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Derivados esteris steres do glicerol Colesterol e seus steres Triglicerdios Hormnios esterides Fosfoglicerdios cidos biliares Derivados da esfingnosina Vitamina D Esfingomielina cidos graxos Glicoesfingolipdios Cadeia curta (2 a 4 C) Terpenos Cadeia mdia (6 a 10 C) Vitamina A Cadeia longa (12 a 26 C) Vitamina E Prostaglandinas Vitamina K
Quilomicrons
Sintetizado no intestino
delgado Secretado no sistema linftico e subsequentemente atinge a circulao. Transporta lipidios da dieta 98% lipidio, tamanho grande, baixa densidade Apo B-48
Receptor de ligao
VLDL
Very Low Density
Lipoprotein (VLDL)
Sintetizado no fgado Transport endgeno
Receptor ligao
LDL
Low Density
Lipoprotein (LDL)
Sintetizado do IDL Transporte Colesterol
Receptor ligao
IDL
Intermediate Density Lipoprotein (IDL)
Sintetizado do VLDL durante a degradao do VLDL Transporte de Triglicrides e precursor para LDL Apo B-100 Receptor Apo C-II LPL ativador Apo E Receptor ligao
HDL
High Density Lipoprotein
(HDL)
Sintetizado no fgado e intestino Reserva de apoproteinas Transporte reverso de colesterol 52% proteina, 48% lipid, 35% C &
CE Apo A
Apo C
Apo E
Apoprotena Lp (a)
uma glicoprotena enorme, homloga ao plasminognio, sintetizada pelo fgado. No plasma, forma uma ligao covalente com a apo B100 das LDL, gerando uma nova lipoprotena, a Lp (a).
Apoliprotenas
So uma famlia complexa de polipeptdio que determinam o destino metablico dos lipdios no plasma e sua captao pelos tecidos. Ativam e inibem enzimas envolvidas no metabolismo das lipoprotenas. Diviso: ApoA; ApoB; ApoC; ApoE;
Apoprotenas da srie A As apo A-I, A-II e A-IV so encontradas na HDL. A-I A-II so sintetizadas no fgado A-IV forma-se apenas no intestino A-I corresponde a 80% de toda a protena das HDL e essencial para a integridade dessas partculas. Apo A-I ativa a LCAT (que esterifica colesterol)
Apoliprotenas da srie B Est presente no plasma em duas formas: apoB100 apoB48 ApoB100 componente protico das LDL -quilomcrons reconhecidas por receptores especficos tecidos perifricos.
Apoprotenas da srie C
Esta famlia de trs protenas (apoCI, apoCII, apoCIII) sintetizada no fgado e esto em todas as lipoprotenas menos LDL. A apo CII ativa a lipoprotena lipase (LPL), que digere (hidrolisa) os triglicerdeos (gordura) em quilomcrons eVLDL.
Apolipoprotenas da srie E sintetizada no fgado, neurnios, glia e macrfagos; Ocorre em todas as lipoprotenas, com exceo da LDL; incorporada ao HDL e transferida, na circulao, para os quilomcrons e VLDL. a principal apoprotena envolvida na captao heptica dos quilomcrons Liga-se aos receptores apo B nos tecidos.
Prostaglandinas(PG)
Derivado de c. Graxos(ariquidonato) Produzido em quase todos os tecidos.
liso ; Induo do parto( msculo uterino); Motilidade Intestinal; Brocoespasmo; Aumenta a coagulao (plaquetas); Aumenta a permeabilidade capilar; Secreo do cido Gstrico(Estomago); Inibe a liplise do triglicrides(tecido adiposo)
Fosfolpides
So formados por glicolipidios e colesterol(menbrana celular). So anfipticos- formados pela conjugao de 2 tipos de c. Graxos e 1 de Glicerol-fosforilado. Resduos resultam em lecitinas e cefalinas Esfingomielina- nico que no deriva do glicerol, e sim de um amino-alcool Esfingosina
Glicolipidios
So acares contendo lipdios esfingosina e acar ligado ao grupo lcool. Molcula total ceramidas galactosilceramida glucosilceramida
Complexos- gangliosdeos(menbranas da clulas do crebro e do SNC).- sintetizadas de ceramidas. membrana glicosfingolpide- Papel no reconhecimento da clula e tipos sanguneos.
Metabolismo
Exgena
Endgena
Transporte Intra celular Transporte Reverso de Colesterol
Lecitina:colesterol aciltransferase (LCAT): participa na remoo do excesso de colesterol das clulas perifricas
TG
CM VLDL
phospholipid
apoE
CM
Energy
apoE
VLDL
Remnant
LDL
TG = triglyceride
LCAT
CE
O processo pelo qual o excesso de colesterol nas periferias da clulas, especialmente clulas espumantes macrfagos, retorrnada para o fgado por degradao e excreo.
RCT envolve apoA-I, ABCA1 and LCAT to bem com receptores no fgado para absoro do excesso de colesterol.
Peripheral Cell UC
Macrophage/ Foam cell
diffusion
HDL
HDL UC
LCAT
ABCA1
UC PL LCAT
Nascent HDL
HDL CE CE
CE
apoA-I SR-B1
TG
VLDL or LDL apoB
CE LDLr
Liver
Chol
Bile acids
Bile to gut
QM
Maior apoB Proteina Maior Lipidio TG
VLDL
IDL
LDL
HDL
apoB
apoB
apoB
apoA-I
TG
CE
CE
CE
Xantomas Tendinosos
Xantomas Planos
Arco Corneal
ABCA1 transportador: transporta excesso de colesterol das clulas apoA-I ligante receptor de varredura A1 (SR-A1): absoro do oxidado e modificado LDL por macrfagos SR-B1 receptor:seletiv a absoro do excess o de colesterol do HDL, apoA-I ligante
COLESTEROL
IMPORTNCIA: Servem como base para sntese de hormnios (ex: sexuais-testosterona), precursor de vitamina d e importante componente da membrana plasmtica.
COLESTEROL
MOLCULA INSOLVEL (APOLAR):
PRODUZIDA PELO PRPRIO ORGANISMO (**ENDGENO-FGADO = 70%) ou INGERIDO (EXGENO = 30%) VAI PARA O SANGUE
2. Sntese heptica: a partir do mevalonato atravs da enzima reductase dahidroximetil glutaril CoA.
3. Absoro intestinal: Ao redor da metade do colesterol do intestino absorvido, somente a tera parte do colesterol intestinal procede da dieta. O colesterol contido na bilis e o secretado nas clulas epiteliais do intestino delgado, representam a maiora do colesterol absorvido e que contribui na formao dos quilomicrons.
CLULAS DO CORPO
PROBLEMA:
LDL NO SANGUE
ATEROSCLEROSE
depsitos de gordura e fibras no lmen dos vasos. (atualmente: processo inflamatrio da parede da artria)
ENRIJECIMENTO E ENTUPIMENTO DOS VASOS.
INFARTO DO MIOCRDIO
ATEROMA
Obstruo arteriosclertica parcial ou total das artrias coronarianas resultando em uma limitao do suprimento do oxignio ao corao frente ao aumento da demanda.
Qumico
Determinao
Metodologia Finalidade Princpios Reagentes Amostras Procedimentos Influncias Analticas Interferncias Linearidade Intervalo de Referncia Significado Clnico
Metodologia : Colorimtrico- Enzimtico de Trinder Finalidade :Mtodo para determinao do Colesterol. Teste
enzimtico colorimtrico somente para uso in vitro.
Princpio:
Os steres de colesterol so hidrolizados pela colesterol esterase (COE) a colesterol livre + cidos graxos.O colesterol livre oxidado pela colesterol (COD) a colesterol 3 ona + peroxido de hidrognio.Na presena da Peroxidase (POD) reage com a 4 Aminoantipirina e Fenol, formando um cromgeno vermelho cereja cuja intensidade de cor proporcional concentrao de Colesterol.
Clculos:
Colesterol (mg/dL) = Absorbncia da Amostra x 200 Absorbncia do Padro
Fator de calibrao = Concentrao do Padro (200 mg/dL) Absorbncia do Padro mg/dL = Absorbncia da Amostra x Fator de calibrao
Valor de Referncia:
Desejvel ............................................... < 200mg/dL Aceitvel ................................................ 200 239mg_/dL Elevado .................................................. > 240mg/dL
Interferncias:
cido Ascrbico (mesmo em pequenas concentraes),-falsos diminuidos repousar amostra por 90 minutos.
Reagentes:
Reagente Enzimtico - Tampo (pH 7,0) 75 mmol/L, Fenol 24 mmol/L, 4- Aminoantipirina0,5 mmol/L, Colesterol Oxidase < 300 U/L, Lipoprotena Lipase > 500 U/L, Peroxidase > 300 U/L, Azida Sdica 14,6 mmol/L,. Reagente N 2 - Padro - conservar entre 2 e 8 C. Contm: Colesterol 200,0 mg/dL,
Dislipidemias
Hipercolesterolemia isolada Hipertrigliceridemia isolada Classificao Laboratorial Hiperlipidemia Mista
Elevao isolada do CT, geralmente aumento do LDL-C
HDL-C Baixo
Dislipidemias primrias
Classificao Etiolgica Dislipidemias Secundrias
Causas genticas
TIPOS DE GORDURA
GORDURAS SATURADAS (VILS): comum nos ANIMAIS (porco, carnes bovinas, leite, manteiga, dend).
Cadeia de carbonos ligados a hidrognios. Sem dupla ligao (cada C se liga a 2H).
GORDURAS INSATURADAS:
TIPOS DE GORDURA
comum nos VEGETAIS (leos vegetais) e nos peixes.
MONOINSATURADAS Cadeia de carbono com uma dupla ligao (azeite de oliva). POLIINSATURADAS Cadeia de carbono com mais de uma dupla ligao (girassol, canola)
SATURADA
INSATURADA POLIINSATURADA
DIETA (baixa eficcia): Substituio de cidos graxos saturados por cidos graxos poliinsaturados. So mais rapidamente metabolizados no fgado, diminuindo a concentrao de colesterol plasmtico. EXERCCIOS FSICOS (baixa eficcia): Impacto pequeno devido queima de calorias. Reduz em at 20 % o nvel de triglicrides em pessoas com altas taxas do mesmo.
MEDICAMENTOS: estatinas reduzem em no mximo 20% o colesterol ruim. Rendem 4 bilhes de dlares ao ano s no Estados Unidos.
FATORES GENTICOS QUESTO COMPLEXA
DIVERSOS FATORES DE RISCO
GORDURAS X CARBOIDRATOS
Triglicrides e do LDL
TRIGLICRIDES
Estrutura do triglicerdeo:
3 molculas de cidos graxos + 1 molcula de glicerol
TRIGLICRIDES
risco de arterosclerose e doenas cardiovasculares
excesso de lcool
Qumico
Determinao
Metodologia Finalidade Princpios Reagentes Amostras Procedimentos Influncias Analticas Interferncias Linearidade Intervalo de Referncia Significado Clnico
Metodologia:
Colorimtrica (Reao de Trinder)
Princpio:
Triglicrides ....Lipase /Lipoprotica Glicerol e c. Graxos. Glicerol... Glicerol -Quinase Glicerol-3-Fosfato Glicerol-3-Fosfato ....Oxidase - Peroxidase - Cromgeno Cereja
Amostra:
Soro obtido livre de hemlise (para evitar resultados falsamente elevados) ou plasma colhido com EDTA ou heparina. O analito estvel durante 3 dias entre 2 e 8C e 30 dias a 10C negativos.O sangue deve ser colhido aps um jejum de 12 a 14 horas. As amostras lipmicas devem ser previamente diludas com Cloreto de Sdio a 0,85%, na proporo 1:2.
Interferncias:
Procedimento:
Rotular 3 tubos: B, P e T. Colocar 1,0 ml do Reagente Enzimtico nos tubos B, P e T. Colocar 0,01ml da Amostra no tubo T e 0,01ml do Padro no tubo P. Misturar bem e colocar em banho-maria 37 C por 10 minutos.Ler a absorbncia da Amostra e do Padro em 505 nm,acertando o zero com o Branco. A cor estvel por 30 minutos.
Valor de Referncia:
Desejvel ............................................... < 150 Alto ......................................................... 150 a 199 Elevado .................................................. 200 a 499 Muito elevado.......................................... > 500
Linearidade:
A reao linear at 1100 mg/dL. Amostras com valores acima diluir a amostra com Cloreto de sdio 0,85%, repetir a dosagem e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio.
Influncias Analticas:
Dieta, Consumo de lcool, Peso Corporal, Exerccio Fsico. Heparina ativa lipoprotena lipase - falso diminudo Obter amostra com paciente sentado Torniquete at 1 minuto
Reagentes:
Padro - conservar entre 2 e 8 C. Contm: Triglicrides 100,0 mg/dL (1,13 mmol/L), cido Benzico20,47 mmol/L; Reagente Enzimtico 1 - conservar entre 2 e 8C. Tampo Pipes pH 7,0 (100 mmol/L), Cloreto de Magnsio 15 mmol/L, 4-cloro fenol 5 mmol/L, Lipase Lipoprotica 2500 U/L, Glicerol quinase > 1500 U/L, Peroxidase > 1000 U/L, Colato de sdio 2,7g/L; Reagente Enzimtico 2 - conservar entre 2 e 8 C. Contm: 4-Aminoantipirina 0,9 mmol/L, ATP 1,5 mmol/L, Azida Sdica 15,38 mmol/L, Glicerol-3Fosfato Oxidase > 4000 U/L, Genapol 1,8g/L.
Clculos:
Triglicrides ( mg/dL ) = Absorbncia da amostra x 200 Absorbncia do padro Fator de calibrao = Concentrao do padro ( 200 mg/dL ) Absorbncia do padro
TRIGLICRIDES
risco de arterosclerose e doenas cardiovasculares
excesso de lcool
HDL
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apoA-I
apoA-II
Qumico
Determinao
Metodologia Finalidade Princpios Reagentes Amostras Procedimentos Influncias Analticas Interferncias Linearidade Intervalo de Referncia Significado Clnico
Metodologia : Colorimtrico
Princpio:
Os quilomcrons e as lipoprotenas de baixssima densidade (VLDL) e de baixa densidade (LDL) presentes na amostra, precipitam em presena de ons fosfotungstato e magnsio. Aps a centrifugao o sobrenadante contm as lipoprotenas de elevada densidade (HDL), cujo colesterol quantifica-se em espectrofotmetro.
col. esterase Colesterol esterificado + H2O---------------------> Colesterol + Ac. graxo col. oxidase Colesterol + O2 + H2O--------------------------> Colestenona + H2O2 peroxidase 2H2O2 + 4-Aminoantipirina + Fenol -------------> Quinoneimina + 4H2O
Reagntes:
Reagente Precipitante:cido Fosfotngstico 16 mmol/L, Cloreto de magnsio 3,5 mmol/L. Padro: Butanol 10% v/v; Triton X100 0,1% v/v; em concentrao equivalente 20 mg/dL de HDL colesterol.
Procedimento:Precipitao
1. Pipetar em tubo de centrfuga amostra: 250 L
e Reagente precipitante 250 L 2. Agitar vigorosamente e deixar em repouso durante 10 minutos. 3. Centrifugar durante 10 minutos a 3.000 rpm para obter um sobrenadante lmpido. 4. Recolher com cuidado o sobrenadante. 5. Realizar a dosagem de colesterol HDL imediatamente.
1. Pipetar Reagente do Colesterol: 1,0 mL nos Tubos B,P e T. 2. gua destilada: 100l no tubo B 3. Padro: 100l no tubo P 4. Sobrenadante: 100l no tubo T 5. Homogeneizar bem e incubar os tubos durante 10 minutos a 37 C. 3. Medir a absorbncia (Ap) do Padro e (Aa) da Amostra frente ao Branco a 505 nm. A cor estvel durante 30 minutos.
Clculos:
HDL Colesterol (mg/dL) = Absorbncia da Amostra x Conc. Padro (mg/dL) (*) Absorbncia do Padro (*) 40 equivale ao valor do padro (20 mg/dL) corrigido de acordo com o fator de diluio (1:2) usado na precipitao. Fator = Concentrao Padro (mg/dL)(*) Absorbncia do Padro Colesterol HDL (mg/dL) = Absorbncia da amostra x Fator de Calibrao
Valor de Referncia:
Faixa Etria At 10 anos
De 10 a 19 anos
Adultos
Linearidade: at
150 mg/dL. Para valores superiores, diluir a amostra com NaCl 150 mM (0,9%), realizar nova dosagem e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio.
Obesidade.
Hipertrigliceridemia. Sedentarismo.
Neomicina.
Anti-hipertensivos.
LDL
Qumico
Determinao
Metodologia Finalidade Princpios Reagentes Amostras Procedimentos Influncias Analticas Interferncias Linearidade Intervalo de Referncia Significado Clnico
Princpio:
Na primeira etapa o LDL colesterol presente na amostra protegido das reaes enzimticas, enquanto os quilomcrons, VLDL e HDL colesterol reagem com as enzimas Colesterol Esterase (CHE) e Colesterol Oxidase (COD). O perxido de hidrognio produzido pelas reaes enzimticas nesta primeira etapa ento decomposto pela Catalase presente no Reagente. Na segunda etapa, a adio do Reagente 2 proporciona a reao do LDL colesterol com as enzimas CHE e a COD e a inativao da Catalase. O perxido de hidrognio produzido nesta etapa forma um complexo colorido pela condensao da 4Aminoantipirina com HDAOS (N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-3,5dimetoxianilina) na presena da Peroxidase (POD). A concentrao do LDL colesterol proporcional absorbncia do complexo formado medido a 600 nm.
LDL+ Surfactante 2
CO
Colesterol + O2
Reagentes:
Tampo de Good 25 mmol/L pH 6,8; Colesterol Esterase 5.000 U/L;Colesterol Oxidase 5.000 U/L; HDAOS 0,64 mmol/L e Catalase 1.000.000 U/L.
Tampo de Good 25 mmol/L pH 7,0; 4-aminoantipirina 3,4 mmol/L; Peroxidase 20.000 U/L e azida sdica 0,095%. Calibrador:Soro Humano; azida sdica 0,095% (valor daconcentrao de LDL)
Clculos:
A2c - A1c = DA calibrador A2a - A1a = DA amostra [C] = Concentrao do Calibrador
A amostra x concentrao do calibrador = (mg/dL) A calibrador Fator: = [Cal] A calibrador Concentrao de LDL (mg/dL) = A amostra x Fator Calibrao
Linearidade:
6,6 e 992 mg/dL. Para valores superiores, diluir a amostra com NaCl 150 mM (0,9%), realizar nova dosagem e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio.
Valor de Referncia:
Adultos timo Limiar timo Limiar Elevado Elevado Muito elevado
< 100 100 a 129 130 a 159 160 a 189 190
Crianas e Adolescentes Idade de 2 a 19 anos Desejvel < 110 Limtrofe 110 a 129 Elevado 190
Significado Clnico
As lipoprotenas de baixa densidade (LDL), so as principais protenas de transporte do colesterol. Os nveis de colesterol total so conhecidos por estarem correlacionados com a doena arterial coronariana (DAC). Nos ltimos anos, em adio ao colesterol total a determinao da frao LDL do colesterol tornou-se fundamental para a avaliao do risco de DAC, pois so seus nveis que determinam o diagnstico e as metas de avaliao e de tratamento da hipercolesterolemia. A relao entre a doena aterosclertica e o aumento de LDL significativa e direta
VLDL
Quantificado pela equao matemtica:
VLDL = Triglicrides
VLDL naciente
VLDL madura
HDL
Lipasa lipoproteica
TG AG FOSFOL
Arterias
Equao de Friedwald
VLDL = Triglicrides 5
LDL= Colesterol Total (HDL + VLDL) Colesterol Total e Fraes = Colesterol HDL + Colesterol LDL
+ Colesterol VLDL Limitaes: Alta concentrao de Triglicrides Quantidade significante de quilomicrons Disbetalipoproteinemias
Avaliao das Apolipoprotenas A medida das apolipoproteina aumentam a especificidade para a identificao dos fatores de risco coronariano. O perfil de apolipoproteinas indicado para pacientes que apresentam riscos de aterosclerose tais como: Hipercolesterolemia. A apoB utilizada para confirmar o diagnstico. HDL C reduzidos Crianas com antecedentes familiares Mulheres usurias de anticoncepcional
A Apolipoprotena A1 a principal constituinte das lipoprotenas de densidade alta (HDL), no qual captada rapidamente assegurando seu retorno ao fgado para seu catabolismo A diminuio de apoA1 indicador do aumento do riscocardiovascular
Apolipoprotena B Maior constituinte protico das lipoprotenas de densidade baixa (LDL) e secundariamente das (VLDL) A apo B atua como determinante da unio das LDL a seus receptores especficos As LDL circulante em excesso so captadas pelos macrfagos produzindo as clulas espumosas, ponto de partida da placa de ateroma. Pois uma concentrao elevada de apoB favorece a formao de aterosclerose
Lipoprotena (a) Lp(a) Elevados nveis de Lp(a) esto associados com o aumento de risco para o: Infarto do miocrdio; Doenas vasculares prematuras (menor de 55 anos) Doena arterial crebro vascular Enfarto agudo do miocrdio em pacientes com histrico familiar e hipercolesterolemia;