTR e ou obtido por calibrao)

TurboMass Hardware 1 - 135

- Padronizao Externa
Este clculo bastante usado, devido a sua praticidade
. ..Deve ser utilizado com precaues devido ao
problema do volume da amostra (* AutoSampler)
injetado .
Neste tipo de clculo so determinados os teores de um
ou de alguns dos componentes da amostra .
As reas dos picos de interesse (Ax) so comparadas
com as dos picos dos Padres respectivos (Ap), atravs
de uma regra de trs simples .
Exemplo : Determ. do teor de Benzeno (ppm) em Nafta
Ap ----- 20 ppm
Ax ----- x ppm , logo :
x = Ax . 20 / Ap ppm
TurboMass Hardware 1 - 136

Padronizao Interna
Esta tcnica um pouco mais trabalhosa, ms tem como
vantagem no exigir medidas (Injees) rigorosas .
utilizada somente para amostras lquidas .
Um Padro especfico (no existente na composio)
colocado dentro da amostra , com valores conhecidos .
Esta mistura analisada e ento as reas (corrigidas) dos
picos de interesse so comparadas com a do P. I. .
Exemplo : Determ. do teor de Iso e N-C5 (%) em Nafta
- Pesa-se, analiticamente, cerca de 10,000 g de amostra e
0,005 g do P.I. (2M-Buteno-1) . Calcula-se o teor do P.I.
(0,05 %) . Aps a anlise , podemos determinar :
% x = Ax . Fi . % P.I. , onde : Fi = fator da resposta
Api
de x em relao a pi
TurboMass Hardware 1 - 137

Curvas de Calibrao
Nestes tipos de Clculos (Padr. Int. e Ext.) devemos
construir Curvas de Calibr. (3 a 5 nveis de concentr.)
para a obteno de resultados + precisos e confiveis .
Os nveis de concentrao devem ser prximos e abrang.
em relao a faixa dos resultados estimados.
Na Padr. Int. devemos calibrar, tambm, o Padro
Interno pois os resultados dos componentes so
calculados em relao (razo) a este .
Quando no houver diversos nveis de concentr. de um
determ. componente, devemos efetuar cerca de 3 corridas
deste nico nvel para obter uma mdia confivel .
TurboMass Hardware 1 - 138

Adio
Esta uma aplicao alternativa, utilizada para a
determinao de um s componente da amostra
(quando as tcnicas anteriores no so aplicveis) .
Inicialmente efetua-se a anlise da Amostra normal ,
determin. a rea do pico do compon. pesquisado (x) .
Em seguida, adiciona-se uma quantidade conhecida
(y) deste compon. Amostra e efetua-se novamente a
anlise , determinando-se a nova rea deste pico (x + y)
x = Ax . z
A(x+y)
TurboMass Hardware 1 - 139

onde : z = x + y

Configurao do PC

Ser fornecido integrado a

cada sistema
Computador
- Dell Pentium Pro 300
- Dell Pentium 233
Sistema operacional :
- Windows NT 4.0
Monitores:
- 17 ou 20
A placa Interface Link , o
Software e a Biblioteca j vem
instalados .

TurboMass Hardware 1 - 141

Resumo da tcnica de CG / MS

Universal e especfica
Sensvel - baixos teores
Identificao positiva, contra padres ou Bibliotecas de
espectros
Quantificao livre de interferncias
Pesquisa e desenvolvimento de produtos
Tcnica moderna e em desenvolvimento

UM PADRO DE TRABALHO , PARA O ANALISTA

TurboMass Hardware 1 - 142

APLICAES :
Meio Ambiente (EPA)
- guas - potveis e efluentes
- Solo , lama e resduos slidos
- Monitoramento do Ar

Industriais
- Petroqumica - Refinarias
- Alimentos
- Aromas e flagrncias
- Farmacuticos
- Resduos
* * HeadSpace - ATD
TurboMass Hardware 1 - 143
Purge and Trap

APLICAES :

Toxicologia
- Controle de frmaco-dependncia
- Dopping
- Sade ocupacional
Resduos Agrotxicos
- inseticidas
- herbicidas
- fungicidas

* * HeadSpace - ATD - Purge and Trap

TurboMass Hardware 1 - 144