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Neisseria gonorrhoeae Treponema pallidum Chlamydia trachomatis Haemophilus ducreyi Calymmatobacterium granulomatis Ureaplasma ureayticum Micoplasma hominis Micoplasma genitalium Gardnerella vaginalis Salmonella Shiguella Campylobacter Estreptococo grupo B Mobilumcus
PROTOZOOS Trichomonas vaginalis Entamoeba histolytica Giardia lambia Otros VIRUS VIH Herpes simple Papiloma humano Hepatitis tipo A, B, C y D Citomegalovirus Epstein Barr Molluscus contagioso Enterovirus ECTOPARASITOS Phtirus pubis Sarcoptes scabiei
HERPES VIRUS
Enfermedad causada por el VHS-2 y el VHS-1 Causa ms frecuente de lceras genitales Infeccin de por vida Presencia de Ac. Especficos
Infeccin actual Potencial para recidiva
Criterio Diagnstico Clnico: presencia de vesculas Hallazgo Virolgico: ante sospechas (cultivo, PCR) Anticuerpos Especficos VHS-2 confirma infecciones pasadas
Lesiones vesiculares
CHLAMYDIASIS
Bacteria intracelular Cultivos celulares para aislamiento. Transmisin: Exclusivamente sexual y perinatal. Sntomas principales
Hombres: secrecin uretral escasa y disuria Mujeres: secrecin vaginal, disuria, sangrado poscoital o intermenstrual. Otros como salpingitis, uretritis, vaginitis, epididimitis y conjuntivitis.
CHLAMYDIA
Cultivo: Celular (Clulas de McCoy). Identificacin del Organismo:
Sondas de ampliacin de ADN: (PCR) o Ampliacin medida por transcripcin (AMT) Detectan 90 a 95% de infecciones (orina y secreciones).
Reconocen los anticuerpos especficos producidos por el sistema inmune como respuesta a la infeccin
Mtodos Indirectos
Se dividen en:
Pruebas de Screening
Diseadas con mxima sensibilidad
Mtodos Indirectos
Pruebas de Screening o tamizaje Las tcnicas inmunoenzimaticas (EIA) metodologa simple alta sensibilidad nivel de automatizacin realizar gran numero de pruebas
Mtodos Indirectos
Pruebas de Screening o tamizaje Pruebas de ELISA Pruebas Rpidas
Mtodos Indirectos
Clasificacin de pruebas de ELISA
Tipo de EIA
1ra Generacin
2da Generacin Protenas recombinantes y peptidos sintticos de VIH-1 y VIH-2 3ra Generacin Pptidos/protenas recombinantes de VIH-1 y VIH-2 y antgeno VIH-1 del grupo O (outlayer o marginal) (IgG, IgM y IgA). Pptidos recombinantes/sintticos de VIH-1 y VIH-2 y VIH-1 "O", y anticuerpos para detectar el antgeno p24
4ta Generacin
Mtodos Indirectos
Pruebas Rpidas Resultados en menos de 30 minutos Usadas: parto, transplante, accidentes Simples de ejecucin No requieren de instrumentos complejos Fcil almacenamiento
Mtodos Indirectos
Pruebas Rpidas Tecnicas Dot blot Tecnicas inmuno-cromatogrficas
Mtodos Indirectos
Pruebas de Confirmacin Western Blot Inmuno-fluorescencia Indirecta
Mtodos Indirectos
Pruebas de Western Blot Mtodo recomendado Discrimina aparicin de bandas que reaccionan a antgenos vricos especficos
Mtodos Directos
Basados en la deteccin de Virus o alguno de sus componentes.
Cultivo Vrico Determinacin de Antgeno p24
(tcnicas moleculares)
Mtodos Directos
a) Cultivo Celular
Cocultivo de clulas mononucleares de sangre perifrica del paciente y otras procedentes de donantes. Criterio de positividad: Demostracin de efecto citoptico Deteccin de productos vricos Ag-p24 Deteccin de transcriptasa reversa.
Mtodos Directos
a) Cultivo Celular
Tcnica ms especfica para diagnstico Para estudios de variabilidad gentica Epidemiologa molecular Patognesis vrica
Resistencia a frmacos
Mtodos Directos
b) Antigenemia de p24
Su deteccin mediante reaccin EIA Marcador de infeccin aguda Su deteccin es variable (anti-p24 neutralizantes) til en tamizaje de donantes
Mtodos Directos
c) Tcnicas Moleculares
Utilidad para el diagnstico
Hipogammaglobulinemia
Infeccin perinatal Infeccin silente
Mtodos Directos
c) Tcnicas Moleculares
Tipos
Reaccin de Cadena de Polimerasa (PCR)
ADN ramificado (bDNA) Amplificacin basada en la trascripcin AMT
Mtodos Directos
c) Tcnicas Moleculares
Reaccin de Cadena de Polimerasa (PCR)
Mtodo de eleccin para diagnstico molecular
Detecta ADN provrico de clulas del paciente Realiza retro-transcripcin a partir de RNA vrico
Mtodos Directos
c) Tcnicas Moleculares
Reaccin de Cadena de Polimerasa (PCR) Usos diagnsticos
Diagnstico de VIH en Recin Nacidos hijo de
madre seropositiva Pacientes con patrones serolgicos atpicos Usos en Bancos de Sangre (AMT: detecta 100 copias/ml, periodo de ventana 7 das).
Periodo de Ventana
ELISA 3ra Generacin: 20,3 das (8 a 32,5) ELISA 4ta Generacin: 2 a 5 das 50% detectables: 45% detectables: 5% detectables:
o conj de ellos tiene la suficiente sensibilidad) Utilidad del Diagnostico precoz El TARGA de inicio antes de seroconversin evita la prdida de inmunidad celular anti-VIH Previene el riesgo de transmisin a otras personas
Criterios de positividad de la prueba western-blot Criterio OMS Cruz Roja Americana FDAa CRSSa CDC/ASTPHLDa Reactividad frente a: Dos glucoprotenas cualquiera de: gp160, gp120, gp41 Una protena de cada gen estructural (env, pol y gag) p24 + p32 + (gp41 o gp120 o gp160) p24 + (gp41 o gp120 o gp160) o p32 + (gp41 o gp120 o gp160) p24 + (gp41 o gp120 o gp160) o gp41 + (gp120 o gp160)
Recomendaciones de ONUSIDA y de la OMS sobre estrategias de deteccin de la infeccin por el VIH en funcin de los objetivos del examen de la prevalencia de la infeccin en la poblacin examinada
Objetivo del examen
Seguridad de transfusiones donaciones y transplantes Vigilancia Prevalencia de la infeccin
Cualquiera que sea
Estrategia
I I II I II
> 10 % < 10 %
Diagnstico
> 30 % < 30 %
Ausencia de sntomas
> 10 %
< 10 %
II
III
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
Negativo
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
(1ra muestra)
SEGUNDO ELISA
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
(1ra muestra)
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
(1ra muestra)
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
(1ra muestra)
CONFIRMACIN
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
TAMIZAJE: (ELISA, Rpido) Positivo Positivo SEGUNDO ELISA Negativo PRUEBA DUDOSA REACTIVO
(1ra muestra)
CONFIRMACIN
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
TAMIZAJE: (ELISA, Rpido) Positivo Positivo SEGUNDO ELISA Negativo PRUEBA DUDOSA REACTIVO
(1ra muestra)
CONFIRMACIN
NEGATIVO NEGATIVO
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
TAMIZAJE: (ELISA, Rpido) Positivo Positivo SEGUNDO ELISA Negativo PRUEBA DUDOSA REACTIVO
(1ra muestra)
CONFIRMACIN
NO REACTIVO
NEGATIVO NEGATIVO
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
TAMIZAJE: (ELISA, Rpido) Positivo Positivo SEGUNDO ELISA Negativo PRUEBA DUDOSA REACTIVO
(1ra muestra)
CONFIRMACIN
NO REACTIVO
NEGATIVO NEGATIVO
POSITIVO POSITIVO
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
TAMIZAJE: (ELISA, Rpido) Positivo Positivo SEGUNDO ELISA Negativo PRUEBA DUDOSA REACTIVO
(1ra muestra)
CONFIRMACIN
NO REACTIVO
NEGATIVO NEGATIVO
POSITIVO POSITIVO
REACTIVO
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
TAMIZAJE: (ELISA, Rpido) Positivo Positivo SEGUNDO ELISA Negativo PRUEBA DUDOSA REACTIVO
(1ra muestra)
CONFIRMACIN
NO REACTIVO
NEGATIVO NEGATIVO
POSITIVO POSITIVO
REACTIVO
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
TAMIZAJE: (ELISA, Rpido) Positivo Positivo SEGUNDO ELISA Negativo PRUEBA DUDOSA REACTIVO
(1ra muestra)
CONFIRMACIN
NO REACTIVO
NEGATIVO NEGATIVO
POSITIVO NEGATIVO
POSITIVO POSITIVO
REACTIVO
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
TAMIZAJE: (ELISA, Rpido) Positivo Positivo SEGUNDO ELISA Negativo PRUEBA DUDOSA REACTIVO
(1ra muestra)
CONFIRMACIN
NO REACTIVO
NEGATIVO NEGATIVO
POSITIVO NEGATIVO
POSITIVO POSITIVO
REACTIVO
MUESTRA DE SANGRE
MUESTRA DE SANGRE
(1ra muestra)
NO REACTIVO
Negativo
TAMIZAJE: (ELISA, Rpido) Positivo Positivo SEGUNDO ELISA Negativo PRUEBA DUDOSA REACTIVO
(1ra muestra)
CONFIRMACIN
NO REACTIVO
NEGATIVO NEGATIVO
POSITIVO NEGATIVO
POSITIVO POSITIVO
REACTIVO
MUESTRA DE SANGRE
SIFILIS
Sifilis
Es una enfermedad infecciosa aguda o crnica de manifestaciones clnicas diversas
Etiologa: Treponema pallidum,
Es un microorganismo mvil que, se encuentra en el lmite de resolucin ptica de los microscopios convencionales
Epidemiologa
Transmisin: Sexual: primaria, secundaria y latente temprana Transplacentaria: en el embarazo
Nosocomial: transfusiones
Periodo de Incubacin
En un tiempo de 10 das a 3 meses
Manifestaciones clnicas
Sfilis Primaria: Chancro
Ulcera, nica indolora, indurada, de fondo limpio, generalmente en genitales Adenopata regional
Manifestaciones clnicas
Sfilis Secundaria:
Manifestaciones proteicas mediada por inmuno-complejos Presentacin habitual erupcin cutnea Ppulo escamosa generalizada sin prurito en plantas y palmas Placas mucosas, condilomas planos Linfoadenopata
Manifestaciones clnicas
Sfilis Terciaria:
Lesiones Viscerales tales como: Gomas, Neurosfilis, Cardiosfilis.
Chanco Duro
Sfilis Secundaria
Manifestaciones clnicas
Sfilis Latente: infeccin asintomtica Detectable slo en el anlisis serolgico
Sfilis Latente Temprana: menor 1 ao
Pruebas No Treponemicas
VDRL
RPR
4 minutos
0 DIL: se presentan en el suero sin diluir y 1 DIL cuando es visible hasta la dilucin 1:2)
Nomenclatura de resultados
Antgeno del VDRL, Contiene adems partculas de Carbn, Cloruro de Colina y Acido Etildiamino Tetra Actico (EDTA)
microlitros El volmen del Antgeno es 17 microlitros La rotacin standard es de 100 r.p.m. por 8 minutos
1 DIL: se presenta en el suero sin diluir y 2 DIL visible hasta la dilucin 1:2
Resultados de RPR
Sfilis
Sensibilidad y Especificidad de las pruebas serolgicas de Sfilis Sensibilidad (%)
Fases de la infeccin Sifiltica
Prueba
Especificidad
%
1ria
FTA-Abs MHA-TP RPR VDRL
93
(93-100)
2ria
100 100 100 100
Latente Temprana
Latente Tarda
100 100
80
(53-100)
96
94 73
(36-96)
99 99 98 98
82
(69-90)
86
(81-100)
80
(74-87)
80
(71-100)
71
(71-100)
REACCIONES INESPECIFICAS
Enfermedades Infecciosas Enfermeades Bacterianas: Lepra, Pian, Pinta,
Leptospirosis TBC miliar, Neumona neumoccica, Endocarditis bacteriana, Escarlatina. Paludismo y Tripanosomiasis Tifus exantemtico Sarampin, Varicela, Hepatitis, Mononucleosis infecciosa
REACCIONES INESPECIFICAS
Enfermedades No Infecciosas Enfermedades del Colgeno: LES Mielopatas (especialmente Mieloma Mltiple) Gammapatas, Drogadiccin, Dislipidemias intensas (por turbidez del suero)
Pruebas Treponmicas
Utilidad para diagnstico y confirmacin
FTA Abs TPHA
FTA -Abs
Pruebas Treponmicas-PT
Nelson y Mayer (1949) desarrollaron la
primera prueba treponmica: TPI prueba de inmobilizacin del treponema. Prueba cara, complicada, consumidora de tiempo 1957 desarrollo de la prueba de anticuerpos fluorescentes contra el Tp FTA, pero el 25% de reactivos eran no especficos
Pruebas Treponmicas-PT
FTA-200 usaba una dilucin 1 : 200 del
suero. Altamente especfico pero no muy sensible FTA-Abs: usa la espiroqueta Reiter para remover Ags comunes. Mas especfica y ms sensible FTA-Abs de doble tincin usa microscopio de luz incidente y es la prueba gold standard
Pruebas Treponmicas-PT
Rathlev (1965) report la tcnica de
PLACA DE TPHA
Otras Pruebas:
ELISA IgM : basado en la captura del
Ac IgM. Util en la Sfilis neonatal ELISA IgG Western Blot: gran valor en S, congnita. Alta sensibilidad y especificidad
con campo oscuro positivo, son no reactivos En la S.secundaria los ttulos suelen ser > 1 : 16 Pacientes con lesiones tpicas t ttulos < 1 : 16 debe repetirse la prueba y/o confirmarse PNT reactiva y PT positiva en ausencia de historia y hallazgos clnicos se clasifican como S. latente