HISTOQUIMICA

TCNICA HISTOLOGICA

Se denomina al conjunto de procedimientos
aplicados a un material biolgico (animal o
vegetal) con la finalidad de prepararlo y conferirle
las condiciones ptimas para poder observar,
examinar y analizar sus componentes
morfolgicos a travs de los microscopios
fotnicos y electrnicos.
HISTOQUIMICA
Es el estudio de los componentes tisulares y celulares
por medio de colorantes especiales, reacciones
bioqumicas y reacciones inmunolgicas.
TECNICAS DE HISTOQUIMICA

Es el estudio qumico de los tejidos,

independientemente del mtodo de anlisis empleado,
con el auxilio de los microscopios pticos (MO) y
electrnico (ME).

Esta tcnica permite la identificacin y localizacin de

compuestos o radicales qumicos en las clulas y
tejidos.



B. PRINCIPALES SUSTANCIAS DE INTERS BIOLGICO DEMOSTRABLE
HISTOQUMICAMENTE.

1. IONES

IN HIERRO- EL in frrico se demuestra por la

reaccin con la mezcla de ferro- cianuro potsico y
cido clorhdrico (azul de Prusia) que forma un
precipitado azul oscuro de ferrocianuro frrico.

- Sirve para localizar los macrfagos del SRE en el

hgado y diagnosticar enfermedades en las cuales hay
depsitos de hierro en los tejidos. Por ejemplo
hemocromatosis y hemosiderosis.


2. LPIDOS.

Se usan colorantes que se disuelven en las grasas como

el Sudan IV y el Sudan negro.

Sirven para el diagnstico de enfermedades

metablicas que producen depsitos intracelulares de
lpidos.

Por ejemplo Enf. de Gaucher, Enf. de Niemann-Pick,

Enf. de Fabry, esteatosis heptica (hgado graso).

3. CIDOS NUCLICOS.

DNA .-Se usa la reaccin de FEULGEN que consiste :

- Hidrlisis del DNA con cido clorhdrico para extraer

las bases pricas y dejar en libertad los grupos
aldehdicos del azucar.

- El reactivo de SCHIFF (PAS) reacciona con el

aldehdo y forma un precipitado rojo.

RNA.-Tiene gran afinidad por los colorantes bsicos
(basoflia) lo que hace que se tia intensamente con el
AZUL DE TOLUIDINA o de METILENO.
4. PROTENAS

Su identificacin se basa en mtodos de deteccin

de aminocidos.

- Reaccin de aminobenceno.

- Reaccin de Sakaguchi que detecta la arginina de

las protenas bsicas como las histonas y
protaminas.

Para Dx. de proteinosis pulmonar.

5.- POLISACARIDOS

La reaccin ms usada es la del PAS (cido peridico-Schiff ). El cido

oxida a los azucares en posicin 1-2 y deja grupos aldehdos libres que
reaccionan con el reactivo de SchifF dando un compuesto de color
magenta . De este modo se demuestra la presencia de:

- Glucgeno en el hgado y msculo.

- Depsito intracelular de glucgeno en enfermedades congnitas.

- Glucosaminoglicano o mucopolisacrido que forman parte de los

proteoglicanos.

- Glucoprotenas.

Los azucares cidos tambin reaccionan con el colorante AZUL DE

ALCIAN.

6.- ENZIMAS

FOSFATASA CIDA

Se usa el mtodo de GOMORI que consiste en incubar

cortes de tejidos en una solucin que contengan
glicerol fosfato sdico y nitrato de plomo a pH 5 .

Se usa para localizar lisosomas.

DESHIDROGENASAS

Se usan cortes no fijados junto con tetrazol para

formar un precipitado coloreado llamado formazan.

Se usa para detectar mitocondrias.

TINCION DE PAS (cido perydico de Schiff)
Se utiliza para la deteccin
de hidratos de carbono,
libres o conjugados, en los
tejidos cuando estn en
cantidades relativamente
grandes. La modificacin
qumica del tejido consiste
en la oxidacin mediante el
cido peridico de los
enlaces entre los carbonos
prximos que contienen
grupos hidroxilos. Esto
provoca la formacin grupos
aldehdos que sern
reconocidos por el reactivo
de Schiff, el cual se
combinar con ellos para dar
un color rojizo brillante.
Inmunohistoqumica. Tcnica de tincin que permite
demostrar una variedad de antgenos presentes en las
clulas o tejidos utilizando anticuerpos marcados.
Estas tcnicas se basan en la capacidad de los
anticuerpos de unirse a sus antgenos.

TINCION PARA AMILOIDE
La tincin de Rojo Congo
seguida de visin al
microscopio con luz normal
(Fig. 4a) o polarizada (con la
que se observa refringencia
de color verde manzana)
(Fig. 4b) es la tcnica ms
prctica para demostracin
de sustancia amiloide.
TINCION DE PLATA PARA FIBRAS
ELASTICAS
INMUNOCITOQUIMICA (INMUNOFLUORESCENCIA)
Sirve para identificar protenas especificas. Se basa en
la reaccin Ag-Ac. Al Ac se le puede marcar con un
compuesto fluorescente. Es el mtodo ms usado para
la deteccin de auto-anticuerpos en enfermedades
autoinmunes.
DX. POR INMUNOFLUORESCENCIA
OBTENCION DE AC MONOCLONALES
OBTENCION DE AC MONOCLONALES
APLICACIONES DE LOS AC MONOCLONALES









En Dx. de tumores

En terapia:

Tumoral

Infecciones virales,

Bacterianas,

Drogas

Toxinas
Mastocitos teidos con Giemsa.
Los grnulos citoplsmicos de
histamina captan el colorante
H y E PFAG VIM
S-100 C.
Schwann
Neurofilamento
s
Enolasa neuronal especfica
Protena
Tau