CROMATOGRAFIA

DE LIQUIDOS

CROMATOGRAFIA

La cromatografa es un procedimiento de separacin de los constituyentes de una mezcla.

FASE MOVIL

FASE ESTACIONARIA

El principio bsico se fundamenta en los equilibrios de concentracin de los compuestos presentes entre dos fases no miscibles en la que una llamada estacionaria , esta inmovilizada en una columna o fijada y la otra llamada mvil , se desplaza al contacto de la primera .

Elusin : proceso por el cual todos los componentes abandonan la columna La elusin a velocidades diferentes de los compuestos presentes por la fase mvil conduce a sus separacin

Se inmoviliza la fase estacionaria

Se coloca un pequeo volumen de muestra que hay que separar

Si los compuestos de la mezcla migran a velocidades diferentes , podran recogerse separadamente

Se fuerza a la mezcla disuelta , a travs de la fase mvil, a atravesar la fase estacionaria para arrastrar los diversos constituyentes

La separacin efectuada se conserva en un registro individual llamado cromatograma

que no es otra cosa que la expresin grafica de las variaciones de composicin de la fase eluida con el transcurso del tiempo

El cromatograma es una imagen que traduce visualmente en una pantalla o en un papel la evolucin , en funcin del tiempo, de un parmetro que depende de la concentracin instantnea del soluto a la salida de la columna.

El tiempo de elucin se lleva en el eje de las abscisas la intensidad de la seal detectada ,ala eje de las ordenadas. La lnea base corresponde al trazado obtenido en ausencia del compuesto eluido.

La separacin se completa cuando un cromatograma presenta tantos picos que vuelven a la lnea base como compuestos hay en la mezcla de anlisis.

Un constituyente se caracteriza por su tiempo de retencin tR que representa el tiempo transcurrido entre el instante de inyeccin y el determinado cuando el pico correspondiente en el cromatograma alcanza su mximo. Un constituyente no retenido sale de la columna en el tiempo tM llamad tiempo muerto

La cromatografa analtica se utiliza en el anlisis cuantitativo. Con esta finalidad hay que poder medir con precisin las reas de los picos , es decir , separaR bien las especies a determinar.

La resolucin y el tiempo de elucin son dos variables dependientes importantes que se tienen que considerara. El objetivo es lograra una separacin suficiente del los compuestos de inters en un mnimo de tiempo.

Un pico de elucin ideal en un cromatograma tienen el mismo aspecto que la funcin representativa de la ley de distribuciones normal de los errores aleatorios ( curvas de gauss)

Los cromatograma reales estn lejos muchas veces de representar picos de aspecto gaussiano Hay varias razones de esto : Se produce una irregularidad en la concentracin en la zona de deposito de la sustancia que se encuentra en la cabeza de la columna La velocidad de la fase mvil es nula en las paredes de la columna y mxima en el centro de esta ,. La simetra observada en un pico se traduce por dos parmetros denominados factores de asimetra y factor de cola