PRUEBAS BIOQUMICAS

PARA ENTEROBACTERIAS
Susana Gonzlez Gurrola
3B

CATEDRTICO: M.C. JHOADAN B. ROCO LUJN LPEZ

IDENTIFICACIN MICROBIANA
Se entiende por identificacin microbiana al conjunto de tcnicas y
procedimientos que se aplican para establecer la identidad de un
microorganismo.

MTODOS DE IDENTIFICACIN
BACTERIANA
Los mtodos ms utilizados para la identificacin microbiana, los podemos
clasificar en:
1. Mtodos basados en criterios morfolgicos
2. Mtodos basados en tincin diferencial
3. Mtodos basados en pruebas bioqumicas
4. Mtodos basados en tipificacin con fagos

5. Mtodos basados en pruebas serolgicas

6. Mtodos basados en deteccin molecular

En la mayora de los casos la identificacin no se realiza con base a un solo

mtodo, sino a la combinacin de ms de uno.

MTODOS BASADOS EN CRITERIOS

MORFOLGICOS
Los rasgos morfolgicos han ayudado a los taxonomistas por
muchos aos a clasificar organismos.
Los organismos superiores tienen rasgos anatmicos tan
diferentes que pueden ser fcilmente utilizados en su
clasificacin, pero con respecto a los microorganismos, stos
lucen bajo el microscopio tan similares que se dificulta su
clasificacin.

Sin embargo, aun cuando la morfologa celular dice poco sobre las
relaciones filogenticas, sigue siendo til para la identificacin bacteriana.

Por ejemplo: la presencia de endosporas y su localizacin resulta de mucha

utilidad en la identificacin de bacilos esporulados.

MTODOS BASADOS EN TINCIN

DIFERENCIAL
La mayor parte de las bacterias, teidas con Gram, las podemos clasificar
como gram positivas o gram negativas, otras tinciones diferenciales, como la
cido resistente, se aplican a otro tipo de bacterias.

Un examen microscpico de una lmina teida por medio de gram o de una

tincin diferencial es til para obtener una informacin rpida sobre la
calidad de un ambiente clnico.

MTODOS BASADOS EN TIPIFICACIN

CON FAGOS

La interaccin entre un virus bacteriofago (fago) y su clula bacteriana

sensible es sumamente especfica, ya que el proceso de adsorcin se
encuentra mediado por receptores especficos tanto en el virus como en la
clula bacteriana.

El uso de fagos especficos permite identificar y subclasificar

bacterias dentro de una misma especie.

MTODOS BASADOS EN ENSAYOS

SEROLGICOS
Los mtodos serolgicos, implican la utilizacin de preparaciones de
inmunoglobulinas especficas provenientes del suero o de un reactivo, y que
pueden ser de gran utilidad en la identificacin microbiana en muestras puras
o en muestras biolgicas.

MTODOS BASADOS EN BIOLOGA

MOLECULAR

Modernamente adquiere ms importancia el uso de mtodos basados en

biologa molecular donde, a travs de procedimientos y reactivos, se pueden
detectar determinadas secuencias de ADN que son propias de un
determinado agente microbiano.

MTODOS BASADOS EN PRUEBAS

BIOQUMICAS

Las pruebas bioqumicas han sido ampliamente

utilizadas para diferenciar bacterias. Estas
pruebas se fundamentan en demostrar si el
microorganismo
es
capaz
de
fermentar
azcares, la presencia de enzimas, la
degradacin de compuestos, la produccin de
compuestos coloreados, etc.

Aun bacterias fuertemente relacionadas pueden separarse en dos especies

diferentes con base a pruebas bioqumicas.
Por ejemplo, las bacterias entricas gram negativas, forman un grupo muy
grande y heterogneo cuyo hbitat natural es el tracto gastrointestinal de
humanos y otros animales. Esta familia, Enterobacteriaceae, incluye a varios
patgenos que causan sndromes diarreicos.

Existen flujogramas, para la identificacin bacteriana, mediante pruebas

bioqumicas de microorganismos.
Por ejemplo, la presencia de un coco bacilo gram negativo, facultativo,
fermentador de glucosa, oxidasa negativo, nos indica la presencia de una
enterobacteria, para determinar su gnero podemos seguir el siguiente
esquema.

PRUEBAS BIOQUMICAS
Citrato
Ureasa
Voges-Proskauer

Rojo de metilo
Sulfuro Indol Movilidad (SIM)
Movilida, Indol, Ornitina (MIO)
Triple azcar Herro (TSI)
Agar Lisina Hierro (LIA)

COLOR: VERDE

INDICADOR: AZUL DE BROMOCRESOL

SUSTRATO PRINCIPAL: CITRATO DE SODIO

PRINCIPIO
Es una sal del acido ctrico.
Algunas bacterias pueden obtener energa de fuentes distintas de la
fermentacin de los hidratos de carbono, con el citrato como nica fuente
de carbono.

La medicin de esta caracterstica es importante para identificar muchos

miembros de la familia Enterobacteriaceae. Cualquier medio usado para
detectar la utilizacin del citrato por las bacterias que se van a probar debe
carecer de protenas e hidratos de carbono como fuente de carbono.

La utilizacin del citrato por la

bacteria que se va a probar se
detecta en el medio de citrato por
la produccin de subproductos
alcalinos.

El medio contiene citrato de sodio, que es un anin, como nica fuente de

carbono, y fosfato de amonio como nica fuente de nitrgeno. Las bacterias
que pueden utilizar el citrato tambin pueden extraer nitrgeno de la sal de
amonio, con produccin de amoniaco (NH+), lo que produce la
alcalinizacin del medio por conversin del NH a hidrxido de amonio
(NH4OH).

El indicador es el azul de bromotimol, que es amarillo por debajo de pH 6 y

azul por encima de pH 7,6.

MEDIO DE CULTIVO
El medio para citrato utilizado con mayor
frecuencia es la formula de Simmons.

El medio se coloca en tubos inclinados

(agar en pico de flauta).

La formula del medio de citrato de

Simmons es la siguiente:
Fosfato de amonio dihidrogenado 1 g
Fosfato dipotasico 1 g

Cloruro de sodio 5 g
Citrato de sodio 2 g
Sulfato de magnesio 0 ,20 g
Agar 15 g

Azul de bromotimol 0 ,08 g

Agua destilada 1 L
pH final = 6,9

PROCEDIMIENTO
Se toma una colonia bien aislada de la superficie de un medio de aislamiento
primario y se siembra en forma de estra nica en el pico de flauta (agar
inclinado) del tubo de agar citrato.

El tubo se incuba a 35 C
durante 24 a 48 horas.

RESULTADOS

La prueba positiva esta representada por la

produccin de color azul oscuro en el termino de
24 a 48 horas, que indica que el microorganismo
en prueba ha sido capaz de utilizar el citrato
contenido en el medio, con formacin de
productos alcalinos.

 La prueba tambin puede considerarse positiva sin

que haya color azul, si hay desarrollo visible en la
estra de siembra. Esto es valido porque para que el
desarrollo sea visible, el microorganismo debi
haber ingresado en la fase logartmica de
crecimiento, lo que solo es posible si ha asimilado
carbono y nitrgeno.

Microorganismos Positivos
Salmonella

Arizona
Citrobacter
Enterobacter

Klebsiella
Serratia licuefaciensis
Pseudomonas cepacia

Microorganismos Negativos
Edwarsiella
Yersinia enterocoltica

Escherichia coli
Shigella
Yersinia pseudotuberculosis

Otras especies de Moraxella

Proteus morganii

Ureasa
COLOR: ROSADO
INDICADOR: ROJO FENOL
SUSTRATO PRINCIPAL: UREA

PRINCIPIO
Es una diamida del acido carbnico
Todas las amidas se hidrolizan fcilmente, con liberacin de amoniaco y
dixido de carbono.
El amoniaco reacciona en solucin para formar carbonato de amonio, lo que
produce alcalinizacin y aumento de pH del medio.

MEDIOS DE CULTIVO
Los dos medios utilizados con mayor frecuencia son el caldo urea de Stuart y el agar urea
de Christensen.
CALDO UREA DE STUART
AGAR UREA DE CHRISTENSEN
Extracto de levadura 0,1 g
Peptona 1 9
Fosfato monopotasico 9,1 g
Glucosa 1 g
Fosfato disodico 9,5 g
Cloruro de sodio 5 g
Urea 20 g
Fosfato monopotasico 2 g
Rojo fenol 0,01 g
Urea 20 g
Agua destilada 1 L
Rojo fenol 0 ,012 g
Agar 15 g
Agua destilada 1 L
pH final = 6,8
pH final = 6,8

PROCEDIMIENTO
El medio liquido se siembra con un ansa de cultivo puro del microorganismo
por probar.

La superficie inclinada del agar (pico de flauta) se siembra en estra con el

microorganismo por probar. Ambos medios se incuban a 35 C durante 18 a
24 horas.

RESULTADOS

Los microorganismos que hidrolizan la urea rpidamente pueden producir

reacciones positivas en l o 2 horas; las especies menos activas pueden
requerir 3 das o mas. Las reacciones son las siguientes:

1. Caldo de Stuart:
Un color rojo en todo el medio
alcalinizacin e hidrolisis de la urea.

indica

2. Agar de Christensen:

Degradadores rpidos de la urea (especies de Proteus): color rojo en todo el

medio.
Degradadores lentos de la urea (especies de Klebsiella): inicialmente color rojo
solo en el pico de flauta, que gradualmente se extiende a todo el tubo.

3. Ausencia de hidrolisis de la urea: el medio

conserva su color amarillo original.

Microorganismos positivos
Klebsiella
Proteus (rpido)

Microorganismos negativos
Escherichia coli

Providencia

VogesProskauer

PRINCIPIO
Voges-Proskauer es un epnimo doble, en honor de dos microbilogos que
trabajaron a principios del siglo xx. Estos investigadores fueron los primeros en
observar la reaccin de color rojo producida en medios de cultivo
adecuados despus del tratamiento con hidrxido de potasio. Luego se
descubri que el producto activo del medio, formado por el metabolismo
bacteriano, es el acetil metil carbinol, producto de la va del butilenglicol.

 El acido pirvico, se metaboliza da como resultado la produccin de

acetoina (acetil metil carbinol).
Los microorganismos del grupo Klebsiella- Enterobacter-Hafnia-Serratia
producen acetoina como producto metablico final principal del
metabolismo de la glucosa y forman cantidades pequeas de cidos
mixtos.
En presencia de oxigeno atmosfrico e hidrxido de potasio al 40%, la
acetoina se convierte a diacetilo y el a-naftol sirve de catalizador para
producir un complejo de color rojo.

MEDIOS DE CULTIVO
El medio utilizado con mayor frecuencia es el caldo de rojo de metiloVoges-Proskauer (MR/VP) segun la formula de Clark y Lubs.
A. Caldo VP/RM

B. Reactivos

Polipeptona 7g

oc-naftol al 5%. intensificador de color

Glucosa 5 g

a-naftol 5 g

Fosfato dipotasico 5 g

Alcohol etilico absoluto 100 mL

Agua destilada 1 L

Hidroxido de potasio al 40%, agente

oxidante

pH final = 6,9

Hidroxido de potasio 40 g
Agua destilada 100 mL

PROCEDIMIENTO
Sembrar un tubo de caldo MR/VP con un cultivo puro del microorganismo por
probar. Incubar 24 horas a 35 C.
Finalizada la incubacin, transferir 1 ml del caldo a un tubo de ensayo limpio.
Agregar 0,6 ml de a-naftol al 5%, seguidos de 0,2 ml de KOH al 40%.
Es esencial que los reactivos sean agregados en ese orden. Agitar
suavemente el tubo para exponer el medio al oxigeno atmosfrico y dejar el
tubo en reposo durante 10 a 15 minutos.

RESULTADOS

Positivo: desarrollo de color rojo 15 minutos o mas despus del agregado de

los reactivos, que indica la presencia de diacetilo, el producto de oxidacin
de la acetoina.

La prueba no debe leerse mas all de una hora despus de dejar los tubos en
reposo, porque los cultivos Voges-Proskauer negativos pueden producir un
color cobrizo, que se puede interpretar como un positivo falso.

Microorganismos positivos
Klebsiella pneuminiae
Yersinia enterocoltica

Microorganismos negativos
Escherichia coli
K. ozaenae

Rojo de
Metilo

PRINCIPIO
El rojo de metilo es un indicador de pH con un rango entre 6 (amarillo) y 4,4
(rojo). El pH al cual el rojo de metilo detecta los cidos es mucho mas bajo
que el pH correspondiente a otros indicadores utilizados en medios de cultivo
bacteriolgicos. Por lo tanto, para provocar un cambio de color, el
microorganismo en estudio debe producir grandes cantidades de acido del
sustrato de hidratos de carbono que se utilice.
La prueba del rojo de metilo es una prueba cuantitativa de la produccin de
acido, que requiere que los microorganismos positivos produzcan cidos
fuertes (lactico, acetico, formico) de la glucosa.

MEDIOS DE CULTIVO
El medio utilizado con mayor frecuencia es el caldo de rojo de metiloVoges-Proskauer (MR/VP) segn la formula de Clark y Lubs.
A. Caldo VP/RM

B. Reactivos

Polipeptona 7g

Indicador de pH rojo de metilo.

Glucosa 5 g

Rojo de metilo, 0,1 g en 300 ml de

alcohol etlico al 95%.

Fosfato dipotasico 5 g
Agua destilada 1 L
pH final = 6,9

Agua destilada, 200 ml.

PROCEDIMIENTO
1. Sembrar el caldo MR/VP con un cultivo puro del microorganismo en
estudio. Incubar el caldo a 35 C durante 48 a 72 horas (no menos de 48
horas).

2. Finalizada la incubacin, agregar 5 gotas del reactivo de rojo de metilo

directamente al caldo.

RESULTADOS

Positivo: El desarrollo de color rojo

estable en la superficie del medio indica
la suficiente produccin de acido como
para disminuir el pH a 4,4.

 Negativo: Como otros microorganismos

pueden producir pequeas cantidades
de acido del sustrato probado, puede
observarse un color naranja, intermedio
entre amarillo y rojo. Esto no indica una
prueba positiva.

Microorganismos negativos
Enterobacter aergenes

Enterobacter cloacae
Klebsiella

Microorganismos positivos
Escherichia coli
Especies de Yersinia

Indol
SIM: Sulfuro indol movilidad
MIO: Movilidad indol ornitina

PRINCIPIO
Es uno de los productos de degradacin metablica del aminocido
triptfano.
La prueba del indol se basa en la formacin de un complejo de color rojo
cuando el indol reacciona con el grupo aldehdo del pdimetilaminobenzaldehido.
En la practica se utilizan medios combinados, como el medio de sulfuro indol
para motilidad (SIM), el medio para motilidad indol omitina (MIO) o el medio
indol nitrato.

SIM: SULFURO INDOL MOVILIDAD

Determinar si un organismo es mvil o inmvil, si es

capaz de liberar cido sulfhdrico por accin
enzimtica de los aminocidos que contienen azufre
produciendo una reaccin visible de color negro y
por ltimo la capacidad de desdoblar el indol de la
molcula de triptfano.

 Produccin de cido
sulfhdrico

Produccin de Indol

Movilidad

PRODUCCIN DE CIDO
SULFHDRICO
La bacteria reacciona con el tiosulfato de sodio por medio de una reaccin
de reduccin que da un sulfito y un sulfato.

El gas incoloro SH2 reacciona con una sal pesada, citrato frrico de amonio
para producir un precipitado negro insoluble, sulfato ferroso.

PRODUCCIN DE INDOL
El triptfano es un aminocido que puede ser oxidado por ciertas bacterias
para formar tres metabolitos principales: indol, escatol e indolactico.

La formacin de indol se produce solamente en aquellos organismos

capaces de fermentar los hidratos de carbono.

MEDIOS Y REACTIVOS
Caldo triptofano (triptofano al 1%)
Peptona o digerido pancreatico de caseina (tripticasa) 2 g
Cloruro de sodio 0,5 g
Agua destila da 100 ml
Reactivo de Kovac
Alcohol amilico o isoamilico puro 150 ml
p-dimetilaminobenzaldehido 10 g
HCI concentrado 50 ml
Reactivo de Ehrlich
p-dimetilaminobenzaldehido 2 g
Alcohol etlico 190 ml
HCI concentrado 40 ml

PROCEDIMIENTO
Sembrar el caldo triptfano con el microorganismo por probar e incubar a 35
C durante 18 a 24 horas.
Una vez transcurrido este tiempo, agregar 15 gotas del reactivo haciendo
que se deslicen por la pared del tubo.
Si se utiliza el reactivo de Ehrlich, este paso debe ser precedido por el
agregado de 1 mL de xilol. Esto no es necesario con el reactivo de Kovac.

RESULTADOS
cido sulfhdrico:
Positivo: ennegrecimiento del medio
Negativo: Sin ennegrecimiento

Indol:
Positivo: Anillo rojo en la superficie del medio
Negativo: No se produce color /Color naranja en la superficie del medio
indica desarrollo de escatol, un compuesto metilado que puede ser precursor
de la formacin de indol.

La reaccin positiva despus de 24 horas indica una prueba completa.

Si el cultivo de 24 hrs es negativo deber incubarse otras 24 horas y repetirse
la prueba.

Movilidad
Positiva: los organismos mviles migran de la lnea de siembra y se difunden
en el medio provocando turbiedad.
Negativa: Crecimiento bacteriano acentuado siguiendo la lnea de siembra.

Bacterias

Produccin H2S

Produccin Indol

Movilidad

Salmonella typhi

+/-

Salmonella

+/-

E. coli

+/-

Klebsiella

+/-

Enterobacter

Citrobacter

Shigella

+/-

+/-

MIO:
MOVILIDAD, INDOL, ORNITINA
Composicin del medio:
Extracto de levadura
Peptona
L-Ornitina
Dextrosa
Agar
Agua
Indicador de pH: prpura de bromocresol
cido: amarillo pH 5.2
Alcalino: Prpura pH 6.8
Medio no inoculado: Prpura intenso brillante pH 6.0

PRINCIPIO
El MIO se utiliza para la identificacin de enterobacterias
sobre la base de movilidad, la produccin de ornitina
descarboxilasa e indol.

1. Descarboxilacin de ornitina
2. Produccin de indol
3. Movilidad

 Descarboxilacin de ornitina: mide la

capacidad enzimtica de un
organismo para descarboxilar un
aminocido para formar una amina,
con la consiguiente alcalinidad.

 Produccin de indol: El triptfano es un

aminocido que puede ser oxidado
por ciertas bacterias para formar tres
metabolitos principales: indol, escatol
e indolactico.

PROCEDIMIENTO
Inoculacin: picadura en forma vertical
Tiempo: 28-48 hrs
Temperatura 35 -37C

RESULTADOS
Ornitina descarboxilasa
Positivo: color prpura del medio
Negativo: color amarillo en el fondo del tubo que puede ser prpura al final
Indol:
Positivo: anillo rojo en la superficie del medio
Negativa: No se Produce color / Color naranja en la superficie del medio,
indica desarrollo de escatol

Movilidad:

Positiva: los organismos mviles migran de la lnea de siembra y se difunden

en el medio provocando turbiedad.
Negativa: crecimiento bacteriano acentuado siguiendo la lnea de siembra.

Microorganismos ornitina
positivos
Especies de Enterobacter
Proteus mirabilis
Proteus morganii
Yersinia enterocolitica

Microorganismos ornitina
negativos
Especies de Klebsiella
Enterobacter aglomerans

Proteus vulgaris
Proteus rettgeri
Yersinia pestis
Yersinia pseudotuberculosis

Bacterias

Produccin Indol

Movilidad

Produccin H2S

Salmonella typhi

+/-

Otras Salmonellas

+/-

E. coli

+/-

+/-

Enterobacter

Citrobacter

+/-

+/-

Klebsiella

Shigella

TSI: Triple azcar

Hierro

MEDIO DE CULTIVO
Agar hierro de klinger (AHK)
Composicin:
Estracto de carne
Peptona
Lactosa
Sulfato ferroso
Tiosulfato de Na
Agua destilada

Extracto de levadura
Proteasa
Dextrosa
Cloruro de Na
Agar
Indicador: Rojo fenol
cido: amarillo
Alcalino: Rojo
Medio no inoculado: naranja rojizo, pH 7.4

PRINCIPIO

Determina la capacidad de un organismo de atacar un

hidrato de carbono especfico incorporado en un medio de
crecimiento bsico, con produccin o no de gases, junto
con la determinacin de posible cido sulfhdrico.

La fermentacin es un proceso que se lleva a cabo en condiciones aerbicas

(pico de flauta) y anaerbicamente (capa inferior)
El medio TSI contiene una cantidad limitante de glucosa y concentracin 10
veces mayor de lactosa. Las enterobacterias y los fermentadores de glucosa
comienzan metabolizando este azcar.
Una vez que se ha reducido toda la glucosa piruvato, este se metaboliza por
el ciclo de Krebs formando productos finales cidos.

El cido en el medio hace virar el amarillo del indicador de pH, rojo fenol.

A 6 horas de la incubacin, la zona de la estra y el fondo del tubo tendrn un

color amarillo (fermentador de glucosa)

Si el fondo permanece rojo, no hay variacin de pH (no fermentador de

glucosa)
Si el color rojo es mas intenso que el original, hay alcalinizacin (no es
miembro de la familia enterobacteriaceae)

Al agotar la glucosa la bacteria utiliza la lactosa o sacarosa.

Despus de 18-24 hrs, el medio permanece amarillo, reaccin cido sobre

cido (A/A). Fermentador de lactosa.
La produccin de gas romper el agar o lo empujara hacia arriba. Reaccin
A/A ms gas.

Si no utiliza la lactosa, har uso de protenas o aminocidos.

El metabolismo proteico se produce en la superficie de la zona inclinada
donde el oxgeno es abundante.
18-24 hrs de incubacin: zona inclinada roja fondo del agar amarillo
(metabolismo anaerobio de glucosa inicial). Reaccin alcalina sobre cido
K/A.

Las bacterias que fermentan glucosa tambin pueden formar productos

alcalinos a partir de la utilizacin de la peptona, sobre la zona inclinada.
Reaccin K/K.

PROCEDIMIENTO
Inoculacin: picadura y estra en pico de flauta.
Tiempo: 18-24 hrs
Temperatura:35-37C

RESULTADOS
K/A:
fermentacin
de
glucosa
solamente
(Pico
de
flauta
alcalino/profundidad cida). Caracterstico de bacterias no fermentadores
de lactosa como Shigella.
A/A: fermentacin de glucosa y lactosa (Pico de flauta cido/ profundidad
cida). Caractersticos de E. coli y grupo Klebsiella-Enterobacter.
K/K: No fermentacin de glucosa y lactosa (pico de flauta
alcalino/profundidad alcalina). Caracterstico de bacterias no fermentadoras
como Pseudomas aeruginosa

Especie bacteriana

Superficie

Fondo

Gas

H2 S

Enterobacter

++

Klebsiella

++

E. Coli

Shigella

Salmonella typhi

Salmonella paratyphi

Citrobacter

+++

Proteus vulgaris

+++

Providencia

+/-

LIA: Agar Lisina

Hierro
COLOR: LILA
INDICADOR: PRPURA DE BROMOCRESOL
SUSATRATPOS PRINCIPALES: LISINA Y HLUCOSA

MEDIO DE CULTIVO
Base de descarboxilasa de Moller
Composicin:
Peptona
Piridoxal
Citrato de amonio
Glucosa
Agar

Extracto de carne
L-lisina
Tiosulfato de sodio
Agua destilada
Indicador de pH: Purpura de bromocresol
cido: Amarillo pH 5.2
Alcalino: Prpura pH 6.8
Medio no inoculado: Purpura intenso brillante pH 6.0

PRINCIPIO

Mide la capacidad enzimtica de un organismo para descarboxilar un

aminocido (lisina y arginina) para formar una amina con la consiguiente
alcalinidad.

PROCEDIMIENTO
Inoculacin: por picadura y estra, inculo liviano.
Temperatura: 35-37C
Tiempo 18-24 hrs

RESULTADOS
A: cido
K: alcalino
N: neutra

R: Rojo (desaminacin oxidativa)

 K/K: Azul de Prusia/azul de Prusia. Desaminacin oxidativa/descarboxilacin.

K/A: azul de Prusia/lila. No desaminacin.
Produccin de H2S: Enegrecimiento del medio

Produccin de gas: burbujas o levantamiento del medio de cultivo de las

paraedes del tubo.

Especie Bacteriana

Superficie

Fondo

Gas

H2S

E. Coli

K/N

+/-

Shigella

Salmonella typhi

+/-

S. paratyphi

+/-

-/+

Enterobacter clocae

+/-

Agar
sangre

El agar sangre es una combinacin de un agar base (agar nutritivo) con

fuente proteica (digeridos trpticos, digeridos proteicos de soja) el cual tiene
un agregado de 5 % de sangre ovina, (tambin puede usarse sangre
humana, para cultivos en una placa de Agar) con una pequea cantidad de
hidratos de carbono naturales y cloruro sdico.

Se usa para ver la capacidad hemoltica de los microorganismos patgenos

(que es un factor de virulencia). Observando los halos hemolticos alrededor
de las colonias se determina el tipo de hemlisis que posee:

Alfa: halos verdosos

Beta: halos incoloros
Gamma: inexistencia de halos.

Hemlisis alfa

Hemlisis beta

Hemlisis Gamma