1ero febrero 2013

Las plantas
A partir de nutrimentos inorgnicos tomados del suelo macronutrientes: N, P, K, Ca, Mg, S; micronutrientes: Fe, Mn, Zn, Cu, Mo, B, etc. sintetizan y acumulan diversas substancias Metabolitos Primarios Metabolitos Secundarios

Metabolitos primarios
Indispensables para la vida y producen los metabolitos secundarios Productos del metabolismo general (respiracin, asimilacin, transporte)

Metabolitos secundarios
Biosintetizados a partir del metabolismo primario Productos del metabolismo especfico como atrayentes o repelentes, protectora o defensa de animales. Distribucin taxonmica restringida (caracterstico de un gnero o de una especie particular)

Ampliamente distribudos en plantas

cidos nucleicos Carbohidratos Lpidos Protenas

Alcaloides Compuestos Fenlicos Glicsidos Terpenos

Elementos bsicos del metabolismo primario y en relacin con el metabolismo secundario de plantas.

Metabolitos primarios

Carbohidratos

Glcidos, azcares, sacridos Formados por C, H, O Fuente de energa Celulosa: soporte estructural Tiempo de vida corto en la clula Fermentan por accin microbiana

Clasificacin por la posicin del carbonilo

Clasificacin por nmero de unidades

Monosacridos Oligosacridos Polisacridos

Aldosa

Cetosa

Monosacridos
Slidos

blancos cristalinos con sabor dulce Solubles en agua (puentes de hidrgeno) Enlace OH polar Presentan actividad ptica Osas: Triosas, tetrosas, pentosas
CH2OH O H H H OH H HO OH H OH CH2OH O OH HO H OH H H H H OH

HOH2C H HO

O HO

H CH2OH

OH

Glucosa
HOH2C H H OH O H H OH OH

Galactosa
HOH2C H H OH H O H H OH

Fructosa

Ribosa

Desoxirribosa

Oligosacridos
2

a 10 monosacridos Enlace O-glicsido Sntesis por deshidratacin:

CH2OH HOH2C H O O H H H H HO + OH H CH2OH O HO OH H OH H H OH

CH2OH O H H H OH H HO H OH

HOH2C

O H OH HO

H
+

H2O

CH2OH H

Glucosa

Fructosa

Sacarosa

Polisacridos
Ms

de 10 unidades Macromolculas, elevado PM Baja solubilidad en agua No tienen sabor dulce

Hetersidos: agliconas

Tipos de polisacridos

Holsidos

Homopolisacridos
Heteropolisacridos

Glucanos

Extraccin de Carbohidratos
Monosacridos y disacridos:

Solubles en agua y etanol Insolubles en solventes orgnicos, excepto piridina Cristalizan por evaporacin Forman suspensiones coloidales o geles Solubilizacin con agua y adicin de cidos minerales o sales:
Amilopectina y glucgeno se dispersan parcialmente en agua caliente Pcticos: se solubilizan en agua caliente si no forman complejos Gomas y muclagos son solubles en agua Celulosa y hemicelulosa son insolubles en agua; soluble en solucin amoniacal de Cu(OH)2 formando complejo y en HCl concentrado La mayora se hidrolizan en presencia de cidos diluidos

Polisacridos

LPIDOS

Lpidos

Saponificables

Tipos de lpidos
Insaponificables

Aceites Grasas Ceras o cridos Fosfolpidos Esteroides Terpenos

Funcin

Lpido Aceites y Grasas Ceras

Almacenamiento de energa Impermeabilizante

Fosfolpidos
Esteroides Terpenos

Componente principal de la membrana celular

Hormonal, reguladora Precursor del colesterol, vitaminas A, E y K, forma parte de aceites esenciales

Aceites, grasas y ceras

Slo

contienen C, H y O Unidad: cido graso Estructuras acclicas Sntesis por deshidratacin

O O OH HO O OH R O R O R' O OH O HO R'' R'' O R' O

+ HO

+ 3H2O

Glicerol

Clasificacin segn el nmero de cidos grasos

Monoglicridos Diglicridos Triglicridos

Grasa:

OH

Slido a Tamb, cadenas saturadas, provienen de animales Aceite: Lquido a Tamb, cadenas con enlaces dobles, provienen de semillas Cera: Slido a Tamb, altamente saturad, steres de cido grasos con alcoholes de alto PM

Fosfolpidos
1

Cabeza polar con 2 colas hidrofbicas 2 AG + Glicerol + Fosfato + Funcin (N)

O N O O O P O O
+

Extraccin de lpidos
Extraccin mecnica Solventes orgnicos no polares:

hexano, CCl4, benceno, ter etlico Son prcticamente insolubles en agua Una hidrlisis cida permite separar a los lpidos de los carbohidratos y las protenas

PROTENAS
Elementos estructurales de los organismos
Se forman por unidades de aminocidos de la siguiente forma:

Protenas
Funcin Enzimtica

Funcin Estructural

Funcin Defensiva

CHON
Funcin Reguladora Funcin Contractil

Funcin Transportadora

Protenas Estructura primaria

Estructura cuaternaria

Estructura secundaria

Estructura terciaria

Protenas
Glucosinatos Otros azufrados Betalanas

Hetersidos azufrados rbano, mostaza, coles, alhel

Ajo, cebolla
alcaloides

H3C

Lecitinas
O

Enzimas

Endulcorantes Taumatina Monelina Miraculina

O O O O P CH3 N
+

Amilasa
-

H3C

CH3

CH3

Protenas

Preparacin
ubicar en dnde se encuentra? trituracin con arena o almina trituracin n mezclador de alta velocidad homogeneizador a pistn prensa francesa sonicacin congelacin con nitrgeno lquido y macerado destruccin enzimtica con ebullicin alcohlica

Protenas
Extraccin
FSICOS

Por agitacin-centrifugacin.
QUMICOS Solubilidad con electrolitos. Resinas de intercambio inico. Reaccin Kjeldahl: determinacin del N orgnico por digestin en H2SO4, se neutraliza, se destila, se recoge con H3BO3y se titulan con HCl. Mtodo Lowry: en medio alcalino, reduccin del reactivo de Folin-Ciocalteau por el complejo de la unin peptdico-Cu2+ precipitacin de fenoles.

Mtodo Bradford:
mtodo espectrofotomtrico a 595nm, a travs de grupos ionizados y un colorante azul (coomasie BG-250). Mtodos turbidimtricos: precipitacin con cido tricloroactico, cido sulfosaliclico reactivos de clarificacin (hexacianoferrato(II) de potasio trihidratado, sulfato de zinc heptahidratado, acetato de zinc)

Ej separacin protenas

En hojas
Protenas citoplsmicas:

son las precipitables despus de separar la fraccin con clorofilas

Protenas cloroplsticas: solubles: polares

insolubles: unidas a la clorofila dependen de la especie vegetal y se separan por agitacin-centrifugacin solubilidad en electrolitos (hipotnica) y surfactantes (SDS)
Sulfato de amonio 40-60 % cido tricloroactico o sulfosaliclico 10%

Protenas foliares: metionina y otros amino cidos azufrados separacin por electroforesis

CIDOS NUCLICOS
BASES NITROGENADAS

Macromolculas constituidas NH qumicos entre NUCLETIDOS:

2

por
O H3C NH NH

enlaces
O HO P
+

N NH

N N

F P BN
Pirimidinas

OH

Purinas

Transportan Energa O AMP, ADP, ATP N NH tomos

Adenina
NH N NH2

Timina
NH2 N NH O

Citosina
O

Almacenan, recopilan y transmiten informacin NH gentica por la polimerizacin en cadena de los NH O nucletidos.
Uracilo

Guanina

CIDOS NUCLICOS Existen dos tipos de cidos nucleicos:

ADN

guarda la informacin gentica en todos los organismos celulares; es necesario para que se exprese la informacin contenida en el ADN

ARN

NUCLEOTIDOS ADN y ARN

cidos Nucleicos

Purinas

Adenina

Pirimidinas

Timina

Citosina Guanina

Uracilo

cidos Nucleicos

ARNm ARNt ARNr ARN np

cidos Nucleicos

EXTRACCIN
Lisis celular (romper membranas) moler tejido con nitrgeno lquido.

Centrifugar la muestra para retirar las membranas.

Adicionar proteasas (o fenol, o cloroformo-octanol_24:1) y acetato de amonio para deshacerse de las protenas.

Precipitar el ADN con etanol frio o isopropanol y recuperarlo por centrifugacin (hasta obtener sobrenandante transparente).
Recuperar el sedimento con agua bidestilada. Correr una electroforesis (en gel de agarosa) de DNA, para asegurar que los cidos nucleicos libres de otras molculas.

Metabolitos secundarios