Metabolismul proteinelor 1

Proteinele

reprezint substane nutritive deosebit de importante, ca singura surs de azot asimilabil de ctre organism i furnizatoare de aminoacizi eseniali. Numai o alimentaie diversificat asigura aportul n aminoacizii necesari. Alimentele de originea animal sunt bogate n proteine: n preparatele din carne procentul este ridicat (20%).

 Oule

conin aproximativ 13% proteine, dar sunt bogate n colesterol (glbenu). Este mult mai redus procentul de protein n alimentele de origine vegetal: leguminoase, pine, cereale. Legtura proteinelor cu constituenii lor aminoacizii este indisolubil n toate procesele vitale. Proteinele din organismele vii permanent regenereaz.

 Pentru

meninerea constant a proporiei lor, viteza de sintez i de degradare a proteinelor trebuie egalat, ceea ce constituie o stare dinamic stabil. Viteza de rennoire se exprim prin perioada de njumtire. La obolani proteinele musculare au o perioad de njumtire egal cu 30 zile, cele hepatice 5-6 zile, enzimele ore sau minute.

din esuturile i fluidele organismului sunt utilizate ntr-o msur foarte mic pentru producerea de energie. n inaniie, dup epuizarea rezervelor de glucide i lipide, are loc degradarea lor cu utilizarea catenelor hidrocarbonate ale aminoacizilor, ce asigur durata supravieuirii. Excesul de proteine alimentare servete direct sau indirect (biosinteza lipidelor, glucidelor) n scop energetic. Organismele vii nu sunt capabile s depoziteze proteine pentru cerine strict energetice.
Proteinele

Echilibrul Azotat
Asigurarea

sintezei de proteine necesit prezena n cantiti suficiente a celor 20 de aminoacizi. Lipsa unui aminoacid esenial stopeaz sinteza proteinelor, catabolismul aminoacizilor neutilizai, sporete pierderea azotului cu urina i micoreaz creterea. Echilibrul azotat negativ exist cnd cantitatea de azot pierdut de organism depete cantitatea consumat.

 Aceast

afirmaie continu pn cnd deficiena aminoacidului esenial este corectat. Echilibrul azotat negativ, de asemenea, poate aprea n sindroame de malabsorbie, febr, traum, cancer i producerea excesiv a hormonilor catabolici (hipercortizolism). Cnd azotul consumat n regimul alimentar egaleaz pierderilor de azot, organismul se afl n echilibru azotat (adulii normali). Cnd consumul azotului depete pierderile de azot avem un echilibru azotat pozitiv (creterea activ i reparaia tisular, sarcina, recovalescena).

Calitatea i cantitatea proteinelor n alimentaie

din alimentaie furnizeaz azot organic i aminoacizii eseniali. Pentru aprecierea cantitativ a necesitilor proteice trebuie de luat n consideraie calitatea proteinei, ca determinat de compoziia aminoacizilor eseniali n cantiti corespunztoare. Dac concentraia unui aminoacid este mai mare sau mai mic dect a altora, utilizarea celor din urm ar trebui s fie deprimat i va fi reflectat n creterea insuficient.
Proteinele

 Proteinele

din cereale sunt lipsite de lizin, nu suport creterea optimal. Cu toate acestea, selecia genetic i programele de nmulire au produs urmai de cereale cu un coninut mai nalt de lizin. Proteinele de origine animalier carne, ou, lapte, cacaval, carne de pasre i pete sunt de calitate bun din momentul cnd furnizeaz toi aminoacizii eseniali.

 Gelatina,

protein derivat din colagen, e lipsit de triptofan. n general, proteinele vegetale sunt srace n calitate din cauza c sunt lipsite de unul sau altul aminoacizi eseniali. Cea mai bun calitate a proteinelor vegetale a fost gsit n legume i nuci. Astfel o diet pur vegetarian necesit o planificare atent pentru a obine o combinaie de proteine care furnizeaz cantiti necesare a tuturor aminoacizilor eseniali.

 Combinaiile de

proteine vegetale complementare include orez i alune, gru ntreg sau gru uscat mcinat (bulgar), boabe de soie i smn de susan. La persoanele cu o diet vegetarian pur poate aprea deficiena de vitamina B12. Cu toate c proteinele vegetale utilizate de unele singure nu aprovizioneaz toi aminoacizii eseniali, componena lor n diet furnizeaz aminoacizi neeseniali care, n caz contrar, va trebui s fie sintetizai la cheltuielile de azot a aminoacizilor eseniali.

 Aprecierile

rezultate ale necesitilor proteice zilnice sunt pentru aduli - 0.8 g/kg; nou-nscui 2.2 g/kg; copii mici (0,5-1 an) - 2 g/kg. n timpul sarcinii i lactaiei este recomandat un consumul proteic suplimentar peste nivelul normal. Dac consumul de carbohidrai i lipide este insuficient pentru necesitile energetice, proteinele din regimului alimentar sunt utilizate pentru prentmpinarea deficitului energetic i va rezulta n echilibrul azotat negativ.

Malnutriia energiei proteice

Dou

dereglri ale nutriiei energiei proteice care sunt larg rspndite ntre copii n spaii economic deprimate sunt kwashiorkor i marasmus. Kwashiorkor este determinat de consumul inadecvat de protein de calitate bun i a dietei ce const n primul rnd din produse alimentare bogate n amidon (rdcini de igmana, cartofi, banane, porumb, manioca) i lipsite de ali nutrieni eseniali.

 Victimele

au greutate i funcia inimii i a rinichilor dereglat; volumul sangvin, hematocritul i concentraia albuminelor serice este micorat; Se observ atrofia pancreasului i intestinelor; micorarea rezistenei imunologice; vindecarea ncetinit a rnilor i reglarea anormal a temperaturii. Semnele clinice caracteristice includ edeme, ascit, insuficiena creterii, apatie, schimbarea pigmentaiei i ulcerarea, pierderea prului, mrirea ficatului, anorexie i diaree.

rezult n urma deficienei proteice i consumului de energie, ca i n foamete. Se observ atrofia generalizat a muchilor i a esuturilor subcutanate, slbire, pierderea esutului adipos. Edema apare n kwashiorkor, dar nu n marasmus; cu toate acestea, deosebirea dintre aceste dou dereglri nu este totdeauna clar. Tratamentul la marasmus necesit suplimentar proteine i surs de energie.
Marasmus

 Indivizii sufer

de nutriie inadecvat datorit bolii sau depresiunii nervoase i sunt sensibili la infecii. Pacienii manifest vindecarea ntrziat a rnii cu durata sporit a internrii n spital. Astfel, malnutriia poate cauza morbiditate, mortalitate i are consecine economice grave. Trauma, arsura sau septicemia, pot, de asemenea, precipita malnutriia graie hipermetabolismului cauzat de sistemul neuroendocrin.

 Diagnosticul fix

i interveniile nutriionale corespunztoare este necesar n administrarea pacienilor. Nivelele proteinelor serice (albumina, transferina) i proteina fixatoare de retinol, sunt utilizate ca parametri biochimici n diagnosticul malnutriiei. Transferina este un indicator senzitiv al deficienei proteice i este efectiv n evaluarea nsntoirii.

Digestia proteinelor alimentare

Absorbia

aminoacizilor are loc numai dup degradarea hidrolitic a proteidelor, datorit aciunii combinate a enzimelor proteolitice din sucurile gastric, pancreatic i intestinal. Cantitatea aminoacizilor liberi n alimentele naturale e minor. Dei toate enzimele catalizeaz hidroliza legturilor peptidice, ele difer specific.

 Se

disting exopeptidaze i endopeptidaze (ce scindeaz legturile peptidice, formate de aminoacizi la extremitile i n interiorul lanului). Majoritatea enzimelor sunt secretate n forme inactive (proenzime, zimogeni) i sunt active doar ntr-un anumit segment. Anume astfel se produce protejarea celulelor reproductive i a canalelor prin care acestea sunt secretate.

 Activarea

lor are loc prin detaarea unor oligopeptide, cu formarea centrului activ. Digestia n stomac. Enzimele proteolitice digestive principale secretate de celulele stomacului sunt: pepsina, gastrixina, renina. Pepsina este sintetizat i secretat de ctre celulele principale ale mucoasei gastrice n forma sa inactiv pepsinogenul. n mediul acid al sucului gastric, pepsinogenul este activat att prin proteoliza limitat, ct i autocatalitic, de ctre pepsin.

O poriune a tractului digestiv uman

calitate de substrat pentru pepsin servesc proteinele native alimentare sau denaturate la fierbere. Endopeptidaza-pepsina, atac specific legturile peptidice la care particip, prin grupele aminice, aminoacizii aromatici. n msur mai mic sunt disponibile pentru atare proces metionina, leucina i acizii dicarboxilici. Se consider c pepsina produce un efect pronunat asupra proteinelor denaturate, ce conin grupe SH libere.

 Durata

limitat de stare a bolului alimentar n stomac duce la formarea amestecului de polipeptide. Gastrixina (pepsina C) i renina (chimozina) sunt enzime aflate n sucul gastric al sugarilor. Secvena aminoacidic le confer o omologie perfect i activeaz la un pH egal cu 3. Renina, n prezena Ca2+, transform cazeina laptelui n paracazein, hidrolizat apoi de pepsin.

 Celulele

secundare secreteaz soluiile 0,16 M HCl i 0,007 M KCl cu resturi de ali electrolii. Totodat, se mai secret i factorul intern. Concentraia H+ n stomac e de 106 mai mare dect n plasm. Micorarea aciditii gastrice influeneaz considerabil degradarea proteinelor (se observ la achilie, anemia pernicioas).

 Cea

mai simpl ipotez presupune c mecanismul de secreie este analog cu transportul protonilor, dependent de ATP n cadrul funcionrii ATP-azei din membrana intern mitocondrial. n ultimii ani s-a conturat rolul H+, K+ATP-azei n reglarea secreiei HCl n mucoasa gastric. E component din familia enzimelor, ATP-aza membranelor plasmatice, de rnd cu H+, K+ ATP-aza, Ca+ATP-aza.

Modelul H+,K+ ATP-azei

ATP

Membrana apical
K+

H+

H+,K+-ATP-aza

ADP + Pi K+-canal K+ H2O + CO2 H2CO3 H2CO3 H+ + HCO3

Cl--canal

Cl-

Cl-

Membrana bazolateral
HCO3-

Sistemele de transport n celula parietal ce determin secreia HCl

Mecanismul ce determin activarea secreiei HCl

n

celulele nesecretoare parietale H+, K+ATP-aza este neactiv i-i concentrat n vezicule, n citozol, n apropierea suprafeei apicale membranare. Activarea secreiei e nsoit de trecerea acestor vezicule spre suprafaa apical i contopirea cu membrana. Un rol activ i aparine citoscheletului acestor celule.

 Proteinele

i schimb poziia. n celula activ, F-actina se depisteaz n apropierea suprafeei apicale membranare i n canalele intracelulare, iar miozina i proteinele filamentoase prsesc aceste locuri. n proces particip i proteinele fixatoare de GTP, ce sunt depistate n celulele parietale. Una din aceste proteine (masa molecular 23 kDa), numit Rab-2, i modific localizarea la activarea secreiei, n acelai mod ca i H+, K+ ATP-aza, ce confirm participarea ei n procesul contopirii veziculelor.

 Secreia

HCl de celule este activat de histamin, gastrin, acetilcholin. Toate au receptori respectivi H2 (histamina) i M cu toate subtipurile (3) pentru acetilcholin. Receptorul pentru gastrin se refer la tipul B ca i la colecistokinin. Consecutivitatea proceselor e puin studiat. Gastrinele sintetizate i secretate de partea piloric a stomacului, sunt perfect studiate, deosebit de active fiind formele sulfat ale gastrinelor.

 Gastrinele

poteniaz efectul histaminei. Ultima e fixat de H2 receptori, mrind nivelul AMPc celular; n consecin, se majoreaz Ca2+ intracelular, trecnd n celul prin membrana plasmatic. Celulele int pentru proteinkinazele AMPc dependente conin proteine membranare i citozolice. Una din ele este Cl-canalul, ce n final limitez secreia HCl.

 La

activarea cu histamin are loc translocarea unor proteine din citozol n membran, care interacioneaz cu H+, K+- ATP-aza, trasmind informaia la proteinele int. Incontestabil c inhibitorii carbanhidrazei (E), de altfel ca i cianidele, iodacetatul, dinitrofenolul, anihileaz secreia. ntre pereii mucoasei membranare exist o disproporie de potenial. Hormonii sunt reglatori intracelulari cu efect receptoric.

 Gastrinele

amplific concentraia Ca2+ intracelular, pe cnd acetilcholina induce eliberarea Ca2+ i din exteriorul celulei. Se atest drept efectiv metoda de investigare vizavi de eventuala secreie a acidului clorhidric prin aplicarea probei cu histamin, care acioneaz conform mecanismului redat anterior.

Gastrina (inducie)
Histidin decarboxilaza (in) Histidin decarboxilaza (a)
His Histamina

Adenilatciclaza (a) FDE

ATP Proteinkinaza (in) Carbanhidraza (in) AMPc AMP

Adenilatciclaza (in)

Proteinkinaza (a)
Carbanhidraza (a, fosforilat)

Sinteza HCl Schema influenei gastrinei asupra sintezei HCl

Digestia n intestin
n intestin este asigurat de sucul pancreatic ce conine endo- i exopeptidaze n forme active. Tripsinogenul este convertit n tripsin prin detaarea de la captul N-terminal al unui hexapeptid. Procesul e influenat de enterokinaza intestinal, ct i de autocataliz (efectul enterokinazei de 2000 de ori mai pronunat).
Proteoliza

hidrolizez legturile peptidice, cu participarea grupelor carboxil ale aminoacizilor arginina i lizina. Chimotripsina se secreteaz n forma neactiv chimotripsinogenul, drept activatori servind tripsina i autocataliticul, ce detaeaz dou peptide de la lanul compus din 245 aminoacizi, cu instituirea unei conformaii active ce posed legturi disulfidice ncruciate.
Tripsina

 Enzima

are o specificitate mai ampl, hidrolizez legturile peptidice formate de grupa COOH, a Phe, Tyr, Trp. De altfel, scindeaz i amidele, esterii, derivaii acil. Elastaza se obine din proelastaz, catalizeaz ruperea legturilor formate de aminoacizi hidrofobi relativ mici glicina, alanina, serina, e activat de tripsin. Carboxipeptidaza A este o enzim ce conine Zn, scindeaz aminoacizii aromatici mai intensiv, ncepnd de la captul C-terminal, dect cei alifatici.

 Atunci

cnd ionul de Zn se modific la Ca, se declaneaz activitatea esterazic. Carboxipeptidaza B acioneaz asupra peptidelor, avnd la captul C-terminal resturi de Arg i Lys. Definitivarea hidrolizei se soldez prin implicarea enzimelor intestinale (din intestinul subire). Prioritar funcionez intracelular dup deplasarea n enterocite sau n procesul traversrii celulelor epiteliale.

 leucin aminopeptidaza conine Zn, pe care o poate activa Mn; posed o specificitate N-terminal a peptidelor. Alanin aminopeptidaza e specific la captul Nterminal al alaninei. Dipeptidazele glicil-glicin dipeptidaz. Prolinaza scindeaz legturile peptidice, cu participarea grupei COOH a prolinei. Prolidaza cu participarea grupei NH a prolinei.
Aminopeptidazele

Digestia i absorbia proteinelor

 Se

observ, c o hidroliz efectiv poate avea loc i la rezecia stomacului, pe cnd insuficiena pancreasului are consecine mai grave pentru organismul uman. pH-ul sucului pancreatic (7,8 8,3) e izotonic cu plasma: concentraia de HCO3 depete de 3 ori concentraia similar din plasm. Secretina stimuleaz eliminarea unui suc pancreatic srac n enzime, prin intermediul AMPc.

 Colecistokinina, eliminarea

unui suc bogat n enzime, stimulez contracia vezicii biliare. Secreia colecistokininei duodenale e stimulat de lipidele i polipeptidele din intestin. Gastrinele sunt stimulatori ai secreiei de insulin.

Polipeptide Oligopeptide Aminoacizi

Mecanismele de reglare ale proteazelor

Celulele paracrine intestinale
Colecistokinaza Pancreozimina

Colecistokinaza Secretina
Pancreozimina

Celulele pancreatice
Enterokinaza

Mucoase intestinale ale enterocitelor

Aminopeptidaze Dipeptidaze

Tripsinogenul

Tripsina

Chimotripsinogenul
Proelastaza Procarboxipeptidaza

Chimotripsina
Elastaza Carboxipeptidaza

Scindeaz proteinele pn la aminoacizi liberi

Absorbia aminoacizilor
Are

loc la nivelul intestinului subire, fiind un proces activ cu solicitri de energie, analog cu transportul glucozei i dependent de Na+. Sngele portal i transport n ficat, unde ia parte la sinteza proteinelor proprii i serice. Restul aminoacizilor din fond este distribuit cu sngele celorlalte esuturi. Absorbia aminoacizilor prin difuzie este limitat.

 Transportul este

mediat de proteine specializate

translocaze. Exist cteva translocaze de grup ce transport aminoacizii cu o structur analoag: aminoacizi neutri cu molecule mici; aminoacizi neutri cu molecule mari; aminoacizi bazici; aminoacizi cu caracter acid; prolina.

Modelul heterodimeric al transportatorului aminoacizilor

 Translocazele n

multe privine seamn cu enzimele: posed fenomenul de saturare cu substrat, sunt sensibile la aciunea unor inhibitori. Aminoacizii din grupe concureaz pentru locusurile de fixare n translocaze absorbia leucinei diminueaz absorbia izoleucinei i valinei. Lizina inhib absorbia argininei.

 Dup

alimentare, concentraia maxim de aminoacizi n snge ajunge la 60 min. crete intensiv abundena azotului peptid n snge. Deseori proteinele native prin mucoasa intestinal trec n snge. Nou-nscuii conin n snge anticorpii colastrei laptelui, fapt cauzat de o protein inhibitor puternic al tripsinei, favorizat de concentraia mic a enzimelor proteolitice n intestinul copiilor, ce n final determin absorbia unor cantiti mici de proteine.

deci sunt suficiente pentru sensibilizarea organismului cauza idiosincraziei la proteinele alimentare (ou, lapte). Vag rmne transportul peptidelor n snge la holer, botulism, difterie etc. Transportul aminoacizilor n celule este asigurat de funcionarea ciclului -glutamilic activ n intestin, creier, rinichi, glandele salivare. n ciclu particip tripeptidul - glutation (-glutamilcisteinilglicina) propriu tuturor celulelor.

 Rolul-cheie l

joac enzima membranar -glutamiltransferaza care iniiaz cataliza. n calitate de donator al grupei -glutamil poate servi oricare alt -glutamil peptid. Toi aminoacizii pot servi ca acceptori, cu excepia prolinei. La transportul aminoacizilor, din exterior n interiorul celulei se utilizeaz energia hidrolizei legturilor peptidice ale glutationului, care apoi regenereaz ntr-o secven de reacii consecutive.

Mecanismul de transfer al aminoacizilor n celul

R CONH (CH2)2 CH COOH NH2 H2N CH2SH CH CH COOH

CH NH2

COOH

Membrana

-glutamil transferaza
CH2SH CONH (CH2)2 CONH CH2 CH COOH NH2 CH CONH CH2

HOOC

-glutamil aminoacid -glutamilciclotransferaza

Cistinilglicina
HOOC

Peptidaza
R CH NH2 COOH NH2CH2COOH CH2SH CH COOH NH2

Glutation

ADP + Pi Glutation sintetaza

ATP

Aminoacid intracelular
COOH NH O

Glicina
CH2SH CONH CH CH2 COOH NH2

Cisteina
(CH2)2 CH

5-oxiprolina Acid glutamic 5-oxiprolinaza COOH

(CH2)2 CH NH2

-glutamilcisteina

COOH

ATP + H2O

-glutamilcisteinsintetaza

ADP + Pi

COOH

ATP

ADP + Pi

Ciclul -glutamil pentru transportul aminoacizilor

 Aadar

pentru transportul aminoacizilor n celul e utilizat energia a trei legturi macroergice de ATP. Transportul intracelular al aminoacizilor este asigurat i de transportatori membranari specifici, funcia crora este reglat de insulin. Majoritatea sunt sisteme de cotransport cu ioni de sodiu, utiliznd energia ATP . Sistemul A este specific pentru aminoacizii aromatici i Ala, Ser i Gly.

 Sistemul

ASC intervine n transportul Ala, Ser i

Cys. Aminoacizii bazici sunt transportai de sitemul B+, iar cei cu caracter acid de sistemul X. Sistemul N, prezent la nivelul hepatocitelor, asigur transportul Gln, Asn i His. Independent de pompa Na+ funcioneaz sistemul L, care intervine n transportul aminoacizilor ramificai.

 Concentraia aminoacizilor n

plasm e de 0,35

0,65 g/L. Aminoacizii sngelui sunt momentan asimilai de esuturi i oragne (ficat, rinichi). Alte organe le absorb mai selectiv. Sunt descrise unele afeciuni ereditare, caracterizate prin malabsorbia aminoacizilor.

 Transportatorii intestinali sunt

similari celor localizai la nivelul tubilor renali i deci anomaliile metabolice afecteaz i reabsorbia tubular a aminoacizilor. Afeciunile se manifest prin prezena n exces n urin a anumitor aminoacizi. n maladia Fanconi cauzat de anomaliile reabsorbiei renale a aminoacizilor, fosfatului i glucozei se depisteaz acidoz, semne de rahitism i aminoacidurie generalizat.

sindrom de malnutriie proteic manifestat prin retard de cretere, hipotonie muscular, organomegalie i osteoporoz se instaleaz la eliminarea marcat a lizinei aminoacid esenial. Cauza este afeciunea genetic, cu deficitul transportatorului i pentru ali 3 aminoacizi arginina, ornitina i cisteina.
Un

Transportul aminoacizilor n celul

Metabolismul

intracelular al aminoacizilor necesit transportul lor prin membrana celular. Transportul L-aminoacizilor mpotriva gradientului de concentraie este un proces activ, combinat cu sistemul de transport Na+-dependent, ca i pentru glucoz. Cel puin se cunosc cinci sisteme de transport pentru aminoacizi n rinichi i intestine.

 Ele

transport aminoacizi neutri, aminoacizi acizi, aminoacizi bazici, ornitina i cistina i, respectiv, glicina i prolina. n sistemul de transport dat, aminoacizii pot rivaliza transportul (de ex., fenilalanina cu triptofanul). D-aminoacizii sunt transportai prin difuzie simpl favorizai prin gradientul de concentraie. Defectele motenite n transportul aminoacizilor afecteaz celulele epiteliale ale tractului gastrointestinal i tubilor renali.

 Unele

afecteaz transportul aminoacizilor neutri (Boala Hartnup), altele a aminoacizilor bazici i ornitinei i cistinei (cistinuria) sau glicinei i prolinei. Cistinoza este un defect de transport intracelular, caracterizat de coninutul intralizozomal nalt de cistin liber n sistemul reticuloendotelial, mduva osoas, rinichi i ochi. Dup degradarea proteinei (endocitoz) pn la aminoacizii n lizozomi, aminoacizii sunt transportai n citozol.

 Msurarea

activitii -GT serice are semnificaie clinic. Enzima este prezent n toate esuturile, dar nivelul cel mai nalt este n rinichi; cu toate acestea, enzima seric i are originea n sistemul hepatobiliar. Nivele ridicate de -GT seric sunt gsite n urmtoarele dereglri: obstrucia biliar intra- i posthepatic (-GT seric mrit, ct i aminopeptidaza leucinic, 5nucleotidaza i fosfataza alcalin);

Cancerul pancreatic, n special, cnd este asociat cu obstrucia hepatobiliar; boal hepatic alcool-indus (-GT seric poate fi perfect senzitiv la insultul hepatic indus de alcool) i unele carcinome prostatice (serul la brbaii normali are activitate 50% mai nalt dect la femei). De asemenea o activitate sporit este indentificat la pacienii ce necesit fenobarbital sau fenitoin, posibil, datorit induciei -GT n celulele hepatice de ctre medicamente.

Fondul metabolic comun al aminoacizilor

Fondul metabolic

comun al aminoacizilor sanguini e de origine proteic alimentar, susinut de hidroliza proteinelor tisulare, precum i de sinteza lor endogen din compui de natur neproteic. n acest fond nu exist distincie de origine. Fiecare esut i extrage tipul i cantitatea de aminoacizi necesari momentului potrivit.

 S-a

mai constatat c n procesul evolutiv organismele animalelor pierd capacitatea de a sintetiza catene hidrocarburice pentru unii -cetoacizi, corespondeni ai anumitor aminoacizi i componente eseniale ale majoritii proteinelor. S-a demonstrat experimental pe obolani c este indicat un anumit raport ntre coninutul acestor aminoacizi indispensabili pentru creterea optim.

 Dac

se ia cantitatea de triptofan ca msur relativ de referin egal cu 1, apoi pentru urmtorii aminoacizi ea se egaleaz cu: Lys 4; Leu 4; Val i Phe 3,5; Met 3; Ile, Thr 2,5; His 2; Arg 1. Aproximativ acelai raport dintre aminoacizii eseniali e caracteristic i organismului uman. S-a stabilit c insuficiena unui aminoacid deregleaz i absorbia celorlali.

cazurile date e valabil legitatea de minimum a lui Liebig: evoluia organismelor vii e determinat de acea substan esenial, ce e absorbit din alimente n cantiti mai mici. n natur aproape c nu dinuie proteine de valori incomplete. Iat de ce trebuie s difereniem proteinele mai valoroase de cele mai puin valoroase, adic de calitate inferioar.

general valoarea biologic a proteinelor e apreciat dup gradul lor de asimilare i compatibilitate n organism, de relaia dintre componena aminoacidic a proteinelor utilizate i gama aminoacizilor din proteinele organismului. Zeina proteina din porumb de exemplu nu conine lizin i triptofan.

 Surplusul de

aminoacizi, comparativ cu suficientul necesar pentru organism (spre deosebire de acizii grai, glucoz) nu poate fi depozitat i nici eliminat din organism; acest surplus este consumat n calitate de combustibil metabolic.

1.

2.
3.

Procesul se iniiaz n urmtoarele cazuri: Dac aminoacizii eliminai la o regenerare normal a proteinelor nu se utilizeaz la sinteza moleculelor lor. Dac organismul ar asimila din alimente mai muli aminoacizi dect necesit. n inaniie sau diabet zaharat, cnd lipsesc glucidele sau e dereglat asimilarea lor.

 Fondul

comun de aminoacizi echilibrat dup necesitile organismului este utilizat n biosinteza proteinelor. Sinteza are loc la nivelul ribozomilor prin traducerea informaiei genetice, vehiculate de mRNA. Sunt descrise afeciuni generalizate ale sintezei proteinelor cauzate de malnutriie proteic (sindromul Kwashiorkor) sau de malnutriie proteincaloric.

 Aceste

maladii sunt caracterizate prin: reducerea marcat a masei musculare, diminuarea concentraiei proteinelor plasmatice (cauznd edeme), hipotonie, astenie etc. Consecine clinice majore se depisteaz i n dereglrile atarii lanurilor oligozaharidice (sindromul de hipoglicozilare) n procesul de maturizare a glicoproteinelor. Se manifest prin retard psihomotor i neurologic, anomalii osoase i hipotonie muscular, cu deces n primii ani de via.

 Anomaliile

sintezei unei anumite proteine constituie un numr major de boli monogenetice (peste 600). La mutaiile sintezei unei proteine enzimatice, receptorului sau unui transportator, afeciunea se ncadreaz n grupul erorilor nnscute de metabolism (peste 500 descrise la moment).

surs de aminoacizi ai fondului metabolic comun este proteoliza citoplasmatic sau lizozomal. Prima predomin n muchi, cealalt n ficat i sistemul macrofagal. Strile caracterizate prin amplificarea proteolizei (hipercatabolice) sunt declanate de aciunea hormonilor respectivi (catecolamine, cortizol, citokine) ca rspuns la situaii extremale (traume, oc, intervenii chirurgicale, arsuri, infecii etc.).

 De

rnd cu biosinteza proteinelor exist i alte ci metabolice n care sunt implicai aminoacizii. De asemenea funcioneaz ci comune ale unor grupe de aminoacizi. Prin implicaiile lor multiple, o deosebit importan au procesele de dezaminare, transaminare, decarboxilare.

Catabolismul grupelor amino

Decarboxilarea asigur formarea unei game largi de amine biogene. Transaminarea constituie o etap-cheie n catabolismul i anabolismul aminoacizilor. Grupele SH i OH ofer aminoacizilor respectivi o serie de particulariti metabolice.

Sinteza fosfoadenozin-fosfosulfatului (PAPS)

 Catabolismul are

drept scop furnizarea energiei i a unor componente structurale celulelor imuncompetente i altor compui, ce au ca rol susinerea funciilor vitale n condiiile unui aport caloric limitat i regenerarea esuturilor lezate. n faza acut a inflamaiei crete nivelul plasmatic al complementului, fibrinogenului, proteinei C i se diminueaz concentraia plasmatic a albuminei.

Soarta amoniacului
1.

2.

Format prin intermediul multiplelor ci metabolice, este un compus deosebit de toxic. Evolutiv amoniacul se utilizeaz: O parte din NH4+ format la degradarea aminoacizilor este reutilizat la biosinteza compuilor azotai. Surplusul de NH4+ la majoritatea vertebratelor este transformat n uree i excretat din organisme.

3. 4.

Psrile i reptilele terestre transform NH4+ n acid uric pe care l elimin. Animalele acvatice l secret sub form de NH4+. NH4+ se formeaz n organismele animalelor, n majoritatea cazurilor, pe calea transdezaminrii. Amoniacul produs n intestin (sub aciunea florei microbiene la degradarea proteinelor) este absorbit i transportat prin sistemul-port spre ficat.

 Numai

o cantitate forte mic de NH4+ este dislocat n snge n form liber, fapt reflectat de concentraia plasmatic redus: 10-20 mg la 100 mL. Cea mai mare parte este sub form de glutamin reacie catalizat de glutamin sintetaz, o enzim localizat n toate celulele:
COOHC
+

COO+

NH3

+ NH4 (CH2)2 COOAcidul glutamic ATP

E
Mg
2+

HC (CH2) 2
ADP + Pi

NH3

H2N

Glutamina

n aceast form justific concentraia plasmatic majorat de 3-5 ori a glutaminei fa de ceilali aminoacizi. Glutamina, substana neutr, netoxic penetreaz uor membranele celulare. n ficat i rinichi, sub influena glutaminazei, are loc hidroliza ireversibil a glutaminei n glutamat i NH4+, din care se sintetizez ureea; 80-90% din coninutul total de amoniac sunt transformate n compusul vizat i eliminat prin urin.
Transportul NH4+

 Ureea

se formez n cadrul unei secvene ciclice de reacii tradiionale, denumite ciclul ureogenetic sau Krebs Henseleit.

OOC

CH
+

CH2

COO-

Mitocondria
H2N

O C (CH2)3 NH L-citrulina Pi O O
C O P OO
-

NH3

L-aspartat

L-citrulina
CH COO-

NH3

ATP

Argininosuccinatsintetaza AMP + PPi L-ornitincarbamoil transferaza

COOCH2 HC N H C + NH2

Carbamoil fosfat sintetaza

2ATP + HCO3- + NH4 2ADP + Pi H2N

Carbamoil fosfat

Ciclul ureogenetic (Krebs-Henseleit)

L-ornitina
+

NH COOArgininosuccinat (CH2)3 HC

NH3 (CH2)3 HC
+

+ NH3

COO-

NH3

COOL-ornitina

Citozol
O H2N C NH2

Argininosuccinatliaza
-

H OOC

COO-

C H Fumarat

H2O
+ NH2 + NH3 NH (CH2)3 CH COO-

Ureea

Arginaza
H2N C L-arginina

Corelaia intre ciclul ureogenetic i ciclul Krebs

 Amoniacul

e foarte toxic pentru organismul

uman. Efectul toxic al amoniacului se explic prin concentraia mare de ioni de amoniu, ce dezechilibreaz reacia catalizat de glutamat dehidrogenaz, cu formarea glutamatului.

 Acesta

epuizeaz concentraia de -cetoglutarat produs intermediar al ciclului Krebs, cu reducerea reaciilor de generare a ATP, ce deregleaz, n primul rnd, funcia creierului. Ultima reacie e nsoit de crearea unui produs intermediar macroergic fixat de enzim (glutamil-5-fosfat). Centrul activ al glutamil sintetazei, adiionnd NH4+, formeaz glutamina, cu eliberarea fosfatului.

Cile majore de transport a amoniacului dup proteoliza muscular

Hiperamonemiile
Sunt

cauzate de ctre erorile nnscute ale ureogenezei i acidemiilor organice, imaturizarea ficatului (hiperamonemia trectoare a nounscutului). Hiperamonemiile neonatale sunt caracterizate prin vom, letargie, lipsa apetitului, atacuri de aproplexie i com. Defectele descrise pot fi identificate prin msurrile de laborator corespunztoare.

cazuri acute de hiperamonemie, ndeprtarea excesului de amoniac prin dializ este o terapie eficace. n situaiile respective este important de a interzice ingestia de proteine. Au fost elaborate metode de tratament i s-a artat a fi eficace perioade ndelungate de timp, ce sunt bazate pe excreia de azot n forme diferite de uree.

Sinteza N-acetilglutamatului i rolul lui de activator n sinteza carbamoil fosfatului

CH3 C O

SCoA

COO-

CH NH2

CH2

CH2

COO-

N - acetilglutamat sintaza
HSCoA

CH3

C O

NH

CH COO-

(CH2)2

COO-

N-acetilglutamat

2ATP

2ADP + Pi

OC O O P OO

HCO3- + NH4

H2N

Carbamoil fosfat sintetaza I

Deficiena activitii enzimelor ciclului ureic

Chiar

i eliminarea normal de azot i prevenirea amonemiei toxice necesit funcionarea ciclului ureic. Copiii nscui cu deficien total a uneia sau mai multor enzime al ciclului supravieuiesc, doar cel mult cteva zile. Multe deficiene enzimatice identificate sunt pariale; se sugereaz ideia, c enzimele n cele mai multe cazuri au probabil alterate valorile Km, mai mult dect valorile Vm.

 Sunt

cunoscute cazuri de deficien n fiecare enzim a ciclului uric. ntreruperea ciclului n orice punct afecteaz metabolismul azotului pentru c, unii dintre intermediari pot difuza din hepatocite, se acumuleaz n snge, i trec n urin. De aceea simptomologia, pronosticul i tratamentul este diferit pentru fiecare deficien enzimatic. n general acestea sunt patologii grave cu indici mrii de retard mintal, piticism, com i moarte precoce.

 Deficiena

n carbomoilfosfat sintetazei (tip I): Dieta cu proteine puine suplimentate cu arginin a fost folosit n baza ipotezei c activarea sintezei N-acetilglutamat de ctre arginin ar stimula indirect nivelul sczut de carbamoilfosfat sintetaz capabile s asigure ndeajuns funcionarea ciclului uric. n general, aceast deficien este asociat cu retard mintal, letargie, com, vom, exitus dup natere care poate fi consecin indirect a perioadelor de hiperamoniemie necontrolat.

 Deficiena

n N-acetilglutamat sintetaza: S-a depistat hiperamonemie i hiperaminoacidemie generalizat la un nounscut al crui ficat era incapabil de sinteza N-acetilglutamatului. n acest caz metabolismul normal al azotului era meninut printr-o diet srac n proteine i administrare de carbamoilglutamat, un analog al N-acetilglutamatului ce este i un activator al carbamoilfosfat sintetazei.

 Deficiena

n ornitin transcarbamoilaz (tipII): Analiza genetic n deficien a ornitin transcarbamoilazei, indic faptul c gena este localizat pe cromozomul X. Din aceast cauz brbaii sunt mai afectai ca femeile, care sunt asimptomatice, ca heterozigoi. Pacienii cu deficiena OCT pot fi identificai la administrarea bucal a unei singure doze de alopurinol, urmat de determinarea excreiei orotidinei.

 Principiul fundamental al

acestei probe const n acumularea carbamoil fosfatului intramitocondrial la OCT heterozigoi, acesta difuzeaz n citoplasm, stimulnd biosinteza pirimidinelor. Unul dintre intermediarii n aceast cale orotidina se acumuleaz i duce la orotidinurie. Sensibilitatea acestui test este mrit de fluxul n calea de biosintez a pirimidinelor. Sporirea fluxului este realizat de ctre alopurinol, care prin calea oxipurinol ribonucleotidei inhib formarea produsului final uridin 5-fosfat (UMP) n biosinteza pirimidinelor.

Corelaia metabolic ntre sinteza mitocondrial a carbamoil fosfatului la formarea ureei i canalului carbamoil fosfat n sinteza pirimidinei

 Diagnozele prenatale

pot fi realizate de ctre probele enzimelor corespunztoare i analiza de DNA. Hiperamonemie neonatal acut, indiferent de cauz, este un pericol medical i necesit micorarea imediat i rapid a nivelelor de amoniu pentru a preveni efectele serioase la nivelul creierului. Msurrile includ hemodializa, transfuzia, dializa peritoneal i administrarea hidrocloridei argininei.

terapie adecvat const n restricia dietei de proteine i administrarea -ceto analogilor aminoacizilor eseniali, ce reduce preluarea total de azot i distrage azotul de la excreia spre aminoacizii eseniali necesari sintezei proteice. Completarea argininei ca precursor al ornitinei este esenial n ciclul ureei.

 Devierea

azotului de a produce altceva dect uree este obinut prin administrarea benzoatului de sodiu sau fenilacetatului de sodiu (sau de calciu), care pot nlocui formarea ureei i preveni amonemia toxic, conjugatele (amide) sunt rapid eliminate n urin.

 Reaciile

ce formeaz aceste amide, au fost crezute a fi importamte doar ca mijloc de a elimina acizii organici strini ca acidul hipuric i fenilacetilglutamin. n capitolele respective sunt descrise reaciile cum glicina poate fi format n cantiti mari din majorele fonduri comune metabolice. Glutamina este de asemenea valabil folosit ct timp reaciile anaplerotice menin necesarul de -cetoglutarat.

 Cu

menajeri atente reaciile de detoxifiere prin utilizarea benzoatului i a fenilacetatului pot nlocui formarea ureei i preveni amonemia toxic, conjugatele sunt rapid eliminate n urin. Un tratament adiional ce minimalizeaz amonemia toxic este substituia n diet a -cetoanalogilor ctorva aminoacizi; aceasta reduce preluarea total de azot i distrage azotul de la excreie spre aminoacizi eseniali necesari pentru sintezele proteice.

 Crete

de asemenea i acidul orotic, presupunmdu-se c carbamoilfosfatul nu poate fi folosit pentru a forma citrulina, difuzeaz n citozol, unde condenseaz cu aspartatul, favoriznd n final sinteza orotatului. Aceasta confirm c sinteza normal de orotat este limitat n citozol de carbamoilfosfat sintetaza II i c producia n exces a carbomoilfosfatului menit pentru sinteza de uree trece de normalul mecanism de control.

 Acidul

hipuric este secretat rapid pentru c compensarea acestuia este de cinci ori mai mare dect viteza de filtrare glomerular a acesteia. Azotul glicinei deriv din amoniul dintr-o reacie complex care utilizeaz CO2, NADH, N5, N10metilentetrahidrofotal (surs a unei singure uniti de carbon) i piridoxal fosfat, catalizat de ctre glicin sintaza mitocondrial (glicina cliveaz enzima). Administrarea fenilacetatului sau fenilbutiratului mrete excreia fenilacetilglutaminei.

 Excreia

fenilacetilglutaminei produce pierderea a doi atomi de azot. Deficiena NAG sintazei nu poate fi tratat prin administrarea NAG-ului, pentru c NAG sufer inactivarea citozolic prin deacilare i nu este prompt permeabil peste membrana mitocondrial intern. Un analog al NAG-ului, N-carbamoilglutamat, activeaz CPSI, nu distribuie proprieti nedorite ale NAG i ar fi efectiv n administrarea acestei deficiene.

 Deficiena

n argininosuccinat sintetaz: Incapacitatea de a continua ciclul uric prin condensarea citrulinei cu aspartatul, determin acumularea citrulinei n snge i excreaia sa n urin. n unele cazuri o majorare a azotului excretat poate fi sub form de citrulin. n intenia de a reduce aportul de azot, terapia necesit o suplimentare specific de arginin pentru sinteza proteinelor i formarea creatinei i ornitinei, care de asemenea au i alte roluri, nu numai n sinteza ureei.

 Deficiena

n argininosuccinat liaza: Incapacitatea de a scinda argininosuccinatul pentru a forma arginina, se aseamn cu deficiena argininosuccinat sintetazei. n acest caz argininosuccinatul este excretat n cantiti mari. Din motive neclare severitatea simptomelor acestei boali variaz foarte mult, astfel fiind greu de evaluat efectul terapiei. Totui, restricia alimentar a azotului, excreia alternativ de azot prin administrarera de benzoat i fenilacetat, suplimentarea de arginin par a fi folositoare.

 Deficiena

n arginaz: Este o patologie rar ce cauzeaz anomalii n dezvoltarea i funcia SNC. Astfel arginina se acumuleaz i este excretat; la fel ca i precursorii argininei i produii metabolismului argininei. O parte din uree de asemenea este excretat, fapt atribuit unui tip secundar de arginaz, depistat n rinichi. Prin cantiti mici de azot n diet incluznd aminoacizi eseniali, cu excepia argininei, sau n unele cazuri folosind cetoanalogii n locul aminoacizilor eseniali se obin rezultate favorabile ca i adaosul de benzoat de sodiu.

 Cea

mai obinuit cauz a hiperamonemiei la aduli este boala ficatului (de ex., datorit abuzului de etanol, infecie sau cancer). Abilitatea de a detoxifica amoniacul este micorat n proporii de severitatea daunei. n boli avansate (de ex., ciroze), hiperamonemia este sporit prin manevrarea sngelui portal care transport amoniacul de la tractul intestinal i alte organe interne la circulaia sanguin sistemic (traversnd ficatul) i duce la encefalopatie portal-sistemic.

plus la restricia dietei de proteine, creterea colonial a bacteriilor trebuie s fie supresat de ctre antibiotice i administrarea lactulozei - o dizaharid neasimilabil. Bacteriile tifoide catabolizeaz lactuloza la acizi organici care convertesc NH3 la NH4+, astfel micornd absorbia NH3 n circulaia portal. Catabolismul lactulozei, de asemenea, duce la formarea particulelor osmotic active care atrag apa n interiorul colonului, produc scaun acid i permit pierderea amoniacului ca ioni de amoniu.

Lactuloza (4-O--D-galactopiranozil--D-fructofuranoza)