Agar sangre

Fundamento La infusin de msculo de corazn y la peptona, otorgan al medio un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos, an de aquellos nutricionalmente exigentes. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El agregado de sangre al medio de cultivo, en concentracin final de 5 !" #, aporta nutrientes para el crecimiento bacteriano, y permite detectar $emlisis.

E%&
Este medio 'tambi(n denominado E.A.%.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos *ram negativos de r+pido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. ,ermite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.

 Fundamento Este medio combina las frmulas de -olt -arris y .eague con la de Levine, para obtener un me/or rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos *ram negativos. La diferenciacin entre organismos capaces de utilizar la lactosa y0o sacarosa, y aquellos que son incapaces de $acerlo, est+ dada por los indicadores eosina y azul de metileno1 (stos e/ercen un efecto in$ibitorio sobre muc$as bacterias *ram positivas. %uc$as cepas deEsc$eric$ia coli y 2itrobacter spp. presentan un caracter3stico brillo met+lico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo $acen son incoloras. Este medio permite el crecimiento de 2andida spp. como colonias rosadas y puntiformes1 la siembra en profundidad permite el desarrollo de clamidosporas en 2. albicans. Enterococcus spp. crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes, mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas pueden dar colonias de color azul lavanda1 esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa al ".5# y ello se debe a la incorporacin de azul de metileno a sus membranas. En este medio se obtiene adem+s, un buen desarrollo de especies de 4almonella y 4$igella.

Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Klebsiella pneumoniae ATCC 7 ! " 'roteus mirabilis ATCC (" 7) Enterococcus &aecalis ATCC 292)2 -higella &le.neri ATCC )2 22 -almonella typhimurium ATCC )( 2/

Tipo de Colonia Verdosas con brillo metlico y centro negro azulado #ucosas$ rosa p%rpura$ con&luentes *ncoloras *ncoloras$ pe+ue,as$ punti&ormes *ncoloras *ncoloras

SIM
Color: crema Indicador - Inhibidor: no tiene Sustrato principal: peptona Sustrato secundario: tiosulfato sodico, hierro

cido sulfhidrico Positivo: negro Negativo: del color del medio

 Es un medio semislido destinado a verificar la movilidad, produccin de indol y de sulfuro de $idrgeno en un mismo tubo. Es til para diferenciar miembros de la familia Enterobacteriaceae. Fundamento El triptfano es un amino+cido constituyente de muc$as peptonas, y particularmente de la tripte3na, que puede seroxidado por algunas bacterias para formar indol. En el proceso interviene un con/unto de enzimas llamadas triptofanasa. El indol producido se combina con el alde$ido del reactivo de 5ovac6s o de Erlic$, para originar un compuesto de color ro/o. Las cepas mviles pueden apreciarse en este medio, por la turbidez que producen alrededor de la puncin de siembra, mientras que aquellas cepas productoras de sulf$3drico se distinguen por la formacin de un precipitado negro de sulfuro de $ierro a partir del tiosulfato siempre que el medio se mantenga a un p- mayor a 7.8.

Microorganis Movilidad mo

Indol

Producci n de cido sulfhdrico 2 2 1 1 1 2

E0 coli ATCC 25922 K0 pneumoniae ATCC 7 ! " '0 mirabilis ATCC (" 7) -0 typhimurium ATCC )( 2/ -0 enteritidis ATCC )" 7! -0 &le.neri ATCC )2 22

1 2 1 1 1 2

1 2 2 2 2 2

Movilidad Positiva : presencia de turbidez Negativa crecimiento en la linea del inoculo

Indol Positivo: anillo ro o !"eactivo de #ovacs$ Negativo: anillo amarillo

CITRATO
Color: verde Inhibidor: no tiene Indicador: azul de bromotimol Sustrato principal: citrato de sodio

Cit -

Cit +

 %edio utilizado para la diferenciacin de enterobacterias, en base a la capacidad de usar citrato como nica fuente de carbono y energ3a. Fundamento En el medio de cultivo, el fosfato monoamnico es la nica fuente de nitrgeno y el citrato de sodio es la nica fuente de carbono. Ambos componentes son necesarios para el desarrollo bacteriano. Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es cofactor enzim+tico. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el azul de bromotimol es el indicador de p-, que vira al color azul en medio alcalino. El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como nica fuente de carbono, usan sales de amonio como nica fuente de nitrgeno, con la consiguiente produccin de alcalinidad. El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras de citrato permeasa, a trav(s del ciclo del +cido tricarbox3lico. El desdoblamiento del citrato da progresivamente, oxalacetato y piruvato. Este ltimo, en presencia de un medio alcalino, da origen a +cidos org+nicos que, al ser utilizados como fuente de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul y esto es indicativo de la produccin de citrato permeasa.

ROJO DE METILO
Caldo RM Sustrato: Glucosa. Vias: Fermentacion acida o neutra. Producto: Acido organicos o acetoina. Reveladores: Solucion de Rojo de Metilo, Alfa aftol ! "#$ %&'.

-Fermentacin cido mixta - Fermentacin butiln-gliclica Positivo negativo

% Medio utilizado para la realizacin del ensayo de Rojo de Metilo y Voges Proskauer.
Es particularmente til para la clasi icacin de entero!acterias. Fundamento En el medio de culti"o# la pluripeptona aporta los nutrientes necesarios para el desarrollo !acteriano y la glucosa es el $idrato de car!ono ermenta!le. %a glucosapuede sermeta!olizada por los microorganismos# a tra"&s de distintas "'as meta!licas. (egn la "'a utilizada# se originar)n productos inales )cidos *)cido l)ctico# )cido ac&tico# )cido rmico+# o productos inales neutros *acetil metil car!inol+. Esta di erencia en el meta!olismo !acteriano# podr'a ser reconocida por la adicin de un indicador como rojo de metilo# para re"elar la presencia de productos )cidos# y por la adicin de al a na tol e $idr,ido de potasio para e"idenciar la presencia de productos inales neutros. Voges y Proskauer# descri!ieron una coloracin rojiza -ue aparec'a despu&s de adicionar $idr,ido de potasio a los culti"os de ciertos microorganismos en medio con glucosa. Esta coloracin se de!e a la o,idacin del acetilmetil car!inol a diacetilo el cual reacciona con la peptona del medio para dar un color rojo.

Microorganismo Klebsiella pneumoniae ATCC 7 ! " -0 typhimurium ATCC )( 2/ E0 coli ATCC 25922 -0 &le.neri ATCC )2 22

Citrato permeas a 'ositi3o 'ositi3o 4egati3o 4egati3o

Color del medio Azul Azul Verde Verde

1-Prue a del ro!o de metilo" 'ositi3o6 color ro7o0 4egati3o6 color amarillo0 #-Prue a de Voges Pros$auer" 'ositi3o6 desarrollo de un color ro7o en pocos minutos despu8s de una completa agitaci9n del tubo0 4egati3o6 ausencia de color ro7o
0

Microorganismo Crecimiento E0 coli ATCC 5ueno 25922 K0 pneumoniae 5ueno ATCC 7 ! " '0 mirabilis ATCC 5ueno (" 7) -0 typhimurium 5ueno ATCC )( 2/ Citrobacter 5ueno &reundii Enterobacter 5ueno aerogenes

RM 1 2 1 1 1 2

VP 2 1 2 2 2 1

UREA.
Los microorganismos que poseen la enzima Ureasa tienen la capacidad de hidrolizar la urea.

Urea Positiva.

Urea negativa.

%edio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad ure+sica. 4e utiliza para identificar bacterias que $idrolizan urea, tales como ,roteus spp., otras enterobacterias y estafilococos. Fundamento En el medio de cultivo, la tripte3na y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el ro/o de fenol es el indicador de p-. Algunas bacterias $idrolizan la urea por medio de la enzima ureasa liberando amon3aco y dixido de carbono. Estos productos alcalinizan el medio $aciendo virar el ro/o de fenol del amarillo al ro/o. En este medio, la fermentacin de la glucosa activa la enzima ureasa, acelerando la velocidad del metabolismo en aquellos organismos que $idrolizan lentamente la urea, como especies de Enterobacter o 5lebsiella. Microorganismo 'roteus mirabilis ATCC (" 7) K0 pneumoniae ATCC 7 ! " Escherichia coli ATCC 25922 -0 &le.neri ATCC )2 22 -0 typhimurium ATCC )( 2/ %ctividad uresica 'ositi3a 'ositi3a d8bil 4egati3a 4egati3a 4egati3a Color del medio :o7o2:osado :o7o2:osado Amarillo Amarillo Amarillo

LIA.
La lisina descarboxilasa. La lisina desaminasa.

$curre en un ambiente ambiente aerobio que al anaerbico se pone de combinarse con la sal de mani!iesto por la glucos hierro %ermentacin en presencia de alcalinizacin del medio oxigeno !orma un color lisin produciendo un vira"e del 'escarboxilacion violeta ro"izo. indicador p#rpura de Produccin de )*+ se evidencia por la bromocresol. escarboxilacion lisina presencia de un precipitado negro por 'esaminacion lisina utilizacin de las sales %ermentacin glucosa de hierro.

ermentacin glucosa& en ocurre escarboxilacion lisina

La presencia de sales de hierro

.49
:;<=A%E<.>? extracto de carne y la pluripeptona La lactosa, sacarosa y glucosa son los $idratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la produccin de +cido sulf$3drico, el sulfato de $ierro y amonio, es la fuente de iones :e 3+ , los cuales se combinan con el +cido sulf$3drico y producen sulfuro de $ierro, de color negro. El ro/o de fenol es el indicador de p ,or fermentacin de azcares, se producen +cidos

 ! ,ico alcalino0fondo +cido 'pico ro/o0fondo amarillo)? el microorganismo solamente fermenta la glucosa. 8 ,ico +cido0fondo +cido 'pico amarillo0fondo amarillo)? el microorganismo fermenta glucosa, lactosa y0o sacarosa. @ ,ico alcalino0fondo alcalino 'pico ro/o0fondo ro/o)? el microorganismo es no fermentador de azcares. A La presencia de burbu/as, o ruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo produce gas. 5 El ennegrecimiento del medio indica microorganismo produce +cido sulf$3drico. que el

BE=;229>< =E <9.BA.>4