UNIVERSIDAD AUTONOMA DE SINALOA

ESCUELA DE BIOLOGIA

CENTRO DE INVESTIGACION Y DE ESTUDIOS AVANZADOS

DEL IPN - IRAPUATO

Análisis de metabolitos secundarios en: Argemone mexicana,

Bignonia unguis-cati, Diospyros sinaloensis y Maytenus
phyllanthoides con posible aplicación en farmacia y agricultura.

Dalia Elizabeth Ávila Grave

Dr. Jorge Molina Torres

M.C. Irma Romelia Sánchez Mendoza

Directores de tesis
Introducción
Uso de las
plantas:

• Alimento • Vivienda • Vestido

• Actos rituales •
Medicina

(Pino, 2004)
 Son compuestos químicos
sintetizados por las plantas
que cumplen funciones no
esenciales en ellas.

 Son responsables del aroma,

sabor, color y cualidades
medicinales de las plantas
(Santizo, 2004).
Propiedades de metabolitos secundarios

Búsqueda de:

 Fármacos

 Antibióticos

 Insecticidas

 Herbicidas

(Santizo, 2004)
Antecedentes
Terpenos
Carotenoides
Aceites esenciales
Cumarinas
Ácidos grasos
Taninos
Mucilagos
Alcaloides
 Los ácidos grasos son biomoléculas orgánicas de naturaleza lipídica formada por una
larga cadena hidrocarbonada lineal, de número par de átomos de carbono, en cuyo
extremo hay un grupo carboxilo.

 Clasificación de ácidos grasos

 Ácidos grasos insaturados

 Ácidos grasos monoinsaturados

Ácido oleico

 Ácidos grasos poliinsaturados

Ácido linoleíco
Ácido linolénico
Ácido araquidonico

(Varro, 1999)
Ácidos grasos saturados

• Cadena corta

Ácido butírico
Ácido isobútirico
Ácido valérico
Ácido isovalérico

• Cadena larga

Ácido mirístico
Ácido palmítico
Ácido esteárico

(Varro, 1999)
 Ácidos grasos esenciales

Ácido linoleíco
Ácido linolénico
Ácido araquidonico

• Ácidos grasos no esenciales

Ácido palmítico
Ácido esteárico
Ácido araquídico
Ácido palmitoléico
Ácido oleico

(Varro, 1999)
De la especie Grias neuberthii , se obtuvieron
los ácidos grasos saturados: miristico,
valérico, palmítico, margárico, esteárico y
araquídico.

Monoinsaturados: palmitoleico, oleico y

erúcico

Poliinsaturados: linoleíco 18.17µg/mg y

linolénico 1.73 µg/mg (Alva, 2002)
 Sustancias orgánicas de origen vegetal con actividad fisiológica muy
intensa. Los alrededor de 12,000 alcaloides que se conocen,
contienen uno o más átomos de nitrógeno, son biosintetizados
principalmente a partir de aminoácidos. Los alcaloides poseen una
gran diversidad de estructuras químicas .

 Los alcaloides son sustancias tóxicas que actúan principalmente

sobre el sistema nervioso central; son fisiológicamente activos en
los animales, aún en bajas concentraciones, por lo que son muy usados
en medicina (Arteche,1999).
Principales
alcaloides:
Alcaloides Acción fisiológica
Atropina Antiespasmódico, estimulante, analgésico
Cocaína Anestésico local, sedante, estimulante
Codeína Analgésico, sedante, hipnótico
Emetina Emético, expectorante, antipirético
Morfina Narcótico, sedante, hipnótico, analgésico
Quinina Antimalárico
Efedrina Asma, estimulante.
Papaverína Relajante muscular
Vincristina Antitumoral
Reserpina Antihipertensivo
 Los principales productores de alcaloides son los
vegetales

Amanita muscaria Catharanthus roseus

Trichocereus pachanoi

También se consideran alcaloides ciertas sustancias

procedentes de bacterias (Pseudomonas aueroginosa),
insectos y otros animales (espongiarios, batracios)

El sapo Bufo
marinus
acumula
cantidades
considerables
de morfina en
su piel

Allopumiliotoxin 267A es un alcaloide que

compone la secreción tóxica de este sapo
tropical y demuestra una significante
atividad cardiotóxica
Papel de los alcaloides en los vegetales

• Reguladores de crecimiento

• Sustancias de reserva
nitrogenada para la síntesis
proteica

• Productos finales de reacciones

de destoxificación en vegetales

• Función protectora frente a

ataques de distintos predadores
(parásitos o insectos)
 Extractos de corteza de Zanthoxylum tsihanimposa,

alcaloide fagarina y otros compuestos probados contra el parásito

del paludismo (Randrianarivelojosia, 2003).

 Extractos de hojas de Peltostigma guatemaltense

alcaloides: fagarina y skimmianina, anhidroevoxina, evoxina, 7-

isopentiloxi- fagarina, kokusagina y 4 metoxi-1-metil-2-quinolona,
probados contra Plasmodium falciparum y contra Staphylococcus
aereus, Enterococcus fecalis y Salmonella typhimurium (Lozano,
2008).
 Familias botánicas que destacan por su contenido en
alcaloides:

 Amarillidaceae, Annonaceae, Apocinaceae,

Asteraceae, Berberidaceae, Boraginaceae,
Celastraceae, Fabaceae, Lauraceae, Papaveraceae,
Piperaceae, Rutaceae y solanaceae (Arteche, 1999).
Argemone
mexicana L.

Familia: Papaveraceae

Nombre común: Cardosanto

Usos: Se utiliza como hipnótico

y calmante para combatir la tos.
El látex se usa para quitar las
manchas de la córnea y las
flores en infusión como
narcótico(Martínez, 1933).
Familia: Bignoniaceae

Nombre común: Uña de gato

Usos: Se utiliza como antiabortivo,

antídoto de picadura de serpiente,
antipirética y antiinflamatoria. Para
el tratamiento de dolencias
intestinales y el paludismo
(Standley, 1926) .
Familia: Ebenaceae

Nombre común: Chapote

Usos: Se emplea como remedio

doméstico para la diarrea,
disentería crónica y hemorragia
uterina. La corteza es
astringente y muy amarga
(Standley, 1926).
Familia: Celastraceae

Nombre común: Mangle

dulce

Usos: La madera es usada

como combustible. Sus
hojas se utilizan para el
dolor de muelas, así como
en la sustitución de goma de
mascar y como material
aislante (Standley, 1926).
Justificación
 México es un país que se caracteriza por sus riquezas naturales y que posee una
gran variedad de plantas endémicas, algunas de las cuales son usadas
artesanalmente como medicina o alimento. En nuestro país, el recurso natural
como sustrato de investigación es muy poco utilizado a pesar que se cuenta con
una gran biodiversidad de flora.

Muchas especies son candidatos potenciales para la obtención de metabolitos

bioactivos, por lo que es necesario disponer de métodos confiables y sencillos que
permitan la identificación de las familias de metabolitos secundarios de
importancia médica y agrícola.
Hipótesis
 Se espera determinar la presencia de alcaloides en hojas
secas y frescas de Argemone mexicana, Bignonia unguis-
cati, Diospyros sinaloensis y Maytenus phyllanthoides.

Se espera encontrar ácidos grasos esenciales en hojas

secas de Argemone mexicana, Bignonia unguis-cati,
Diospyros sinaloensis y Maytenus phyllanthoides.
Objetivos
Objetivo general:

Identificar y cuantificar metabolitos secundarios:

ácidos grasos y alcaloides en Argemone mexicana,
Bignonia unguis-cati, Diospyros sinaloensis y
Maytenus phyllanthoides por cromatografía de gases
acoplada a espectrometría de masas (CG-EM)
Identificación y cuantificación de alcaloides en
hojas secas y frescas de las especies en
estudio por CG-EM.

Identificación y cuantificación de ácidos grasos

en hojas de las especies de interés por CG-EM.
Metodología
Obtención de las plantas de interés
Determinación de alcaloides:

Pesado de Homogenizaci Filtración a

material ón gravedad
biológico

(Molina, 2009)
• Determinación de alcaloides

Sequedad total Viales de 1.5 ml Cromatografo de

gases
-Temp. inyección 180°C
-Temp. Inicial 40°C
-Gas acarreador: Helio
 Determinación de ácidos grasos


Método de esterificación-transmetilación in situ



Pesar material Viales de 4 ml

Moler
material biológico
-Estándar
biológico
interno
• Determinación de ácidos grasos:

Block de calentamiento Mezcla de Fase orgánica

1.Hidrólisis alcalina reacción
2.Transmetilació -Agua
- Hidróxido de sodio n - hexano

- Triofluoruro de
boro
• Determinación de ácidos grasos:

Viales de 1.5 Cromatografo de

Evaporación de
ml gases
muestras con una
corriente de
nitrógeno -Temp inyección
200°C
-Temp. Inicial 130°C
- isooctano -Gas acarreador,
Helio
Resultados
• Identificación de alcaloides

Perfil cromatográfico de compuestos en Argemone mexicana, en seco usando Diclorometano como

solvente. 3.ϒ-Fagarina
 Presencia de fagarina en Argemone mexicana, Bignonia unguis-cati,
Diospyros sinaloensis y Maytenus phyllanthoides.

Especie de Argemone Bignonia Diospyros Maytenus

trabajo mexicana unguis-cati sinaloensis phyllanthoide
s
Solvente Fresco seco Fresco seco Fresco Seco Fresco seco
extracción

Metanol - + - - - - - -

Diclorometa + + - - + + - -
no
 Cuantificación de alcaloides presentes en, Argemone mexicana, Bignonia
unguis-cati, Diospyros sinaloensis y Maytenus phyllanthoides

Argemone mexicana Bignonia unguis cati Diospyros sinaloensis Maytenus phyllanthoides

fresco seco fresco seco fresco seco fresco seco
 Identificación ácidos grasos


1 2
3

Perfil cromatográfico de ácidos grasos en Argemone mexicana, 1.C16= ácido palmítico, 2.

C17= estándar interno, 3. C18:2=ácido linoleíco, 4. C18:3=ácido linolénico. La cantidad de
cada ácido graso se calculo en base al estándar interno (ácido heptadecanoico) que
presento un Rt= 26.50
Presencia/ausencia de ácidos grasos en Argemone mexicana, Bignonia unguis-cati, Diospyros
sinaloensis y Maytenus phyllanthoides.

ÁCIDO Argemone Bignonia Diospyros Maytenus

GRASO mexicana unguis- cati sinaloensis phyllanthoides
Ácido palmítico + + + +

Ácido linoleíco + + + +
Ácido linolénico + + + +

Ácido + + + +
Tridecílico
Ácido araquídico + + + -

Ácido behénico + - - -

Ácido elaidico - + - +
Ácido esteárico - + + +
Ácido valérico - - + -
Cuantificación de ácidos grasos presentes en
Argemone mexicana en µg/mg
Cuantificación de ácidos grasos presentes en
Bignonia unguis-cati en µg/mg
Cuantificación de ácidos grasos presentes en
Diospyros sinaloensis en µg/mg
Cuantificación de ácidos grasos presentes en
Maytenus phyllanthoides µg/mg
 Se logró la identificación y cuantificación de metabolitos: ácidos
grasos y algunos alcaloides presentes en Argemone mexicana,
Bignonia unguis-cati, Diospyros sinaloensis y Maytenus
phyllanthoides por Cromatografía de gases acoplado a
espectrometría de masas (CG-EM).

 Se identificó un alcaloide de tipo furoquinolona, conocida como ϒ-

fagarina, en hojas secas y frescas de Argemone mexicana y
Diospyros sinaloensis, usando metanol y diclorometano como
solventes de extracción, siendo en Diospyros sinaloensis en fresco
donde se encontró en mayor cantidad usando diclorometano, siendo
este el solvente con el que mejores resultados se obtuvieron.
 Se identificaron nueve ácidos grasos en las diferentes especies de este
estudio siendo estos; el ácido palmítico, ácido linoleíco, ácido linolénico,
ácido tridecílico, ácido behenico, ácido araquídico, ácido elaidico, ácido
esteárico y ácido valérico.

 Los ácidos grasos esenciales linoleíco y linolénico se encontraron en

Argemone mexicana, Bignonia unguis-cati, Diospyros sinaloensis y
Maytenus phyllanthoides, siendo en Argemone mexica donde predominó
en cantidad el ácido linolénico.
PERSPECTIVAS
• Los resultados obtenidos sugieren que las plantas analizadas son
fuente de compuestos naturales de fármacos, antimicrobianos y de
plaguicidas por lo tanto, pueden ser explotados para desarrollar
tecnologías que permitan la producción de productos naturales a
gran escala y así proteger los cultivos, evitando las pérdidas de
producción de alimentos necesarios para una población en
constante aumento, así como en la elaboración de antibióticos para
combatir enfermedades de origen bacteriano que afectan a la
población en general.

• Estos resultados aportan evidencia que nos permitirá continuar

con los estudios tendientes a purificar la muestra e intentar aislar el
o los principios activos.
Muchas gracias…