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manera el ADN se ve atrado por cualquier cosa que est cargada positivamente.
Y este principio se utiliza en la electroforesis.
fragmento.
Mientras es ms pequeo, migra ms rpido a travs
del gel.
La tasa de migracin de fragmentos lineales es
diferente manera que los fragmentos lineales del mismo peso molecular.
Otro parmetro importante en la electroforesis, es la
buffer.
La buffer es necesaria porque durante la electroforesis
EDTA.
Otras buffer utilizadas son TAE (Tris-Acetato-EDTA) y
TPE (Tris-Fosfato-EDTA).
separan los fragmentos de ADN tan eficientemente como los corridos a bajos voltajes.
Para una buena separacin, los geles deben correrse a
PREPARACIN DE UN GEL
sustancia tiene un poderoso efecto mutagnico y, posiblemente puede ser cancergeno o teratgeno.
SYBR Green.
Es un agente intercalante utilizado en la tincin de
de la doble hlice del ADN y se acopla energticamente a los cidos nucleicos que lo forman.
El SYBR Green representa una alternativa como tinte al
bromuro de etidio.
poliacrilamida.
La poliacrilamida forma una malla ms compacta que
la agarosa.
Por esta razn, los geles de poliacrilamida pueden
resolucin, es decir, el gel de poliacrilamida puede separar dos molculas cuyo peso molecular es muy parecido.
Se la utiliza para anlisis forenses, en los cuales es
crtico determinar si es que dos fragmentos de ADN son exactamente del mismo tamao.
Tambin se la utiliza para electroforesis de protenas.
aaden catalizadores para comenzar la polimerizacin (in persulfato como persulfato de amonio).
ADN usualmente se hacen y corren en TBE, al igual que los geles de agarosa.
El qumico urea, puede ser aadido al gel para
ELECTROFORESIS DE PROTENAS
Las protenas normalmente son separadas en geles de
poliacrilamida porque son molculas mucho ms pequeas que los fragmentos de ADN comnmente separados en agarosa.
Las protenas presentan una carga elctrica neta si se
encuentran en un medio que tenga un pH diferente al de su punto isoelctrico y por eso tienen la propiedad de desplazarse cuando se someten a un campo elctrico.
ser la migracin.
La electroforesis en poliacrilamida es un mtodo
conveniente, rpido y econmico a nivel de muestra pues se requieren slo cantidades del orden de microgramos de protena.
ELECTROFORESIS DE PROTENAS