GENETICA BACTERIANA

Estructura del genoma de los

organismos procariotas
Contienen un nico cromosoma de estructura circular
Bsicamente ADN desnudo
Mayora de la secuencia de ADN compuesta por genes

E. coli- 4.6 Mb
~87% --- 4288
genes

Estructura y funcin del

genoma bacteriano
El material gentico de las bacterias
se encuentra en el citoplasma, se le
denomina como nucleoide, cuerpo
nuclear, regin nuclear.
Esta compuesto de alrededor de
80% de DNA, 10% de RNA y 10% de
protenas (RNA polimerasa).

 En 1963 se logro aislar y extender el

cromosoma de E. coli, determinado
que tiene una longitud de 1 mm. Es
una tira circular doble y que se
encuentra super enrollado.
El termino genoma se refiere al
conjunto completo de elementos
genticos (genes) dentro de la clula.

 Los procesos genticos requieren

tres tipos de polmeros:
Acido Desoxirribonucleico (DNA).
Acido Ribonucleico (RNA)
Protenas.

 DNA:
El cromosoma bacteriano nico
contiene dos tiras complementarias
de DNA que estn enrolladas
alrededor una de la otra en patrn
helicoidal, con los extremos unidos
para formar una molcula circular.

 Las molculas de DNA son de doble

cadena con bases complementarias.
Esta caracterstica le permite a una
de las cadenas proporcionar la
informacin para el copiado de la
informacin en la otra cadena.
Cada par de bases esta compuesto
por una purina y una pirimidina.

 Las purinas de una cadena forman

puentes de hidrogeno con las
pirimidinas.
El par A-T con 2 uniones puente de H.
El par G-C con tres uniones.
Cada una de las cuatro bases esta
unida a una fosfo-2-dexosirribosa para
formar un nucletido.

 La longitud de una melecula de DNA

se expresa en miles de pares de
bases o en kilobases (kb).
El cromosoma de una bacteria, E.
coli, es una molcula circular nica
que contiene alrededor de 4,500,000
pares de bases o 4500 kb. Con una
longitud aproximada de 1 mm.

RNA:
Existen 3 diferencias entre la qumica
del DNA y la del RNA:
1. Las macromolculas del RNA
contienen el azcar ribosa en lugar
de desoxirribosa.
2. El RNA tiene la base uracilo en lugar
de timina.
3. El RNA no es una molcula de tira
doble

Las bacterias contienen 3 tipos de RNA:

1. RNAm: (mensajero), su funcin es copiar

el cdigo gentico del gen (DNA
cromosmico) y llevar este mensaje al
sitio de sntesis de protenas (Ribosomas).
2. RNAt (transferencia), traduccin del
mensaje de RNA en una secuencia
especifica de aminocidos.
3. RNA (ribosomal) sntesis de protenas.

ENZIMAS
1. Toposisomerasa II: promueve el
superenrollarmiento (DNA girasa)
2. Toposisomerasa I: controla el
desenrrollamiento.
3. RNA polimerasa: hace que las dos
tiras de DNA se desenrollen de
modo que se pueda transcribir la
informacin.

4. DNA ligasa: une los

fragmentos
sintetizados.
5. Primasa: inicia la sntesis de
un fragmento roto.

RECOMBINACION GENETICA
Es el proceso por el que los elementos
genticos contenidos en dos genomas
separados se juntan en una unidad.
Trae como consecuencia un cambio.
Se transfieren genes completos, grupos
de genes o cromosomas completos.

Formas de Recombinacin
Transformacin: el DNA libre se
incorpora a una clula.
Transduccin: La transferencia del DNA
donador esta mediada por un virus.
Conjugacin: la transferencia de DNA
implica contacto clula clula y la
presencia de un plasmido y de una
estructura llamada pili.

TRANSFORMACION
Este descubrimiento fue uno de los
hechos mas relevantes, pues
condujo a experimentos que
probaron que el DNA es el material
gentico. Fred Grifth (1920).
Trabajos con Streptococcus
pneumoniae.

 No todas las bacterias tienen esta

capacidad, sino clulas competentes
que son capaces de tomar una
molcula de DNA y lo integran a su
cromosoma.
Intervienen: protenas especiales que
intervienen en el trasporte e
incorporacin del DNA.

Transformacion: Etapas
1. Unin del DNA: protena asociada a la
membrana: autolisina y nucleasas.
2. Incorporacion del DNA:
Primero se fija reversiblemente, luego
se vuelve irreversible.
3. Integracion del DNA: protena de
unin, en el cromosoma protena RecA

 Cuando una clula es capaz de

tomar una molcula o un fragmento
de DNA y transformarse se
denomina clula competente.
Solo algunas cepas poseen esta
caracterstica, parece ser una
propiedad hereditaria.

Experimento de Griffith

Neumococo vivo
capsulado. (S)

Ratn muerto
Se aslan cepas lisas

Neumococo muerto
por calor

Ratn vivo.

Neumococo vivo
rugoso (R) no
capsulado

Ratn vivo.

Neumococo (R)
vivo +
Neumococo muerto

Ratn muerto: se aslan

cepas S

TRANSDUCCION
El DNA se transfiere de una clula a
otra por medio de un virus:
bacterifago.

Transduccion

Transduccin
Cuando un fago infecta a una
bacteria, capta fragmentos del
genoma de la clula hospedadora.
Al infectar a otra bacteria el fago
transductor puede transferir sus
propios genes y tambin los de la
clula hospedadora de la cual
procede.

Transduccin
Puede ocurrir de 2 formas:
1. Transduccin generalizada:
Cualquier porcin del genoma
bacteriano pasa a formar parte del
genoma de la partcula vrica.

Transduccin
2. Transduccion especializada:
El DNA de una regin especifica del
cromosoma del hospedador se integra
directamente en el genoma del virus.
No todos los fagos pueden transducir,
ni todas las bacterias son
transducibles.

Transduccin
El mecanismo de transduccin fue
descubierto por Zinder y Lederberg
(1952).
Estudiando la recombinacin
gentica entre diferentes cepas de
Salmonella typhimurium.

CONJUGACION
Implica el contacto clula clula.
El material gentico transferido puede
ser un plasmido, o una porcin del
cromosoma.
Una clula donadora trasmite la
informacin gentica a otra clula, la
receptora.
La clula donadora posee el pili o pelo
sexual.

conjugacion
La capacidad de la clulas para
actuar como donantes se debe a la
presencia de factor f o factor de
fertilidad.
Las clulas que carecen de factor f,
son receptoras.

Pasaje de ADN
Conjugacin

Factor de fertilizacin
1946: Lederburg y Tatum
Forma bsica del Factor F : plsmido
Clula con factor F: clula frtil
Plsmidos F con otros genes :plsmido F
Plsmido F puede integrarse al cromosoma
Otros plsmidos promotores de la
transmisin del ADN : plsmidos
conjugativos

Tipos de bacterias segn el factor F

(factor de fertilizacin)

F F+
F
Hfr

Hfr

FA B

A B
C

E D

ED C

F+

F
A BC
D
E

C D

A B
E

C
D

Conjugacin
E.coli EstR
E.coli AmpiR

AmpR
EstR

PLASMIDOS
Son elementos genticos que se
replican independientemente del
cromosoma.
Se encuentran dentro de la clula.
Existen varios tipos de plasmidos.
En E coli, se han aislado mas de 300

Tipos de plasmidos
P. conjugativos: codifican pili
sexuales y protenas necesarias para
la transferencia de DNA.
P. R (resistencia a los antibiticos,
mercurio).
P. Produccin de bacteriocinas y
antibiticos.

Tipos de plasmidos
Plasmidos de funciones fisiolgicas:
Utilizacin de urea,
Fermentacin de carbohidratos.
Produccin de pigmentos.
Plasmidos de virulencia: produccin
de toxinas, enzimas, tumores.

 E coli, posee un plasmido

conjugativo llamado Factor F:
- Capacidad para sintetizar pili.
- Movilizacin del DNA para su
transferencia.
- Alteracin de receptores de la
superficie de la clula.

Terapia genica

MUTACION
Es un cambio hereditario en la
secuencia de bases del acido nucleico
que constituye el genoma de un
organismo.
Fenotipo: las caractersticas
observables de un organismo.
Genotipo: constitucin gnica precisa
de un organismo. (conjunto de genes)

MUTACIONES
Cepa silvestre: cepa aislada de la
naturaleza.
Se pueden obtener mutantes de una
cepa silvestre o de una derivada de esta.
Pueden ocurrir cambios perjudiciales,
neutros o beneficiosos.

MUTACIONES
M. Espontneas.
Ocurren en la naturaleza, sin ser
provocadas.
Ej: efectos de la radiacin natural, que
alteran la estructura de las bases de DNA.
Errores en el apareamiento de bases.
Tipos de mutantes: No capsulado, inmvil,
fermentacin de azucares.

MUTACION
Mutaciones inducidas por mutgenos,
sustancias que inducen a mutaciones.
Mutgenos qumicos: reaccionan
directamente con el DNA, ocasionando
cambios qumicos, en las bases.
Acido nitroso, bromuro de etidio etc.
Mutgenos fsicos: rayos UV, rayos X.