La hematopoyesis ocurre en la mdula sea a partir de la segunda mitad del embarazo y en el resto de la vida.

Se encuentra en la cavidad medular de los huesos largos (principalmente en las epfisis) y en los espacios existentes entre las Trabculas de los huesos esponjosos.

Compartimiento Vascular

 El pasaje Transendotelial de clulas maduras, desde el

comportamiento hematopoytico a la sangre ocurre directamente a travs de poros de migracin transitorios (<4 m de dimetro) que se forman en las clulas endoteliales de los sinusoides.

Compartimiento Hematopoytico

 TMB existen otras clulas que forman parte del

estroma medular.
Macrfagos

Clulas Reticulares
Algunas clulas Adiposas

Estas clulas participan activamente en la regulacin

de la hematopoyesis secretando citoquinas y factores de maduracin.

Clulas Madres o Troncales

Las CTH (stem cells) tambin denominadas CFU-ML

(Unidad formadora de colonias mieloides y linfoides) Menos del 1% de las clulas de la mdula sea No son identificables morfolgicamente Tres Propiedades Sino por su Inmunofenotipo
CD34 CD38 CD90 CD117

Multi-potencialidad Su capacidad de autorenovacin Su capacidad de proliferacin

Estudiadas en cultivos in vitro.

 Los mecanismos de control que regulan las clulas

troncales, destacan:
Clulas del estroma medular
Matriz extracelular (fibronectina, vitronectina,

laminina, colgeno) Molculas de adhesin (integrinas, superfamilia de las inmunoglobulinas, selectinas) citoquinas y factores de crecimiento.

 Actualmente existen varias fuentes de stem cells:

Mdula sea
Sangre perifrica Sangre de cordn umbilical Hgado fetal Sistemas in vitro

Siendo la Sangre Perifrica y De Cordn Umbilical

las ms utilizadas actualmente en el tratamiento con clulas progenitoras.

ONTOGENIA DE LA CLULA TRONCAL HEMATOPOYTICA

LIBERACIN DE CLULAS DE LA MEDULA SEA

Las clulas medulares clivan el parnquima

hematopoytico e ingresan a la circulacin atreves de las fenestraciones de las clulas endoteliales que tapizan los sinusoides No se conoce los mecanismos migratorios

 Se postula que (Neutrofilos) glucocorticoides,

esteroides androgenicos, endotoxinas, y F. complementos. Los megacariocitos penetran el endotelio con prolongaciones citoplasmticas. Dilatacin sinusoidal y aumento del flujo sanguneo (estimulado por la Epo)

CLULAS TRONCALES EN LA MDULA SEA

Cumplen la importante funcin de reemplazar la

dotacin de clulas diferenciadas que en cada tejido, se pierden por uso o por envejecimiento celular.
PROPIEDADES DE LAS CLULAS TRONCALES

ADULTAS
Su capacidad de autogenerarse

Su capacidad de comprometerse, diferenciarse y

madurar hacia uno o varios linajes Dogma

 La mdula sea es el sitio de residencia de al menos

dos tipos de clulas troncales multipotentes. La clula Troncal Hematopoytica

Origina todas las clulas de la sangre

La clula Troncal Mesenquimtica (Ubicada en el estroma de la mdula sea) Origina tanto linajes

Mesenquimticos (seo, cartlago, msculo, adiposo y de soporte hematopoytico) No-mesenquimticos (neural, heptico).

Clulas troncales adultas: algunas evidencias de plasticidad*

 La M. O. es semiliquida y puede extraerse por

aspiracin o biopsia 1903 Pianese primera biopsia medular, epfisis del fmur usando un trocar 1908 Ghedini uso el tercio superior de la tibia 1923 Seyfarth eligi el esternn- accesibilidad, menor espesor, tejido medular activo. 1929 Arinkin propuso la aspiracin con una aguja a la biopsia

 La biopsia de mdula sea por aguja

est indicada cuando existe sospecha clnica de las siguientes condiciones: Enfermedad Granulomatosa crnica Linfoma Mieloma Sndrome Mieloproliferativo Anemia Aplstica

 Metstasis de carcinoma
Enfermedades Metablicas Del Hueso Enfermedades De Depsito Alteraciones De Los Depsitos De Fierro.
Es esencial en la Etapificacin de los linfomas y en forma seriada en las leucemias para evaluar la respuesta al tratamiento.

MTODOS DE OBTENCIN DE MUESTRA

Aspiracin. Biopsia.

 La puncin puede llevarse acabo en varios huesos

En el adulto: El esternn (altura del segundo espacio intercostal)

Menos molestias No esta rodeada de tejido conjuntivo Riego si se lesionan estructuras cardiacas y vasos retro esternales

Cresta iliaca anterior y posterior en su porcin esponjosa

 En los lactantes: se punza la espina Tibial, pero el

procedimiento puede provocar fractura.

MATERIAL NECESARIO
Aguja de puncin y de biopsia y lquido de transporte de biopsia (formol al 10%).

Portas limpios y secos.

Jeringas de 10. c.c. y de 20. c.c. Agujas subcutnea e intramuscular. Guantes estriles y de un solo uso. Pao, apsitos y gasas estriles. Anestsico local (scandinibsa al 2%). Betadine. Hojas de bistur. Documentos:

Hoja de Consentimiento informado.

Hoja de datos del aspirado de Mdula sea. Carro de transporte de portas.

PREPARACIN DEL PACIENTE

En primer lugar

colocamos al paciente en decbito prono, luego se localiza la zona donde se va a realizar la puncin. Una vez localizada la zona de puncin preparamos a paciente para la prueba.

PREPARACIN DEL ASPIRADO

Se desinfecta la zona

con yodo y una vez seca se coloca un pao estril al que se le incorpora todo el material que se va a necesitar para el aspirado.

PREPARACIN DEL ASPIRADO

Se aplica anestesia en

la zona donde se va a realizar la extraccin de mdula.

 Una vez

anestesiado y localizado el lugar se procede a la extraccin de la mdula

REALIZACIN DE LOS FROTIS

A continuacin se

realizan con el material obtenido varios frotis de la mdula sea.

BIOPSIA DE MDULA SEA

Una vez terminado el

aspirado se procede si fuese necesario a la extraccin de la biopsia. Se localiza, se mide y se extrae.

Recogida de la muestra de Biopsia

La muestra de biopsia

se recoge y es rotada entre dos portas para su posterior tincin y anlisis. Se introduce en un recipiente en una solucin de formol al 10%

FINAL DE LA EXTRACCIN
Despus de haber

hecho presin durante un tiempo sobre la zona de la puncin, se coloca un apsito de forma que comprima toda el rea afectada.

LLEGADA AL LABORATORIO
Una vez en El

laboratorio se marcan las extensiones con un lpiz de grafito o diamante para poder identificar todas las muestras que se han realizado

TINCIN Y LECTURA

Preparacin de la muestra medular

Frotis: Inspeccionar el material colocndolo en un tubo Hacer tantas improntas como coloraciones se quieran realizar Debe prepararse antes que la muestra se coagule. No se aconseja el uso de anticoagulantes Si recomienda usar EDTA

PREPARACIN DE LA MUESTRA MEDULAR

Tincin: Existen varios mtodos de coloracin Los mas usados los de Romanovsky Tambin coloraciones especiales

Peroxidaza Fosfataza Acida Acido Periodico de Schiff Perls o Azul de Prusia

Peroxidaza
Neutrofilos y eosinofilos (mieloperoxidaza)
Monocitos apenas positivos Lifocitos y hematies nucleados negativos

Se usa para diferenciar las LL de LM

La enzima es sensible a la luz el calor y el metanol La peroxidasa no reacciona en cortes parafinados

Fosfatasa Acida
Se encuentra en todas las clulas hematopoyeticas
Mayor actividad en los macrofago y osteoclastos Identifica leucemia de clulas vellosas

 Acido Periodico de Schiff

Detecta glucgeno intracelular La mayora de las clulas hematopoyeticas son PAS

positivas No sirve para detectar LLA de la LMA Podra ser til para detectar Eritroleucemia

 Perls o Azul de Prusia

El hierro celular se dispone en forma de ferritina y

hemosiderina Permite reconocer el hierro en los hemates nucleados (Sideroblastos), los histiocitos y los cuerpos de Pappenheimer eritrocitario. Se aplica a los cortes y extendidos de medula sea

Evaluacin de las Muestras Medulares

Incluye Estimacin de la celularidad Estudio de la estructura celular Determinacin de la distribucin y contenido de hierro Evaluacin de las clulas tumorales y de almacenamiento y granuloms Tmb ofrece la posibilidad de hacer cultivos y anlisis de cariotipo.

 CAUSAS DE MDULA SEA HIPOCELULAR:

Edad avanzada, Exposicin a substancias txicas o infecciones,

Ideoptica,
congnita, Hemoglobinuria paroxstica nocturna,

 CAUSAS DE MDULA SEA HIPERCELULAR: Neonatos, Reacciones Leucemoides, Leucemia Policitemia, Sndrome Mieloproliferativo, Anemia Perniciosa, Anemia Hemoltica, etc.

VALORES NORMALES EN MDULA SEA