CROMATOGRAFA DE

GASES
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO
F E S - CUAUTITLN
SECCIN DE QUIMICA ANALITICA
ASESOR:
Q. PABLO HERNNDEZ MATAMOROS
INTRODUCCION
Los problemas mas comunes en los laboratorios
de analisis quimicos son:

SEPARACION
IDENTIFICACION
CUANTIFICACION

De estos una parte importante en el analisis
consiste en aislar un analito en particular; para su
posterior identificacion y cuantificacion. Todo ello
puede ser englobado en la Cromatografia.
CROMATOGRAFIA
Clasificacin de los procesos de Separacin
CROMATOGRAFIA
CROMATOGRAFIA
METODOS DE SEPARACION MODERNOS.
Actualmente se cuenta una diversidad de tcnicas de separacin
entre las mas importantes se encuentran:
1) Electroforesis Capilar
2) Electro deposicin
3) Cromatografa de Gases
4) Cromatografa de lquidos
5) Electro cromatografa
Con todas estas tcnicas analticas hoy en da es muy difcil no
tener una tcnica de separacin para la mayora de compuestos
presentes en la naturaleza.
CROMATOGRAFIA
CROMATOGRAFIA
Qu es la Cromatografa?
Es una tcnica de separacin de los
componentes o solutos de una mezcla,
sobre la base de una distribucin de
cantidades relativas de cada soluto
entre una fase mvil y una fase
estacionaria en contacto intimo entre
si.
La base de la separacin es la
diferencia de velocidades de
migracin de los soluto, regida por la
afinidad de este por la fase
estacionaria.
CROMATOGRAFIA
INTRODUCCION DE LA
MUESTRA
FASE MOVIL
COLUMNA
FASE ESTACIONARIA
CROMATOGRAFIA
CLASIFICACION DE LA CROMATOGRAFIA
CROMATOGRAFIA DE
GASES
CROMATOGRAFIA DE
LIQUIDOS
GAS-SLIDO
(adsorcin)
GAS-LIQUIDO
(absorcin)
LIQUIDO-LIQUIDO
LIQUIDO-SLIDO
CROMATOGRAFIA
M. TSWEET (1903): Separo mezclas de pigmentos
vegetales en columnas rellenas
con adsorbentes slidos y solventes variados.
pigmentos
separados
ter de
petrleo
CaCO
3
mezcla de pigmentos
Cromatografia =
kroma [color] + graph [escribir]
(griego)
CROMATOGRAFIA
Principio Bsico
Separacin de mezclas por intercambio diferencial de sus
componentes entre una FASE ESTACIONARIA (lquido o slido)
y una FASE MVIL (lquido o gas)
CROMATOGRAFIA
Modalidades y Clasificacin
FM = Lquido
FM = Gas
Cromatografia
de lquidos
Cromatografia
de gases (CG)
Segn la FE en
CG puede ser:
Slida
Lquida
Cromatografia
Gas-Slido (CGS)
Cromatografia
Gas-Lquido (CGL)
CROMATOGRAFIA
DEFINICION DE CROMATOGRAFIA DE GASES
Es un mtodo de separacin que se basa en la diferencia de
afinidad de cada soluto de la mezcla por una fase
estacionaria. Esto provoca que los componentes avancen
con velocidades relativas diferentes a travs del sistema al
ser arrastrados por la fase mvil gaseosa.

La fase estacionaria se encuentra distribuida en el interior
de un tubo de acero inoxidable o slice fundida. La mezcla
se introduce en un dispositivo de inyeccin donde es
vaporizada, para posteriormente ser transportada a la
columna por la fase mvil. A la salida de la columna un
detector seala la presencia, cantidad y grado de separacin
obtenido entre ellos.
CROMATOGRAFIA
FASE
ESTACIONARIA
(slido o liquido)
DETECTOR
FUNDAMENTOS DE CROMATOGRAFIA DE GASES
(termodinamicos o de retencin)
INTRODUCCION DE
LA MUESTRA
Fase gaseosa o
liquida
FASE MOVIL
(gas acarreador)
COLUMNA (acero inoxidable
o tubo de slice)
CROMATOGRAFIA GASEOSA
Historia
Detector por Densidad de Gas Martin
y James)
1940
1950
1960
CGS rudimentaria
CGL propuesta (Martin y Synge)
Separacin de cidos orgnicos por
CGL: primer cromatgrafo (Martin y
J ames)
Primer equipamento comercial (Griffin &
George)
Detector por Ionizacin de llama
(McWillian y Dewar)
Detector por Captura de Electrones (Lovelock
y Lipsky)
Columnas Capilares (Golay)
CROMATOGRAFIA
QU TIPO DE COMPUESTOS SE SEPARAN POR CG?
Se pueden separar diversos tipos de compuestos
por este tipo de cromatografia :

1) Compuestos trmicamente estables
2) Compuestos voltiles o semivoltiles
3) Compuestos por medio de formacin de derivados se
transformen en los anteriores

Generalmente se trata de compuestos orgnicos
de bajo peso molecular (P.M. 300 o menos)
CROMATOGRAFIA GASEOSA
Aplicaciones
Qu muestras pueden ser separadas por CG?
Mezclas cuyos constituyentes sean
VOLTILES (evaporables)
Una mezcla cualquiera pueda ser
arrastada por el flujo de un gas, en
donde se debe disolver - pero solo parcialmente -

DE FORMA GENERAL:
CG es aplicable para separar y anlizar mezclas cuyos
constituyentes tengan PUNTOS DE EBULLICION de ms de
300
o
C y que sean termicamente estables.
Del proceso cromatogrfico en el detector se
obtiene lo que se llama un Cromatograma
R
E
S
P
U
E
S
T
A

CROMATOGRAFIA
TEORIA BSICA
Tiempo de Retencin Ajustado t
R

t
R

t
M

t
R
= t
R
- t
M

TIEMPO
S
E

A
L

t
R
= Tiempo de Retencin (tiempo de recorrido entre una inyeccin y el pice de
un pico cromatogrfico)
t
M
= Tiempo de Retencin del Compuesto No Retenido (tiempo mnimo para que
un compuesto que no interacciona con la FE atraviese la columna)
t
R
= Tiempo de Retencin Ajustado (tiempo medio que las molculas de un
analito pasan adsorbidas en una FE)
Un parmetro directamente medible de retencin de un analito es el
TIEMPO DE RETENCIN AJUSTADO, t
R
:
TEORIA BSICA
Volumen de Retencin Ajustado, V
R

Parmetro no directamente mesurable, pero fundamental, de
retencin es el:
VOLUMEN DE RETENCIN AJUSTADO, V
R
:
Flujo del gas de arrastre
M R R
t t t = '
x
C
F
V
R
= Volumen de Retencin (volumen de gas de arrastre necesario
para eluir un analito)
V
M
= Volumen de Fase Mvil (volumen de gas de arrastre
contenido en una columna; volumen muerto)
V
R
= Volumen de Retencin Ajustado (volumen de gas de arrastre
consumido en cuanto un analito esta sorbido en una FE)
V
R
= f
Factores termodinmicos
Parmetros dimensionales de la columna
TEORIA BSICA
Velocidad de lineal media (v):
Es la velocidad promedio que viaja la fase mvil en en sistema
cromatografico y se calcula:

v = L/tm
Velocidad de migracin promedio (v
a
):
Es la velocidad promedio que viaja el soluto a en el sistema
cromatografico y se calcula:

v
a
= L/tR
(a)
TEORIA BSICA
Constante de Distribucin K
C

Columna cromatogrfica: serie de compartimientos independientes donde ocurre un
equilibrio entre un analito disuelto en una fase estacionaria y un gas de arrastre:
Ocurre un quasi-equilibrio entre la parte de
un analito sorbido en una FE y la disuelta en
un gas de arrastre.
| |
| |
M
S
C
A
A
K =
K
C
= Constante de Distribucin
[A]
S
= concentracin de un analito en una FE
[A]
M
= concentracin de un analito en un gas
MENOR RETENCIN
Volatilidad
[A]
M

Afinidad por la FE
[A]
S

TEORIA BSICA
Factor de Retencin k
Expresando un equilibrio en terminos de la MASA del analito en cada fase,
en vez de la concentracin:
M
S
W
W
k =
FACTOR DE RETENCIN, k: razn
entre las masas del analito contenidas
en una FE (W
s
) y Fase movil (W
M
)
S
M
V
V
= |
RAZN DE FASES, |: razn entre
volumenes de FE de un gas de arrastre
en una columna
Un factor de retencin k depende de la
constante termodinmica de
distribucin K
C
y de la razn de fases
| de una columna
TEORIA BSICA
Razn de Fases |
Depende de las DIMENSIONES de la columna:
L = longitud de la columna
r
C
= radio
de la columna
d
f
= espesor de la
pelcula de FE
( )
f C
f C
d r
d r
2
2

= |
r
C
>> d
f

d
C
/ mm d
f
/ m |
0.10 0.10 250
0.20 0.11 455
0.20 0.33 152
0.25 0.25 250
0.25 1.00 63
0.32 0.17 471
0.32 0.52 154
0.32 1.00 80
0.53 0.88 151
0.53 2.65 50
0.53 5.00 27
Valores de | para columnas
capilares de dimensiones
tpicas:
Empaquetadas:
5 < | < 50
TEORIA BSICA
Relaciones entre V
R
, K
C
y |
V
R
puede ser definido en funcin de K
C
y |:
V
R
depende directamente de la constante de distribucin del soluto entre
una FE, la Fase Movil y de las dimensiones de la columna.
Otra combinacin
posible:
Es posible estimar tanto un
factor de retencin como una
constante de distribucin a
partir de un cromatograma
TEORIA BSICA
Factor de Retencin (k)
El Factor de Retencin (k) es una medida de retencin.
Es la relacin de tiempo que gasta el soluto en las fases
estacionaria y mvil. Se calcula utilizando la Ecuacin
k = (tr - tm) / tm = tr /tm
El factor de Retencin es una medida de la retencin
por la FE. Es una medida relativa y lineal. Por ejemplo,
un soluto con un k = 6 es doblemente retenido por la
fase estacionaria (no la columna) comparado con un
soluto con un k = 3.
Factor de Separacin (o):

El factor de Separacin es una medida del tiempo o distancia
entre el mximo de dos picos. Se calcula utilizando la Ecuacin:

o= k2 / k1
Si o = 1, entonces los picos tienen el mismo tiempo de retencin
y co-eluyen (eluyen juntos)

TEORIA BSICA
Resolucin (Rs):

Es el grado de separacin entre dos picos adyacentes. Entre
mayor sea la resolucin, menor ser el solapamiento entre dos
picos consecutivos. El factor de Separacin (o) es solo la distancia
o el tiempo entre los mximos de dos picos . La Resolucin toma
en cuenta tanto a (o) como el ancho de pico.
TEORIA BSICA
TEORIA BSICA
TEORIA BSICA


Relacin de Fase ( b)

TEORIA BSICA
Eficiencia de Sistemas Cromatogrficos
Una dispersin de un analito
por la columna provoca
inevitablemente un
alargamiento de su banda:
TIEMPO
Efectos del alargamiento excesivo de picos:
Separacin deficiente de analitos
con retenciones prximas.
Picos ms anchos y menos
intensos = menor detectabilidad
EFICIENCIA Capacidad de elucin con un mnimo de
dispersin del analito.
TEORIA BSICA
Cuantificacin de la eficiencia
Se supone a una columna cromatogrfica como una serie de compartimientos
separados donde ocurre un equilibrio entre un analito y una FE y/o gas de
arrastre:
Cada compartimiento de equilibrio
es llamado como PLATO TERICO
El nmero de platos tericos de una
columna (N) puede ser calculado por:
Columna ms
eficiente
t
R

w
b

N
TEORIA BSICA
Cuantificacin de la eficiencia
ALTURA EQUIVALENTE A UN PLATO TERICO (H) Tamao de cada
compartimiento de equilibrio
Valores tpicos de H y N:
d
C
d
f
H N
0.10 0.25 0.081 370370
0.25 0.25 0.156 192308
0.32 0.32 0.200 150000
0.32 0.50 0.228 131579
0.32 1.00 0.294 102041
0.32 5.00 0.435 68966
0.53 1.00 0.426 70423
0.53 5.00 0.683 43924
2.16 10% 0.549 3643
2.16 5% 0.500 4000
Capilares, L = 30 m
Empaquetadas, L = 2 m
Los valores de H para columnas capilares y empaquetadas son prximos, mas
como L para capilares es tipicamente MUCHO mayor stas son ms eficientes
(L = longitud de la columna)
TEORIA BSICA
Cuantificacin de la eficiencia
Numero de Platos Tericos (N) o Eficiencia de Columna
La eficiencia de la Columna se expresa como el nmero de platos
tericos (N) y se calcula:
N = 5.545 [(tr) / w
1/2
]
2
N = 16[tr / w
b
]
2

El Nmero de platos tericos es una medida indirecta del ancho
del pico para un pico a un tiempo de retencin especfico. Las
columnas con un alto nmero de platos tericos son
consideradas por ser ms eficientes (esto es, columnas ms
eficientes) que aquellas con un nmero ms bajo de platos
tericos.
TEORIA BSICA
Optimizacin de la Eficiencia
La altura equivalente de un plato terico es funcin de la velocidade linear media
del gas de arraste u:
H

u
u
MAX

H
MIN

El valor de H puede
ser minimizado
optimizandose la
velocidad de
inyeccin del gas de
arrastre
Relaciones algebraicas entre H y u:
- Columnas Empaquetadas: Ecuacin de van Deemter
- Columnas Capilares: Ecuacin de Golay
(A, B, C = constantes)
(B, C
M
, C
S
= constantes)
Los gases portadores ms usados en cromatografa de gases con
columnas capilares son el Nitrgeno, el Helio y el Hidrgeno. Las
diferencias entre ellos son evidentes al comparar las respectivas
curvas de van Deemter. El Nitrgeno entrega la mejor eficiencia; sin
embargo, su velocidad lineal ptima es muy baja (opt bajo).
Comparado con el Nitrgeno, la opt para el Helio es mucho ms
alto sin una prdida significativa de la eficiencia.
TEORIA BSICA
Optimizacin de la Eficiencia
Comparacin entre Nitrgeno, Helio e Hidrgeno.
TEORIA BSICA
Optimizacin de la Eficiencia
Un Cromatgrafo de Gases
1
2
3
4
6
5
1 - Reservorio de Gas y Controles de Paso/Presin.
2 - Inyector (Vaporizador) de la muestra.
3 - Columna Cromatogrfica y Horno de la Columna (Temperatura Controlada)
4 - Detector.
5 - Amplificador de seal (Tratamiento).
6 - Registro de la Seal (Registrador o Computador).
INSTRUMENTACIN
Gas de Arraste
Fase Mvil en CG: NO interacciona con la muestra solo la conduce,
acarrea a travs de la columna-. Usualmente se denomina como GAS
DE ARRASTRE
Requisitos:
INERTE : No debe reaccionar con la muestra, fase estacionaria o
superfcies del instrumento.
PURO : Debe estar excento de impurezas que puedan degradar
la fase estacionaria.
Impurezas tpicas en gases y sus efectos:
oxida / hidroliza algunas FE
incompatibles con DCE
H
2
O, O
2
hidrocarburos

Rudo, no hay seal
de DIC
INSTRUMENTACION
Gas de Arraste
Requisitos:
COSTO: Gases de altsima pureza pueden ser muy caros.
COMPATIBLE CON EL DETECTOR: Cada detector demanda un
gas de arraste especfico para mejor funcionamento.
Seleccin de Gases de Arraste en Funcin del Detector:
He , H
2

DCT

DIC

N
2
, H
2

DCE

N
2
(SS), Ar + 5% CH
4

C
O
S
T
O

PUREZA
A
B
C
A = 99,995 % (4.5)
B = 99,999 % (5.0)
C = 99,9999 % (6.0)
INSTRUMENTACIN
Alimentacin de Gas de Arraste
Componentes necesarios en una lnea de gas:
controladores de paso / presin de gas
dispositivos para purificar el gas (trampas, traps)
1
2
3
4
5
6
1 - Cilindro de Gas
2 - Regulador de Presin Primario
3 - Traps para eliminar impurezas del gas
4 - Regulador de Presin Secundario
5 - Regulador de Vaco (Controlador Diferencial de Flujo)
6 - Medidor de Vaco (Rotmetro)
Nota: Tubos y Conexiones deben ser de Acero Inoxidable o Cobre
CROMATOGRAFIA
CROMATOGRAFIA







CROMATOGRAFIA
INSTRUMENTACIN
Dispositivos de Inyeccin de la muestra
Los dispositivos para inyeccin (INYECTORES o VAPORIZADORES)
deben proporcionar, en la medida de lo posible, una introduccin
INSTANTNEA de la muestra en la columna cromatogrfica
Inyeccin instantnea:
Inyeccin lenta:
t = 0
t = x
t = 0
t = x
INSTRUMENTACIN
Inyector on-column Convencional
1
2
3
4
1 - Septo (silicon)
2 - Alimentacin de gs de arraste
3 - Block metlico calentado
4 - Punta da columna cromatogrfica
INSTRUMENTACIN
Parmetros de Inyeccin
TEMPERATURA DEL INYECTOR: Debe ser suficientemente elevada
para que la muestra vaporize imediatamente, pero sin descomposicin
Regla Gral: T
inj
= 50
o
C por encima de la temperatura de ebullicin del
componente menos voltil
VOLUMEN INYECTADO: Depende del tipo de columna y del estado
fsico de la muestra
COLUMNA
Muestras
Gaseosas
Muestras
Lquidas
empaquetada
C = 3,2 mm (
1
/
4
)
0,1 ml ... 50 mL 0,2 L ... 20 L
capilar
C = 0,25 mm
0,001 ml ... 0,1 mL 0,01 L ... 3 L
Slidos: convencionalmente se disuelve en un solvente adecuado
y se inyecta como solucin
INSTRUMENTACIN
Microjeringas para Inyeccin
LQUIDOS Capacidades tpicas: 1 L, 5 L y 10 L
mbolo
cuerpo (pirex)
aguja (inox 316)
Microjeringa de 10 L:
Microjeringa de 1 L (seccin ampliada):
cuerpo
guia
mbolo (fijo de acero
soldado a la guia)
aguja
INSTRUMENTACIN
Columnas: Definiciones Bsicas
EMPAQUETADA
C = 3 a 6 mm
L = 0,5 m a 5 m
Relleno con slido pulverizado (FE
slida o FE lquida depositada
sobre las partculas del relleno)
CAPILAR
C = 0,1 a 0,5 mm
L = 5 m a 100 m
Paredes internas recubiertas con
una pelcula fina (del orden de m)
de FE lquida o slida
INSTRUMENTACIN
Temperatura de la Columna
Referente a la interaccin con una FE, o tiempo que un analito
demora para recorrer una columna, depende de su PRESIN DE
VAPOR (p
0
).
p
0
= f
Estructura qumica del
analito
Temperatura de la
columna
Temperatura
de la
columna
Presin de
vapor
Velocidad
de
migracin
ANALITO ELUYE MS RPIDAMENTE
(MENOR RETENCIN)
INSTRUMENTACIN
Temperatura de la Columna
T
E
M
P
E
R
A
T
U
R
A

D
E

L
A

C
O
L
U
M
N
A

CONTROL CONFIABLE DE TEMPERATURA DE LA COLUMNA
ES ESENCIAL PARA OBTENER BUENA SEPARACIN EN CG
INSTRUMENTACIN
Horno de la Columna
Caractersticas Deseables de un Horno:
AMPLIO RANGO DE TEMPERATURA DE USO: Por lo
menos de T
ambiente
a 400
o
C. Sistemas criognicos
(T < T
ambiente
) pueden ser necesarios en casos especiaies.
TEMPERATURA INDEPENDIENTE DE LOS DEMAS
MDULOS: No debe ser afectado por la temperatura del
inyector ni el detector.
TEMPERATURA UNIFORME EN SU INTERIOR: Sistemas
de ventilacin interna muy eficientes para mantener la
temperatura homognea en todo el horno.
INSTRUMENTACIN
Horno de la Columna
Caractersticas deseables de un horno:
FCIL ACCESO A LA COLUMNA: Una operacin de
fractura de columna puede ser frecuente.
CALENTAMIENTO Y ENFRIAMENTO RPIDO: Importante
tanto en anlisis de rutina y/o durante el desenvolvimiento
de metodologas analticas nuevas.
TEMPERATURA ESTABLE Y REPRODUCIBLE: La
temperatura debe ser mantenida con exactitud y precisin
de 0,1C.
En cromatogrfos modernos (despues de 1980),el control de
temperatura de un horno es totalmente operado por
microprocesadores.
INSTRUMENTACIN
Programacin Linear de Temperatura
Mezclas complejas (constituyentes con volatilidades muy
diferentes) separadas ISOTERMICAMENTE:
T
COL
BAJA:
- Componentes ms voltiles son
separados
- Componentes menos voltiles demoran
para eluir, saliendo como picos mal
definidos
T
COL
ALTA:
- Componentes ms voltiles no son
separados
- Componentes menos voltiles eluyen
ms rpidamente
INSTRUMENTACIN
Programacin Linear de Temperatura
La temperatura del horno puede ser variada linealmente
durante una separacin:
Se consigue buena
separacin de los
componentes de una
muestra en menor tiempo
TIEMPO
T
E
M
P
E
R
A
T
U
R
A

t
INI
t
FIM

T
INI

T
FIM

R
Parmetros de una programacin de temperatura:
T
INI
Temperatura Inicial
T
FIM
Temperatura Final
t
INI
Tiempo Isotrmico Inicial
t
FIM
Tiempo Final do Programa
R Velocidad de Calentamiento
INSTRUMENTACIN
Programacin Linear de la Temperatura
Posibles problemas asociados a PLT:
VARIACIONES DE INYECCIN DEL GAS DE ARRASTE: Las
viscosidades de un gas aumentan con la temperatura.
viscosidades velocidad de inyeccin
DERIVADA (DRIFT) DE LA LINEA DE BASE: Debido al
aumento de volatilizacin de la FE lquida
INSTRUMENTACIN
Detectores
Dispositivos que examinan continuamente el material eludo, generando
una seal debida al pasaje de substancias o al gas de arraste
Grfico Seal vs Tiempo = CROMATOGRAMA (Idealmente cada
substancia separada aparece como un PICO en el cromatograma.
INSTRUMENTACIN
Detectores
Ms Importantes:
DETECTOR POR CAPTURA DE ELECTRONES (DCE O ECD):
Supresn de la corriente causada por la absorcin de
electrones de eluatos altamente electroflicos.
DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA (DCT O TCD):
Variacin de la conductividad trmica del gas de arrastre.
DETECTOR POR IONIZACIN DE LLAMA (DIL O FID): Iones
generados durante la quema de los eluatos en una llama
de H
2
+ Ar.
REGISTRO DE
SEAL
ANALGICO
Registradores XY
DIGITAL
Integradores
Computadores
FASES ESTACIONARIAS
Conceptos Generales
LQUIDOS: Depositados sobre la superficie de slidos porosos inertes (columnas
empaquetadas) o de tubos finos de materiales inertes (columnas capilares)
FE
lquida
SOPORTE
Slido inerte
poroso
Tubo capilar de
material inerte
SLIDOS: Columnas rellenas con material finamente granulado (empaquetadas) o
depositados sobre la superficie interna del tubo (capilar)
Para minimizar la prdida de FE lquida por volatilizacin, normalmente sta es:
Entrecruzada: las cadenas
polimricas son
qumicamente ligadas entre s
Qumicamente ligadas: las cadenas
polimricas son presas a un
soporte por reacciones qumicas
FASES ESTACIONARIAS
Caractersticas de una FE ideal
SELECTIVA: Debe interaccionar diferencialmente con los
componentes de la muestra.
Regla general: la FE debe tener caractersticas, cuanto sea posible, prximas
al soluto a ser separado (polar, apolar, aromtico, ...)
FE Selectiva:
separacin adecuada
de los constituyentes
de la muestra
FE poco Selectiva:
menos resolucin con
misma columna de buena
eficiencia
FASES ESTACIONARIAS
Caractersticas de una FE ideal
AMPLIO RANGO DE TEMPERATURAS DE USO: Mayor flexibilidad
para realizar distintos anlisis
BUENA ESTABILIDADE QUMICA Y TRMICA: Mayor durabilidad
de la columna, que no reaccione con los componentes de la
muestra
POCO VISCOSA: Columnas ms eficientes (menor resistencia a la
transferencia del analito entre las fases)
DISPONIBLE EN ELEVADO GRADO DE PUREZA: Columnas
reproducibles; ausencia de picos fantasma en los
cromatogramas.
FASES ESTACIONARIAS
FE Slidas: Adsorcin
El fenmeno fsicoqumico responsable de la interaccin analito +FE
slida es la ADSORCIN
La adsorcin ocurre en la interface entre el gas de arraste y la FE slida
ADSORCIN
Slidos con grandes reas
superficiales (partculas finas,
poros)
Solutos polares
Slidos con gran nmero de
sitios activos (hidroxilos, pares
de electrones...)
FASES ESTACIONARIAS
FE Lquidas: Absorcin
El fenmemo fsicoqumico responsable de la interaccin analito +FE
lquida es la ABSORCIN
La absorcin ocurre en el interior de la pelcula de FE lquida (fenmeno
INTRAFACIAL)
ABSORCIN
Pelculas espesas de FE lquida
Interaccin fuerte entre la FE lquida
y el analito (gran solubilidad)
Gran superfcie lquida expuesta al
gas de arrastre
FASES ESTACIONARIAS
FE Slidas
Caractersticas Generales:
- Slidos finamente granulados (dimetros de partculas tpicos de 105 a 420 m).
- Grandes reas superficiaies (alrededor de 10
2
m
2
/g).
Ms usados:
Polmeros Porosos: Porapak (copolmero estirenodivinilbenceno), Tenax (polixido de
difenileno)
Slidos Inorgnicos: Carboplot, Carboxen (carbonos activos grafitizados), Almina,
Arcilla microporosa
GASES DE REFERENCIA
Columna: Carboxen-1000 60-80
mesh; 15 x 1/8
T
COL
: 35
o
C a 225
o
C / 20
o
C. min
-1

Gas de Arrastre: He a 30 ml.min
-1
Detector: TCD
Principales Aplicaciones:
- Separacin de gases fijos
- Compuestos de bajo PM
- Series homlogas
FASES ESTACIONARIAS
Familias de FE Lquidas
POLIGLICOLES: Muy polares; sensibles a uniones y oxidaciones; son de
los ms importantes. Principal: Polietilenglicol (nombres comerciales:
Carbowax, DB-Wax, Supelcowax, HP-Wax, etc.)
CH
2
CH
2
O H OH
n
Estructura Qumica:
AMINAS ALIFTICAS
Columna:4 % Carbowax 20M s/ Carbopack B + 0,8% KOH T
COL
: 200
o
C (isotrmico)
Gas de Arrastre: N
2
a 20 mL.min
-1
Detector: FID Muestra: 0,01 L de mezcla de aminas
FASES ESTACIONARIAS
Familias de FE Lquidas
Mayor parte de las aplicaciones en CG moderna
Cuatro grandes grupos estructurales:
PARAFINAS: Apolares; alta inercia qumica; prcticamente
abandonadas. Principales: escualeno (C
30
H
62
), Apiezon .
POLIESTRES: Estres de dialcoholes con dicidos. Polares;
altamente sensibles a uniones y oxidaciones; uso en decline.
Principales: DEGS, EGA, EGS.
ESTRES METLICOS DE CIDOS
GRASOS
Columna:5%DEGS-PS s/ Supel-coport
100/120 mesh; 6 x 1/8
T
COL
: 200
o
C (isotrmico)
Gas de Arrastre: N
2
a 20 ml.min
-1
Detector: FID
Muestra: 0,5 L de solucin en cloroformo
conteniendo 0,5 g de cada ster
FASES ESTACIONARIAS
Familias de FE Lquidas
SILICONES (polisiloxanos): Las FE ms empleadas en CG. Cubren una
amplia gama de polaridades y propiedades qumicas diversas.
Si
CH
3
H
3
C
CH
3
O Si
R
1
R
2
O Si
CH
3
CH
3
CH
3
n
R
1
, R
2
= qualquer
radical orgnico
- Uniones Si-O son extremadamente estables = elevada estabilidad trmica y
qumica de las FE.
- Los silicones son fabricados en gran escala para diversas aplicaciones =
minimizar el costo del producto +tecnologia de produccin y purificacin
largamente estudiada y conocida.
- Prcticamente cualquier radical orgnico o inorgnico puede ser ligado a la
cadena polimrica = FE ajustables a separaciones especficas + facilidad
de inmovilizacin por entrecruzamiento y unin qumica a soportes
FASES ESTACIONARIAS
Familias de FE Lquidas
Sustituyentes Nombres Comerciales Observaciones
- - SE-30 OV-1 OV-101 SP-2100 menos polares de la serie
poco selectivas
carborano ? - Dexsil 300GC similar a PDMS
estable a temperaturas > 400
o
C
fenil 5 % - SE-52 SE-54 OV-3 OV-5
OV-73
poco polar
cianopropil 7% fenil 7% OV-1701 SPB-7 CP-Sil 19CB moderadamente polar
fenil 50 % - OV-17 SP-2250 HP-50+
SPB-50
moderadamente polar retiene
compuestos aromticos
trifluoropropil 50% - OV-210 QF-1 moderadamente polar retiene
compuestos carbonlicos
cianopropil 50% fenil 50% OV-225 SP-2300 CP-Sil
43CB
polar
retiene dadores de electrones
cianopropil 100% - SP-2340 SP-2330 Silar-9 CP altamente polar

FE derivadas de polidimetilsiloxano (PDMS) por substitucin de -CH
3
por
radicales orgnicos, en orden creciente de polaridad:
Diferencias entre FE de composicin similar provenientes de
fabricantes diferentes: pureza, viscosidad.
FASES ESTACIONARIAS
Familias de FE Lquidas
Separacin de pesticidas - FE = 100 % PDMS
Columna: CP-Sil 5 (25 m x 0,32 mm x 0,12 m)
T
COL
:195
o
C (6,5 min) / 195
o
C a 275
o
C (10
o
C.min
-1
)
Gas de Arrastre: He a 35 cm.min
-1
Detector: FID
Muestra: 2L de solucin de pesticidas on-column
1 - TCNB
2 - Dichloram
3 - Lindano
4 - PCNB
5 - Pentacloroanilina
6 - Ronilano
7 - Antor
8 - pp-DDE
9 - Rovral
10 - Cypermetrin
11 - Decametrin
17 min
FASES ESTACIONARIAS
Familias de FE Lquidas
Separacin de piridinas - FE = 100 % CNpropilsilicon
1 - piridina
2 - 2-metilpiridina
3 - 2,6-dimetilpiridina
4 - 2-etilpiridina
5 - 3-metilpiridina
6 - 4-metilpiridina
3 min
Columna: CP-Sil 43CB (10 m x 0,10 mm x 0,2 m)
T
COL
:110
o
C (isotrmico)
Gas de Arraste: N
2
a 16 cm.min
-1
Detector: FID
Muestra: 0,1L de solucin 1-2% de piridinas en 3-metilpiridina
FASES ESTACIONARIAS
Familias de FE Lquidas
Separacin de fenoles - FE =fenilmetilsilicon
50% Ph
50% Me
5% Ph
95% Me
FASES ESTACIONARIAS
FE Quirales
Separacin de ismeros pticos:
FRMACOS: En muchos frmacos apenas dos ismeros pticos tienen
actividad farmacolgica.
PRODUCTOS BIOLGICOS: Distincin entre productos de origen
sinttico y natural (natural = normalmente substancias pticamente
puras; sinttico = muchas veces son mezclas racmicas).
Propiedades fsicoqumicas de ismeros pticos son MUY SIMILARES
FE convencionales no interaccionan diferencialmente con ismeros
pticos
Separacin de mezclas de ismeros pticos es posble con
FE pticamente activas
=
FE Quirales
FASES ESTACIONARIAS
FE Quirales
FE pticamente activas ms importantes:
O Si
CH
3
CH
2
CH CH
3
C
O N
H
C*
C
O
H
CH CH
3
CH
3
NH C
CH
3
CH
3
CH
3
Si
CH
3
CH
3
O
n
Quiralsil-Val
Derivados de aminocidos:
Mezclas de compuestos
formadores de puentes de
hidrogeno.
Organometlicos:
Separacin de enantimeros
formadores de complejos.
n
O Si
CH
3
CH
2
Si
CH
3
CH
3
O
CH
2
O
O
Ni
C
3
F
7
/ 2
Quiralsil-Metal
FASES ESTACIONARIAS
FE Quirales
Derivados de ciclodextrinas alquiladas:
|-ciclodextrina:
oligosacardo cclico
quiral
Quiralsil-Dex
- Introducidas en 1983
- Cuando estn ligadas a cadenas de polisiloxano: uso extremadamente
favorable como FE lquida (viscosidad baja, estabilidad ...)
- Pueden ser qumicamente inmovilizadas las columnas
- Columnas disponibles comercialmente
FASES ESTACIONARIAS
FE Quirales: Aplicaciones
Aceite esencial artificial de limn: separacin de terpenos primarios
1 - (+/-) o-pineno
2 - sabineno
3 - (+/-) |-pineno
4 - (+/-) limoneno
Columna: Rt-DEXsm (30 m x 0.32 mm x 0.25 m)
T
COL
: 1 min a 40C / 2C min
-1
/ 3 min a 200C
Gas de Arrastre: H
2
a 80 cm.min
-1
Detector: FID
FASES ESTACIONARIAS
FE Quirales: Aplicaciones
Aceite esencial natural Esencia artificial
Aroma de bergamota: distincin entre aroma natural y artificial
Columna: Rt-DEXse (30 m x 0.32 mm x 0.25 m)
T
COL
: 1 min a 40C / 4C min
-1
/ 200C
Gas de Arrastre: He a 80 cm.min
-1
Detector: MS
FASES ESTACIONARIAS
FE Quirales: Aplicaciones
Anfetaminas: resolucin de dos ismeros
Columna: Rt-DEXcst (30 m x 0.25 mm x 0.25 m)
T
COL
: 1 min a 120C / 1,5C min
-1
/ 3 min A 175C
Gas de Arrastre: He a 25 cm.min
-1
Detector: MS
COLUMNAS EMPAQUETADAS
Definiciones Bsicas
Tubo de material inerte relleno con FE slida granulada o FE lquida
depositada sobre un soporte slido.
MATERIAL
DEL
TUBO
= 3 mm a 6 mm
L = 0,5 m a 5 m
acero inox
vidro pirex
nquel
TEFLON
Granulometra
del
relleno
80 - 100 mesh
149 - 177 m
100 - 120 mesh
125 - 149 m
60 - 80 mesh
177 - 250 m
MESH d
p

Eficiencia maximizada con:
- Diminucin de d
C

- Diminucin de d
p

- Relleno regular
Limitados por la resistencia al
pasaje del gas de arrastre
COLUMNAS EMPAQUETADAS
FE Lquidas: Soporte
La FE lquida debe ser
depositada sobre un
SOPORTE slido
rea superficial entre 0,5 y 10 m
2
.g
-1

microporos regulares (~1 m)
NO interaccionar con la muestra
buena resistencia mecnica
Uso casi universal: TIERRA DIATOMCEA
Esqueletos fsiles (SiO
2
+
xidos metlicos) de
algas microscpicas
Chromosorb
Anachrom
Supelcoport
secado
calcinacin
fusin con sonda
lavado con cido
silanizacin
COLUMNAS EMPAQUETADAS
FE Lquidas: Soporte
Chromosorb - caractersticas generales

r
e
a

S
u
p
e
r
f
i
c
i
a
l
D
e
n
s
i
d
a
d

A
p
a
r
e
n
t
e
T
a
m
a

o

d
e

P
o
r
o
%

M

x
.

d
e

F
E
NOMBRE
m
2
.g
-1
g.ml
-1
m
Chromosorb P 4,0 0,47 0,4 - 2 30
Chromosorb W 1,0 0,24 8 - 9 15
Chromosorb G 0,5 0,58 - 5
O
r
d
e
n

c
r
e
c
i
e
n
t
e

d
e

i
n
e
r
c
i
a

Tratamientos especiales:
AW Lavado con cido, para remocin de metales
HP o DMCS o HDMS Silanizados (menor adsorcin)
NAW Tambin lavado con cido
Chromosorb P Rosa, muy activo.
Chromosorb W Blanco, ms inerte que el P.
Chromosorb G Similar a W, mayor resistencia mecnica
COLUMNAS EMPAQUETADAS
FE Lquidas: Carga de FE
TPICAMENTE % FE = 1 al 30 % del relleno total
Mayores volumenes de muestra
Mejor blindaje de los sitios adsortivos del soporte
Mejor reproducibilidad, no hay preparacin del relleno
Mayor eficiencia (d
f
= N)
Menor sangrado de la FE con temperatura programada
Separaciones rpidas a temperaturas menores
% FE
d
f
= f (% FE no relleno)
COLUMNAS CAPILARES
Definiciones Bsicas
Tubo fino de material inerte con FE lquida o slida depositada sobre las paredes
internas.
MATERIAL
DEL
TUBO
= 0,1 mm
a 0,5 mm
L = 5 m
a 100 m
slica fundida
vidro pirex
acero inox
Nylon
Silcosteel
Columnas de slica son revestidas externamente con polmero (poli-imida) para
aumentar resistencia mecnica y qumica
Columnas Capilares vs Empaquetadas:
C
A
P
I
L
A
R
E
S

L = N Columnas ms eficientes
F
C
= 1 ... 10 mL.min
-1
Control de inyeccin ms difcil
V
i
Dispositivos especiales de inyeccn
Familias de Columnas Capilares :
PLOT (Porous layer open tube) Cama de FE slida sujeta a las paredes internas
SCOT (Support coated open tube) Paredes internas revestidas con material de relleno
similar a las colunas empaquetadas
WCOT (Wall coated open tube) FE liquida depositada (ligada / entrecruzada) sobre las paredes
internas.
COLUMNAS CAPILARES
Dimetro Interno
d
C
= Eficiencia
0,10 mm
0,25 mm
0,32 mm
0,53 mm
1 2 3
Valores comunes:
1
Columnas de altsima eficiencia (muestras complejas, Fast
GC); capacidad volumtrica limitada del procesamiento de la
muestra
2
Dimetros ms comunes; capacidad volumtrica limitada de la
muestra, requiere de dispositivos especiales de inyeccin
3
Columnas megabore: menor eficiencia, mayor capacidad de
procesamiento, permite el uso de inyectores convencionales
COLUMNAS CAPILARES
Fast GC: Columnas Capilares Finas
Destilacin simulada de aceite diesel:
Columna: HP-1 (1 m x 0.10 mm x 0.40 m)
T
COL
: 35C / 40C min
-1
/ 0,75 min A 310C
Gas de Arrastre: He a 90 ml.min
-1
Detector: FID
Para columnas finas: es necesario un control confable de inyeccin (control
electrnico de presin) y altas velocidades de calentamiento de la columna.
COLUMNAS CAPILARES
Inyeccin
1
2
3
4
5
6
1 - Septo;
2 - Entrada de gas de arrastre;
3 - Liner (mezclador);
4 - Columna Capilar
5 - Purga de gas de arrastre;
6 - Vlvula de control de purga.
Baja capacidad de procesamiento de la muestra (sub-microlitro)
Inyeccin directa con microjeringa es muy difcil
Inyectores con divisin (splitters) Sistema neumtico de presin que
inyecta una fraccin de la muestra
- Menor sensibilidad (buena parte de la muestra es despreciada)
- Divisin de la muestra raramente es uniforme (fraccin purgada de los
constituyentes menos voltiles es siempre menor)
- Ajuste de razn de divisin es mas una fuente de error
COLUMNAS CAPILARES
Large Volume Injection (LVI)
Combinando inyectores con temperatura programada, vlvulas controladas por microprocesador y
precolumnas pueden ser posibles inyecciones de grandes volumenes (>100 L) de la muestra
1 Columnas e inyector
frios; vlvula de purga
abierta (solvente es
eliminado)
2 Columnas e inyector
calentados; vlvula de
purga fechada
(constituyentes de interes
transferidos para columna
analtica)
COLUMNAS CAPILARES
Large Volume Injection (LVI)
Separacin de PAH con LVI (V
inj
=25 L, solucin 400 ppb en CH
2
Cl
2
)
Columna: HP-5 (30 m x 0.25 mm x 0.25 m)
T
COL
: 5 min a 50C / 20C min
-1
/ 2 min A 320C
Gas de Arrastre: He a 2 ml.min
-1
Detector: FID
COLUMNAS CAPILARES
Columnas Multicapilares
Acomodos paralelos de
columnas capilares con d
C

convencional
- Eficiencia prxima a las columnas convencionales
- Capacidad similar a las columnas empaquetadas
- Columnas ms cortas: anlisis ms rpidos
Separacin de explosivos en
columna multicapilar (OV-17,
1000 capilares x 6 m)
1 - 2,6-DNT
2 - 2,4-DNT
3 - 2,4,6-TNT
4 - 3,4,5-TNT
5 - 2,3,4-TNT
6 - RDX ?
7 - tetryl
DETECTORES
Definiciones Generales
Dispositivos que generan una seal elctrica proporcional a la cantidad
eluda de un analito
~ 60 detectores son ya usados en CG
~ 15 equipamientos cromatogrficos comerciales
4 responden para la mayor parte de las aplicaciones
DCT TCD
Detector por
Conductividad
Trmica
DIC FID
Detector por
Ionizacin en
llama
DCE ECD
Detector por
Captura de
Electrones
EM MS
Detector
Espectromtrico de
Masas
DETECTORES
Parmetros Bsicos de Desempeo
CANTIDAD MNIMA DETECTABLE: Masa de un analito que genera un pico
con altura igual a tres veces el nvel de ruido
S
E

A
L

(
E
S
)

RUIDO (N)
= 3
S
N
RUIDO: Cualquier componente de una seal generado por el detector que no
se origina de la muestra
Fuentes
de
Ruido
Contaminantes diferentes a los gases
Impurezas acumuladas en el detector
Capacidad elctrica deficiente
DETECTORES
Parmetros Bsicos de Desempeo
LMITE DE DETECCIN: Cantidad de analito que genera un pico con S/N = 3 y
w
b
= 1 unidad de tiempo
Mismo detector, diferente nvel de ruido y masa de analito, diferentes
anchuras de base:
w
b

QMD = f
Detector (seal generada, ruido)
Anchura del pico cromatogrfico
Definiendo lmite de deteccin como:
LD es independiente de la eficiencia del sistema cromatogrfico
[QMD] =
masa
(ng, pg ...)
[LD] =
masa / tiempo
(ng.s
-1
, pg.s
-1
...)
DETECTORES
Parmetros Bsicos de Desempeo
VELOCIDAD DE RESPUESTA: Tiempo de recorrido entre la entrada del
analito al detector y la generacin de la seal elctrica.
63,2% FSD
t
TIEMPO
S
E

A
L

Constante de Tiempo, t :
tiempo necesario para que
la seal llegu a 63,2 %
FSD (full scale deflection =
fondo de escala) despes
de la entrada de la muestra
Una constante de tiempo del sistema (detector +dispositivos de registro de seal)
debe ser igual o menor al 10% de la anchura a media altura (w
0.5
) del pico ms
estrecho del cromatograma
t >> w
0.5

t
R
medido >t
R
real
w medida >w real
Deformacin del pico (caudal)
Diminucin del rudo (damping)
DETECTORES
Parmetros Bsicos de Desempeo
SENSIBILIDAD: Relacin entre un incremento de rea del pico y un
incremento de masa del analito
MASA

R
E
A

Factor de Respuesta, S:
inclinacin de la recta
rea del pico x Masa del
analito
Un mismo incremento de
masa causa un mayor
incremento de rea
Sensibilidad
S
En ausencia de errores determinados:
A = rea del pico cromatogrfico
m = masa del analito
DETECTORES
Parmetros Bsicos de Desempeo
RANGO LINEAL DINMICA: Intervalo de masas dentro del cual la respuesta
del detector es lineal
MASA

R
E
A

A partir de cierto
punto la seal no
aumenta ms
linealmente
El fin de una zona de linearidad puede ser detectado cuando la razon (rea /
Masa) diverge en ms de 5 % de la inclinacin de la recta en la regin linear:
MASA

R
E
A

/


M
A
S
A

0,95 S
1,05 S
DETECTORES
Clasificacin
UNIVERSALES:
Generan seal para cualquier
substancia eluda.
SELECTIVOS:
Detectan slo substancias
con determinada propiedad
fsicoqumica.
ESPECFICOS:
Detectan substancias que poseen
determinado elemento o grupo
funcional en sus estructuras
DETECTORES
Detector por Conductividad Trmica
PRINCIPIO: Variacin en la conductividad trmica del gas cuando se eluye
un analito.
Celda de Deteccin del DCT:
1
2
3
5
4
i
1 Bloque metlico (arco)
2 Entrada de gas de arrastre
3 Salida de gas de arrastre
4 Filamento metlico (liga W-Re) calentado
5 Alimentacin de corriente elctrica para
calentamiento del filamento
La tasa de transferencia de calor entre un cuerpo caliente y un
cuerpo fro depende de la conductividad trmica del gas no del
espacio que separa los cuerpos
S la conductividad trmica de un gas disminuye, la cantidad de
calor transferido tambin disminuye- un cuerpo caliente se
enfra-.
DETECTORES
Detector por Conductividad Trmica
Configuracin tradicional del DCT: bloque metlico con cuatro celdas interligadas
en par, por donde pasa el eluyente de la columna y el gas de arrastre puro:
CELDAS DE LA MUESTRA
CELDAS DE
REFERENCIA
C
O
R
T
E

S
U
P
E
R
I
O
R

CELDAS DE LA
MUESTRA
CELDAS DE
REFERENCIA
C
O
R
T
E

L
A
T
E
R
A
L

Cuando se eluye un compuesto con conductividad trmica menor que la del gas
de arrastre puro:
Diferencia de
resistencia
elctrica entre los
filamentos de la
muestra y de
referencia
Filamentos en las
celdas de la muestra se
calientan
Resistencia elctrica de los
filamentos en las celdas de
la muestra aumenta
Filamentos en las
celdas de referencia no
se calientan
Resistencia elctrica de los
filamentos en las celdas de
referencia es constante
DETECTORES
Detector por Conductividad Trmica
Los filamentos del DCT son montados en un puente de Wheatstone que transforma la
diferencia de resistencia, cuando se eluye la muestra, en una diferencia de voltaje:
V Fuente de CC / Bateria (18 V a 36 V, tpico)
F Ajuste de la corriente en los filamentos
I Medida de la corriente en los filamentos (100 mA - 200 mA, tpico)
B
1
B
2
Balanceamiento / ajuste de cero
R
1
R
2
Filamentos de las celdas de referencia
A
1
A
2
Filamentos de las celdas de la muestra
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DCT
SELECTIVIDAD: Se observa seal para cualquier substancia eluda diferente
del gas de arrastre =UNIVERSAL
SENSIBILIDAD / LINEARIDAD: Dependiendo de la configuracin particular y
del analito: QMD = 0,4 ng a 1 ng con linearidad de 10
4
(ng - decenas de g)
INYECCIN DEL GAS DE ARRASTRE: Una seal es proporcional a la
concentracin del analito no al gas de arrastre que pasa por la celda de la
muestra.
INYECCIN DEL GAS DE ARRASTRE
CONSTANTE DURANTE UNA ELUCIN
VARIAIN DE LA INYECCIN DEL GAS DE
ARRASTRE DURANTE UNA ELUCIN
F
c
= 0
Con el DCT, el rea de los picos cromatogrficos es MUY dependiente de la
inyeccin del gas de arrastre
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DCT
NATURALEZA DEL GAS DE ARRASTRE: Cuanto mayor es la diferencia A entre una
conductividad trmica del gas de arrastre puro,
A
, y del analito,
X
, mayor es la respuesta.
CUANTO MENOR ES LA MASA MOLECULAR DEL GAS DE ARRASTRE,
MAYOR ES LA RESPUESTA
Como: (M = masa molecular)
Gas de arrastre con DCT: He o H
2

otro gas
1
2
He ou H
2

1
2
1 Usando He o H
2
como gas de arrastre, A es maximizado: MAYOR RESPUESTA
2 Con otros gases, eventualmente
X
>
A
: PICOS NEGATIVOS
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DCT
FACTORES DE RESPUESTA: Cuanto menor es la conductividad trmica del
analito, mayor es la seal.
Cantidades iguales de substancias diferentes generan picos
cromatogrficos con reas diferentes
Los factores de respuesta dependen de la
conductividad trmica del analito
Mezcla de cantidades
equimolares de:
Etano = 17,5
Cloroformo = 6,0
Etanol = 12,7
C
2
H
6

CHCl
3

C
2
H
5
OH

X

A
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DCT
TEMPERATURAS DE OPERACIN: Cuanto mayor sea la diferencia entre la
temperatura de los filamentos y del bloque metlico mayor ser la respuesta.
Temperatura del filamento, T
F
: entre 300
o
C y 350
o
C. En funcin de la
corriente de alimentacin de los filamentos, i.
i T
F
Seal
Limitaciones:
- Corrientes excesivas pueden fundir el filamento ( tpicos del
filamento =20 m)
- Disminucin del tiempo de vida til de los filamentos (oxidacin
por trazas de O
2
o del gas de arrastre)
Temperatura del bloque, T
B
: mantenida tan baja cuanto sea posible
T
B
Seal
Limitacin:
- Temperaturas excesivamente bajas pueden provocar la
condensacin de analitos en las celdas (errores analticos, daos a
los filamentos)
DETECTORES
DCT: Aplicaciones
1. Separacin y cuantificacin de compuestos que no generan seal en otros
detectores (gases nobles, gases fijos)
2. Por ser un detector no destructivo, puede ser usado en CG preparativa o
deteccin secuencial con dos detectores en tandem
Columna: CP Sil 5CB
(50 m x 0.32 mm x 5 m)
Gas de Arrastre: He a 3 ml.min
-1
T
COL
: 40C Detector: DCT
1 N
2
2 CH
4

3 CO
2
4 n-C
2

5 NH
3
6 n-C
3

7 i-C
4
8 n-C
4

Separacin de Gases Fijos e Hidrocarburos:
DETECTORES
Detector por Ionizacin en Llama
PRINCIPIO: Formacin de iones cuando un compuesto es quemado en una
llama de hidrgeno y oxigeno
Un eluyente de la columna es mezclado
con H
2
y O
2
, y quemado. Como en una
llama de H
2
+ O
2
no existen iones, no
se conduce corriente elctrica.
Cuando un compuesto orgnico eluye,
este tambin es quemado. Como
cuando se quema forma iones, la llama
pasa a conducir corriente elctrica
DETECTORES
Detector por Ionizacin en Llama
COLECTOR
FLAME TIP
BLOQUE
Aire
H
2

COLUMNA
El Aire y el H
2
difunden hacia el interior del
colector, donde se mezclan con el eluyente
de la columna y se queman:
Una diferencia de potencial elctrico es
aplicada entre el flame tip y el colector.
Cuando se forman iones en la llama, fluye
una corriente elctrica:
DETECTORES
Detector por Ionizacin en Llama
Qumica de la llama de Hidrgeno: Incandescencia
Reactiva
Quiebra
Estructura de la llama
tres regiones bsicas
Regin de quiebra: Mezcla de los gases, precalentamiento, inicio del rompimiento de las
molculas de H
2
, O
2
y de los analitos.
Zona reactiva: Reacciones exotrmicas con produccin y/o consumo de radicales H, O,
OH, HO
2
(provenientes do H
2
), CH y C
2
(proveniente del analito) e iones CHO
+
(analito).
Zona de incandescencia: Emisin de luz por decaimiento de especies excitadas: OH (luz
UV), CH

y C
2
(visble).
Quema de substancias con
uniones C-H
CH + O CHO
+
+ e
-

1 ion formado por cada ~10
5
tomos de C
quemados
Quema de H
2

Se forman apenas radicales
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DIC
SELECTIVIDAD: Selectivo para substancias que contienen uniones C-H en
su estructura qumica.
(como virtualmente todas las substancias analizables por CG son orgnicas, en la
prctica el DIF es UNIVERSAL)
Compuestos que NO producen respuesta en el DIC:
Gases nobles
H
2
, O
2
, N
2

CO, CO
2
, CS
2

CCl
4
, perhalogenados
NH
3
, N
x
O
y

SiX
4
(X = halogeno)
H
2
O
HCOOH, HCHO *
SENSIBILIDAD / LINEARIDAD: QMD tpicas =10 pg a 100 pg con linearidad
entre 10
7
y 10
8
(pg a mg)
DIF
DCT
N
2

CH
4

CO
2

O
2

DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DIC
INYECCIN DE GASES: Para el gas de arrastre, las inyecciones de
alimentacin de Aire (carburante) e H2 (combustble) deben ser optimizadas.
Grficos Seal vs Inyeccin de Gases tpicos:
S
E

A
L

150 300 450 600 15 30 45 60
Ar H
2

La seal se mantiene aproximadamente constante en una amplia gama
de inyecciones de Aire e H
2

VARIACIONES EN LAS INYECCIONES DE Aire E H
2
AFECTAN APENAS
MARGINALMENTE LA SEAL = MAYOR REPRODUCIBILIDAD Y
REPETIBILIDAD
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DIC
TEMPERATURA DE OPERACIN: El efecto de la temperatura sobre la seal
del DIF es innegable.
TRATAMIENTO DE LA SEAL: Por causa de la baja magnitud de la corriente
elctrica generada (pA a nA) esta debe ser amplificada para poder ser
registrada.
1
2
3
4
Diagrama electrnico
simplificado de un DIC
1. Flame tip / Llama / Colector
2. Bateria o Fuente de CC: Voltajes de operacin normales de 200 V
a 300 V (no variables, el valor depende de la geometra especfica del
detector).
3. Amplificador Electromtrico: Debe amplificar la seal y convertir
una corriente variable en un voltaje variablve (pA mV).
4. Salida de Registro de Seal
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DIC
FACTORES DE RESPUESTA: El factor de respuesta de un determinado
compuesto es aproximadamente proporcional al nmero de tomos de
carbono. Presencia de heteroelementos disminuye el factor de respuesta.
Nmero Efectivo de Carbonos (NEC): ~20% es el factor de respuesta de un
compuesto.
tomo X
C aliftico +1,00
C aromtico +1,00
C olefnco +0,95
C carbonlico +0,00
O alcoholprim. -0,60
Cl aliftico -0,12

(X =Contribucin de cada tomo
al NEC)
C
2
H
6
NEC = 2,00
C
2
H
5
OH NEC = 1,40
CH
3
CHO NEC = 1,00
Mezcla con cantidades
equimolares de:
DETECTORES
Detector de Nitrgeno - Fsforo
Modificacin del DIC altamente selectiva para compuestos orgnicos nitrogenados
y fosforados
Bola de cristal de sal de metal alcalino:
RbCl (normal), KCl
Selectividad: Separa fosforados o nitrogenados:
10.000 x - 100.000 x en relacin a hidrocarburos
similares
QMD = 0,4 pg a 10 pg (N) y 0,1 a 1 pg (P)
Pesticidas Triaznicos usando DNP:
1 Desetilatrazina
2 Desisopropilatrazina
3 Atraton
4 Atrazina
5 Trietazina
6 Secbumeton
7 Sebutilazina
8 Simetrin
9 Dipropretrina
10 Dimetametrina
11 Metroprotrina
(100 pg c/u)
DETECTORES
Detector por Captura de Electrones
PRINCIPIO: Supresin de un flujo de electrones lentos (terminales) causada
por la absorcin de especies electroflicas
Un flujo continuo de electrones lentos
establecido entre un ando (fuente
radioactiva | -emisora) y un ctodo.
En el pasaje de una substancia
electroflica algunos electrones son
absorbidos, resultando una supresin
de corriente elctrica.
DETECTORES
Detector por Captura de Electrones
1
2
3
4
5
1 Ando (fuente radiocativa | - emisora)
2 Salida de gases 3 Ctodo
4 Cavidad 5 Columna cromatogrfica
DETECTORES
Detector por Captura de Electrones
Mecanismo de Captura de Electrones
1 Generacin de electrones lentos por la interaccin entre la radiacin |,
molculas de gas de arrastre G y molculas de bloqueador (quencher) Q
|
-
+ G G
+
+ e
-
+ e* energia
|
-
+ G G* + Q G + e
-
+ Q energia
2 Electrones lentos son capturados por la especie electroflica AB
AB + e
-
AB
-
+ energia
Un decremento en la corriente elctrica fluyendo por la celda de
deteccin es proporcional a la concentracin a de la especie
absorbente y no al gas de arrastre
I
b
corriente de reposo
I
e
corriente no eluida del analito
K constante de captura
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DCE
FUENTE RADIOACTIVA: El ando debe estar dotado con un istopo
radioactivo | - o o- emisor
Empleado universalmente en DCE comerciales:
3
H (|
-
, 0,02 MeV)
Usado en forma de Ta
3
H
3

T
det
debe ser <225
o
C
Mayor sensibilidad
63
Ni (|
-
, 0,06 MeV)
Usado como
63
Ni
0

Mayor linearidad
til a temp ~400
o
C
85
Kr,
90
Sr,
99
Tc,
147
Pm,
241
Am,
226
Ra
Raramente
usados:
63
Ni preferido en
equipamentos
modernos
- Mayor durabilidad (t
1/2
= 100 a x 12 a
para
3
H)
- Mayor estabilidad trmica
- Menor riesgo de uso (radioactividad)
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DCE
TEMPERATURA DEL DETECTOR: Dependencia de la seal con la
temperatura de operacin, es bastante significativa
Variacin de 3
o
C en la temperatura
Error de ~ 10% en el rea de los picos
Magnitud y seal del error depende del compuesto analizado
POLARIZACIN DE LOS ELECTRODOS: Modos de polarizacin posibles
VOLTAJE PULSADO: Menos anomalas elctricas; mayor sensibilidad y
linearidad.
VOLTAJE CONSTANTE: Poco usada en la actualidad, picos
cromatogrficos pueden ser deformados.
TEMPERATURA DEL DCE DEBE SER
RIGUROSAMENTE CONTROLADA
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DCE
GAS DE ARRASTRE: Funcionamiento del DCE es muy dependiente de la
naturaleza del gas de arrastre
MS USADOS:
N
2

Ar + 5% CH
4

Generan electrones
lentos cuando son
bombardeados con |
-

Un gas debe ser lo ms puro posble
(trazas de H
2
O y O
2
comprometen la seal del DCE)
INYECCIN DEL GAS DE ARRASTRE: Seal depende directamente del flujo
de la inyeccin del gas, no del detector
Seal
F
!
Adsorcin de contaminantes
sobre los electrodos causa
deformacin en los picos
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DCE
SENSIBILIDAD / LINEARIDAD: QMD = 0,01 pg a 1 pg (organoclorados),
linearidad ~10
4
(pg a ng)
10 fg Lindano (C
6
H
6
)
-ECD HP-6890
PESTICIDAS
1 tetracloro-m-xileno
2 o - BHC
3 Lindano
4 Heptachlor
5 Endosulfan
6 Dieldrin
7 Endrin
8 DDD
9 DDT
10 Metoxychlor
10 decaclorobifenila
~250 fg cada analito
EL DCE ES EL DETECTOR PREFERENCIAL PARA ANLISIS DE TRAZAS
DE ORGANOHALOGENADOS Y SIMILARES
DETECTORES
Caractersticas Operacionales del DCE
SELECTIVIDAD / FACTORES DE RESPUESTA: Valores de S maximizados
para compuestos electroflicos
hidrocarbonados y esteres alifticos, dienos
alcoholes, cetonas y aldehdos alifticos, aminas, nitrilos, mono - Cl,
mono - F
enoles, oxalatos, mono - Br, di - Cl, hexa - F
tri - Cl, cloratos de cidos, alquil - Pb, anhdridos
mono - I, di - Br, tri - Cl, mono - nitro, CS
2

di - I, tri - Br, poli - Cl, di - nitro, 1,2 - dicetonas, fumaratos, organo - Hg
S tpicos (clorobenzeno: S = 1)
Comparando
organohalogenados:
I > Br > Cl > F
Terc > Sec > Prim
Tri > Di > Mono
o > | >
trans > cis
DETECTORES
DCE: Aplicaciones
Contaminantes en aire atmosfrico detecccin paralela DIC +DCE
DIF
DCE
1, 2, 3 - Hidrocarburos aromticos, 4, 5, 6 - Hidrocarburos clorados
ANLISIS CUALITATIVO
Mtodos de Deteccin Cualitativos
Mtodos de deteccin que proporcionan informacin cualitativa sobre los
analitos eludos:
Cromatografia Gaseosa con Detector Espectromtrico
por Absorcin en Infrarojo (CG-EIR)
Cromatografia Gaseosa con Detector Espectromtrico
de Masas (CG-EM)
Cromatografia Gaseosa con Detector Espectromtrico
por Emisin Atmica (CG-EA)
La identificacin es muy confiable cuando son combinados las
tcnicas de identificacin basadas en la retencin
ANLISIS CUALITATIVO
Espectrometria de Masas
PRINCIPIO: La muestra es fragmentada e ionizada en un patrn caracterstico
de la especie qumica.
1 Molculas de la muestra son bombardeadas por electrones (electron
impact = EI) o iones (chemical ionization = CI):
ABCDE + e
-
ABCDE
.
+
+ 2 e
-
2 El ion formado se fragmenta:
ABCDE
.
+
AB
.
+ CDE
+
ABCDE
.
+
AB
+
+ CDE
.
ABCDE
.
+
A
+
+ BCDE
.
3 Los fragmentos inicos formados son separados magnticamente de
acuerdo con sus masas moleculares y son contados:
A
B
U
N
D
A
N
C
I
A

MASA / CARGA
El grfico del nmero de iones
formados en funcin de la razn
Masa / Carga de los iones es un
ESPECTRO DE MASAS del analito
ANLISIS CUALITATIVO
Espectrmetro de Masas
1
2
3
4
1 Cmara de Ionizacin: Electrones generados por un filamento calentado
bombardean a la muestra. Los fragmentos ionizados (carga +1) son repelidos por el
electrodo positivo y conducidos a un separador magntico.
2 Salida de Vaco: Todo el interior del EM debe estar con un alto vaco (natm).
3 Separador Magntico: Una fraccin del campo magntico deja pasar apenas
iones con determinada razn Masa / Carga atravesar esta rea del equipo.
4 Detector: Una vlvula fotomultiplicadora o un fotodiodo genera una seal
elctrica proporcional al nmero de iones que inciden sobre ste.
ANLISIS CUALITATIVO
Espectro de Masas
m/Z = 118
m/Z = 80
m/Z = 79
- CO
- (CO + H)
m/Z = 90
20 40 60 80 100 120 0
m / Z
ANLISIS CUALITATIVO
Acoplamiento CG - EM
Interface cromatgrafo - espectrmetro:
CG EM
Vaco
Separador Molecular
Un gas de arrastre bajo (He)
difunde ms rpidamente que el
analito y tiende a ser drenado
por el vaco.
Cmara
de Ionizacin
Columna
Capilar
Interface Capilar Directa
Con columnas capilares de
vaco, el gas de arrastre puede
ser drenado por el sistema de
vaco.
ANALISIS CUALITATIVO
Acoplamiento CG - EM
Sistema de Control y Adquisicin de Datos:
Es OBLIGATORIO que los
sistemas CG-EM sean
totalmente controlados por un
microcomputador.
Sistema de Control y Adquisicin de Datos:
1 Dirige y monitorea el funcionamiento de los mdulos
de CG y EM.
2 Colecta y archiva espectros de masas en intervalos
regulares de tiempo y construye un cromatograma.
3 Despus de la corrida, compara los espectros
colectados con bases de datos para identificacin de los
eluatos.
COMPUTADORES RPIDOS Y CON GRAN CAPACIDAD DE
ALMACENAMIENTO DE DATOS
INSTRUMENTACIN
Inyeccin on-column de lquidos
1 2 3
1 La punta de la aguja de la microjeringa es introducida en el incio de la
columna.
2 - Muestra inyectada y vaporizada instantneamente en el incio de la
columna.
3 - Plug de vapor de la muestra, forzado por el gas de arrastre a fluir por la
columna.
ANLISIS CUALITATIVO
Retention Time Locking (RTL)
PRINCIPIO: En cromatgrafos con controles neumticos y trmicos
microprocesados, inyectores automticos y columnas cromatogrficas de
calidad excepcional, es posble lograr una alta repetibilidade en los t
R

CORRIDA #1
T
COL
(1)
F
C
(1)
Columna A
CORRIDA #2
T
COL
(2)
F
C
(2)
Columna B
El software RTL (Hewlett-Packard) automticamente ajusta las condiciones
operacionales en un segundo CG para reproducir los t
R
obtenidos en un primer
equipo
Cromatogramas obtenidos en
diferentes equipos y columnas con
condiciones operacionales de la
segunda corrida ajustadas por el
software de RTL
ANLISIS CUALITATIVO
CG-EM: Generacin del Cromatograma
Los espectros de masas completos son colectados y archivados
en intervalos regulares de tiempo
Generacin del cromatograma a partir de los espectros:
CROMATOGRAMA DE IONES TOTALES (TIC = Total Ion
Chromatogram)
Para cada espectro o nmero total de iones, detectados en un barrido de
masas, son sumados y graficados en funcin del tiempo, generando un
cromatograma.
MONITORAMIENTO DE UN ION SELECCIONADO (SIM = Single
Ion Monitoring)
Se selecciona un fragmento resultante de la fragmentacin de la especie
de interes. Se genera un cromatograma graficandose el nmero de ones
detectados con la masa de ese fragmento en funcin del tiempo.
TIC
Universal
Similar a DIC
SIM
Selectivo
Mayor Sensibilidad
ANLISIS CUALITATIVO
CG-EM: TIC vs SIM
Aroma de pulpa industrializada de caj despus de la extraccin por SPME
TIC
Aparecen los picos
correspondientes a todas las
substancias eludas
SIM (m/z = 149)
Cromatograma construdo a
partir de los mismos datos de
arriba, apenas usando
fragmentos con masa = 149
(ftalatos: plastificante)
ANLISIS CUALITATIVO
Identificacin de Eluatos
TIEMPO
C
O
N
T
A
D
O
S

MASA / CARGA
C
O
N
T
A
D
O
S

1 Seleccin manual o automtica del espectro de masas correspondiente a
un eluato.
2 Interpretacin manual del espectro y/o comparacin automtica con
biblioteca de espectros patrn del equipo.
ANLISIS CUALITATIVO
Identificacin de Eluatos
Busqueda automtica en bibliotecas de espectros: comparacin estadstica ( Probability
Based Matching )
BIBLIOTECA DE
ESPECTROS
ESPECTRO
DESCONOCIDO
PBM
Lista con posibles
candidatos + porcentaje de
confiabilidad
# NOME FRM. %
1 1-dodeceno C
12
H
24
99
2 1-dodecanol C
12
H
26
O 91
3 ciclododecano C
12
H
24
91
4 2-dodeceno C
12
H
24
66
5 1-undeceno C
11
H
22
35
6 8-metil-3-undeceno C
12
H
24
32
PBM de un eluato
desconocido (1-
dodeceno)
LIMITACIONES:
Identificacin poco confiable de espectros muy
simples
Limitada por el tamao de la base de datos
(NIST = 66.000 espectros)
Diferencias entre espectros generados por
diversos EM
ANLISIS CUALITATIVO
Emisin Atmica de Plasma
PRINCIPIO: La muestra es fragmentada en un plasma, los fragmentos son
excitados, emiten luz y retornan a sus estados fundamentales.
1 La muestra es fragmentada al chocar con molculas excitadas del gas de
soporte del plasma.
ABCD + He
m
A
+
+ B + CD + He + e
-
2 Los fragmentos son excitados electrnicamente.
A
+
+ B + CD + He
m
A
+
* + B* + CD* + He
3 Al retornar a sus estados fundamentales los fragmentos excitados emiten
luz en longitudes de onda caractersticas.
A
+
* A
+
+ hv
1

B* B + hv
2

CD* CD + hv
3

EL MONITORAMIENTO DE LA EMISION DE LAS LONGITUDES DE ONDA
CARACTERSTICAS DE CADA FRAGMENTO GENERA CROMATOGRAMAS
ELEMENTO-ESPECFICOS
ANLISIS CUALITATIVO
Generacin de Sustentacin de Plasmas
PLASMA: Gas ionizado por aplicacin de una descarga elctrica y
sustitudo por un campo elctrico oscilante
Electrones de descarga elctrica
chocan con el gas generando iones
Iones formados son acelerados por el
campo elctrico aplicado generando
continuamente ms iones y especies
excitadas
Gas de Soporte: HELIO (especies formadas con energa suficiente para
excitar tomos y fragmentos de no metales)
Sustentacin: MICROONDAS (otros tipos de campos elctricos oscilantes no
mantienen plasmas estables de He a presin atmosfrica de forma
conveniente)
ANLISIS CUALITATIVO
Espectro de Emisin Atmica
Mezcla de tipos de emisin atmica y moleculares de fragmentos del analito y
tipos de emisin de plasma e impurezas
200 nm 800 nm

n-Hexano
Fragmentos:
C
2
CN
OH NH
456 nm
566 nm

Fsforo
Bromo
Cloro
Naled (C
4
H
7
Br
2
Cl
2
O
4
P)
ANLISIS CUALITATIVO
Esquema Tpico de un CG-DEA
1 Cromatgrafo Gaseoso
2 Alimentacin de Gas de Soporte de Plasma (He)
3 Lnea de Transferencia (acoplamiento CG - DEA)
4 Cavidad Resonante (generacin de plasma)
5 Lente de Focalizacin
6 Monocromador / Policromador
7 Detector de Luz (fotomultiplicadora / diode array)
8 Amplificacin / Digitalizacin de Seal
9 Computador
ANLISIS CUALITATIVO
DEA: Generacin de Plasma
Una cavidad resonante focaliza la potencia generada por una fuente de microondas,
en el interior de una celda de deteccin de onda pasa el gas de soporte.
CELDA DE
DETECCIN
PLASMA
CABO DE
ALIMENTACIN DE
MICROONDAS
CAVIDAD
RESONANTE
He
Cavidad Resonante Beenaker TM
010
:
Permite plasmas de He estables a presin atmsferica y potencias de
microondas < 100 W
CELDA DE DETECCIN: Tubo de material aislante elctrico y altamente
refractario (cuarzo, almina)
ANLISIS CUALITATIVO
Interface CG - DEA
Plasmas de He se extinguen por el pasaje de grandes cantidades de material
(~1 L de lquido vaporizado)
Interface para columnas empaquetadas:
COLUMNA
He
CELDA
PURGA
VLVULA
DISPERSORA
Antes de ser mezclado
el He, o eluyente de la
columna, pasa por una
vlvula dispersora
Cuando se eluyen
grandes cantidades de
analito el flujo de la
columna es desvado
para la purga
Columnas capilares: no hay necesidad de dispersin.








ANLISIS CUALITATIVO
Conceptos Generales
Fuentes de Informacin Cualitativas
RETENCIN: Uso de datos de retencin de un analito para su
identificacin
DETECCIN: Detectores que conforman informacin estructural sobre
las substancias eludas
Identificacin individual de las especies
contenidas en la muestra
Determinacin de la identidad de la
muestra propiamente dicha
Aplicaciones
cualitativas de
CG
Para anlisis cualitativos confiables por CG es
recomendable la combinacin de datos provenientes de
por lo menos dos fuentes
ANLISIS CUALITATIVO
Tiempos de Retencin
t
R
= f
Interacciones analito / FE
Presin de vapor del analito
Condiciones operacionales (T
COL
, F
C
...)
Fijando las condiciones operacionales, el tiempo de retencin
ajustado de un analito es una constante
MUESTRA
PATRN
Comparacin de
cromatogramas de
una muestra y de una
solucin patrn del
analito esperado
ANLISIS CUALITATIVO
Tiempos de Retencin
Identificacin por t
R
es poco confiable:
Dependencia con F
C
y T
COL:
Variaciones en estas condiciones
afectan sensiblemente los t
R

VARIACIN DE
1% EN EL t
R

AT
COL
= 0,1%
AF
C
= 1%
Sobrecarga en la columna: Aumento excesivo en la masa de
material eludo deforma el pico cromatogrfico y altera a su t
R

M
A
S
A

Saturacin de la columna
cromatogrfica con
aumento de masa eluda
provoca caudal frontal
en el pico
ANLISIS CUALITATIVO
Tiempos de Retencin
Comparacin de t
R
usando dopagem (spiking) de la muestra con el analito
sospechoso (esperado): aumento de la confiabilidad en la identificacin.
Muestra compleja: incertidumbre
en los tR medidos puede llevar a
una identificacin errnea
Comparacin con cromatograma
de la muestra dopada permite
identificacin ms confable del
compuesto desconocido
ANLISIS CUALITATIVO
ndice de Retencin de Kvats
FUNDAMENTO: Los t
R
isotrmicos para una serie homloga de compuestos
dependen logartmicamente del nmero de tomos de carbono en la cadena.
Separacin isotrmica de una
mezcla de n-alcanos (n-C
4
, n-C
5
, ...
n-C
16
)
Un grfico de log(t
R
) en funcin del
nmero de tomos de carbono del
analito; n
C
es LINEAR
ANLISIS CUALITATIVO
ndice de Retencin de Kvats
El ndice de retencin de Kvats I para un analito es definido por:
t
R
(A): Tiempo de retencin ajustado del
analito A
t
R
(N): Tiempo de retencin ajustado del
n-alcano con N carbonos
t
R
(n): Tiempo de retencin ajustado del
n-alcano con n carbonos (n = N + 1)
Ej.: un analito con I =874 tendra un tiempo de retencin ajustado
equivalente al de un n-alcano hipottico con cadena de 8,74 tomos de
carbono
Interpolacin
logartmica de los t
R

+
N
ANLISIS CUALITATIVO
ndice de Retencin de Kvats
REPETIBILIDAD REPRODUCIBILIDAD: Los efectos de T
COL
y F
C
en los
ndices de Kvats son pequeos
ANALITO
AI/AT
CHCl
3
+0,02 %
CH
3
CH
2
OH -0,12 %
CH
3
CHO -0,05 %
CH
3
(CO)CH
3
-0,04 %
Dependencia de I para algunas
substancias en una columna
apolar no fija de T
COL
=70
o
C a
T
COl
=130
o
C
La identificacin por ndices de retencin es ms confable que
comparaciones basadas en t
R

NDICE DE RETENCIN DE KRATZ: Para programacin linear de
temperatura, la relacin entre t
R
y n
C
es linear: clculo de los ndices de
retencin es modificado
(N)
31.39
70.47
18.21
31.39
0
17.53
El cromatograma de una gasolina comercial es:
1
4
2
3
5
6
73.39 106.83

En el cromatograma se identificaron las olefinas C
4
-C
5
: (1) Isobuteno,
(2) 1-Penteno, (3) 2-Metil-1-Buteno, (4) 2-Metil-1,3-Butadieno, (5) cis-2-
Penteno, (6) Metil-1-Penteno, que estn bien resueltas de los
compuestos vecinos.