UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS deber de laboratorio de microbiologa

Agar Sangre 2. Agar Mac Conkey 3. Agar triple azcar 4. Agar citrato de Simmons 5. Agar urea 6. Agar Fe lisina 7. Agar SS 8. Agar sulfito de Bi 9. Agar MIO 1.

TEMA:

nombre: QUIMIS PONCE LISSETH

CURSO: TERCERO C
DOCENTE: Q.F MARIANA RENDON
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MARCO TERICO AGAR SANGRE AGAR MAC CONKEY AGAR TSI AGAR CITRATO DE SIMMONS AGAR UREA AGAR FeLisina

3 4 6 8 10 12 14

AGAR SS
AGAR SULFITO DE BI AGAR MIO BIBLIOGRAFA

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18 20 23
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Fundamento La infusin de msculo de corazn y la peptona, otorgan al medio un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El agregado de sangre al medio de cultivo, en concentracin final de 5-10 %.

Es til tanto para el aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios, y para la observacin de reacciones de hemlisis.
Puede utilizarse como medio base para preparar el medio agar chocolate.
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Microorganismos E. coli ATCC 25922 S. aureus ATCC 25923 S. pyogenes ATCC 19615 S. pneumoniae ATCC 6305 S. pneumoniae ATCC 49619 Una muestra, en placa de agar sangre, se siembra directamente sobre la superficie slida del medio de cultivo, por inoculo diluido en estrias zig-zag. Se incuba por 24 hrs. a 37C.

Crecimiento Abundante Abundante Abundante Abundante Abundante

Hemlisis -Beta Beta Alfa Alfa

El color del medio es mbar claro una vez se halla agregado sangre un 5% o 10 % del volumen total , su color cambia a rojo cereza. 5

Fundamento En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.

Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos.

Resultados

Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Salmonella typhimurium ATCC 14028

Colonias Rojas con halo turbio

Rosadas mucosas Incoloras, transparentes

Shigella flexneri ATCC 12022

Proteus mirabilis ATCC 43071

Incoloras, transparentes
Incoloras, transparentes

Enterococcus faecalis ATCC 29212

Diminutas, incoloras, opacas

Medio preparado: rojo prpura

Fundamento En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la produccin de cido sulfhdrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico.

Gracias a su composicin es uno de los medios de cultivo ms empleados para la diferenciacin de enterobacterias segn: Fermenten o no glucosa. Fermenten o no lactosa o sacarosa. Produzcan o no cido sulfhdrico. Produzcan o no gas.
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Resultados

Microorganismo

Pico/Fondo

Produccin de gas + + +

E. coli ATCC 25922 K. pneumoniae ATCC 700603 P. mirabilis ATCC 43071 S. typhimurium ATCC 14028 S. enteritidis ATCC 13076 S. flexneri ATCC 12022 P. aeruginosa ATCC 27853

A/A A/A K/A

Produccin decido sulfhdrico +

K/A
K/A K/A K/K

+ -

+
+ -

Medio utilizado para la diferenciacin de enterobacterias, en base a la capacidad de usar citrato como nica fuente de carbono y energa.

Fundamento En el medio de cultivo, el fosfato monoamnico es la nica fuente de nitrgeno y el citrato de sodio es la nica fuente de carbono. Las sales de fosfato forman un sistema buffer. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el azul de bromotimol es el indicador de pH, que vira al color azul en medio alcalino. El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como nica fuente de carbono. El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras de citrato permeasa, a travs del ciclo del cido tricarboxlico. El desdoblamiento del citrato da progresivamente, oxalacetato y piruvato. ono, producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul y esto es indicativo de la produccin de citrato permeasa. 10

Resultados
-Positivo: crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad. -Negativo: el medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo bacteriano y no hay cambio de color.

Microorganismo Klebsiella pneumoniae ATCC 700603

S. typhimurium ATCC 14028 E. coli ATCC 25922 S. flexneri ATCC 12022

Citrato permeasa Positivo Positivo Negativo Negativo

Color del medio Azul Azul Verde Verde

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Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad uresica. Se utiliza para identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como Proteus spp., enterobacterias y estafilococos. Fundamento En el medio de cultivo, la triptena y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el rojo de fenol es el indicador de pH. Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa liberando amonaco y dixido de carbono. Estos productos alcalinizan el medio haciendo virar el rojo de fenol del amarillo al rojo. En este medio, la fermentacin de la glucosa activa la enzima ureasa, acelerando la velocidad del metabolismo en aquellos organismos que hidrolizan lentamente la urea, como especies de Enterobacter o Klebsiella.

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Resultados Microorganismo Proteus mirabilis ATCC 43071 K. pneumoniae ATCC 700603 Escherichia coli ATCC 25922 S. flexneri ATCC 12022 S. typhimurium ATCC 14028 Actividad uresica Positiva Positiva dbil Negativa Negativa Negativa Color del medio Rojo-Rosado Rojo-Rosado Amarillo Amarillo Amarillo

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Fundamento En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes para el desarrollo bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y la lisina es el sustrato utilizado para detectar la presencia de las enzimas decarboxilasa y deaminasa. El citrato de hierro y amonio, y el tiosulfato de sodio, son los indicadores de la produccin de cido sulfhdrico. El purpura de bromocresol, es el indicador de pH, el cual es de color amarillo a pH igual o menor a 5.2, y de color violeta a pH igual o mayor a 6.8. Por decarboxilacin de la lisina, se produce la amina cadaverina, que alcaliniza el medio y esto produce el viraje del indicador al color violeta. Las cepas de los gneros Proteus, Providencia y algunas cepas de Morganella, desaminan la lisina, esto produce un cido alfa-ceto-carbnico, el cual, con la sal de hierro y bajo la influencia del oxgeno forma un color rojizo en la superficie del medio.

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Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos, especialmente Salmonella spp., basado en la decarboxilacin / desaminacin de la lisina y en la produccin de cido sulfhdrico.

Resultados
1- Decarboxilacin de la

Microorganismos

Color en el pico de Color en la Ennegrecimient flauta base del tubo o del medio

lisina:

-Prueba Positiva: Pico violeta/fondo violeta.

Proteus mirabilis ATCC 43071

Rojo

Amarillo

Negativo

-Prueba Negativa: Pico violeta/fondo amarillo. 2-Desaminacin de la lisina: Pico rojizo/fondo amarillo. Esto sucede con cepas del gnero Proteus, Providencia y alguna cepas de Morganella spp. 3-Produccin de cido sulfhdrico: -Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el lmite del pico y fondo)

Salmonella typhimurium ATCC 14028

Salmonella enteritidis ATCC 13076 Providencia spp. Citrobacter freundii Morganella spp.* Edwarsiella spp. Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Escherichia coli ATCC 25922

Prpura
Prpura

Prpura
Prpura

Positivo
Positivo

Rojo Prpura Rojo Prpura

Prpura Prpura

Amarillo Amarillo Amarillo Prpura

Prpura Prpura

Negativo Positivo Negativo Positivo

Negativo Negativo
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Fundamento Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. La selectividad, esta dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas. Es diferencial debido a la fermentacin de la lactosa, y a la formacin de cido sulfhdrico a partir del tiosulfato de sodio. La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formacin de sulfuro de hierro.

Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp.
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RESULTADOS
Microorganismos Salmonella typhimurium ATCC 14028 Shigella flexneri Colonias Transparentes, centro negro Incoloras

Shigella sonnei
Proteus mirabilis ATCC 43071 Escherichia coli ATCC 25922 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Enterococcus faecalis ATCC 29212

Incoloras
Transparentes, centro negro Rosadas a rojas Rosadas cremosas y mucosas Incoloras, de muy escaso crecimiento
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Es un medio selectivo utilizado para el aislamiento de Salmonella typhi y otros bacilos entricos.

La peptona, el extracto de carne y la dextrosa proporcionan los nutrientes necesarios para el crecimiento de los microorganismos. El sulfato ferroso acta como indicador en la produccin de sulfuro de hidrgeno que se manifiesta en el centro de la colonia por un precipitado negro y un halo negro grisceo con brillo metlico por la reduccin de los iones bismuto en presencia del sulfuro de hidrgeno. El sulfito de bismuto y el verde brillante inhiben considerablemente el crecimiento de bacterias contaminantes. Sembrar la superficie del medio de cultivo con el material de ensayo por estra cruzada. Incubar 24 - 48 h a 35C. 18

MICROORGANISMO
Salmonella typhi

CEPA
ATCC 19430

RESULTADO
Colonias con centro negro, bordes claros, a las 48 h con halo negro grisceo y brillo metlico.

Salmonella typhimurium
Escherichia coli

ATCC 14028
ATCC 25922

Colonias negras a verdes.

Crecimiento inhibido o colonias verdes.

Proteus mirabilis

ATCC 12453

Colonias pequeas verde plido a veces mucoides.

Crecimiento inhibido
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Staphylococcus aureus

ATCC 25923

Medio usado para la identificacin de Enterobacteriaceae en base a su movilidad, actividad de ornitina decarboxilasa y produccin de indol.

Fundamento Medio de cultivo semislido, altamente nutritivo debido a la presencia de extracto de levadura, peptona y triptena. Adems, la triptena aporta grandes cantidades de triptofano, sustrato de la enzima triptofanasa, para la realizacin de la prueba del indol. La dextrosa es el hidrato de carbono fermentable, la ornitina es el sustrato para la deteccin de la enzima ornitina decarboxilasa, el prpura de bromocresol es el indicador de pH, que en medio alcalino es de color prpura y en medio cido es amarillo. Por su composicin, es posible detectar 3 reacciones en un mismo tubo: movilidad, presencia de ornitina decarboxilasa e indol. La movilidad se demuestra por un enturbiamiento del medio o por crecimiento que difunde mas all de la lnea de inoculacin. La reaccin positiva a la ornitina est dada por un color prpura del medio. 20

Microorganismo

Crecimien to Bueno Bueno

Movilidad

Indol

Ornitina decarboxilasa + -

E. coli ATCC 25922 K. pneumoniae ATCC 700603

+ -

+ -

P. mirabilis ATCC 43071

Bueno

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Resultados
1-Movilidad: -Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento mas all de la

lnea de siembra. -Resultado negativo: crecimiento solamente en la lnea de siembra.

2-Ornitina decarboxilasa:
-Resultado

positivo: color prpura. -Resultado negativo: color amarillo. A veces se puede desarrollar un color violceo en la superficie del medio.
3-Prueba del indol:

La prueba de indol se realiza una vez que se ha determinado la movilidad y la prueba de ornitina. -Resultado positivo: color rojo al agregar el reactivo revelador. -Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece incoloro-amarillento.

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http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/maconkeyagar.htm http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/tsiagar.htm

http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/lisinahierroagar.htm
http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/simmonscitagar.htm http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/miomedio.htm http://www.britanialab.com/productos/certificado_es_265_039.pdf http://microbitos.files.wordpress.com/2010/06/resumen-de-algunas-pruebasbioquimicas.pdf http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro /sulfitobismuto.pdf http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/salmoshigagar.htm

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