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BACTERIANA
NUTRICION Y
FACTORES DE
CRECIMIENTO.
METABOLISMO
BACTERIANO.
CRECIMIENTO
BACTERIANO.
GENETICA
BACTERIANA.
NUTRICION:
NUTRIENTE:
SUSTANCIA QUMICA QUE
CONTRIBUYEN AL LOGRO DE UN
CRECIMIENTO OPTIMO.
CRECIMIENTO OPTIMO:
MANTENIMIENTO E INCREMENTO DE
LA MASA PROTOPLASMATICA CON
UNA MNIMA PERDIDA DE ENERGA.
Composicin elemental
de la clula microbiana.
ELEMENTO
Carbono
Oxgeno
Nitrgeno
Hidrgeno
Fsforo
Azufre
Potasio
Sodio
Calcio
Magnesio
Cloro
Hierro
Otros
% PESO SECO
50
20
14
8
3
1
1
1
0.5
0.5
0.5
0.2
0.3
Composicin
molecular de una
clula procaritica.
Molcula
% de peso seco
Macromolculas
96
PROTEINAS
55
POLISACARIDOS
5
LIPIDOS
9,1
DNA
3,1
RNA
20,5
Monmeros
3,5
A.A y precursores.
0,5
Azcares y prec.
2
Nucletidos y prec.
0,5
Iones Inorgnicos
1
100%
Molculas x celulas
24.610.000
2.350.000
4.3
22.000.000
2,1
255500
Clases diferentes
2500
1850
2
4
1
660
350
100
50
200
18
REQUERIMIENTOS
QUMICOS
NUTRICIN
OXIGENO
TEMPERATURA
pH
Presin Osmtica.
REQUERIMIENTOS
FSICOS
Potencial de
Oxido Reduccin
NUTRICION BACTERIANA
Macronutrientes
Micronutrientes
Factores de
Crecimiento
EL AGUA
PRINCIPAL
FUENTES.
CONSTITUYENTE DEL
PROTOPLASMA
ENDGENA:
PROCEDENTE DE
BACTERIANO.
PROCESOS DE OXIDO
MEDIO UNIVERSAL
REDUCCIN.
DONDE OCURRE LAS
REACCIONES
EXGENA:
PROCEDENTE DEL
BIOLGICAS.
MEDIO, Y QUE
REACTANTE EN
DIFUNDE A TRAVS
DE LAS MEMBRANAS.
EXCESO.
REQUERIMIENTOS
C
O
H
N
MACRONUTRIENTES.
ELEMENTO
CARBONO C
HIDRGENO H
OXGENO
O
NITROGENO N
FOSFORO
AZUFRE
POTASIO
MAGNESIO
SODIO
CALCIO
HIERRO
P
S
K
Mg
Na
Ca
Fe
AMBIENTE
CO2, C.ORGANICOS
H2O, C. ORGANICOS
H2O, O2, C. ORGANICOS
NH3, NO3-, N2, C. ORG NITROG.
CULTIVO
Glucosa,Malato,Mezclas Complejas
H2O C. ORGANICOS
H2O, O2, C. ORGANICOS
INORGANICOS: NH4Cl, (NH4)SO4,
KNO3,N2.
ORGANICOS: A.A, NUCLEOTIDOS.
PO43KH2PO4,Na2HPO4
H2S, SO42-, Comp.Organicos Azuf
Na2SO4,Na2SO3, Na2S
K+ en solucin o como sales K
KCl, KH2PO4
Mg2+en solucin o como sales Mg
MgCl2, MgSO4
Na+ en solucin, NaCl, otras sales. NaCl
Ca2+ en solucin o como CaSO4
CaCl2
Fe2+ o Fe3+ en sol. Como otras sales. FeCl3, FeSO4,quelados con EDTA.
REQUERIMIENTOS
P
S
C
Fe
Ca
Citocromos,
Protenas,
Siderforos.
Estabiliza la Pared Celular.
Termoresistencia en las
esporas
Ac Nucleicos,
Fosfolipidos,
Coenzimas.
A.A, Vitaminas,
Coenzima A
Varias enzimas,
Na
Dependiendo de la
especie
Mg
Cofactor.
Estabiliza membranas
cel, Ribosomas, Ac
Nucleicos. Forma
complejos con ATP.
Esencial para Enzimas.
REQUERIMIENTOS
Micronutrientes
Cobalto: Vit B13,
Transcarboxilasa.
Cobre: Citocromos,
Oxidasas.
Manganeso: Activador
de Enzimas.
Molibdeno: Enzimas
con Flavina,
Nitrogenasas etc.
Selenio: Deshidrogenasas,
algunas Hidrogenasas, a.a.
Tungsteno:
Deshidrogenasas.
Vanadio: Bromoperoxidasa.
Zinc: Anhidrasa carbnica,
Alcohol Deshidrogenasa,
RNA y DNA polimerasa.
Hierro: Citocromos,
Catalasa, Peroxidasa,
Protenas con hierro y
azufre, Oxigenasas,
Nitrogenasas. *
FACTORES DE
CRECIMIENTO
MOLCULAS ORGNICAS
ESPECFICAS QUE EN
PEQUEAS CANTIDADES,
ALGUNAS BACTERIAS
NECESITAN PARA
CRECER.
NO TIENE FUNCIN
PLSTICA, NO SON
FUENTES DE ENERGA.
AMINOCIDOS
VITAMINAS
PURINAS Y
PIRIMIDINAS
Ejemplos:
Las bacterias del gnero
Brucella requieren como
factores de crecimiento en
sus medios de cultivo la
biotina, niacina, tiamina y
cido pantotnico.
Haemophilus necesita
suplementos de grupos
hemo y piridn-nucletidos.
FACTOR O VITAMINA
FUNCIONES PRINCIPALES
p-aminobenzoico (PABA)
Acido flico
Biotina
Riboflavina
cido pantotnico
Precursor de la CoA
Descarboxilaciones; transcetolasas.
CLASIFICACION SEGN
REQUERIMIENTOS DE FACTORES
DE CRECIMIENTO.
Prottrofos: microorganismos que
sintetizan sus propios factores de
crecimiento.
Auxtrofos: microorganismos que
requieren una fuente exgena de
factores de crecimiento debido a
que son incapaces de sintetizarlos.
Crecimiento Bacteriano
Aumento de nmero
(no de tamao)
Multiplicacin
bacteriana: fisin
simple o binaria
Elongacin
Auto duplicacin de ADN
cromosmico
Tabicado central
Invaginacin membrana
celular
Sntesis de pared
REQUERIMIENTOS
FSICOS
OXIGENO
TEMPERATURA
pH
Presin Osmtica.
TEMPERATURA
ESCALA DE pH
PRESIN OSMTICA
TIPO FISIOLOGICO
NO HALFILOS
FORMAS MARINAS
HALFILOS MODERADOS
HALFILOS EXTREMOS
Aerobio Obligado:
OXIGENO
Anaerobio Facultativo
Anaerobio Aerotolerante
Puede crecer en ausencia
o presencia de Oxgeno,
pero son Fermentativos
Anaerobio Estricto
Microaerofilo:
Las altas tensiones de
Oxigeno son txicas.
Respiracin aerbica
ENTRADA DE
NUTRIENTES A LA
CLULA
REACCION
RIBONUCLEASA l
DNA ENDONUCLEASA l
FOSFATASA ALCALINA
5 NUCLEOTIDASA
FOSFATASA ACIDA DE HEXOSAS
FOSFATASA ACIDA
FOSFODIESTERASA CICLICA
PENICILINASA
HIDROLISA RNA
ROMPE INTERNAMENTE ADN
SEPARA LOS GRUPOS PO4
NUCLETIDOS NUCLEOSIDOS
SEPARA GRUPOS PO4 DE
AZUCARES FOSFATOS
SEPARA GRUPOS PO4
RIBONUCLESIDOS CICLICOS
EN RIBONUCLEOSIDOS
HIDROLIZA PENICILINA.
INACTIVA
CAPTACIN DE NUTRIENTES
MECANISMOS DE CAPTACIN DE NUTRIENTES SON
ESPECFICOS
LOS MICROORGANISMOS VIVEN A MENUDO EN
HABITATS CON ESCASOS NUTRIENTES , MEDIO
INTRACELULAR MAYOR CONCENTRACIN
LOS NUTRIENTES ATRAVIESAN LA M.C SELECTIVAMENTE
VARIOS MECANISMOS DE TRANSPORTE DE
NUTRIENTES.VERSATILIDAD
MECANISMOS: DIFUSIN PASIVA, FACILITADA,
TRANSPORTE ACTIVO Y TRANSLOCACIN DE GRUPO
TRANSPORTE DE
NUTRIENTES
Difusin Pasiva: Desplazamientonde molculas
desde una regin de concentracin elevada a
otra con menor concentracin. (Agua,
Oxgeno, Dixido de Carbono)
Difusin facilitada: Permeasas embebidas en la
M.C. Cintica similar Enzima-Sustrato
TRANSPORTE
ACTIVO
TRANSLOCACIN
DE GRUPO
FUERZA MOTRIZ H+
Antiporte
Simporte
CAPTACIN DE HIERRO
Constituyente de citocromos y muchas enzimas
Insolubilidad , poco disponible
Secrecin de siderforos
Moleculas transportadoras de hierro
de bajo peso molecular complejos con el in frrico
Complejo Fe+3- siderforo, se une a l receptor del
siderforo, es liberado o se puede transportar todo
el complejo al interior celular
En E. coli el sideroforo se denominanterobactina y se
encuentra en la membrana externa
biosntesis (anabolismo)
transporte activo
translocacin de protenas a travs
de la membrana citoplsmica
movimiento flagelar
ADENOSIN TRIFOSFATO
ATP
Transportador primario de
energa generado en reacciones
exotermicas
compuesto fosfatado de
alta energa
protena
oxgeno
sulfatos, nitratos y carbonatos
CATEGORIAS
NUTRICIONALES
FOSFORILACIN A
NIVEL DE SUSTRATO
FOSFORILACIN
OXIDATIVA
CATABOLISMO
Dividir en 3 etapas:
-Primera etapa: protenas,
polisacridos y lpidos son
hidrolizados en partes
constituyentes.
-Segunda etapa:
aminocidos, monosacridos,
cidos grasos, glicerol
degradados a molculas
sencillas
-Metablitos como acetil CoA
, Piruvato
-ATP,NADH FADH
-Tercera etapa: nutriente
carbonado se incorpora al
ciclo de los acidos
tricarboxilicos, molculas
oxidadas a CO2
DEGRADACION DE LA GLUCOSA A
PIRUVATO
1.Glucolisis
2.Via de las pentosas fosfato
3.Via de Entner-Doudoroff
VIA GLUCOLITICA
Embden Meyerhof
Acta en presencia o ausencia de oxgeno
Se divide en tres etapas:
-Etapa inicial de seis carbonos
glucosa fosforilada
No se produce energa
Se consumen dos molculas de ATP
-Etapa de tres carbonos- enzima
Fructosa 1-6 bifosfato aldolasa
cataliza la escisin de la fructosa
Fosforilacin a nivel de
sustratofosforilacin del ADP acoplada a la
degradacin exergnica de una
molcula de sustrato de alta
energia
2.
La va sntetiza azucares de 4 y 5
carbonos para sntesis de aminocidos
aromticos y cidos nucleicos
3.
Fermentaciones
microbianas
Tipo
Lctica
Alcoholica
Acido-Mixta
Butilengliclica
Aceto-Butirica
Producto
Lactato
Etanol, CO2
Succinato,etanol,
formiato,
lactato,CO2,H2
Butilenglicol, CO2
Acetato, Acetona,
butirato, etanol,
CO2,H2
Respiracion microbiana
Aceptor
N03
S04
Fumarato
C02
Fe+3
02
Producto
N02, N2
S, SH2
Succinato
CH4
Fe+2
C02 + H20
Prueba de Oxidacin-Fermentacin
(OF) Hugh-Leifson
Vogues Proskauer
Catabolismo Proteco
Protenas (Exoenzimas)
Peptidos y Oligopptidos (Endoenzimas
Aminocidos intracelulares
Desaminacin, descarboxilacion,
transaminacin
Gran variedad de pruebas bioqumicas:
proteasas, gelatinasas, ADNasas,
descarboxilasas, deshidrolasas,
desamimasas
Catabolismo
Glucdico
Accin sobre el
glucgeno
Almidn
Disacridos
Monosacridos
Lipidico
Lipasas
Lecitinasas
Pigmentos
Crecimiento Bacteriano
Aumento de nmero
(no de tamao)
Multiplicacin
bacteriana: fisin
simple o binaria
Elongacin
Auto duplicacin de ADN
cromosmico
Tabicado central
Invaginacin membrana
celular
Sntesis de pared
Curva de Crecimiento
Bacteriano
Bacteria en medio
adecuado
Grfico de coordenadas:
nmero de bacterias
(logaritmo) versus lapso de
tiempo.
Distinta para cada bacteria
En todas se identifican
cuatro etapas
Curva de desarrollo
bacteriano
Fase de rezago, retardo (lag):
- Adaptacin del cultivo a las condiciones del
medio fresco, ajuste metablico
- Duracin de esta fase depende de:
-Tamao inculo
-Estado metablico previo del cultivo
Fase de Latencia
El nmero de microorganismos no vara
Adaptacin al medio, produccin de
enzimas
Tiempo variable: entre una hora a das.
Tamao relativo aumentado por divisin
Fase exponencial o de
crecimiento logartmico
Depende del tiempo de
generacin de cada bacteria
Los antimicrobianos son mas
activos
Relacin casi lineal entre el
tiempo y el nmero de
Actividad metablica
incrementada
Puede haber variaciones entre el
crecimiento in vitro e in vivo.
Fase Estacionaria
En determinado punto el crecimiento disminuye
La poblacin no aumenta
Clulas nuevas reemplazan a las clulas muertas
Actividad metablica mas lenta
Clulas en animacin suspendida
Produccin de metabolitos secundarios
Antibioticos
Toxinas
Fase de Esporogenesis para las especies
productoras de esporas
Fase de declinacin o
muerte
Regulacion del
Metabolismo Bacteriano
Es el resultado de la expresin gnica
Se produce a muchos niveles:
transcripcin, traduccin y
postraduccin
Cientos de reacciones enzimticas
ocurren simultneamente (catabolismo,
biosntesis, cambios ambientales,
crecimiento, etc
Regulacin Metabolismo
Bacteriano
Orquestar eficazmente las numerosas
reacciones qumicas de una clula,
sacar el mximo provecho a los
recursos accesibles y llevar a cabo los
procesos de desarrollo, las clulas
necesitan controlar la expresin de la
informacin gentica
Principales tipos de
regulacin
Control de Actividad Enzimtica: Ocurre
despus que la protena ha sido
sintetizada (postraduccional)
Control de la cantidad : Puede ocurrir
en la transcripcin (RNAm) o en la
traduccin (si el RNAm se traduce o no)
Regulacin de la
Actividad enzimtica
Inhibicin : Ocurre por la presencia de
compuestos relacionados con la ruta
metablica en la que interviene la
enzima
Inhibicin por retroalimentacin: El
producto final de la ruta biosinttica
inhibe la actividad de la primera enzima
de la ruta (enzima alostrica)
Inhibicin por
retroalimentacin
Regulacin de la
Actividad Enzimtica
Modificacin covalente: Adicin o
eliminacin de alguna molcula
orgnica.
La unin de la molcula a la enzima
cambia la conformacin de la protena
y puede alterar dramticamente la
actividad cataltica.
Modificacin covalente de
enzimas
Que es un opern?
Regulacin gnica de la
transcripcin
Regulacin del inicio transcripcin:
Subunidades sigma alternativas
Protenas reguladoras:
Control Negativo (Induccin y
Represin)
Control Positivo
Regulacin de la
transcripcin
Subunidades sigma alternativas:
Subunidades sigma: Ayudan a la RNA
pol, a reconocer el sitio del ADN donde
se inicia la transcripcin. Ejm. Proceso
de esporulacin en B. subtilis,
respuesta al choque por calor en E. coli,
Sintesis del flagelo bacteriano,
Regulacin de
transcripcin
Protenas reguladoras:
Los desencadenantes de la respuesta
de denominan Efectores
Induccin: El desencadenante del
ajuste es un inductor
Represin: El desencadenante del
ajuste es un represor
Regulacin de la
transcripcin
Generalizando:
El inductor suele ser sustrato de una ruta
catablica o muy semejante al sustrato
natural
El correpresor suele ser el producto de una
ruta biosinttica, o una molcula parecida
Los efectores interactan con protenas
reguladoras especficas para cada opern u
operones
Regulacin de la
transcripcin Protenas
reguladoras
Induccin Enzimtica
Represin enzimtica
Control Negativo.
Induccin
Represin
Control Positivo
Curva Diaxica.
Represin catablica
operon Lac
Regulacin de la
transcripcin por atenuacin
Se da en ciertos operones de rutas
biosintticas (aminocidos).
Onda de transcripcin recien iniciada
puede terminar prematuramente, en
una zona llamada atenuador, antes de
alcanzar el primer gen estructural.
No depende de protenas reguladoras
Regulacin de la
transcripcin por atenuacin
La atenuacin se produce por un control
ejercido por la traduccin, que a su vez
responde al nivel intracelular de ARNt-aa
cargado con el aa de la ruta biosinttica en
cuestin
Si existe suficiente ARNt cargado, habr
atenuacin de la transcripcin, si no hay la
transcripcin se completar
Regulacin de la
transcripcin por atenuacin
Sistemas de control
Global
Grandes sistemas de operones que se
ven sometidos a una regulacin
coordinada comn, encaminada a la
supervivencia d ela bacteria en
determinadas circunstancias
ambientales externas o a realizar
grandes ajustes metablicos para
adaptarse a cambios bruscos en las
condiciones nutricionales
Quorum sensing
Mecanismo regulador cuya seal desencadenante
depende de que las bacterias correspondientes
alcancen en su medio una densidad celular umbral.
En general consiste en que mientras las bacterias
estan creciendo, van sintetizando y excretando al
medio una pequea molcula llamada lactona de
homoserina acilada (LHA)
Cuando el cultivo alcanza cierta densidad ( alcanza
el quorum) la concentracin externa de LHA es
suficiente para que a su vez se alcance un nivel
interno de la misma en cada individuo, lo que permite
su unin a una protena activadora que ejerce su
papel sobre los operones correspondientes