Prof. MSc.

Jos Antonio Romero Palmera

Brbula, Febrero 2010

Objetivo General:
Especificar las herramientas que utiliza la histologa para el estudio ultraestructural de tejidos y de la clula como unidad morfolgica y funcional del organismo.

Contenido
La clula: Concepto, funcin, tipos (procariotas y eucriotas), tamaos y formas y organizaciones celulares.
Estudio de las clulas: centrifugacin diferencial, purificacin y separacin de cidos nuclicos, ultracentrifugacin. Compartimentacin celular: Caractersticas morfofuncionales de Citoplasma y ncleo. Citoplasma:

Membrana plasmtica o Plasmalema: Modelos, Movilizacin de sustancias,

receptores. Transporte vesicular. Exocitosis y endocitosis.

Contenido
Organelas Membranosas:

Endosomas, lisosomas, retculo endoplasmtico peroxisomas, aparato de Golgi, mitocondrias.

Organelas No membranosas: (citoesqueleto)

liso

rugoso,

Microtbulos, Microfilamentos, filamentos intermedios, centriolos y centros organizadores de microtbulos, cuerpos basales.
Inclusiones citoplasmticas.

Todos los organismos estn compuestos de una o ms clulas. Las clulas constituyen la unidad anatmica y funcional de los seres vivos (Schleiden, 1838 y Schwann, 1839) Toda clula procede de una clula preexistente (Virchow, 1855)

(omnis cellula e cellula)

Unidad funcional de los tejidos vivos.

Es un sistema complejo con cientos de componentes moleculares que trabajan coordinadamente para producir el fenmeno que llamamos vida

Wiley y Sons, (2005)

Ovulo (1 cel) + espermatozoide (1cell) = Millones de clulas 200 micrmetros

Fuente: Wiley y Sons, (2005)

Existen diferencias evidentes entre unas clulas y otras. Teniendo en cuenta el grado de evolucin, desarrollo, su organizacin general.

Procariota y Eucariota
Tipo la diversidad celular: clulas animales y vegetales, de diferentes tejidos

Vs

PROCARIOTAS

EUCARIOTAS

Ncleo rodeado por una membrana. Material ADN localizado en una regin: Nucleoide, no gentico fragmentado en cromosomas formados rodeada por una membrana. por ADN y protenas. Por lo general clulas grandes, (10-100 m), Clulas pequeas 1-10 m Algunos son microbios, la mayora son organismos grandes. Divisin celular por mitosis, presenta huso Divisin celular directa, principalmente por mittico, o alguna forma de ordenacin de fisin binaria. No hay centrolos, huso mittico microtbulos. Sistemas sexuales frecuentes. ni microtbulos. Sistemas sexuales escasos, si Alternancia de fases haploides y diploides mediante existe intercambio sexual se da por Meiosis y Fecundacin transferencia de un donador a un receptor. Escasas formas multicelulares Los organismos multicelulares muestran Ausencia de desarrollo de tejidos desarrollo de tejidos Formas anaerobias estrictas, facultativas, Casi exclusivamente aerobias microareroflicas y aerobias Ausencia de mitocondrias: las enzimas para la oxidacin de molculas orgnicas estn Las enzimas estn en las mitocondrias ligadas a las membranas Flagelos simples formados por la protena Flagelos compuestos, (9+2) formados por flagelina tubulina y otras protenas En especies fotosintticas, las enzimas necesarias estn ligadas a las membranas. Las enzimas para la fotosntesis se empaquetan Exitencia de fotosntesis aerobia y anaerobia, en los cloroplastos. con productos finales como azufre, sulfato y Oxgeno

Inespecfica (Mantenimiento intrnseco de la clula)

Metabolismo (Anabolismo y catabolismo) Respiracin Reproduccin celular (Mitosis o Meiosis) Excrecin Especializacin funcional (Compartamentalizacin y sistema de endomembranas) Especifica (Funcin en el tejido y sobre el metabolismo orgnico) Intercambio Metablico (Absorcin y Secrecin) Transmisin de Impulso elctrico (Conductibilidad) Cambios en longitud (Contractibilidad) Respuesta a estmulos (Irritabilidad) Transporte y Movimiento

La especializacin supone la disponibilidad de una maquinaria molecular necesaria para su funcin (sobre todo protenas)

Una clula eucariota tpica mide entre 10 y 30 micras

Fuente: Raisman y Gonzlez, (2005)

La morfologa de las clulas en los tejidos animales es diversa, enormemente diversa! Puede variar desde redondeada, a estrellada, desde multilobulada a filiforme.
FORMA PLANAS Fotomicrografas (Geneser, 2000)
Epitelio plano simple Epitelio plano estratificado

CUBICAS

Epitelio cubico simple

Epitelio cubico simple

FORMA
CILNDRICAS

Fotomicrografas (Geneser, 2000)

Epitelio cilndrico simple Epitelio cilndrico simple

ESFRICAS

Neutrofilo

Basofilo

ESTRELLADAS

Neurona

Neurona

FORMA
FUSIFORMES

Fotomicrografas (Geneser, 2000)

Musculo liso Musculo liso

DISCOIDAL

Eritrocito

Eritrocito

POLIDRICAS

Adipocito

Adipocito

20 30%

Agua
70 80%

Sales
1%
Na+ Ca++ Cl K+ Mg++

Protenas
Componentes Estructurales Funcional Enzimas Macromolculas

Alta [LEC]

Carbohidratos
Alta [LIC]
Componentes Estructurales Funcional Fuente Energtica

Solvente de sustancias polares y con cargas

Reacciones Qumicas

Lpidos
Presin Osmtica Componentes Estructurales Funcional Reserva Energtica
Geneser, 2000

Es un conjunto de mtodos y tcnicas que tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en un determinado componente celular, ya sea ste un orgnulo (mitocondrias, ncleos, peroxisomas, ..) una fraccin de membrana (membrana total, plasmtica, dominio basolateral, dominio apical,...), complejos multiproteicos (citoesqueleto de actina, microtbulos, poros nucleares, etc..)

Todo proceso de fraccionamiento subcelular tiene dos etapas :

Rotura de las clulas o tejidos

Separacin de la fraccin deseada

Se basa en la existencia de diferentes partculas en la suspensin que difieren en su densidad de la del medio

Fuente: http://www.ub.es/biocel/wbc/tecnicas/fraccionamiento.htm

Estudiar las caractersticas de sedimentacin de estructuras subcelulares (lisosomas, ribosomas y microsomas) y biomolculas. Utiliza rotores especiales (fijos o de columpio) y sistemas de monitoreo.

Velocidad de Sedimentacin Equilibrio de Sedimentacin

Disgregacin o fragmentacin del tejido

Estas etapas deben ir acompaadas de medidas o agentes que inactiven nucleasas celulares

Lisis celular Durante todo el procedimiento se Clarificacin debe usar soluciones y material estril, ademas Purificacin de guantes

Cualitativo: electroforesis

Anlisis

Cuantitativo: espectrofotometra UV

Membrana

RE

Liso
Rugoso

Aparato de Golgi Lisosomas Organelos Endosomas Mitocondrias Ribosomas

Peroxisomas

Citoplasma

Parte Acuosa

Citosol

Ncleo

Citoesqueleto

Estructura Modelos de Organizacin Composicin Protenas Lpidos Dinmica Difusin y smosis Mecanismos de Transporte

Modelo de Davson - Danielli, 1935 Presenta un modelo de Sandwich Protena/lpido/protena Crean que las protenas superficiales formaban una lmina beta plana. Prevaleci por ms de 20 aos.

Modelo de Singer y Nicholsen, 1972 Propusieron el Modelo del Mosaico Fluido. La membrana es un fluido con protenas embebidas o unidas a las capas de lpidos. Las protenas y los lpidos pueden moverse libremente.

Prescott, Harley and Klein (2004)

Protenas Integrales Protenas Perifricas Glucoprotenas Glucolpidos

El 30% de las protenas codificadas en el genoma se encuentra en la membrana celular.

Bicapa Lipdica

(5nm)

Molcula de Lpido

Molcula de Protena

Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Bicapa lipdica con protenas de 5nm de espesor que delimita la clula y mantiene las diferencias de composicin entre el citosol y el medio extracelular.

Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

La teora dice que la base de la membrana plasmtica est constituida por una doble capa de fosfolpidos, que se disponen con sus colas (hidrofbicas) enfrentadas. A esta doble capa lipdica se le pueden asociar sustancias como: PROTENAS: Intrnsecas (Transporte de sustancias a travs de la membrana) Extrnsecas LPIDOS: Se intercalan entre los fosfolpidos y su funcin es incrementar la rigidez y la resistencia de la membrana y tienden a mantener fijas y ordenadas sus colas; lo que hace disminuir la fluidez de la membrana (Colesterol).

GLCIDOS:
Especialmente los oligosacridos, situados en la cara externa de la membrana. Se pueden unir a protenas (glucoprotenas), a lpidos ( glucolpidos). Forman una capa con aspecto de vello afieltrado que se denomina glucocalix.

COMPARTIMENTALIZACIN
SOSTEN PARA RECCIONES BIOQUMICAS BARRERA DE PERMEABILIDAD SELECTIVA TRANSPORTE DE SOLUTOS RESPONDER A SEALES EXTERNAS

INTERACCIONES INTERCELULARES
TRANSDUCCIN DE ENERGA

Cabezas Hidroflicas

CadenasHidrofbicas
Fosfolpidos en Agua Detergente en Agua

Los fosfolpidos son amfipticos porque tienen:

cabezas hidroflicas (glicerol + fosfato)

colas de cadenas de carbono hidrofbicas (cidos grasos).

Los fosfolpidos forman una bicapa en la membrana.

Las cabezas y las colas estn uniformes en dimensions laterales: formando bicapas planas.

Presentan el arreglo del Modelo del Mosaico fluido.

La parte hidroflica o polar (cabezas de glicerol y fosfato) se arregla hacia fuera y hacia dentro de la clula. La parte hidrofbica o no polar (las colas de cidos grasos) proyectan hacia el centro creando interacciones hidrofbicas.

Las protenas integrales de la membrana estn embebidas en una bicapa de fosfolpidos. Las protenas perifricas estn unidas a ambos lados de la superficie de la membrana biolgica. Pueden encontrarse hacia afuera y hacia adentro de la clula.

Ancladores con hlices alfa. Uniones covalentes con lpidos lipoprotenas. Unidas a hidratos de carbono complejos (glucoprotenas) que llegan al citoplasma o el espacio extracelular.

Enzimas, canales, bombas para iones y otras molculas pequeas.

Receptores para partculas extraas como bacterias y virus. Transduccin por seales.

Uniones celulares: mantienen las clulas unidas y pasan molculas entre las clulas. Ancladores celulares: unen las clulas al substrato. Transporte pasivo : los canales permiten que las molculas se difundan (difusin) a travs de la membrana sin utilizar ATP. Transporte activo: bombea molculas hacia adentro y afuera de la clula usando ATP en el proceso. Enzimas: catalizan reacciones (aumentan velocidad de reacciones disminuyndo energa de activacin). Receptores celulares: identifican molculas de clulas extraas en la superficie como bacterias. Seales de transduccin de hormonas: molculas extracelulares que pueden generar una seal en el interior de la clula.

Anclaje

Transporte pasivo

Transporte activo

Enzimtica

Transduccin hormonal

Receptores

Unin celular

Procesos

Utilizacin de ATP

Ejemplos

Gradiente

Transporte pasivo

No

Difusin simple:
smosis dilisis

*A favor del gradiente. *De mayor a menor concentracin

Difusin facilitada

Transporte activo

Si

Endocitosis:
fagocitosis pinocitosis

*En contra del gradiente. *De menor a mayor concentracin

Exocitosis

Osmosis es la difusin de agua a travs de una membrana semipermeable. Es un proceso importante para todas las clulas.
El agua es polar y se une al soluto por enlaces de hidrgeno.

Dilisis es la difusin de molculas de soluto a travs de una membrana semipermeable. La membrana selectivamente permeable permite que las molculas pequeas como glucosa pasen a travs de la membrana.

Las molculas grandes como las protenas no dializan a travs de la membrana.

Requiere protenas integrales transmembranales.

Existen dos tipos de transporte mediado por permeasas: Difusin facilitada

Causa el rompimiento de gradientes. Algunos son canales que actan como poros en la membrana. Aguaporina es un canal para agua recin descubierto. Los canales inicos permiten el transporte de iones.

Transporte activo
Formacin de gradientes Utiliza energa, generalmente de ATP.

Raven, (2002)

Uniportales mueven un solo soluto en una direccin. En co-transporte, dos o ms solutos se mueven al mismo tiempo.

Simportales mueven 2 solutos en la misma direccin.

Antiportales mueven 2 solutos en direccin opuesta. Une se debe unir primero a una protena transmembranal, luego la otra y entonces, ocurre el movimiento de ambas.

Uniportales

Simportales

Antiportales
Raven, (2002)

Se utiliza energa de ATP para mover solutos a travs de la membrana, en contra del gradiente. Ejemplo: Bomba de Na/K Se forman dos gradientes, uno para cada in. Los gradientes tienen orientacin opuesta. La concentracin de sodio es mayor en el exterior que en el interior de la clula.
La concentracin de potasio es mayor en el interior que en el exterior de la clula.

Raven, (2002)

Utiliza una gran cantidad de energa. Ayuda a la liberacin de solutos y partculas en vesculas: Desperdicios Neurotransmisores u hormonas

Vescula Vesculase sefusiona aproxima fusiona a ala la amembrana membrana la membrana plasmtica plasmtica plasmtica

Vescula se fusiona a la membrana plasmtica

Se vierte el contenido al exterior celular

Es endocitosis de partculas slidas.

Invagina la Membrana Plasmtica alrededor de la partcula

Ingestin de virus, etc)

clulas

(bacterias,

Las partculas de alimento son digeridas por la fusin de la vacuola con los lisosomas.
Se forma la vacuola

Se separa de la Membrana Plasmtica y se fusiona a los Lisodsomas

Entrada de molculas (fluidos acuosos).

lquidas
El fluido es envuelto por la Membrana Plasmtica y se invagina y atrapa

Es ayudada por vesculas de la membrana. No es extremadamente especfico o dirigido.

Se cierra y forma la vescula y se separa de la Membrana Plasmtica

Se vierte el contenido al citosol

Mantienen las clulas unidas. Los filamentos intermedios mantienen los desmosomas en la clula. Las uniones adherentes (adhesinas) son similares, pero tienen filamentos de actina. Las cadherinas,protenas de unin dependientes de calcio, mantienen las clulas unidas.

Membrana Plasmtica

Membrana Nuclear Retculo Endoplasmtico Liso Rugoso Perisoxomas Complejo de Golgi Endosomas
Vesculas de Transporte Cis Golgi

Trans Golgi

Lisosomas

Lisosomas
Retculo Endoplasmtico

Wiley & Sons, (2005)

Elementos del Retculo Endoplsmico

Ribosomas

Vesculas

Wiley & Sons, (2005)

Retculo Endoplsmico Rugoso

Ribosomas

Luz RER

Citoplasma

Retculo Endoplsmico Liso

Retculo Endoplsmico Rugoso:

Sntesis de protenas Insercin y N-glicosilacin de protenas de membrana.

Plegamiento y modificacin de protenas solubles

Retculo Endoplsmico Liso:

Sntesis de lpidos: fosfolpidos y esteroides
Destoxificacin

Retculo Endoplsmico:
Almacenamiento de clcio

RIBOSOMAS
- Corpsculo celular que utiliza las instrucciones genticas contenidas en el cido ribonucleico (ARN) para enlazar secuencias especficas de aminocidos y formar as protenas. -Casi todos flotan libremente (ribosomas libres) en el citoplasma, pero muchos estn enlazados a redes de tbulos envueltos en membranas que ocupan toda la masa celular (retculo endoplasmtico) -Los ribosomas libres se agrupan en racimos y forman los polisomas, en los cuales los ribosomas individuales estn unidos por un hilo de cido ribonucleico, llamado ARN mensajero

-Los ribosomas libres sintetizan protenas que permanecen en la clula como elementos citoplasmticos estructurales o funcionales

-Se encuentran en todas las clulas, excepto en los eritrocitos maduros

Sntesis de Protenas
-El DNA es una molcula alargada formada por dos cadenas que se unen longitudinalmente, cada una con un extremo 3 (tres prima) y 5 (cinco prima). -Este apareamiento o unin ocurre de forma antiparalela, es decir: si la primera cadena apunta su extremo 3 hacia arriba, el de la segunda cadena apuntar hacia abajo. Una vez apareadas ambas cadenas se enrollarn formando la famosa doble hlice.
-Dichas cadenas estn formadas por unas unidades bsicas llamadas nucletidos, que se unen unos a otros formando cada cadena.

Sntesis de Protenas
-A su vez, los nucletidos estn formados por tres molculas fundamentales: una base nitrogenada, un fosfato y una pentosa (azcar de cinco carbonos). -El grupo fosfato proviene del cido ortofosfrico, muy importante para el metabolismo ya que forma parte de biomolculas como el DNA, el RNA y los transportadores de energa: ATP, GTP, UTP -El azcar o la pentosa que se encuentra en los cidos nuclicos puede ser de dos tipos y esto es fundamental para hacer distincin entre DNA y RNA. Podemos tener Ribosa o Desoxirribosa.

Sntesis de Protenas
-La Ribosa, ser un componente clave en la estructura del RNA, denominado como ARN, cuyo nombre largo sera: cido RiboNuclico. -La Desoxirribosa, ser componente clave en la estructura del DNA o ADN: cido DesoxirriboNuclico. -La diferencia entre ambos azcares radica en el grupo qumico que presentan en su carbono 2. La ribosa presenta en su carbono 2 un grupo alcohol o hidroxilo, mientras que la desoxirribosa presenta un hidrgeno, se puede deducir que ha perdido un oxgeno, de ah que se le ponga el prefijo Desoxi.

Sntesis de Protenas
- Las bases nitrogenadas que podemos encontrar en los cidos nucleicos se clasifican en bases pricas y bases pirimidnicas.

-Las bases pricas son la Adenina y la Guanina, ambas presentes en los dos tipos de cido nucleico: DNA y RNA.
-Las pirimidnicas, como se puede deducir son: Timina, Citosina y Uracilo. Aqu se encuentra la excepcin de que no todas aparecen en el DNA, ya que el Uracilo sustituye a la Timina en el RNA.

Sntesis de Protenas
-El DNA estar formado por nucletidos con las bases: Adenina, Guanina, Timina y Citosina. Y el RNA estar formado por las bases: Adenina, Guanina, Citosina y Uracilo.
-Estas bases tienen la capacidad de formar enlaces dbiles entre ellas: enlaces de puente de hidrgeno, que sern los responsables de la adhesin de ambas cadenas en el DNA. -Las protenas son molculas enormes formadas por muchas unidades bsicas llamadas aminocidos -Los aminocidos son molculas que presentan en su carbono central o asimtrico o (alfa) un grupo amino (H2N-) y un grupo cido (-COOH), un hidrgeno y un grupo radical que determinar cada tipo de aminocido.

Sntesis de Protenas
-Hay 20 tipos de aminocidos distintos, con diferentes caractersticas: apolares, polares con carga y polares sin carga. A los polares les gusta el agua y los no polares la repelen. -Cada aminocido vendr determinado por tres bases nitrogenadas del DNA. -Recordando: el RNA es un cido nuclico parecido al DNA pero con la diferencia de que en lugar de Desoxirribosa est formado por Ribosa y en lugar de Timina utiliza Uracilo. -Al momento de sintetizar protenas tiene lugar un fenmeno denominado Transcripcin. La transcripcin no es ms que la copia de un Gen o fragmento de DNA a RNA, que contendr la informacin para formar una protena.

-Para que ocurra la transcripcin se debe desenrollar la doble hlice de DNA y separar ambas cadenas, esto lo hace un complejo enzimtico llamado RNA Polimerasa.

Sntesis de Protenas
-La actividad polimerasa de este complejo ir apareando nucletidos de RNA con las bases del fragmento de DNA que queremos copiar a lenguaje RNA y se ir sintetizando un RNA mensajero de una sola cadena que contendr la informacin deseada para la sntesis de la protena. -En el apareamiento de bases de RNA con las bases de DNA, la Adenina de ste aparear con el Uracilo del RNA.

-A este RNA se le llama RNA mensajero (RNAm) que, es la copia de un gen presente en el DNA de la clula. En este mensajero se encuentra el cdigo gentico para fabricar una protena.
- Con tres bases (triplete) se est codificando para la unin de un aminocido. Estos tripletes aparecen en el RNA mensajero, cada uno denominado Codn. -Los aminocidos se relacionan con el cdigo gentico, a travs de un vector, o transportador, capaz de unirse a cada triplete codificante de RNAm o Codn y a su vez transportar el aminocido correspondiente a dicho Codn: el RNA transferente (RNAt).

-EL ARNt posee una zona de unin a las tres bases del Codn del RNAm llamada Anticodn, que aparea complementariamente con ste.

-A cada aminocido le corresponde un RNAt distinto con un triplete de anticodn distinto, segn el cdigo gentico
-Una vez tenemos sintetizado el RNAm con la informacin necesaria, en forma de cdigo gentico, para formar una protena y tenemos los RNAt unidos a sus correspondientes aminocidos, ya podemos fabricar nuestra nueva protena.

Sntesis de Protenas
- La sntesis proteica comienza con la iniciacin, que tiene lugar cuando una cadena de ARN mensajero (ARNm), que lleva instrucciones genticas copiadas del cido desoxirribonucleico (ADN), se acopla a un ribosoma. - El ARNm indica al ribosoma cmo debe enlazar los aminocidos para formar una protena. - Dos molculas de ARN de transferencia (ARNt), cada una de ellas con un aminocido, se unen al complejo ribosoma-ARN mensajero - Entre los dos primeros aminocidos se forma un enlace qumico llamado enlace peptdico - Durante la fase de elongacin, el ARNt se separa de su aminocido y se aleja del complejo

Las protenas neosintetizadas pasan normalmente al aparato de Golgi en pocos minutos. Organela membranosa compuesta de mltiples cisternas aplanadas que se ocupan de modificar, clasificar y empaquetar protenas y lpidos para su transporte intracelular y extracelular. Est polarizado morfolgica y funcionalmente, en una cara formadora ubicada ms cerca del rER (red cisGolgi) que constituye una superficie convexa orientada hacia el ncleo celular. Y una cara madurativa ms alejada del rER que constituye una superficie cncava orientada hacia el exterior de la clula (red trans-Golgi)

Organelas membranosas: APARATO DE GOLGI

-Sobre la superficie trans de Golgi se detectan las vesculas de secrecin, sobre todo en clulas especializadas en secrecin.
Esta bien desarrollado en las clulas secretoras y no se tie con H-E (zona paranuclear no teida, imagen negativa).

- Es activo en las clulas que secretan protenas por exocitosis y en las clulas que sintetizan gran cantidad de membrana y de protenas asociadas con membrana, como las neuronas.
- En MO las clulas que poseen un aparato de Golgi grande: plasmocitos, osteoblastos y clulas del epiddimo, exhiben una regin clara (imagen negativa)
Mielocito neutrfilo (Clula sanguina inmadura, precursor de la serie blanca) Imagen no teida difusa. Coloracin Wright

ESQUEMA DINMICO DEL TRANSPORTE DE PROTENAS

Ubicados en el citosol de clulas eucariontes y procariontes. Organelos con una membrana Fuente principal de H2O2 70 a 100 por clula.

En mayor nmero en las clulas renales y hepticas.

Contienen enzimas Forman cristales en su interior Dimetro: 0,6 m

Fuente: Raisman y Gonzalez, (2005)

Formacin y descomposicin de H2O2

Oxidacin de cidos grasos. Degradan purinas.

Catalasa (40%) Uratooxidas (purinas) D Aminooxidas Oxidasa del cido - Hidroxilo

Envoltura Nuclear RE Rugoso

Cisterna Tubular y Vesicular

Cis Golgi

Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Dictiosoma
Prescott, Harley and Klein (2004)

Sntesis de lpidos (Glicoesfingolpidos) Transporte de protenas y lpidos Modificaciones de glicoprotenas Sntesis de proteoglucanos

Polarizacin: cis-medial-trans

(Entrada)

(Salida)
Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Digestin intracelular de macromolculas

Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Enzimas Hidrolticas
ENZIMAS HIDROLTICAS Ribonucleasa Desoxirribonucleasa Fosfatasa cida Catepsina Colagenasa -Glucosidasa -Glucuronidasa -Galactosidasa SUSTRATOS cido ribonucleico cido desoxirribonucleico steres de fosfato Protenas

Glucsidos Mucopolisacridos

Se encuentran en el citoplasma de las clulas eucariontes. Fueron descubiertos por centrifugacin

Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Cilndricas. Miden 3 m de largo y 0,5

Um de dimetro.

En los hepatocitos pueden haber 1000 a 2000 mitocondrias. Presenta desplazamiento en la clula

Membrana Externa: Porinas y

cidos Grasos a grupos acetilo. Interna: crestas

Enzimas que modifican los

Membrana membranosa)

(Aumenta

la

superficie

Se localizan las siguientes molculas:

Cardiolipina : impide el pasaje de solutos a cualquier direccion. Protenas transportadoras: Permite el pasaje selectivo desde el espacio intermembranoso a la matriz y viceversa. Molculas que componen la cadena respiratoria : nadh deshidrogenasa, citocromo oxidasa .

La ATP sintetasa: en la cadena transportadora de electrones .

This micrograph shows the DNA and ribosomes in a close-up view. Note that the circular structure of the DNA is not evident. It is noted by an arrow. There are two sets of ribosomes seen, each is circled

Contiene:
Complejo enzimatico piruvato deshidrogenasa, convierte el piruvato en acetil coa. Enzimas del ciclo de krebs O2, ADP fosfato LAS COENZIMAS A (coa) NAD +. ENZIMAS QUE ROMPEN AC. Grasos.

Varias copias de una molecula de adn

13 TIPOS DE ARN m 02 TIPOS DE ARN r. 22 tipos de ARN t

GENERACION DE ATP: EN PRESENCIA DE O2

EL CICLO DE KREBS LA FOSFORILACION OXIDATIVA, SE FORMA EL ATP. LA DESCARBOXILACION OXIDATIVA SE PRODUCE EN LA MATRIZ MITOCONDRIAL (NADPH)

MORFOLOGA: LA CLULA
Organelas No Membranosas: Microtbulos. Microfilamentos o Filamentos de Actina. Filamentos Intermedios Centrolos y Centros organizadores de microtbulos (MTOC) o Centrosomas. Cuerpos basales. Inclusiones: Citoplasmticas. Nucleares.

MORFOLOGA: LA CLULA
Organelas No Membranosas:

MICROTBULOS

Caractersticas morfolgicas:

Cilindros proteicos huecos, rgidos y no ramificados. Compuestos por 2 polipptidos diferentes: y tubulina. Crecen desde un centro organizador de microtbulos Son visibles al microscopio ptico con coloraciones especiales. (fluorescencia)

Huso mittico

MORFOLOGA: LA CLULA
Organelas No Membranosas:

Funciones:

MICROTBULOS Dinenas: Transporte desde la periferia celular hacia en Centro Organizador de Microtbulos. Cinesinas: Transporte desde el Centro Organizador de Microtbulos hacia la periferia celular.

Transporte vesicular intracelular: - Vesculas de secrecin. -Transporte de organelas citoplasmticas: Endosomas, Lisosomas. Mitocondrias.

INVOLUCRAN LA PARTICIPACION DE MOTORES MOLECULARES PROTICOS

MORFOLOGA: LA CLULA
Organelas No Membranosas:

MICROTBULOS
Funciones: Movimiento de cilios y flagelos. Fijacin de los cromosomas al huso mittico. Movimiento de los cromosomas durante la divisin celular (Mitosis y Meiosis) Alargamiento y movimiento de las clulas Mantenimiento de la morfologa celular.

Tripanosomas

MORFOLOGA: LA CLULA
Organelas No Membranosas:

MICROFILAMENTOS O FILAMENTOS DE ACTINA

Caractersticas morfolgicas:

Filamentos delgados y flexibles. Compuestos por molculas de actina G (actina globular) Se organizan en forma lineal helicoidal bicatenaria. La polimerizacin de las molculas de actina G requieren de: ATP Mg+ K+

Funciones:

La polimerizacin depende de: Cantidad local de Actina G y la interaccin con protenas fijadoras de actina

Anclaje y movimiento de protenas de membrana Formacin del ncleo estructural de las microvellosidades: clulas epiteliales absortivas Locomocin celular: clulas transformadas de los tumores invasores Emisin de prolongaciones celulares

MORFOLOGA: LA CLULA
Organelas No Membranosas:

FILAMENTOS INTERMEDIOS

Caractersticas morfolgicas: Su diametro es intermedio entre los filamentos de actina y los microtbulos

No poseen actividad enzimtica y forman filamentos no polares Fibras trenzadas a manera de cuerdas: Dominio bastoniforme. Dmeros superenrrollados. Tetrmero escalonado.

FILAMENTOS INTERMEDIOS

Estn agrupados en 4 clases principales segn su composicin proteica y su distribucin celular: - Queratinas (citoqueratinas): pelo, uas - Vimentina y smil de vimentina: Clulas derivadas del mesodermo - Neurofilamentos: desde el cuerpo celular hacia los extremos de los axones de las dentritas, lo cual provee sostn estructural - Lminas: lminas nucleares que se asocian con la envoltura nuclear

Funciones: De sostn o estructural general Integridad de las uniones clula-clula y clula matriz extracelular. Proveen solidez y resistencia mecnica.

Los centrolos son estructuras de forma cilndrica que se encuentran en parejas (diplosoma) ocupando el centro de una estructura tpica de las clulas eucariticas denominada centrosoma.
Un centrosoma est formado por:

1.

Un diplosoma: par de centrolos dispuestos perpendicularmente entre s.

Material pericentriolar: Sustancia amorfa que envuelve a los centrolos. Las fibras del aster: Fibras formadas por microtbulos que crecen y se organizan a partir del material pericentriolar, disponindose como un conjunto de rayos que parten de l.

2.

3.

El centrosoma, citocentro o centro organizador de microtbulos (COMTs) es una estructura exclusiva de las clulas animales

Las paredes de los centrolos estn formadas por nueve tripletes de microtbulos (estructura 9 + 0). Cada triplete est unido al vecino mediante puentes que aseguran el mantenimiento de la estructura del centrolo.

A travs del material pericentriolar, son centros organizadores de microtbulos En el momento de la divisin celular organiza la formacin del huso acromtico

Un Cuerpo Basal o Cinetosoma es una estructura que se presenta en la base de los undilopodios eucariotas (cilios o flagelos) y que sirve como punto de nucleacin para el crecimiento de los microtbulos del axonema. Los centrolos se forman por duplicacin de los centrolos preexistentes

Es una solucin coloidal de aspecto gelatinoso, que representa la mitad del volumen celular, en la que se encuentran inmersos los orgnulos celulares.
El citosol representa entre el 50 y el 80 % del volumen celular

Jugo Celular" o Citosol"

COMPOSICIN QUMICA DEL HIALOPLASMA
Agua (75 - 85%)
Glcidos Lpidos HIALOPLASMA (Disolucin coloidal) Prtidos Aminocidos Enzimas Protenas estructurales Nuclesidos, Nucletidos, ATP... ARNm, ARNt... Monosacridos: Glucosa... Polisacridos...

Solutos

cidos Nucleicos

Sales minerales

Aniones: Cl-, CO3=, HCO3-, HPO4=... Cationes: Ca++, Mg++, K+, Na+, Fe++...

Es el medio en el cual se mueven los orgnulos celulares y el ncleo. El hialoplasma es el medio en el que se realizan muchos procesos metablicos, como, la gluclisis, la gluconeognesis, la fermentacin lctea,

biosntesis de cidos grasos, etc.

Trasladarse y fijarse. Algunas clulas pueden emitir prolongaciones del citoplasma (pseudopodos) debido a los movimientos internos o ciclosis.

Son acmulos de sustancias orgnicas o inorgnicas, rodeadas o no de una envuelta limitante de naturaleza protenica, que se originan dentro del citoplasma bajo determinadas condiciones de crecimiento. Depsitos de Lpidos
Las inclusiones citoplasmticas formadas por lpidos son, en su mayora, lpidos neutros (triglicridos de cidos grasos) con un grado de insaturacin suficiente para ser lquidos a temperatura corporal. Constituyen una fuente de energa y cadenas cortas de carbono

Glcidos intracelulares
Los carbohidratos se almacenan como glucgeno, que es un polmero ramificado de la glucosa.
Este es catabolizado, segn las necesidades para producir glucosa. La degradacin enzimtica de la glucosa proporciona, a su vez, energa y cadenas cortas de carbono, que vuelven a emplear en la sntesis de diferentes componentes del citoplasma.

Epidermis de trucha. Carbohidratos en color prpura. PAS

Acmulos de naturaleza proteca

Se observan como inclusiones de estructura cristalina. Generalmente, se encuentran en el citosol; pero a veces tambin se pueden observar en el ncleo, mitocondrias, complejo de Golgi, retculo endoplasmtico rugoso y grnulos de secrecin.

Casi nunca se conoce su significado funcional, aunque en algunos casos, como los cristales de Reinke de las clulas de Leydig, se consideran un subproducto metablico, que se incrementa con la edad.

Pigmentos y sustancias minerales

Los pigmentos dan un color natural al tejido, sin necesidad de tinciones. Para que se pueda considerar pigmento esa sustancia ha de poseer color durante la vida de la clula.
Los pigmentos pueden clasificarse en: Pigmentos Exgenos: Originados fuera del organismo Lipocromos-carotenodes

Pigmentos Endgenos

Hemoglobina: Se encuentra en el interior de los eritrocitos y, cuando stos se destruyen, dan lugar a:
Hemosiderina

Lipofuscina
Otros tipos celulares pigmentados (cromatforos), que estn presentes en algunos vertebrados y contienen pigmentos relacionados con carotenoides, son los xantforos (amarillos) y eritrforos (rojos). Estas clulas, junto con los melanforos, dan coloracin a la piel de esos animales.

Centro de control de la clula

The Cell a Molecular Aproach, (2000)

El ncleo tiene el depsito de casi toda la informacin gentica de la clula mediante el ADN, con el que se controla la actividad celular. En el ncleo el ADN est en los genes en forma de cromosomas (durante la mitosis) o como cromatina (durante la interfase). En el ncleo tienen lugar procesos tan importantes como la autoduplicacin del ADN o replicacin, antes de comenzar la divisin celular, y la transcripcin o produccin de los distintos tipos de cidos ribonucleicos (ARNs). Da rdenes al citoplasma mediante el cido ribonucleico mensajero (ARNm) que permite a la Clula elaborar protenas.

Transporta los genes a travs de los poros nucleares.

Produce ribosomas en el nucleolo.

La envuelta nuclear separa el nucleoplasma del citoplasma (25-40 nm)

Est formada por una membrana interna, una membrana externa, un espacio intermembrana, por los poros nucleares y por la lmina nuclear Es responsable de la estructura y de la forma del ncleo, gracias sobre todo a la lmina nuclear Regula el trasiego de molculas entre el nucleoplasma y el citoplasma, que est mediado por los poros nucleares

La membrana externa se contina con la membrana del retculo endoplasmtico

Permite el intercambio selectivo de materiales El agua, los iones y las molculas pequeas como el ATP pueden pasar libremente por el canal central del

poro, pero ste regula el paso de

molculas mayores, en especial de protenas y de ARN. Los poros ayudan a controlar el flujo de informacin de y desde el ADN.

Son la puerta de comunicacin entre ncleo y citoplasma

Los poros nucleares proteicos localizados en la cuya misin es permitir trfico de molculas entre y el citoplasma son complejos envuelta nuclear y controlar el el nucleoplasma

3000 a 4000 poros por ncleo

Las protenas que forman los poros nucleares se denominan nucleoporinas El transporte mediado por los poros nucleares es especfico y aprovecha el gradiente creado por las molculas RanGTP y Rand-GDP Las importinas y las exportinas son dos de las familias de molculas que reconocen pptidos seal de entrada o salida, respectivamente, de aquellas molculas que tienen que entrar o salir del ncleo Son estas dos familias de protenas las que interaccionan con las nucleoporinas durante su trasiego por los poros nucleares

Lquido de viscosidad variable, presente en las clulas eucariotas

Composicin
Agua . Sales . Nucletidos . ARN . Protenas: Transcripcin . Replicacin . Estructurales ADN . Reguladoras genticas. Estructurales del nucleoplasma

Funcin

Medio interno nuclear

Los cromosomas estan formados por largas cadenas de ADN superenrolladas y envueltas en protenas (histonas)

El ADN es una macromolcula formada por dos fibras , torcidas en forma helicoidal.
Cada molcula de ADN est formada por dos largas cadenas de polinucletidos que corren en direcciones opuestas formando una hlice doble alrededor de un eje imaginario central.

De esta forma la polaridad de cada cadena es opuesta

La representacin grfica del cariotipo, ordenada por parejas de cromosomas homlogos, se denomina cariograma. El cariograma se realiza para: 1. Diagnosticar los trastornos causados por anomalas cromosmicas como las no disyunciones, las transposiciones, las delecciones y las duplicaciones. 2. Diagnstico prenatal de enfermedades genticas

La doble cadena de ADN se forma por la unin de nucletidos (fosfato, azcar y base nitrogenada) que se atraen fuertemente mediante puentes de H.

La cromatina est formada por el ADN ms sus protenas asociadas, principalmente histonas. Morfolgicamente se distinguen dos tipos de cromatina en el nucleoplasma: La eucromatina tiene un aspecto claro y est poco condensada, se cree que se produce una mayor expresin gnica La heterocromatina tiene un aspecto oscuro y est muy condensada, se supone que hay una menor expresin gnica

En el interior del ncleo encontramos una estructura de forma irregular llamada nuclolo. Aqu se forma y se almacena el ARNr.

Su ubicacin tiende a estar localizada en el centro de la clula. Sin embargo, es capaz de desplazarse en el caso de algunas clulas, mientras que en el caso de otras se encuentra fijo. Es aproximadamente esfrico, carente de membrana y est rodeado por una capa de cromatina condensada. Es el sitio donde se sintetiza el ARN ribosmico y se produce el armado inicial de los ribosomas

Participa en la regulacin del ciclo celular

Se tie hematoxilina intensamente con la
Hepatocito. Se destaca un nuclolo adherido a la envoltura nuclear.

Ciclo Celular

La mitosis es el proceso de formacin de dos clulas idnticas (generalmente) por replicacin y divisin de los cromosomas de la original que da como resultado una "copia" de la misma. La meiosis es un proceso para convertir una clula diploide en un gameto haploide, y causa un cambio en la informacin gentica para incrementar la diversidad de los descendientes.

Interfase

Profase

Metafase

MITOSIS

Anafase

Telofase

Citokinesis

Es la divisin celular (compuesta por las fases: profase, metafase, anafase y telofase) que acompaada de citocinesis, produce dos clulas hijas idnticas
Durante la La interfase ( tcnicamente no es parte de la mitosis, ms bien incluye los etapas G1, S y G2 del ciclo celular) las clulas hijas maduran y sintetizan los organelos y material nuclear para obtener una clula madura diploide (2n) igual que la clula madre La clula est ocupada en la actividad metablica preparndose para la mitosis (las prximas cuatro fases que conducen e incluyen la divisin nuclear) Los cromosomas no se disciernen claramente en el ncleo

La clula puede contener un par de centriolos ( o centros de organizacin de microtubulos en los vegetales).

Al principio de la Profase , la cromatina en el ncleo comienza a condensarse y se vuelve visible en el microscopio ptico como cromosomas. Los centrolos comienzan a moverse a polos opuestos de la clula y las fibras cruzan la clula para formar el huso acromtico.

Al final de esta fase, la membrana nuclear se disuelve y los cromosomas comienzan a hacerse visibles .

Los cromosomas se alinean en las Fibras del huso

Esta organizacin ayuda a asegurar que en la prxima fase, cuando los cromosomas se separan, cada nuevo ncleo recibir una copia de cada cromosoma.

Los pares de cromosomas se separan y se mueven a lados opuestos de la clula

Las cromtidas llegan a los polos opuestos de la clula, y nuevas membranas se forman alrededor de los ncleos hijos

Los cromosomas se dispersan y ya no son visibles bajo el microscopio ptico. Las fibras del huso se dispersan. En clulas animales, la citocinesis ocurre cuando un anillo fibroso compuesto de una protena llamada actina, alrededor del centro de la clula se contrae pellizcando la clula en dos clulas hijas, cada una con su ncleo.

Muerte celular programada El fenmeno se inicia con la liberacin del citocromo C por parte de las mitocondrias desde el espacio intermembrana hacia el citoplasma celular. El acontecimiento es regulado por la familia de Bcl-2 protenas.

Inician una cascada de reacciones enzimticas proteolticas que conducen a la apoptosis

Es una forma de suicidio celular genticamente definida, que ocurre de manera fisiolgica durante la morfognesis, la renovacin tisular y en la regulacin del sistema inmunitario.

APOPTOSIS Criterios morfolgicos

Borrado de clulas simples Formacin de protuberancias, pero sin afectarse la integridad de la membrana Las clulas se contraen, formando al final los cuerpos apoptticos No respuesta inflamatoria Fagocitosis por clulas normales adyacentes y algunos macrfagos Lisosomas intactos Compactacin de la cromatina en masas densas uniformes

NECROSIS

Muerte de grupos celulares Edema y lisis celular, con desintegracin de membrana Respuesta inflamatoria significativa Fagocitosis por macrfagos Fuga (escape) de productos lisosomales Agregacin poco definida de la cromatina

Criterios bioqumicos
Inducida por estmulos fisiolgicos Proceso finamente regulado, con etapas de sntesis y activacin Requiere energa Requiere sntesis de macromolculas Transcripcin gnica de novo Fragmentacin controlada del ADN Iniciada por alteraciones no fisiolgicas Prdida de la regulacin de la homeostasis inica No requiere energa No requiere la sntesis de protenas y cido nuclicos No hay transcripcin gnica de novo Digestin del ADN al azar